Понедельник , 12 октября 2020
Главная / Разное / Окраска орсеином: Гистологические окраски 2 — С глубоким удовлетворением я приветствую тебя, Фридрих! — LiveJournal

Окраска орсеином: Гистологические окраски 2 — С глубоким удовлетворением я приветствую тебя, Фридрих! — LiveJournal

Содержание

Окраска: Орсеин — Студопедия

Данный метод окраски препарата позволяет отчетливо выявить эластические волокна, которые окрашиваются в коричново-вишневый цвет. Ядра клеток не окрашиваются.

На препарате хорошо видны эластические мембраны в средней оболочке имеющие вид толстых извилистых линий, расположенных концентрически.

Наружная и внутренняя оболочки стенки сосуда слабо окрашены и на препарате видны плохо.

Задание:

При малом увеличении микроскопа:

а) рассмотреть стенку аорты

б) найти окончатые эластические мембраны средней оболочки. На препарате они в виде толстых, вишневых или коричневых (в зависимости от интенсивности окраски) извитых волокон.

в) найти адвентицию. Наружная оболочка выражена слабо, представлена сетью коллагеновых волокон.

Фото 1.1.3.

При большом увеличении микроскопа:

а) рассмотреть эластические мембраны.

Фото 1.1.4., 1.1.5.

Зарисовать препарат и обозначить на рисунке:

1. эластические мембраны

2. адвентициальную оболочку

Фото 1.1.3. Артерия эластического типа. Аорта Поперечный срез.

Орсеин. Малое увеличение. ( Ув.10х7)

эластические мембраны в средней оболочке аорты
наружная оболочка

Фото 1.1.4. Артерия эластического типа. Аорта. Поперечный срез.

Орсеин. Большое увеличение. ( Ув.40х7)

окончатые эластические мембраны
наружная оболочка

Фото 1.1.5. Артерия эластического типа. Аорта Поперечный срез.

Орсеин. Большое увеличение. ( Ув.90х7)

окончатые эластические мембраны средней оболочки

Окраска орсеином по методу Унны — Тенцера


Этот метод наиболее простой, но окрашивание эластических волокон менее интенсивное, чем другими красителями.

Приготовление красителя

1 г орсеина растворяют в 100 мл 98 % или 100 % спирта и добавляют 1 мл крепкой (молекулярная масса 1,15 — 1,19) соляной кислоты. Краситель можно хранить 1 — 2 мес.

Или 1 г орсеина на 100 мл 70 % спирта нагревают до 60 С, после охлаждения добавляют 1 мл крепкой соляной кислоты и фильтруют.

Методика окраски

1. Ополаскивают в 70 % спирте.

2. Окрашивают орсеином в течение 30 — 80 мин при 37 С (в термостате) или 18 — 24 ч при комнатной температуре.

3. Дифференцируют в 1 % солянокислом спирте (под контролем микроскопа) до просветления фона и выявления эластических волокон, обычно от нескольких секунд до 2 — 3 мин.

4. Промывают водой, проводят через спирты и ксилол.

Результат

Эластические волокна буро-красные, коричневые, остальные структуры — слабо-розовые. Иногда коллагеновые волокна окрашиваются слишком интенсивно, а при дифференцировке ослабляется окраска эластических волокон. В этих случаях следует уменьшить концентрацию орсеина (растворяют до 0,4 г на 100 мл спирта) и РН раствора путем добавления нескольких капель соляной кислоты, что позволяет усилить избирательность окрашивання.

Метод окраски Шморля

Метод выявления остеоцитов путем окраски препаратов костной ткани тионином с пикриновой или фосфорно-вольфрамовой кислотой после декальцинации кости.

Этапы

· Фиксация материала в формалине, заливка парафином и получение срезов в микротоме.

· Депарафинизация.

· Промывание срезов в дистиллированной воде.

· Помещение срезов на 5 — 20 мин в реакционную смесь.

· Промывание срезов в проточной воде.

· Окраска по Ван Гизону (противоокраска).

· Быстрое обезвоживание в спиртах возрастающей концентрации, проведение через ксилол, заключение в канадский бальзам.

Краситель – раствор тионина — основной тиазиновый краситель, хорошо растворимый в спирте, хуже в воде; применяется для окраски нервной ткани по Нисслю, для выявления клеточных ядер.

Результат

Стенки костных полостей и канальцев (выстланные сетью коллагеновых волокон) окрашиваются в тёмно-коричневый цвет, остальной фон — светло-коричневый.

Окраска клеточных структур

Окрашивание мазков по Романовскому

В красящих смесях Романовского и сходных с ним прописей Гимзы, Райта, Лейшмана в качестве ядерных краси телей используют тиазины. В их ряду — тионин-анилиновый краситель и его моно-, ди-, три- и тетраметилпроизводные азур С, азур А и азур В, метиленовый синий — широко применяются в цитологических исследованиях как ценные ядерные красители со свойством метахромазии для эксфолиативной и пункционной цитологии, для клеток крови, костного мозга, окрашивания бактерий. Сочетание тиазинов с красителями эозиновой группы дает известную много вариантность методов. Красители типа Романовского, названные по именам авторов, которые стремились добиться стабильности состава тиазинов (Гимза, Лейшман, Дженнер, Май-Грюнвальд, Мак Нил, Райт и др.), в принципе дают сходные результаты окрашивания.

Краситель: азур 2 — эозин

Фиксацию мазков проводят чистым метанолом, окрашивание продолжают всего 30-45 мин, для заключения под покровное стекло используют кедровое масло.

Результаты

Цитоплазма лимфоцитов окрашивается в светло-синий цвет, их ядра — в цвета от интенсивно пурпурного до фиолетового, ядра моноцитов в более светлый пурпурно-красный, их цитоплазма в мутный голубовато-серый, грануломеры тромбоцитов в красный, гиаломеры — в голубой, гранулы базофилов — в интенсивный сине-фиолетовый цвет, гранулы эозинофилов — в оранжево-розовый, а нейтрофильных лейкоцитов — в цвета от пурпурного до фиолетового.

Референтным признается метод Романовского, состоящий из азура В и эозина Y. Азур-эозиновые красители позволяют четко определять ранние некробиотические изменения в клетках, поскольку обычный светло-голубой оттенок цитоплазмы резко меняется на светло-розовый. В синий цвет обычно окрашиваются ядра, бактерии, риккетсии, тигроид и рибонуклеопротеиды, в голубовато-фиолетовый — гранулы тучных клеток и базофилов, цитоплазма зрелых клеток — от голубого до фиолетового и бледно-лилового цвета. цитоплазма клеток в состоянии некроза и некробиоза — ярко-розовая, секреторные гранулы ацинарных клеток (под желудочной железы, слюнных желез) от розового до красного. Амилоид, фибрин окрашиваются в розовый цвет, цитоплазма мышечных волокон, коллоид щитовидной железы — в серовато-синий, кератин — ярко-голубой. Эритроциты оранжево-красного цвета. Методы на основе азур-эозина широко используются для идентификации клеток воспалительного экссудата.


Заключение

На данный момент известно огромное количество методов окраски. Я рассказал в своем реферате об основных методах (по ван Гизону, по Маллори, импрегнация серебром, орсеином, по Шморлю, азур2 – эозином и по Романовскому). Остальные, являются их модификациями, заключающихся в замене того или иного красителя на более современный, что позволяет лучше окрасить определенные структуры или же ускорить время приготовления препарата.

Список литературы

· “Руководство-атлас по гистологии, цитологии и эмбриологии” — С. Л. Кузнецов, Н. Н. Мушкамбаров, В. Л. Горячкина

· Википедия – свободная энциклопедия

· Книга – “Микроскопическая техника”


Читайте также:


Рекомендуемые страницы:

Поиск по сайту

Орсеин, окраска — Справочник по медицине PRO7

Рис. 72. Субтотальиый лизис и зернистый распад эластических волокон в легких при бериллиозе. Окраска орсеином. Х400. [Стр.401]

Рис 11. Эластический хрящ. Изогенные группы крящевых клеток (1) окружены многочисленными эластическими волокнами (2) Окраска гематоксилином и орсеином [72]. [Стр.677]

В гепатоцитах при электронномикроскопическом (рис. 216), имму-(окраска орсеином) исследовании… [Стр.387]

Сифилический мезаортит (окраска гематоксилином и эозином и орсеином на эластические волокна) — описать,… [Стр.206]

Результат эластические волокна буро-красные, коричневые. Можно докрасить ядра гематоксилином, метиленовым или толуидиновым синим после 3-й стадии или окрасить их литиевым кармином Орта до окраски в орсеине. [Стр.437]

Импрегнацию серебром можно сочетать с окраской гематоксилином и эозином, по Ван-Гизону, орсеином на эластические волокна в этом случае после импрегнации нужно длительно, до 1 сут, промывать срезы в водопроводной воде. [Стр.433]

Для дифференцированного выявления углеводосодержащих биополимеров может быть использована окраска орсеином в сочетании с алциановым синим (17). [Стр.227]

Антигены вируса В выявляют в тканях гистологическим (окраска аль-дегидфуксином, орсеином) или иммуногистохимическим (использование антисывороток к HB A , НВ(у, HBEA ) методами. [Стр.512]

Гистологическое выявление меди производится с помощью окраски рубеановой кислотой, родамином и орсеином, но диагностическое значение их ограничено. [Стр.287]

Эластические элементы в аорте кошки. Окраска орсеином. Обратить внимание на толстые эластические мембраны в средней оболочке и на присутствие тонких эластических волокон в наружной оболочке сосуда. [Стр.172]

Э шстический (сетчатый) хрящ ушной раковины. Окраска орсеино.и. х 400. [Стр.206]


Смотреть другие источники с термином Орсеин, окраска: [Стр.126]    [Стр.141]    [Стр.59]    [Стр.55]    [Стр.36]    [Стр.150]    [Стр.76]    [Стр.376]    [Стр.221]    [Стр.62]    [Стр.169]    [Стр.209]    [Стр.244]    [Стр.218]    [Стр.636]    [Стр.734]    [Стр.89]    [Стр.516]    [Стр.60]    [Стр.383]    [Стр.122]    [Стр.377]    [Стр.215]    [Стр.560]    [Стр.314]    [Стр.434]    [Стр.437]    [Стр.437]    [Стр.440]    [Стр.442]    [Стр.443]    [Стр.79]    [Стр.380]    [Стр.384]    [Стр.406]    [Стр.45]    [Стр.478]    [Стр.51]    [Стр.279]   

23. Аорта (орсеин) — МГМСУ им. А.И. Евдокимова

23. Аорта (орсеин)

ВИДЕО

Окраска орсеином — эластические волокна соединительной ткани окрашиваются в тёмно-красный цвет, остальные структуры — в слабо-розовый цвет. Дополнительная информация о красителях — здесь

Гистологический препарат №23 (НЕ ОРСЕИН!!!)
Артерия эластического типа. Аорта человека.

Окраска гематоксилином и эозином. Поперечный срез. Увеличение большое и малое. Найти:

  1. внутреннюю оболочку и в ней:
  2. эндотелий,
  3. подэндотелиальный слой (хорошо развитый),
  4. среднюю оболочку и в ней:
  5. окончатые эластические мембраны,
  6. ядра гладкомышечных клеток,
  7. наружную оболочку.

ВИДЕО I

Ситуационная задача 01-28

Дополнительный материал


Артерия эластического типа. Аорта. В ее мощной стенке три оболочки.

Внутренняя состоит из эндотелия и подэндотелиального слоя с тонкофибриллярной соединительной тканью. В ней много гликозамингликанов и фосфолипидов. Подэндотелиальный слой имеет значительную толщину, в нем много звездчатых малодифференцированных клеток. На границе со средней оболочкой располагается густое сплетение эластических волокон.
Средняя оболочка очень широкая, представлена большим количеством эластических окончатых мембран и связанных с ними и между собой эластических волокон, которые вместе с эластическими волокнами внутренней и наружной оболочек составляют выраженный эластический, каркас, смягчающий толчки крови во время систолы и поддерживающий тонус во время диастолы. Между мембранами имеются гладкие миоциты.
Наружная эластическая мембрана отсутствует. В рыхлой волокнистой соединительной ткани наружной оболочки имеются эластические и коллагеновые волокна, сосуды сосудов и нервные стволики.

Методичка МГМСУ в формате PDF — скачать и читать со страницы 34 (Сердечно-сосудистая система.)
Методичка МГМСУ. Частная гистология.

Читать другие методички

Учебник «Частная гистология» В.Л.Быков страницы с 5 по 20 для самостоятельного изучения

Применение дополнительных гистологических методов окраски в доклинических исследованиях

Введение

Неотъемлемая часть доклинических исследований – патоморфологическое изучение экспериментальных животных, сначала макроскопическое – органов и систем органов, а в последующем микроскопическое – отдельных органов и тканей. Именно гистологическое исследование позволяет более точно определить патологические процессы, выявить ткани-мишени, механизм и степень их повреждения. Основным этапом подготовки материала к гистологическому исследованию является визуализация, которая достигается окрашиванием структур тканей красителями. Цель окрашивания – более четкое выделение различных компонентов клеток и тканей [2].

Общие механизмы окрашивания тканей и клеточных структур

Существует много классификаций красителей; их делят в зависимости от их химической природы [3], в зависимости от реакции с субстратом на субстантивные (прямые) и адъективные (непрямые) [4, 5]. Однако чаще применяют деление на основные или базофильные (ядерные), кислые или ацидофильные (цитоплазматические), нейтральные и флюорохромы [2, 3]. По механизму действия красителя со структурами тканей и клеток выделяют ионное взаимодействие, слабые электрические взаимодействия, ковалентное связывание, взаимодействие с металлами и др.

Ионное взаимодействие – самое распространенное и сильное, но оно чувствительно к pH среды и концентрации солей. Так, например, катионные красители при pH 5 будут окрашивать почти все структуры, поскольку карбоксильные группы белков хорошо ионизированы, при pH 4 окрашиванию подвергаются ядра клеток и хрящевая ткань, а при pH 1 слабые фосфорно-кислые группы ДНК не ионизируются, и ядра будут плохо визуализированы. При увеличении концентрации солей в растворе, наблюдается конкуренция между ионами солей и ионами красителя за субстрат и окрашивание будет менее эффективно. Также при высоких концентрациях солей в растворе наблюдается агрегация частиц красителя в коллоидные частицы, что затрудняет их диффузию к субстрату и окрашивание также будет менее эффективно. Электронное взаимодействие слабее ионного, поэтому можно рассматривать 2 основных механизма – водородные связи, силы Ван дер Ваальса и гидрофобное связывание [6, 7].

Водородные связи обеспечивают прикрепление анионов красителей к незаряженным субстратам в тканях (например, целлюлоза с множеством ОН-групп и коллаген, богатый NH и Nh3-групп). В водных растворах большая часть молекул кислорода и азота уже связаны с молекулами воды, и в данном случае взаимодействие обусловлено силами Ван дер Ваальса [6].

Гидрофобное окрашивание является следствием взаимодействия водородных связей молекул воды и агрегации гидрофобных участков молекул силами дисперсионного взаимодействия (силами Лондона), которые из области высокой концентрации (краситель) поступают в область низкой концентрации (клетки), где удерживаются слабыми силами Ван дер Ваальса [6, 7].

Хорошим примером ковалентных связей является реактив Шифа в реакциях PAS (Periodic acid – Schiff reaction), который взаимодействует с альдегидными группами, образуя окрашенный продукт [7]. Другой пример – образование ковалентных связей между органическими группировками и ионами металлов. Так, ализариновый красный образует в тканях хелатные комплексы с ионами кальция, а гематоксилин, являясь комплексом гематина с ионами алюминия, взаимодействует, вероятно, с амино- и гуанидино-группами ДНК в ядре, что и придает ему синий цвет [7].

Как видно существует много вариантов взаимодействия красителя с субстратом; они различаются специфичностью и условиями использования и служат для достижения своих, подчас узкоспециализированных, задач. Однако в рутинной гистологии главной и основной окраской остается методика с применением гематоксилина и эозина. Это простой, дешевый и повсеместно используемый метод, который имеет много модификаций и может применяться в большинстве случаев. Именно поэтому его еще называют обзорной окраской. Но подчас этого недостаточно и тогда необходимы дополнительные методы [8, 9], которые в значительной мере улучшат качество не только диагностики заболеваний, но и качество исследовательских работ с привлечением гистологических методов.

Рассмотрим ряд гистологических окрасок, некоторые особенности их применения, а также механизмы взаимодействия краситель-субстрат в тканях. Данные методики можно, а часто и необходимо, использовать при гистологической работе, а исследователям при планировании следует учитывать возможность их применения, что поможет выявлять, а также всесторонне изучать патологические процессы, моделируемые в доклинических исследованиях.

Окраска соединительной ткани. Окраска соединительной и мышечной тканей гематоксилин-пикрофуксином по методу Ван Гизона (рис. 1). Это второй наиболее часто используемый в гистологической практике метод. Им можно заменить окраску гематоксилин-эозином и применять как основной для получения обзорных препаратов, но все же чаще он дополняет исследование [10]. Этот метод имеет ряд преимуществ по сравнению с окраской гематоксилин-эозином, так как по-разному окрашивает различные ткани: соединительная ткань после окраски пикрофуксином имеет ярко-красный цвет, а все остальные ткани – буровато-желтый или желто-зеленый. Механизм действия основан на большем сродстве кислого фуксина к коллагену, что, с одной стороны, объясняется параллельной волокнистой организацией белка, открывающей большое количество пептидных групп, содержащих карбоксильные аминокислоты (аспарагиновую и глутаминовую), легко образовывающих водородные связи с красителем, а, с другой стороны, наличием ионных связей, которые могут быть нарушены обработкой ткани кислотами, т.е. дезаминированием белков. Цитоплазматическое окрашивание более характерно для пикриновой кислоты, поскольку она, за счет меньшего размера, имеет более высокую скорость диффузии в клетки, а также, являясь выраженным анионным красителем, проявляет более сильное ионное взаимодействие с положительно заряженными аминогруппами цитоплазматических белков [11] (рис. 2).

 <strong>Рис. 1.</strong> Мышечная оболочка тонкой кишки (13). Окраска по методу Ван Гизона: 1 – соединительная ткань – красная; 2 – мышечная ткань – желтая, ядра – буро-черные Рис. 1. Мышечная оболочка тонкой кишки (13). Окраска по методу Ван Гизона: 1 – соединительная ткань – красная; 2 – мышечная ткань – желтая, ядра – буро-черные  <strong>Рис. 2. </strong>Схема окрашивания коллагеновых волокон пикрофуксином Рис. 2. Схема окрашивания коллагеновых волокон пикрофуксином

В качестве ядерной окраски можно использовать гематоксилин Майера, Эрлиха, но железный гематоксилин Вейгерта дает лучшую черную или буро-черную окраску ядер. Данный метод необходим при дифференцировке соединительной ткани от мышечной в случаях, когда их трудно различить на препаратах, окрашенных другими методами (например, при исследовании хронических заболеваний с развитием фиброза или при опухолевых процессах).

Некоторые особенности не позволили данному методу стать основным, например, необходимость контроля под микроскопом, поскольку пикрофуксин как дифференцирующее соединение, ослабляет интенсивность окраски гематоксилином, и если ядра приобретают бурый, а не черный цвет, то следует использовать более длительную экспозицию срезов в гематоксилине или меньшую в пикрофуксине [2]. Но более существенным недостатком является выцветание препаратов за счет потери окраски фуксинофильных коллагеновых волокон, а это значит, что препараты нельзя хранить длительное время [12].

Окраска эластических волокон фуксин-резорцином по Вейгерту. Окраска (рис. 3) позволяет выявить эластические волокна в тканях, что полезно при изучении заболеваний и патологических процессов, поражающих сосуды или, например кожу. Взаимодействие между эластином и красителем осуществляется за счет сложных эфирных групп, а также путем образования водородных связей между фенольными гидроксильными группами красителя и эластином [14] (рис. 4). При этом хлорид железа, используемый при окраске, с одной стороны, взаимодействуя с резорцином, дает насыщенный синий цвет, а, с другой, увеличивая насыщенность раствора солями, препятствует окрашиванию таких базофильных структур, как хроматин и рибосомы цитоплазмы, а значит повышает селективность метода [15]. Но специфичность метода все равно остается низкой, причем возможно окрашивание и других структур коллагена, а также базальных мембран. Поэтому для лучшей визуализации эластических волокон необходимо проводить тщательное дифференцирование под микроскопом в процессе окраски [13].

 <strong>Рис. 3.</strong> Кровеносный сосуд (13). Окраска по Вейгерту. Эластичные волокна – темно-синие Рис. 3. Кровеносный сосуд (13). Окраска по Вейгерту. Эластичные волокна – темно-синие  <strong>Рис. 4.</strong> Схема окрашивания эластических волокон по Вейгерту Рис. 4. Схема окрашивания эластических волокон по Вейгерту

Есть возможность использовать данный метод в комбинации с окраской по Ван Гизону, что позволяет одновременно выявить также коллаген и окрашивать ядра. Тогда результатом будет следующая картина: ядра – черные, эластические волокна – от темно-синих до черного, коллагеновые волокна – оттенки красного, цитоплазма, гладкая и поперечнополосатая мышечная ткань, ороговевающий эпителий, нейроглия и эритроциты – желтые [2, 13].

Орсеин – еще один распространенный краситель, позволяющий выявить эластические волокна в тканях, прежде всего в сосудах (рис. 5, 6). Результат – эластические волокна – от темно-красных до коричневых [10, 11]. За счет окрашивания белков, связанных с медью, данная методика применяется для диагностики заболеваний накопления меди (болезнь Вильсона). Кроме того, связываясь с поверхностными антигенами вируса гепатита В, позволяет использовать краситель для визуализации пораженных клеток [16].

 <strong>Рис. 5.</strong> Кровеносный сосуд в почке. Окраска орсеином (13). Эластичные волокна – от красного до коричневого цвета Рис. 5. Кровеносный сосуд в почке. Окраска орсеином (13). Эластичные волокна – от красного до коричневого цвета  <strong>Рис. 6.</strong> Схема окрашивания орсеином Рис. 6. Схема окрашивания орсеином

Механизм окрашивания до конца неясен. Возможно, краситель взаимодействует с эластином за счет образования в кислой среде водородных связей между фенольными группами орсеина, заряженными положительно, и отрицательно заряженными боковыми цепями белка, который отличается от коллагеновых волокон меньшим содержанием аргинина, гистидина и лизина и большим количеством нейтральных лейцина и валина. Кроме того, повышенное (до 90%) содержание неполярных аминокислот делает эластические волокна, в отличие от коллагеновых, малорастворимыми в большинстве органических и неорганических растворителей, что может быть применено для выделения компонентов ткани [17].

Трихром по Маллори. Дифференцировка коллагеновых волокон хорошо достигается при окраске по Ван Гизону, но другие компоненты ткани (фибрин, хрящевая и мышечная ткань, форменные элементы крови) окрашиваются хуже и не столь специфично, поэтому для более детальной одновременной визуализации можно использовать трихромные окраски, которые окрашивают компоненты тканей в 3 цвета (красный, желтый и синий) с их вариантами. Например, метод окрашивания по Маллори, включает в себя несколько компонентов: анилинового синего, фосфомолибденовую кислоту, пикриновую кислоту и фуксин [12] (рис. 7). Специфичность действия трихрома объясняется различной степенью сродства между его компонентами и макромолекулами соединительной ткани, которая из-за наличия большого числа основных групп ацидофильна и обладает высоким сродством к кислым красителям (пикриновая кислота и оранжевый G), но низким по отношению к слабым основным и амфотерным красителям (кислый фуксин и пунцовый фуксин). Фосфомолибденовая кислота как крупный гетерополианион легко и прочно связывается с катионными группами тканевых структур (волокна коллагена, клеточные мембраны), блокируя таким образом воздействие на них анилинового синего (основный краситель с частичными амфотерными свойствами) [10, 13, 16, 18] (рис. 8). Результат следующий: ядра – темно-коричневые; коллагеновые волокна – темно-синие; хрящ, кость, мукополисахариды, амилоид – оттенки синего; фиброглия, нейроглия, фибрин – красные; мышечная ткань, миелин и эритроциты – желтые; эластические волокна – розовые.

 <strong>Рис. 7.</strong> Ядра – темно-коричневые; коллагеновые волокна – темно-синие; мукополисахариды– оттенки синего; эритроциты – желтые; эластические волокна – розовые Рис. 7. Ядра – темно-коричневые; коллагеновые волокна – темно-синие; мукополисахариды– оттенки синего; эритроциты – желтые; эластические волокна – розовые  <strong>Рис. 8.</strong> Схема окрашивания трихромом по Маллори Рис. 8. Схема окрашивания трихромом по Маллори

Данная окраска дает более яркие и выраженные результаты, если использовать для фиксации материала жидкость Ценкера, и перед окраской обработать срезы 3% раствором бихромата калия примерно в течение 20 мин [12].

Окраска мукоплисахаридов. Мукополисахариды – это полимерные углеводно-белковые комплексы, содержащиеся в соединительной ткани (хрящевой ткани, роговице) и в жидкостях (слизь, гепарин, синовиальная жидкость, стекловидное тело). В гистологии окраски на мукополисахариды применяются при изучении, прежде всего структур, выделяющих слизь – кишечника, бронхов, муцинозные опухоли, а также заболеваний хрящевой ткани.

Альциановый синий (рис. 9) по химической структуре является медьсодержащим фталоцианином, который образует прочную связь с полианионами мукополисахаридов, избирательно взаимодействуя с их карбоксильными группами и сульфогруппами [пирс]. Краситель под воздействием тетрабората натрия становится плохо растворимым синим пигментом, который хорошо визуализируется. На реакцию значительно влияет кислотность раствора, так альциановый синий рН 1,0 образует связи с мукополисахаридами с большим содержанием сульфо-групп, а альциановый синий рН 2,5 способен к окрашиванию всех кислых мукополисахаридов [2,13,16] (рис. 10). Это позволяет добиться селективного окрашивания кислых сиаломуцинов и сульфомуцинов бокаловидных клеток толстой кишки, в то время как нейтральный муцин желудка или желез Бруннера не реагируют с альциановым синим при рН 2,5 [16].

Результат окрашивания будет следующим – кислые мукополисахариды – бирюзово-голубые, хрящевая ткань – от пурпурного до темно синего.

 <strong>Рис. 9. </strong>Срез кишки. Окраска альциановым синим рН 2,5 (13). Мукополисахариды бокаловидных клеток – синие Рис. 9. Срез кишки. Окраска альциановым синим рН 2,5 (13). Мукополисахариды бокаловидных клеток – синие  <strong>Рис. 10.</strong> Схема окрашивания альциановым синим Рис. 10. Схема окрашивания альциановым синим

Для выявления гликогена в нормальных и патологически измененных тканях используют ШИК-реакцию (Шифф-йодная кислота) (рис. 11). В данном случае йодная кислота окисляет и разрывает связи в соединениях, содержащих 2 смежные гликолевые группы, образуя диальдегид. Последний образует с серосодержащим фуксином из реактива Шиффа нерастворимое окрашенное соединение, сходное с основным фуксином [13, 17] (рис. 12).

 <strong>Рис. 11. </strong>Срез тонкой кишки. Накопление ШИК-положительных субстанций, окрашенных красным Рис. 11. Срез тонкой кишки. Накопление ШИК-положительных субстанций, окрашенных красным  <strong>Рис. 12.</strong> Схема ШИК-реакции Рис. 12. Схема ШИК-реакции

В результате гликоген окрашивается в красные цвета. Таким образом, этот метод широко используется при изучении болезней накопления гликогена, ряда опухолевых заболеваний при которых происходит накопление муцина, грибковых поражений для визуализации клеточной стенки, а также для изучения лимфопролиферативных заболеваний для детализации патологических клеток крови.

Окраска жиров. Обнаружение липидов в клетках и тканях осуществляется группой жировых красителей под общим названием «Суданы» (Судан черный, Судан III, Судан IV и др.), а также нильблаусульфатом и осмиевой кислотой. Эти жирорастворимые вещества легко проникают в липидсодержащие структуры, и не взаимодействует с гидротированными белками (рис. 13, 14). Таким образом, процесс окрашивания липидов представляет собой не гидрофобное взаимодействие, а имеет чисто физический характер, что не позволяет проводить избирательное окрашивание отдельных липидов разного химического состава. Для этой цели перед проведением гистохимической реакции необходимо использовать методы экстракции отдельных групп липидов разными системами растворителей [7, 19,].

 <strong>Рис. 13.</strong> Срез мышцы. Окраска Судан III (13). Жировые включения окрашены желтым Рис. 13. Срез мышцы. Окраска Судан III (13). Жировые включения окрашены желтым  <strong>Рис. 14.</strong> Схема окрашивания липидов Суданом Рис. 14. Схема окрашивания липидов Суданом

Наиболее часто применяют Судан III и шарлах красный. Они выявляют все жиры, липоиды и нейтральные жиры, интенсивно окрашивая их в оранжево-красный цвет. При этом следует помнить о существенных особенностях обработки материала. Прежде всего формалиновая фиксация не должна быть более 48 ч. После чего на замораживающем микротоме сразу изготавливают срезы, поскольку при обычной проводке эфир, ксилол и крепкие спирты растворяют и извлекают жиры из клеток в растворы, именно поэтому после окраски срезы нельзя обезвоживать и заключать обычным способом. Препараты заключают в глицерин или глицерин-желатин, которые не растворяют жиры и хорошо просветляют необезвоженный препарат, но при длительном хранении препаратов наблюдается выпадение Судана в осадок в виде красных кристаллов. Лучше использовать специальные монтирующие среды на водной основе [13, 20]. Несмотря на используемый метод заключения, краситель все равно быстро выцветает, поэтому желательно исследовать препараты вскоре после их изготовления [10, 20].

Стоит отметить метод окраски макропрепаратов при помощи Sudan Red 5B или масляный красный (Oil Red O), которые применяются для визуализации атеросклеротического повреждения сосудов. Oil Red O – это лизохромный диазокраситель, используемый для окрашивания нейтральных триглицеридов и липидов. Он окрашивает липиды в красный цвет с максимальным поглощением при 500–600 нм. На интиме аорты, после обработки красителем, можно обнаружить даже ранние стадии патологического процесса, поскольку жировые включения окрашиваются красным и хорошо визуализируются глазом [20] (рис. 15).

 <strong>Рис. 15.</strong> Аорта кролика. Окраска Oil Red. Атеросклеротические бляшки – красные Рис. 15. Аорта кролика. Окраска Oil Red. Атеросклеротические бляшки – красные

Окраска на амилоид. Для выявления скопления амилоида (патологический белково-полисахаридный комплекс, образующийся при хронических заболеваниях) в тканях наиболее простой и широко используемый краситель – конго красный (рис. 16). Данный краситель окрашивает белок в красный цвет. Кроме того, возможно изучение препаратов в поляризационном свете, при этом массы амилоида дают желто-зеленое свечение, однако рекомендуется заключение срезов в гуммиарабик для исключения свечения коллагеновых волокон [2, 21]. Прочное связывание амилоида с красителем не до конца изучено. Оно происходит таким образом: за счет водородных связей гидроксильных групп, с помощью положительно заряженных аминокислот и посредством полярных контактов [22] (рис. 17).

 <strong>Рис. 16.</strong> Срез печени. Окраска конго красным. Включения амилоида – кирпично-красные Рис. 16. Срез печени. Окраска конго красным. Включения амилоида – кирпично-красные  <strong>Рис. 17.</strong> Схема окрашивания амилоида конго красным: 1 – водородные связи; 2 – электростатические; 3 – полярные связи Рис. 17. Схема окрашивания амилоида конго красным: 1 – водородные связи; 2 – электростатические; 3 – полярные связи

Специальные методы

Выявление повреждений миокарда по Ли (ГОФП-метод: гематоксилин – основной фуксин – пикриновая кислота). Liе и соавт. (1971) описали и дали название этому методу – «фуксиноррагический». Основной фуксин как катионный краситель взаимодействует с продуктами распада, высвобождаемых из саркоплазмы кардиомиоцитов (в частности с гликогеном), тем самым окрашивая их в красно- коричневый цвет. При этом интактные ткани остаются желто-коричневыми или бледно-зелеными, поскольку, как указано выше, хорошо воспринимают пикриновую кислоту (рис. 18, 19), тем самых создавая хороший контраст с поврежденными участками. ГОФП-метод эффективен для объективного выявления ишемизированных участков миокарда, причем при повреждении как коронарогенного, так и некоронарогенного генеза. Кроме того, опосредованно можно визуализировать соединительную ткань (например, рубцовая ткань после перенесенного инфаркта миокарда окрашивается в сиреневые оттенки, а эластические волокна становятся красными). Особенно эффективна методика на ранних этапах поражения сердечной мышцы, поскольку в поражённых кардиомиоцитах фуксинофильный субстрат появляется вначале вблизи ядра, затем распространяется по всей цитоплазме, а в дальнейшем и на большую часть мышечного волокна [12, 23]. Но впоследствии, когда мышечные волокна начинают разрушаться и рассасываться, фуксинофильный субстрат полностью исчезает, и окраска утрачивает свое значение [24].

 <strong>Рис. 18.</strong> Срез печени. Окраска конго красным. Включения амилоида – кирпично-красные Рис. 18. Срез печени. Окраска конго красным. Включения амилоида – кирпично-красные  <strong>Рис. 19.</strong> Схема окрашивания амилоида конго красным: 1 – водородные связи; 2 – электростатические; 3 – полярные связи Рис. 19. Схема окрашивания амилоида конго красным: 1 – водородные связи; 2 – электростатические; 3 – полярные связи

Для макроскопической оценки площади ишемического повреждения тканей, а особенно миокарда и головного мозга, можно использовать соли тетразолия, в частности трифенилтетразолия хлорид (ТТХ) (рис. 20). Соли тетразолия, реагируя с дегидрогеназами (группы ферментов катализирующих окислительно-восстановительные реакции) восстанавливаются до окрашенных соединений – формазанов. Таким образом, в очаге повреждения высвобождается большое количество дегидрогеназ, которые при взаимодействии с тетразолием дают хорошо видимый глазом красный цвет (рис. 21). Реакция позволяет выявить ишемические повреждения на ранних донекротических стадиях патологического процесса [25, 26].

 <strong>Рис. 20.</strong> Срезы головного мозга крысы. Окраска тетразолия хлоридом. Ишемизированные участки не окрашиваются Рис. 20. Срезы головного мозга крысы. Окраска тетразолия хлоридом. Ишемизированные участки не окрашиваются  <strong>Рис. 21.</strong> Схема окрашивания ишемизированных клеток ТТХ Рис. 21. Схема окрашивания ишемизированных клеток ТТХ

Заключение

В клинической практике и при фармакологических исследованиях микроскопический анализ – неотъемлемая часть изучения нормального строения тканей, а также патологически измененных органов. Приготовление гистологических препаратов включает в себя 5 этапов, каждый из которых важен и может повлиять на полученные результаты. Последний этап является – окрашивание, который обычно ограничен применением стандартной – обзорной окраски гематоксилином и эозином. Но для раскрытия более полной картины процесса необходимы дополнительные окраски; их можно применять как обзорные и заменить ими классические гематоксилин и эозин, например окраски по Ван Гизону или трихром по Маллори. Однако эти методы имеют ряд ограничений или трудоемки в исполнении, поэтому не получили широкого распространения и используются как дополнительные окраски для более детального анализа, в частности для изучения соединительной ткани и патологических процессов, связанных с фиброзом.

Большая часть окрасок более специфична, и их применение служит для выявления конкретных структур или химических соединений в клетках и тканях. Это позволяет получить значительный объем информации, что облегчает как понимание течения нормальных, так и патологических процессов. Так методики выявления мукополисахаридов альциановым синим широко применимы при исследовании желудочно-кишечного тракта и дыхательной системы, а ШИК-реакция незаменима в диагностике болезней накопления, ряда онкологических процессов и грибковых инфекций. Жировые красители, прежде всего Судан III и шарлах красный, используются повсеместно при исследовании дистрофических заболеваний и не в последнюю очередь атеросклероза, а методика применения красителя Oil Red O применима для макроскопической оценки площади атеросклеротического поражения аорты. Конго красный незаменим для обнаружения патологического белка амилоида, который образуется в тканях при аутоимунных и хронических заболеваниях – ревматоидном артрите, туберкулезе или нефропатии.

Кроме того, применяются специализированные окраски, направленные на диагностику повреждений миокарда. Выявить наиболее ранние признаки повреждения кардиомиоцитов позволяет ГОФП-методика. А при помощи солей тетразолия легко макроскопически визуализировать площадь поражения в тканях (не только в сердечной мышце, но и, например, в головном мозге).

В данном обзоре была рассмотрена только незначительная часть гистологических окрасок, их механизмы действия, химические реакции, позволяющие визуализировать микроскопические структуры тканей. Многие из этих методик нашли свое применение в практической деятельности лабораторий, при изучении эффективности и токсичности лекарственных средств. Конечно, существует еще множество красителей, методов, а также их сочетания. Все они могут быть использованы сами по себе, но скорее необходимо применять целый комплекс окрасок. Данный материал будет полезен как специалистам по планированию и проведению доклинических исследований на этапе подготовки к экспериментам, так и врачам-гистологам для понимания процессов, происходящих в тканях в момент окрашивания структур, что позволит выявлять ошибки и получать более объективный конечный результат.

Методы выявления НВ  антигена

Методы выявления НВ  антигена

Окраска орсеином.

Данная окраска имеет наибольшее значение для диагностики гепатита В

Окраска по Шиката.

-срез поместить в 1-й раствор(9,5 мл 5%-го марганцовокислого калия+5 мл 3%-го раствора серной кислоты + 85 мл дистиллированной воды) -на 10 мин

-поместить в 2% щавелевую кислоту на 10 мин

-промыть в проточной воде 5 мин,затем в двух порциях дистиллированной воды и двух порциях 70%-го этанола

-на срез налить краситель(орсеин 4 г,70% этанол-100 мл,концентрированной соляной кислоты-2 мл)-на 4 часа

-промыть в проточной воде 10 мин

-дифференцировать солянокислым этанолом

-заключить в бальзам

РЕЗУЛЬТАТ:в цитоплазме гепатоцитов на светло-коричневом фоне тканевых элементов выявляются крупные округлые темно-коричневые включения однородного строения. Аналогично окрашиваются ядра лимфоцитов в перипортальных инфильтратах

Эластические волокна,медно-белковые комплексы окрашиваются также в коричневый цвет.

Результаты во многом определяются качеством красителя. Встречаются реактивы, не окрашивающие специфический субстрат. Поэтому при смене реактива необходимо апробировать его на материале, где уже был получен положительный результат.

Редко реактив пригоден более 2 недель, поэтому нужен свежий. Но все же встречаются орсеины, окрашивающие цитоплазму гепатоцитов диффузно, особенно на секционном материале. Поэтому предложены другие методы.

Высокоспецифичный метод для выявления НВ  антигена

1.Депарафинированные  и доведенные до воды срезы обрабатывают метанолом,содержащим 0,6% перекиси водорода, в течение 20 мин для подавления эндогенной пероксидазы.

2.Промывают в трех сменах фосфатного буфера(рН 7,2)

3.Инкубируют в растворе пероксидазы (5 мг на 100 мл),нанесенном на срезы, в течение 30 мин при комнатной температуре во влажной камере

4.Промывают в буфере

5.Обрабатывают диаминобензидином

6.Промывают в буфере

7.Докрашивают ядра гематоксилином Майера

РЕЗУЛЬТАТЫ: включения НВ  антигена темно-коричневого цвета


I. Окраска орсеином на эластические компоненты — КиберПедия

⇐ ПредыдущаяСтр 5 из 11Следующая ⇒
3,а-б. Препарат — артерия эластического типа. Аорта. Окраска орсеином.
а)(Малое увеличение) Полный размер б)(Большое увеличение) Полный размер
1. Согласно п. 1.1.3.3, при окраске орсеином эластические компоненты окрашиваются в вишнёво-красный или коричневыйцвет. 2. а) В данном случае, благодаря этой окраске, в средней оболочке (II) аорты обнаруживаются многочисленные окончатые мембраны (1). б) На снимках они имеют вид толстых извитых линий, расположенных концентрически. 3. а) Внутренняя оболочка (I) в данном случае очень тонкая. б) Это особенность аорты кошки, из которой приготовлен препарат. 4. В наружной оболочке (III) эластические элементы представлены тонкими волокнами.


II. Окраска толуидиновым синим на гликозамингликаны

1. а) Аморфное вещество (1), лежащее между эластическими элементами (и другими компонентами) стенки аорты, богато гликозамингликанами. б) Последние, как отмечалось в п. 1.1.4, выявляются при обработке толуидиновым синим по фиолетово-красной окраске. 2. Напомним (п. 18.1.5), что в средней оболочке сосуда эти компоненты, равно как и эластические волокна и мембраны, образуются гладкими миоцитами. 4. Препарат — глюкозамингликаны в стенке аорты. Окраска толуидиновым синим. Полный размер

18.2.3. Артерии мышечно-эластического типа

Напомним, что сюда относятся крупные сосуды, отходящие от аорты: сонные, подключичные и подвздошные артерии.
Кратко отметим особенности строения их стенки.

Внутренняя оболочка Под эндотелием и хорошо выраженным подэндотелиальным слоем находится внутренняя эластическая мембрана (а не сплетение эластических волокон, как в аорте).
Средняя оболочка Уже отмечалось, что миоциты и эластические элементы (волокна и окончатые мембраны) содержатся в t. media данных сосудов в примерно равном количестве.
Наружная оболочка Пучки миоцитов располагаются также в t. externa (наряду с обычными компонентами этой оболочки - рыхлой соединительной тканью, vasa vasorum и адипоцитами).

18.2.4. Артерии мышечного типа

Как мы знаем, к этому типу относятся артерии среднего и мелкого калибра.

Отдельный сосуд



Сосудисто-нервный пучок

I. Препарат

6,а-б. Препарат — сосудисто-нервный пучок. Окраска гематоксилин-эозином.
1. Как мы говорили (п. 18.1.1.1), артерии обычно идут рядом с венами и нервами, образуя с ними сосудисто-нервный пучок. 2. На первом снимке мы видим все основные компоненты такого пучка - артерию (I), вену (II), лимфатический сосуд (III), нерв (IV), а на втором — лишь вену (II) и артерию (I). 3. Заметим: нерв (IV) образован миелиновыми нервными волокнами, окружённых эпиневрием и мелкими сосудами. 4. а) Артерия же относится в данном случае к артериям мышечного типа. Об этом свидетельствуют а)(Среднее увеличение) Полный размер б)(Большое увеличение) Полный размер
мелкая складчатость внутренней поверхности, наличие под эндотелием 1.А) и очень тонким подэндотелиальным слоем (1.Б) внутренней эластической мембраны (1.В) (в виде светлой извилистой полоски),
и сильное развитие t. media (2) – благодаря присутствию в ней большого количества циркулярно ориентированных гладких миоцитов (2.A) (помимо эластических волокон (2.Б). б) Наружная оболочка (3) артерии содержит, как обычно, мелкие сосуды и нервы.


II. Отличия между артериями и венами на препарате



а) О строении вен мы будем говорить в следующей теме. б) Однако отметим некоторые признаки, позволяющие различить на препарате артерию и вену (если они имеют средний или мелкий калибр).

 

  А Р Т Е Р И Я В Е Н А
Основные признаки 1. Внутренняя поверхность Извилистая Обычно гладкая
2. Внутренняя эластическая мембрана Чётко выражена в виде извилистой блестящей полоски Отсутствует или выражена очень слабо
3. T. media Большое количество гладких миоцитов (обычно расположенных циркулярно) Гладких миоцитов обычно много меньше, чем у сопутствующей артерии
Дополни- тельные (непосто- янные признаки) 4. Соотношение между t.media и t.externa Средняя оболочка толще, чем наружная Как правило, самой толстой является наружная оболочка
5. Просвет сосуда Зияет — из-за наличия в стенке эластических элементов Просвет вены часто (хотя не всегда) — спавшийся
6. Наличие клапанов Клапанов нет У 50% вен имеются клапаны






МИКРОСКОПИЧЕСКИЕ ИЗОБРАЖЕНИЯ — СОЕДИНИТЕЛЬНАЯ ТКАНЬ

МИКРОСКОПИЧЕСКИЕ ИЗОБРАЖЕНИЯ — СОЕДИНИТЕЛЬНАЯ ТКАНЬ — ХРУСТЯЩИЙ, ТЕНДОН
СОЕДИНИТЕЛЬНАЯ ТКАНЬ
ХОД,
ПЛОТНАЯ ВОЛОКОННО-СОЕДИНИТЕЛЬНАЯ ТКАНИ (ТЕНДОН)

КОСТИ ОСВОБОЖДЕНИЕ СОЕДИНИТЕЛЬНОЙ ТКАНИ КРОВИ


Наведите курсор мыши на изображение
, и вы увидите изображение без меток
HYALINE CARTILAGE
Окрашено гематоксилином и эозином

1 — клетки хряща (хондроциты, хондробласты)
2 — межклеточный хрящевой матрикс
3 — надхрящница

HYALINE CARTILAGE
Окрашено гематоксилином и эозином

1 — клетки хряща (хондроциты, хондробласты)
2 — межклеточный хрящевой матрикс
3 — надхрящница

HYALINE CARTILAGE
Окрашено гематоксилином и эозином

1 — клетки хряща (хондроциты, хондробласты)
2 — межклеточный хрящевой матрикс
3 — надхрящница

УПРУГОЙ КАРТИЛЯЖ
Окрашено железным гематоксилином

1 — клетки хряща (хондроциты, хондробласты)
2 — межклеточный хрящевой матрикс
3 — надхрящница

УПРУГОЙ КАРТИЛЯЖ
Окрашено железным гематоксилином

1 — клетки хряща (хондроциты, хондробласты)
2 — межклеточный хрящевой матрикс

УПРУГОЙ КАРТИЛЯЖ
Окрашено орсеином

1 — клетки хряща (хондроциты, хондробласты)
2 — межклеточный хрящевой матрикс

ФИБРОКАРТЛЯЖ (МЕЖПОЗВОНОЧНЫЙ ДИСК)
Окрашено гематоксилином и эозином

1 — клетки хряща (хондроциты, хондробласты)
2 — межклеточный хрящевой матрикс
3 — пульпозное ядро ​​
4 — фиброзное кольцо

ФИБРОКАРТЛЯЖ (МЕЖПОЗВОНОЧНЫЙ ДИСК)
Окрашено гематоксилином и эозином

1 — клетки хряща (хондроциты, хондробласты)
2 — межклеточный хрящевой матрикс
3 — пульпозное ядро ​​
4 — фиброзное кольцо

ТЕНДОН (продольный разрез)
Окрашено гематоксилином и эозином

1 — эндотеноний (формы пучков I уровня)
2 — перитеноний (формы пучков II уровня)

ТЕНДОН (продольный разрез)
Окрашено гематоксилином и эозином

1 — эндотеноний (формы пучков I уровня)

ТЕНДОН (поперечный срез)
Окрашено гематоксилином и эозином

1 — эндотеноний (формы пучков I уровня)
2 — перитеноний (формы пучков II уровня)

КОСТИ ОСВОБОЖДЕНИЕ СОЕДИНИТЕЛЬНОЙ ТКАНИ КРОВИ ,

МИКРОСКОПИЧЕСКИЕ ГИСТОЛОГИЧЕСКИЕ ИЗОБРАЖЕНИЯ — СИСТЕМА ЦИРКУЛЯТОРА

те же фото БЕЗ ЭТИКЕТКИ
ЭЛАСТИЧНАЯ АРТЕРИЯ (АОРТА)
Окрашено орсеином

1 — внутренняя оболочка оболочки
2 — оболочка медиа
3 — внешняя оболочка

ЭЛАСТИЧНАЯ АРТЕРИЯ (АОРТА)
Окрашено орсеином

1 — внутренняя оболочка оболочки
2 — оболочка медиа
3 — внешняя оболочка

МЫШЕЧНАЯ АРТЕРИЯ (слева),
БОЛЬШАЯ МЫШЕЧНАЯ ВЕНА (справа)

Окрашена гематоксилином и эозином

1 — внутренняя оболочка
2 — средняя оболочка
3 — внешняя оболочка
4 — внутренняя эластическая пластинка
(присутствует только в артериях)

МЫШЕЧНАЯ АРТЕРИЯ (слева),
БОЛЬШАЯ МЫШЕЧНАЯ ВЕНА (справа)

Окрашена гематоксилином и эозином

1 — внутренняя эластическая пластинка
(присутствует только в артериях)
2 — эластическая оболочка в средней оболочке
(присутствует только в артериях)

МИКРОЦИРКУЛЯЦИЯ
(артериолы, венулы, капилляры)

Окрашено гематоксилином и эозином

Капилляры показаны стрелками

КАПИЛЛЯРЫ
(в миокарде)

Окрашены гематоксилином и эозином

Капилляры показаны стрелками

СЕРДЦЕ (МИОКАРД)
Окрашено железным гематоксилином

Вставные диски показаны стрелками

СЕРДЦЕ (ПУРКИНЬЕ ВОЛОКНА)
Окрашено гематоксилином и эозином

1 — волокна Пуркинье
2 — эндокард
3 — миокард

СЕРДЦЕ (ПУРКИНЬЕ ВОЛОКНА)
Окрашено гематоксилином и эозином

1 — волокна Пуркинье
2 — эндокард
3 — миокард

СЕРДЦЕ (ПУРКИНЬЕ ВОЛОКНА)
Окрашено гематоксилином и эозином

1 — волокна Пуркинье
2 — эндокард
3 — миокард

СЕРДЦЕ (ПУРКИНЬЕ ВОЛОКНА)
Окрашено гематоксилином и эозином

1 — волокна Пуркинье
2 — эндокард
3 — миокард

.

Устранение кислотных пятен — Советы по окрашиванию бетона

ОСНОВЫ КИСЛОТЫ

Вопрос:

Я устанавливаю много подъездных дорожек и патио, и некоторые из моих новых клиентов просят окрашенный бетон. Я никогда не пробовала наносить кислотные пятна. Каковы основные шаги и как избежать проблем?

Ответ:

Я получаю подобные вопросы почти каждую неделю, и не только от тех, кто впервые применяет красители. При нанесении кислотной морилки жизненно важно понимать основы для достижения хороших результатов.Чтобы увидеть четыре основных шага окрашивания и соответствующие процедуры для каждого, см. Основы кислотного окрашивания.


СМЕШАННЫЕ КИСЛОТНЫЕ ПЯТНА

Вопрос:

Как лучше всего нанести кислотную морилку двух цветов? Имеет ли значение, какой цвет будет применен первым: светлый или темный?

Ответ:

Два наиболее распространенных метода нанесения кислотных пятен разного цвета: «мокрый по мокрому» и «мокрый по сухому». Оба метода создают впечатляющие цветовые эффекты, которые могут поднять простую окраску на новый уровень.Подробнее об этом см. Смешивание кислотных красок.


БЕТОН КИСЛОТЫ — ВОССТАНОВЛЕНИЕ БЕТОНА

Вопрос:

Я нанес пятно для бетона на большой бетонный внутренний дворик, построенный 8 лет назад в Рино, штат Невада — в районе, подверженном резким перепадам температуры. Сначала я вымыл патио смесью соляной кислоты и воды, чтобы очистить его. Я промыл его из шланга, подождал день или около того и нанес пятно с помощью распылителя, следуя указаниям производителя.Два года спустя на патио появились участки шелушения. Я хотел бы снова окрасить весь внутренний дворик, чтобы цвет был более однородным. Я слышал, что если вы вымыли патио соляной кислотой, вы не сможете испачкать его. Я пытаюсь найти специалиста, который подскажет, как правильно подготовить поверхность, нанести пятно и защитить его. Первоначально я использовал акриловую морилку.

Ответ:

Используемое вами средство — тонированная акриловая морилка — не является морилкой для бетона на кислотной основе.Это полупрозрачная краска для бетона, она актуальна, что означает, что она образует цветное покрытие на поверхности бетона, которое со временем изнашивается, если за ним не ухаживать. Чтобы получить полный ответ и надлежащую подготовку поверхности для решения этой проблемы, см. Бетон с кислотным травлением — Повторное окрашивание бетона.


ОКРАШИВАНИЕ БЕТОНА — КАК ИСПРАВИТЬ ВАРИАНТЫ ЦВЕТА

Вопрос:

Недавно я заделал несколько мелких трещин в бетонном полу и теперь хочу испачкать весь пол.Смогут ли отремонтированные участки впитать пятно, как и остальной пол? Я хочу, чтобы цвет был однородным.

Ответ:

Каждый раз, когда вы окрашиваете пол с отремонтированными или залатанными участками, ожидайте разницу в цвете. Базовый цвет и характер бетона во многом влияют на окончательный цвет и внешний вид, который достигается при нанесении полупрозрачных красок или красок. Полный ответ и дополнительную информацию см. В разделе «Различия в цвете при окрашивании пятен на бетонном полу».


УДАЛЕНИЕ ЗАГРЯЗНЕНИЙ СМАЗКИ НА ЗАРАЖЕННОМ ПОЛЕ

Вопрос:

Покрасили бетонные полы, которые были в доме, когда мы его покупали. На полу кухни много пятен от жира. Мы перепробовали все, чтобы их удалить. Пожалуйста помоги!

Ответ:

На большинство окрашенных полов нанесен герметик для защиты. Эти герметики только защитят вас от пищевых пятен, таких как жир, масло, сода, горчица и т. Д.Тип герметика и качество ухода также играют большую роль в сроке службы пола и его эксплуатационных характеристиках. Полный ответ см. В разделе Удаление жирных загрязнений с окрашенного пола.


ПРОБЛЕМЫ ПЕРЕРАБОТКИ ПЯТЕН НА БЕТОНЕ

Вопрос:

Бетонный пол в нашем офисном здании, имеющем сертификат LEED-Silver, был покрыт краской на водной основе от ведущего производителя, а затем герметизирован герметиком другого производителя с последующим нанесением двух слоев воска.Строительство велось в декабре 2008 года, а здание открыли для использования в марте 2009 года. Через пару месяцев пятно и герметик начали отслаиваться и царапаться под ножками стульев. Тест клейкой ленты подтвердил, что отделка легко снимается.

Подрядчик по отделке полов вернулся в декабре 2009 года, чтобы удалить воск и герметик и повторно нанести краситель и герметик из системы того же производителя. Внешний вид отделки пола был улучшен за короткое время, но с тех пор износился.Испытание изолентой примерно через два месяца после ремонтных работ позволило удалить окрашенный материал. Покрытие также продолжает иметь неровный или «сумасшедший» вид после мытья с помощью мягкого моющего средства, как во влажном, так и после высыхания.

Строительный подрядчик считает, что бетонный пол был уложен правильно, чтобы принять пятно, потому что ему дали затвердеть примерно за шесть месяцев до нанесения красителя и герметика и защитить до тех пор, пока работа не будет завершена. Обратите внимание, что температура на стройплощадке, вероятно, была ниже точки замерзания во время отделочных работ.Какие факторы могут повлиять на поломку покрытия даже после повторного нанесения?

Ответ:

Обычно подобные сбои вызваны сочетанием факторов, а не одним. Полный ответ см. В разделе Отслаивающийся герметик, вызванный чрезмерным нанесением пятен.


БЕТОН МНОЖЕСТВЕННО ОКРАШЕННЫЙ ОКРАШЕННЫЙ

Вопрос:

Могу ли я окрасить бетон, уже содержащий пигмент, кислотой? У нас был этаж

.Пятно

— Викисловарь

английский [править]

Этимология [править]

из среднеанглийского steinen , steynen («окрашивать, красить, раскрашивать»), северогерманского происхождения, из древнескандинавского steina («окрашивать, красить, раскрашивать»), из steinn (« камень, минеральный синий, цвет, морилка »), от прото-норвежского ᛊᛏᚨᛁᚾᚨᛉ (стиназ), от протогерманского * стиназ (« камень »), от протоиндоевропейского * steyh₂- (« до Жестче»).Соответствует древнеанглийскому stān («камень»). Больше у камня.

В некотором смысле, под влиянием несвязанного среднеанглийского disteynen («обесцветить, удалить цвет»; буквально «обесцветить»), от англо-нормандского desteindre («чтобы удалить цвет, отбеливатель» »), Со старофранцузского destaindre (« удалить цвет, отбелить »), из des- (« дис-, де-, не- ») + teindre (« красить »), с Латинский тинго .

Произношение [править]

Существительное [править]

пятно ( множественное число пятен )

  1. Обесцвеченное пятно или участок.
  2. Пятно на характере или репутации.
  3. Вещество, используемое для пропитывания поверхности и ее окраски.
    • 1980 , Роберт М. Джонс, редактор, Walls and Ceilings , Time-Life Books, → ISBN , page 93:

      Дерево потемнеет вне зависимости от того, окрашено оно или нет — основная функция Морилка предназначена для улучшения естественного цвета древесины и подчеркивания ее текстуры.

  4. Реагент или краситель, используемый для окрашивания образцов под микроскопом, чтобы сделать некоторые структуры видимыми.
  5. (геральдика) Любая из ряда нестандартных настоек, используемых в современной геральдике.
Производные термины [править]
Переводы [править]

обесцвеченное пятно или участок

  • абхазский: ашәыта (āš ° əṭā)
  • Арабский: بُقْعَة f (buqʿa)
  • Башкирский: тап (тап)
  • Белорусский: пля́ма f (pljáma)
  • Болгарский: петно ​​(bg) n (petno)
  • Бирманский: အစွန်း (my) (a.cwan 🙂
  • каталонский: taca (ca)
  • чеченский: таммагӏа (tammaġa)
  • Cherokee: ᎠᏍᎪᎸᎬ (asgolvgv)
  • китайский:
    Мандаринский диалект: 污跡 (чж), 污迹 (чж) (вуджи), 污漬 (чж), 污渍 (чж) (вузи)
  • Чешский: skvrna (cs) f
  • датский: plet
  • Голландский: vlek (nl)
  • Эсперанто: makulo
  • Финский: läiskä (fi), tahra (fi), jälki (fi)
  • французский: tache (fr) f
  • Грузинский: ლაქა (лака)
  • Немецкий: Fleck (de) m
  • Греческий: κηλίδα (el) f (kilída)
    Древний: κηλίς f (kēlís), σπίλος m (spílos)
  • Хинди: दाग (привет) m (dāg), दाग़ m (dāġ)
  • Венгерский: folt (hu)
  • Ido: makulo (io)
  • Ингушетия: Шатта (atta)
  • итальянский: macchia (it) f , chiazza (it), patacca (it) f (образно)
  • Японский: 染 み (し み, шими)
  • кхмерский: ស្នាម ប្រឡាក់ (snaamprɑɑlak)

пятно на характере или репутации

Вещество, используемое для впитывания поверхности и ее окраски

Реагент или краситель, используемый для окрашивания образцов с микроскопа, чтобы сделать видимыми некоторые структуры

Приведенные ниже переводы необходимо проверить и вставить выше в соответствующие таблицы переводов, удалив все цифры.Числа не обязательно совпадают с числами в определениях. См. Инструкции в Викисловаре: Макет статьи § Переводы.

Проверяемые переводы

Глагол [править]

пятно ( третье лицо единственного числа простое настоящее пятна , причастие настоящего окрашивание , простое причастие прошедшего и прошедшего времени окрашенное )

  1. (переходный) Обесцветить.
    по морилка рука с красителем
    броня окрасилась кровью
  2. Чтобы испортить или запятнать чей-то характер или репутацию
    • 1667 , Джон Милтон, «Книга 8», в «Потерянный рай».Поэма, написанная в десяти книгах , Лондон: […] [Сэмюэл Симмонс], […], OCLC 228722708 ; переиздано как Paradise Lost in Ten Books: […] , London: Basil Montagu Pickering […], 1873, OCLC 230729554 :

      of Honor void,
      Of Innocence, Faith, Puritie,
      Our wonted Орнаменты теперь полые и окрашенные

  3. Для покрытия поверхности морилкой
    Окрашивать древесину кислотами, краской, втирать и т. Д.
    витраж стекло для церковных окон
  4. (непереходный) Чтобы стать окрашенным; взять пятно.
  5. (переходный, цитология) Для обработки (микроскопического образца) красителем, особенно тем, который окрашивает специфические особенности
  6. Чтобы казаться неполноценным или испорченным при сравнении.
    • г. 1607–1611 , Фрэнсис Бомонт; Джон Флетчер, «Месть Купидона», в Комедиях и трагедиях […] , Лондон: Отпечатано для Хамфри Робинсона, […], и для Хамфри Мозли […], опубликовано 1679, OCLC 3083972 , Акт 2, сцена 2 :
      Она запятнала самых зрелых дев своего возраста.
    • (Можем ли мы указать дату этой цитаты Спенсера и указать название, полное имя автора и другие детали?)
      , который сделал всех остальных зверей красотой окрасил
Переводы [править]

, чтобы запятнать или запятнать чей-то характер или репутацию

для покрытия поверхности морилкой

для обработки образца микроскопа красителем

Приведенные ниже переводы необходимо проверить и вставить выше в соответствующие таблицы переводов, удалив все цифры.Числа не обязательно совпадают с числами в определениях. См. Инструкции в Викисловаре: Макет статьи § Переводы.

Проверяемые переводы

Анаграммы [править]

  • Astin, Insta, Saint, Santi, Sinta, Tanis, Tians, antis, insta-, saint, сидел, сатин, stian, tians, tisan

Романизация [править]

морилка

  1. Романизация 𐍃𐍄𐌰𐌹𐌽

Гутниш [править]

Этимология [править]

Из древнескандинавского steinn («камень»), из прото-норвежского ᛊᛏᚨᛁᚾᚨᛉ (шиназ), из протогерманского * шиназ («камень»).Совместимость с английским камнем , немецким Stein , голландским steen , датским sten , норвежским букмолом sten , норвежским Nynorsk stein , шведским sten , фарерским steinur 9000, фарерским steinur 9000 Нижненемецкий Steen . В конечном итоге от догерманского * stoyh₂nos , o-grade от протоиндоевропейского * steyh₂- («застывать»).

Существительное [править]

морилка м

  1. камень, скала в виде материала или отдельный кусок камня или гальки

Среднеанглийский [править]

Прилагательное [править]

морилка

  1. Альтернативная форма stonen

Вестроботниан [править]

Этимология [править]

Из древнескандинавского steinn («камень»), из прото-норвежского ᛊᛏᚨᛁᚾᚨᛉ (шиназ), из протогерманского * шиназ («камень»).Совместимость с английским камнем , немецким Stein , голландским steen , датским sten , норвежским букмолом sten , норвежским Nynorsk stein , шведским sten , фарерским steinur 9000, фарерским steinur 9000 Нижненемецкий Steen . В конечном итоге от догерманского * stoyh₂nos , o-grade от протоиндоевропейского * steyh₂- («застывать»).

Существительное [править]

морилка м

  1. камень, скала в виде материала или отдельный кусок камня или гальки
Альтернативные формы [править]
,

Check Also

Можно ли мешать протеин с кефиром: Можно ли мешать протеин с кефиром

Содержание Можно ли мешать протеин с кефиромМожно ли протеин и кефир соединить в коктейлеВсегда ли …

Отправить ответ

avatar
  Подписаться  
Уведомление о