Воскресенье , 14 августа 2022
Главная / Разное / Окраска орсеином: 18.2.2.2. Специальные окраски

Окраска орсеином: 18.2.2.2. Специальные окраски

Содержание

Окраска: Орсеин — Студопедия

Данный метод окраски препарата позволяет отчетливо выявить эластические волокна, которые окрашиваются в коричново-вишневый цвет. Ядра клеток не окрашиваются.

На препарате хорошо видны эластические мембраны в средней оболочке имеющие вид толстых извилистых линий, расположенных концентрически.

Наружная и внутренняя оболочки стенки сосуда слабо окрашены и на препарате видны плохо.

Задание:

При малом увеличении микроскопа:

а) рассмотреть стенку аорты

б) найти окончатые эластические мембраны средней оболочки. На препарате они в виде толстых, вишневых или коричневых (в зависимости от интенсивности окраски) извитых волокон.

в) найти адвентицию. Наружная оболочка выражена слабо, представлена сетью коллагеновых волокон.

Фото 1.1.3.

При большом увеличении микроскопа:

а) рассмотреть эластические мембраны.

Фото 1.1.4., 1.1.5.

Зарисовать препарат и обозначить на рисунке:

1. эластические мембраны

2. адвентициальную оболочку

Фото 1.1.3. Артерия эластического типа. Аорта Поперечный срез.

Орсеин. Малое увеличение. ( Ув.10х7)

эластические мембраны в средней оболочке аорты
наружная оболочка

Фото 1.1.4. Артерия эластического типа. Аорта. Поперечный срез.

Орсеин. Большое увеличение. ( Ув.40х7)

окончатые эластические мембраны
наружная оболочка

Фото 1.1.5. Артерия эластического типа. Аорта Поперечный срез.

Орсеин. Большое увеличение. ( Ув.90х7)

окончатые эластические мембраны средней оболочки

23. Аорта (орсеин) — МГМСУ им. А.И. Евдокимова

23. Аорта (орсеин)

ВИДЕО

Окраска орсеином — эластические волокна соединительной ткани окрашиваются в тёмно-красный цвет, остальные структуры — в слабо-розовый цвет. Дополнительная информация о красителях — здесь

Гистологический препарат №23 (НЕ ОРСЕИН!!!)
Артерия эластического типа. Аорта человека.

Окраска гематоксилином и эозином. Поперечный срез. Увеличение большое и малое. Найти:

  1. внутреннюю оболочку и в ней:
  2. эндотелий,
  3. подэндотелиальный слой (хорошо развитый),
  4. среднюю оболочку и в ней:
  5. окончатые эластические мембраны,
  6. ядра гладкомышечных клеток,
  7. наружную оболочку.

ВИДЕО I

Ситуационная задача 01-28

Дополнительный материал


Артерия эластического типа. Аорта. В ее мощной стенке три оболочки.

Внутренняя состоит из эндотелия и подэндотелиального слоя с тонкофибриллярной соединительной тканью. В ней много гликозамингликанов и фосфолипидов. Подэндотелиальный слой имеет значительную толщину, в нем много звездчатых малодифференцированных клеток. На границе со средней оболочкой располагается густое сплетение эластических волокон.

Средняя оболочка очень широкая, представлена большим количеством эластических окончатых мембран и связанных с ними и между собой эластических волокон, которые вместе с эластическими волокнами внутренней и наружной оболочек составляют выраженный эластический, каркас, смягчающий толчки крови во время систолы и поддерживающий тонус во время диастолы. Между мембранами имеются гладкие миоциты.
Наружная эластическая мембрана отсутствует. В рыхлой волокнистой соединительной ткани наружной оболочки имеются эластические и коллагеновые волокна, сосуды сосудов и нервные стволики.

Методичка МГМСУ в формате PDF — скачать и читать со страницы 34 (Сердечно-сосудистая система.)
Методичка МГМСУ. Частная гистология.

Читать другие методички

Учебник «Частная гистология» В.Л.Быков страницы с 5 по 20 для самостоятельного изучения

МИКРОСКОПИЧЕСКИЕ ФОТОГРАФИИ — СОЕДИНИТЕЛЬНАЯ ТКАНЬ

 
Поместите стрелку мыши или нажмите пальцем на фотографию
и Вы сможете увидеть ее без обозначений
(при медленной загрузке — не убирайте стрелку мыши или палец
с картинки до тех пор пока не появится картинка без обозначений)
АРТЕРИЯ ЭЛАСТИЧЕСКОГО ТИПА (АОРТА)
     Окраска орсеином

1 — внутренняя оболочка
2 — средняя оболочка
3 — наружная оболочка

АРТЕРИЯ ЭЛАСТИЧЕСКОГО ТИПА (АОРТА)
     Окраска орсеином

1 — внутренняя оболочка
2 — средняя оболочка
3 — наружная оболочка

АРТЕРИЯ МЫШЕЧНОГО ТИПА (слева),
ВЕНА СО СРЕДНИМ РАЗВИТИЕМ
МЫШЕЧНЫХ ЭЛЕМЕНТОВ (справа)

     Окраска гематоксилин-эозином

1 — внутренняя оболочка
2 — средняя оболочка
3 — наружная оболочка
4 — внутренняя эластическая мембрана
     (есть только у артерий)

АРТЕРИЯ МЫШЕЧНОГО ТИПА (слева),
ВЕНА СО СРЕДНИМ РАЗВИТИЕМ
МЫШЕЧНЫХ ЭЛЕМЕНТОВ (справа)

     Окраска гематоксилин-эозином

1 — внутренняя эластическая мембрана
     (есть только у артерий)
2 — эластические мембраны в толще средней оболочки
     (есть только у артерий)

МИКРОЦИРКУЛЯТОРНОЕ РУСЛО
(АРТЕРИОЛЫ, ВЕНУЛЫ, КАПИЛЛЯРЫ)

     Окраска гематоксилин-эозином

Стрелками показаны капилляры

КАПИЛЛЯРЫ
(в миокарде)

     Окраска гематоксилин-эозином

Стрелками показаны капилляры

МИОКАРД
     Окраска железным гематоксилином

Стрелками показаны вставочные диски

ВОЛОКНА ПУРКИНЬЕ В МИОКАРДЕ
     Окраска гематоксилин-эозином

1 — волокна Пуркинье
2 — эндокард
3 — миокард

ВОЛОКНА ПУРКИНЬЕ В МИОКАРДЕ
     Окраска гематоксилин-эозином

1 — волокна Пуркинье
2 — эндокард
3 — миокард

ВОЛОКНА ПУРКИНЬЕ В МИОКАРДЕ
     Окраска гематоксилин-эозином

1 — волокна Пуркинье
2 — эндокард
3 — миокард

ВОЛОКНА ПУРКИНЬЕ В МИОКАРДЕ
     Окраска гематоксилин-эозином

1 — волокна Пуркинье
2 — эндокард
3 — миокард

I. Окраска орсеином на эластические компоненты — КиберПедия

3,а-б. Препарат — артерия эластического типа. Аорта. Окраска орсеином.
а)(Малое увеличение) Полный размер б)(Большое увеличение) Полный размер
1. Согласно п. 1.1.3.3, при окраске орсеином эластические компоненты окрашиваются в вишнёво-красный или коричневыйцвет. 2. а) В данном случае, благодаря этой окраске, в средней оболочке (II) аорты обнаруживаются многочисленные окончатые мембраны (1). б) На снимках они имеют вид толстых извитых линий, расположенных концентрически. 3. а) Внутренняя оболочка (I) в данном случае очень тонкая. б) Это особенность аорты кошки, из которой приготовлен препарат. 4. В наружной оболочке (III) эластические элементы представлены тонкими волокнами.


II. Окраска толуидиновым синим на гликозамингликаны

1. а) Аморфное вещество (1), лежащее между эластическими элементами (и другими компонентами) стенки аорты, богато гликозамингликанами. б) Последние, как отмечалось в п. 1.1.4, выявляются при обработке толуидиновым синим по фиолетово-красной окраске. 2. Напомним (п. 18.1.5), что в средней оболочке сосуда эти компоненты, равно как и эластические волокна и мембраны, образуются гладкими миоцитами. 4. Препарат — глюкозамингликаны в стенке аорты. Окраска толуидиновым синим. Полный размер

18.2.3. Артерии мышечно-эластического типа

Напомним, что сюда относятся крупные сосуды, отходящие от аорты: сонные, подключичные и подвздошные артерии.
Кратко отметим особенности строения их стенки.

Внутренняя оболочка Под эндотелием и хорошо выраженным подэндотелиальным слоем находится внутренняя эластическая мембрана (а не сплетение эластических волокон, как в аорте).
Средняя оболочка Уже отмечалось, что миоциты и эластические элементы (волокна и окончатые мембраны) содержатся в t. media данных сосудов в примерно равном количестве.
Наружная оболочка Пучки миоцитов располагаются также в t. externa (наряду с обычными компонентами этой оболочки - рыхлой соединительной тканью, vasa vasorum и адипоцитами).

18.2.4. Артерии мышечного типа

Как мы знаем, к этому типу относятся артерии среднего и мелкого калибра.

Отдельный сосуд



Сосудисто-нервный пучок

I. Препарат

6,а-б. Препарат — сосудисто-нервный пучок. Окраска гематоксилин-эозином.
1. Как мы говорили (п. 18.1.1.1), артерии обычно идут рядом с венами и нервами, образуя с ними сосудисто-нервный пучок. 2. На первом снимке мы видим все основные компоненты такого пучка - артерию (I), вену (II), лимфатический сосуд (III), нерв (IV), а на втором — лишь вену (II) и артерию (I). 3. Заметим: нерв (IV) образован миелиновыми нервными волокнами, окружённых эпиневрием и мелкими сосудами. 4. а) Артерия же относится в данном случае к артериям мышечного типа. Об этом свидетельствуют а)(Среднее увеличение) Полный размер б)(Большое увеличение) Полный размер
мелкая складчатость внутренней поверхности, наличие под эндотелием 1.А) и очень тонким подэндотелиальным слоем (1.Б) внутренней эластической мембраны (1.В) (в виде светлой извилистой полоски),
и сильное развитие t. media (2) – благодаря присутствию в ней большого количества циркулярно ориентированных гладких миоцитов (2.A) (помимо эластических волокон (2.Б). б) Наружная оболочка (3) артерии содержит, как обычно, мелкие сосуды и нервы.


II. Отличия между артериями и венами на препарате



а) О строении вен мы будем говорить в следующей теме. б) Однако отметим некоторые признаки, позволяющие различить на препарате артерию и вену (если они имеют средний или мелкий калибр).

 

  А Р Т Е Р И Я В Е Н А
Основные признаки 1. Внутренняя поверхность Извилистая Обычно гладкая
2. Внутренняя эластическая мембрана Чётко выражена в виде извилистой блестящей полоски Отсутствует или выражена очень слабо
3. T. media Большое количество гладких миоцитов (обычно расположенных циркулярно) Гладких миоцитов обычно много меньше, чем у сопутствующей артерии
Дополни- тельные (непосто- янные признаки) 4. Соотношение между t.media и t.externa Средняя оболочка толще, чем наружная Как правило, самой толстой является наружная оболочка
5. Просвет сосуда Зияет — из-за наличия в стенке эластических элементов Просвет вены часто (хотя не всегда) — спавшийся
6. Наличие клапанов Клапанов нет У 50% вен имеются клапаны

Применение дополнительных гистологических методов окраски в доклинических исследованиях

Введение

Неотъемлемая часть доклинических исследований – патоморфологическое изучение экспериментальных животных, сначала макроскопическое – органов и систем органов, а в последующем микроскопическое – отдельных органов и тканей. Именно гистологическое исследование позволяет более точно определить патологические процессы, выявить ткани-мишени, механизм и степень их повреждения. Основным этапом подготовки материала к гистологическому исследованию является визуализация, которая достигается окрашиванием структур тканей красителями. Цель окрашивания – более четкое выделение различных компонентов клеток и тканей [2].

Общие механизмы окрашивания тканей и клеточных структур

Существует много классификаций красителей; их делят в зависимости от их химической природы [3], в зависимости от реакции с субстратом на субстантивные (прямые) и адъективные (непрямые) [4, 5]. Однако чаще применяют деление на основные или базофильные (ядерные), кислые или ацидофильные (цитоплазматические), нейтральные и флюорохромы [2, 3]. По механизму действия красителя со структурами тканей и клеток выделяют ионное взаимодействие, слабые электрические взаимодействия, ковалентное связывание, взаимодействие с металлами и др.

Ионное взаимодействие – самое распространенное и сильное, но оно чувствительно к pH среды и концентрации солей. Так, например, катионные красители при pH 5 будут окрашивать почти все структуры, поскольку карбоксильные группы белков хорошо ионизированы, при pH 4 окрашиванию подвергаются ядра клеток и хрящевая ткань, а при pH 1 слабые фосфорно-кислые группы ДНК не ионизируются, и ядра будут плохо визуализированы. При увеличении концентрации солей в растворе, наблюдается конкуренция между ионами солей и ионами красителя за субстрат и окрашивание будет менее эффективно. Также при высоких концентрациях солей в растворе наблюдается агрегация частиц красителя в коллоидные частицы, что затрудняет их диффузию к субстрату и окрашивание также будет менее эффективно. Электронное взаимодействие слабее ионного, поэтому можно рассматривать 2 основных механизма – водородные связи, силы Ван дер Ваальса и гидрофобное связывание [6, 7].

Водородные связи обеспечивают прикрепление анионов красителей к незаряженным субстратам в тканях (например, целлюлоза с множеством ОН-групп и коллаген, богатый NH и Nh3-групп). В водных растворах большая часть молекул кислорода и азота уже связаны с молекулами воды, и в данном случае взаимодействие обусловлено силами Ван дер Ваальса [6].

Гидрофобное окрашивание является следствием взаимодействия водородных связей молекул воды и агрегации гидрофобных участков молекул силами дисперсионного взаимодействия (силами Лондона), которые из области высокой концентрации (краситель) поступают в область низкой концентрации (клетки), где удерживаются слабыми силами Ван дер Ваальса [6, 7].

Хорошим примером ковалентных связей является реактив Шифа в реакциях PAS (Periodic acid – Schiff reaction), который взаимодействует с альдегидными группами, образуя окрашенный продукт [7]. Другой пример – образование ковалентных связей между органическими группировками и ионами металлов. Так, ализариновый красный образует в тканях хелатные комплексы с ионами кальция, а гематоксилин, являясь комплексом гематина с ионами алюминия, взаимодействует, вероятно, с амино- и гуанидино-группами ДНК в ядре, что и придает ему синий цвет [7].

Как видно существует много вариантов взаимодействия красителя с субстратом; они различаются специфичностью и условиями использования и служат для достижения своих, подчас узкоспециализированных, задач. Однако в рутинной гистологии главной и основной окраской остается методика с применением гематоксилина и эозина. Это простой, дешевый и повсеместно используемый метод, который имеет много модификаций и может применяться в большинстве случаев. Именно поэтому его еще называют обзорной окраской. Но подчас этого недостаточно и тогда необходимы дополнительные методы [8, 9], которые в значительной мере улучшат качество не только диагностики заболеваний, но и качество исследовательских работ с привлечением гистологических методов.

Рассмотрим ряд гистологических окрасок, некоторые особенности их применения, а также механизмы взаимодействия краситель-субстрат в тканях. Данные методики можно, а часто и необходимо, использовать при гистологической работе, а исследователям при планировании следует учитывать возможность их применения, что поможет выявлять, а также всесторонне изучать патологические процессы, моделируемые в доклинических исследованиях.

Окраска соединительной ткани. Окраска соединительной и мышечной тканей гематоксилин-пикрофуксином по методу Ван Гизона (рис. 1). Это второй наиболее часто используемый в гистологической практике метод. Им можно заменить окраску гематоксилин-эозином и применять как основной для получения обзорных препаратов, но все же чаще он дополняет исследование [10]. Этот метод имеет ряд преимуществ по сравнению с окраской гематоксилин-эозином, так как по-разному окрашивает различные ткани: соединительная ткань после окраски пикрофуксином имеет ярко-красный цвет, а все остальные ткани – буровато-желтый или желто-зеленый. Механизм действия основан на большем сродстве кислого фуксина к коллагену, что, с одной стороны, объясняется параллельной волокнистой организацией белка, открывающей большое количество пептидных групп, содержащих карбоксильные аминокислоты (аспарагиновую и глутаминовую), легко образовывающих водородные связи с красителем, а, с другой стороны, наличием ионных связей, которые могут быть нарушены обработкой ткани кислотами, т.е. дезаминированием белков. Цитоплазматическое окрашивание более характерно для пикриновой кислоты, поскольку она, за счет меньшего размера, имеет более высокую скорость диффузии в клетки, а также, являясь выраженным анионным красителем, проявляет более сильное ионное взаимодействие с положительно заряженными аминогруппами цитоплазматических белков [11] (рис. 2).

Рис. 1. Мышечная оболочка тонкой кишки (13). Окраска по методу Ван Гизона: 1 – соединительная ткань – красная; 2 – мышечная ткань – желтая, ядра – буро-черные Рис. 2. Схема окрашивания коллагеновых волокон пикрофуксином

В качестве ядерной окраски можно использовать гематоксилин Майера, Эрлиха, но железный гематоксилин Вейгерта дает лучшую черную или буро-черную окраску ядер. Данный метод необходим при дифференцировке соединительной ткани от мышечной в случаях, когда их трудно различить на препаратах, окрашенных другими методами (например, при исследовании хронических заболеваний с развитием фиброза или при опухолевых процессах).

Некоторые особенности не позволили данному методу стать основным, например, необходимость контроля под микроскопом, поскольку пикрофуксин как дифференцирующее соединение, ослабляет интенсивность окраски гематоксилином, и если ядра приобретают бурый, а не черный цвет, то следует использовать более длительную экспозицию срезов в гематоксилине или меньшую в пикрофуксине [2]. Но более существенным недостатком является выцветание препаратов за счет потери окраски фуксинофильных коллагеновых волокон, а это значит, что препараты нельзя хранить длительное время [12].

Окраска эластических волокон фуксин-резорцином по Вейгерту. Окраска (рис. 3) позволяет выявить эластические волокна в тканях, что полезно при изучении заболеваний и патологических процессов, поражающих сосуды или, например кожу. Взаимодействие между эластином и красителем осуществляется за счет сложных эфирных групп, а также путем образования водородных связей между фенольными гидроксильными группами красителя и эластином [14] (рис. 4). При этом хлорид железа, используемый при окраске, с одной стороны, взаимодействуя с резорцином, дает насыщенный синий цвет, а, с другой, увеличивая насыщенность раствора солями, препятствует окрашиванию таких базофильных структур, как хроматин и рибосомы цитоплазмы, а значит повышает селективность метода [15]. Но специфичность метода все равно остается низкой, причем возможно окрашивание и других структур коллагена, а также базальных мембран. Поэтому для лучшей визуализации эластических волокон необходимо проводить тщательное дифференцирование под микроскопом в процессе окраски [13].

Рис. 3. Кровеносный сосуд (13). Окраска по Вейгерту. Эластичные волокна – темно-синие Рис. 4. Схема окрашивания эластических волокон по Вейгерту

Есть возможность использовать данный метод в комбинации с окраской по Ван Гизону, что позволяет одновременно выявить также коллаген и окрашивать ядра. Тогда результатом будет следующая картина: ядра – черные, эластические волокна – от темно-синих до черного, коллагеновые волокна – оттенки красного, цитоплазма, гладкая и поперечнополосатая мышечная ткань, ороговевающий эпителий, нейроглия и эритроциты – желтые [2, 13].

Орсеин – еще один распространенный краситель, позволяющий выявить эластические волокна в тканях, прежде всего в сосудах (рис. 5, 6). Результат – эластические волокна – от темно-красных до коричневых [10, 11]. За счет окрашивания белков, связанных с медью, данная методика применяется для диагностики заболеваний накопления меди (болезнь Вильсона). Кроме того, связываясь с поверхностными антигенами вируса гепатита В, позволяет использовать краситель для визуализации пораженных клеток [16].

Рис. 5. Кровеносный сосуд в почке. Окраска орсеином (13). Эластичные волокна – от красного до коричневого цвета Рис. 6. Схема окрашивания орсеином

Механизм окрашивания до конца неясен. Возможно, краситель взаимодействует с эластином за счет образования в кислой среде водородных связей между фенольными группами орсеина, заряженными положительно, и отрицательно заряженными боковыми цепями белка, который отличается от коллагеновых волокон меньшим содержанием аргинина, гистидина и лизина и большим количеством нейтральных лейцина и валина. Кроме того, повышенное (до 90%) содержание неполярных аминокислот делает эластические волокна, в отличие от коллагеновых, малорастворимыми в большинстве органических и неорганических растворителей, что может быть применено для выделения компонентов ткани [17].

Трихром по Маллори. Дифференцировка коллагеновых волокон хорошо достигается при окраске по Ван Гизону, но другие компоненты ткани (фибрин, хрящевая и мышечная ткань, форменные элементы крови) окрашиваются хуже и не столь специфично, поэтому для более детальной одновременной визуализации можно использовать трихромные окраски, которые окрашивают компоненты тканей в 3 цвета (красный, желтый и синий) с их вариантами. Например, метод окрашивания по Маллори, включает в себя несколько компонентов: анилинового синего, фосфомолибденовую кислоту, пикриновую кислоту и фуксин [12] (рис. 7). Специфичность действия трихрома объясняется различной степенью сродства между его компонентами и макромолекулами соединительной ткани, которая из-за наличия большого числа основных групп ацидофильна и обладает высоким сродством к кислым красителям (пикриновая кислота и оранжевый G), но низким по отношению к слабым основным и амфотерным красителям (кислый фуксин и пунцовый фуксин). Фосфомолибденовая кислота как крупный гетерополианион легко и прочно связывается с катионными группами тканевых структур (волокна коллагена, клеточные мембраны), блокируя таким образом воздействие на них анилинового синего (основный краситель с частичными амфотерными свойствами) [10, 13, 16, 18] (рис. 8). Результат следующий: ядра – темно-коричневые; коллагеновые волокна – темно-синие; хрящ, кость, мукополисахариды, амилоид – оттенки синего; фиброглия, нейроглия, фибрин – красные; мышечная ткань, миелин и эритроциты – желтые; эластические волокна – розовые.

Рис. 7. Ядра – темно-коричневые; коллагеновые волокна – темно-синие; мукополисахариды– оттенки синего; эритроциты – желтые; эластические волокна – розовые Рис. 8. Схема окрашивания трихромом по Маллори

Данная окраска дает более яркие и выраженные результаты, если использовать для фиксации материала жидкость Ценкера, и перед окраской обработать срезы 3% раствором бихромата калия примерно в течение 20 мин [12].

Окраска мукоплисахаридов. Мукополисахариды – это полимерные углеводно-белковые комплексы, содержащиеся в соединительной ткани (хрящевой ткани, роговице) и в жидкостях (слизь, гепарин, синовиальная жидкость, стекловидное тело). В гистологии окраски на мукополисахариды применяются при изучении, прежде всего структур, выделяющих слизь – кишечника, бронхов, муцинозные опухоли, а также заболеваний хрящевой ткани.

Альциановый синий (рис. 9) по химической структуре является медьсодержащим фталоцианином, который образует прочную связь с полианионами мукополисахаридов, избирательно взаимодействуя с их карбоксильными группами и сульфогруппами [пирс]. Краситель под воздействием тетрабората натрия становится плохо растворимым синим пигментом, который хорошо визуализируется. На реакцию значительно влияет кислотность раствора, так альциановый синий рН 1,0 образует связи с мукополисахаридами с большим содержанием сульфо-групп, а альциановый синий рН 2,5 способен к окрашиванию всех кислых мукополисахаридов [2,13,16] (рис. 10). Это позволяет добиться селективного окрашивания кислых сиаломуцинов и сульфомуцинов бокаловидных клеток толстой кишки, в то время как нейтральный муцин желудка или желез Бруннера не реагируют с альциановым синим при рН 2,5 [16].

Результат окрашивания будет следующим – кислые мукополисахариды – бирюзово-голубые, хрящевая ткань – от пурпурного до темно синего.

Рис. 9. Срез кишки. Окраска альциановым синим рН 2,5 (13). Мукополисахариды бокаловидных клеток – синие Рис. 10. Схема окрашивания альциановым синим

Для выявления гликогена в нормальных и патологически измененных тканях используют ШИК-реакцию (Шифф-йодная кислота) (рис. 11). В данном случае йодная кислота окисляет и разрывает связи в соединениях, содержащих 2 смежные гликолевые группы, образуя диальдегид. Последний образует с серосодержащим фуксином из реактива Шиффа нерастворимое окрашенное соединение, сходное с основным фуксином [13, 17] (рис. 12).

Рис. 11. Срез тонкой кишки. Накопление ШИК-положительных субстанций, окрашенных красным Рис. 12. Схема ШИК-реакции

В результате гликоген окрашивается в красные цвета. Таким образом, этот метод широко используется при изучении болезней накопления гликогена, ряда опухолевых заболеваний при которых происходит накопление муцина, грибковых поражений для визуализации клеточной стенки, а также для изучения лимфопролиферативных заболеваний для детализации патологических клеток крови.

Окраска жиров. Обнаружение липидов в клетках и тканях осуществляется группой жировых красителей под общим названием «Суданы» (Судан черный, Судан III, Судан IV и др.), а также нильблаусульфатом и осмиевой кислотой. Эти жирорастворимые вещества легко проникают в липидсодержащие структуры, и не взаимодействует с гидротированными белками (рис. 13, 14). Таким образом, процесс окрашивания липидов представляет собой не гидрофобное взаимодействие, а имеет чисто физический характер, что не позволяет проводить избирательное окрашивание отдельных липидов разного химического состава. Для этой цели перед проведением гистохимической реакции необходимо использовать методы экстракции отдельных групп липидов разными системами растворителей [7, 19,].

Рис. 13. Срез мышцы. Окраска Судан III (13). Жировые включения окрашены желтым Рис. 14. Схема окрашивания липидов Суданом

Наиболее часто применяют Судан III и шарлах красный. Они выявляют все жиры, липоиды и нейтральные жиры, интенсивно окрашивая их в оранжево-красный цвет. При этом следует помнить о существенных особенностях обработки материала. Прежде всего формалиновая фиксация не должна быть более 48 ч. После чего на замораживающем микротоме сразу изготавливают срезы, поскольку при обычной проводке эфир, ксилол и крепкие спирты растворяют и извлекают жиры из клеток в растворы, именно поэтому после окраски срезы нельзя обезвоживать и заключать обычным способом. Препараты заключают в глицерин или глицерин-желатин, которые не растворяют жиры и хорошо просветляют необезвоженный препарат, но при длительном хранении препаратов наблюдается выпадение Судана в осадок в виде красных кристаллов. Лучше использовать специальные монтирующие среды на водной основе [13, 20]. Несмотря на используемый метод заключения, краситель все равно быстро выцветает, поэтому желательно исследовать препараты вскоре после их изготовления [10, 20].

Стоит отметить метод окраски макропрепаратов при помощи Sudan Red 5B или масляный красный (Oil Red O), которые применяются для визуализации атеросклеротического повреждения сосудов. Oil Red O – это лизохромный диазокраситель, используемый для окрашивания нейтральных триглицеридов и липидов. Он окрашивает липиды в красный цвет с максимальным поглощением при 500–600 нм. На интиме аорты, после обработки красителем, можно обнаружить даже ранние стадии патологического процесса, поскольку жировые включения окрашиваются красным и хорошо визуализируются глазом [20] (рис. 15).

Рис. 15. Аорта кролика. Окраска Oil Red. Атеросклеротические бляшки – красные

Окраска на амилоид. Для выявления скопления амилоида (патологический белково-полисахаридный комплекс, образующийся при хронических заболеваниях) в тканях наиболее простой и широко используемый краситель – конго красный (рис. 16). Данный краситель окрашивает белок в красный цвет. Кроме того, возможно изучение препаратов в поляризационном свете, при этом массы амилоида дают желто-зеленое свечение, однако рекомендуется заключение срезов в гуммиарабик для исключения свечения коллагеновых волокон [2, 21]. Прочное связывание амилоида с красителем не до конца изучено. Оно происходит таким образом: за счет водородных связей гидроксильных групп, с помощью положительно заряженных аминокислот и посредством полярных контактов [22] (рис. 17).

Рис. 16. Срез печени. Окраска конго красным. Включения амилоида – кирпично-красные Рис. 17. Схема окрашивания амилоида конго красным: 1 – водородные связи; 2 – электростатические; 3 – полярные связи

Специальные методы

Выявление повреждений миокарда по Ли (ГОФП-метод: гематоксилин – основной фуксин – пикриновая кислота). Liе и соавт. (1971) описали и дали название этому методу – «фуксиноррагический». Основной фуксин как катионный краситель взаимодействует с продуктами распада, высвобождаемых из саркоплазмы кардиомиоцитов (в частности с гликогеном), тем самым окрашивая их в красно- коричневый цвет. При этом интактные ткани остаются желто-коричневыми или бледно-зелеными, поскольку, как указано выше, хорошо воспринимают пикриновую кислоту (рис. 18, 19), тем самых создавая хороший контраст с поврежденными участками. ГОФП-метод эффективен для объективного выявления ишемизированных участков миокарда, причем при повреждении как коронарогенного, так и некоронарогенного генеза. Кроме того, опосредованно можно визуализировать соединительную ткань (например, рубцовая ткань после перенесенного инфаркта миокарда окрашивается в сиреневые оттенки, а эластические волокна становятся красными). Особенно эффективна методика на ранних этапах поражения сердечной мышцы, поскольку в поражённых кардиомиоцитах фуксинофильный субстрат появляется вначале вблизи ядра, затем распространяется по всей цитоплазме, а в дальнейшем и на большую часть мышечного волокна [12, 23]. Но впоследствии, когда мышечные волокна начинают разрушаться и рассасываться, фуксинофильный субстрат полностью исчезает, и окраска утрачивает свое значение [24].

Рис. 18. Срез печени. Окраска конго красным. Включения амилоида – кирпично-красные Рис. 19. Схема окрашивания амилоида конго красным: 1 – водородные связи; 2 – электростатические; 3 – полярные связи

Для макроскопической оценки площади ишемического повреждения тканей, а особенно миокарда и головного мозга, можно использовать соли тетразолия, в частности трифенилтетразолия хлорид (ТТХ) (рис. 20). Соли тетразолия, реагируя с дегидрогеназами (группы ферментов катализирующих окислительно-восстановительные реакции) восстанавливаются до окрашенных соединений – формазанов. Таким образом, в очаге повреждения высвобождается большое количество дегидрогеназ, которые при взаимодействии с тетразолием дают хорошо видимый глазом красный цвет (рис. 21). Реакция позволяет выявить ишемические повреждения на ранних донекротических стадиях патологического процесса [25, 26].

Рис. 20. Срезы головного мозга крысы. Окраска тетразолия хлоридом. Ишемизированные участки не окрашиваются Рис. 21. Схема окрашивания ишемизированных клеток ТТХ

Заключение

В клинической практике и при фармакологических исследованиях микроскопический анализ – неотъемлемая часть изучения нормального строения тканей, а также патологически измененных органов. Приготовление гистологических препаратов включает в себя 5 этапов, каждый из которых важен и может повлиять на полученные результаты. Последний этап является – окрашивание, который обычно ограничен применением стандартной – обзорной окраски гематоксилином и эозином. Но для раскрытия более полной картины процесса необходимы дополнительные окраски; их можно применять как обзорные и заменить ими классические гематоксилин и эозин, например окраски по Ван Гизону или трихром по Маллори. Однако эти методы имеют ряд ограничений или трудоемки в исполнении, поэтому не получили широкого распространения и используются как дополнительные окраски для более детального анализа, в частности для изучения соединительной ткани и патологических процессов, связанных с фиброзом.

Большая часть окрасок более специфична, и их применение служит для выявления конкретных структур или химических соединений в клетках и тканях. Это позволяет получить значительный объем информации, что облегчает как понимание течения нормальных, так и патологических процессов. Так методики выявления мукополисахаридов альциановым синим широко применимы при исследовании желудочно-кишечного тракта и дыхательной системы, а ШИК-реакция незаменима в диагностике болезней накопления, ряда онкологических процессов и грибковых инфекций. Жировые красители, прежде всего Судан III и шарлах красный, используются повсеместно при исследовании дистрофических заболеваний и не в последнюю очередь атеросклероза, а методика применения красителя Oil Red O применима для макроскопической оценки площади атеросклеротического поражения аорты. Конго красный незаменим для обнаружения патологического белка амилоида, который образуется в тканях при аутоимунных и хронических заболеваниях – ревматоидном артрите, туберкулезе или нефропатии.

Кроме того, применяются специализированные окраски, направленные на диагностику повреждений миокарда. Выявить наиболее ранние признаки повреждения кардиомиоцитов позволяет ГОФП-методика. А при помощи солей тетразолия легко макроскопически визуализировать площадь поражения в тканях (не только в сердечной мышце, но и, например, в головном мозге).

В данном обзоре была рассмотрена только незначительная часть гистологических окрасок, их механизмы действия, химические реакции, позволяющие визуализировать микроскопические структуры тканей. Многие из этих методик нашли свое применение в практической деятельности лабораторий, при изучении эффективности и токсичности лекарственных средств. Конечно, существует еще множество красителей, методов, а также их сочетания. Все они могут быть использованы сами по себе, но скорее необходимо применять целый комплекс окрасок. Данный материал будет полезен как специалистам по планированию и проведению доклинических исследований на этапе подготовки к экспериментам, так и врачам-гистологам для понимания процессов, происходящих в тканях в момент окрашивания структур, что позволит выявлять ошибки и получать более объективный конечный результат.

Методы выявления НВ  антигена

Методы выявления НВ  антигена

Окраска орсеином.

Данная окраска имеет наибольшее значение для диагностики гепатита В

Окраска по Шиката.

-срез поместить в 1-й раствор(9,5 мл 5%-го марганцовокислого калия+5 мл 3%-го раствора серной кислоты + 85 мл дистиллированной воды) -на 10 мин

-поместить в 2% щавелевую кислоту на 10 мин

-промыть в проточной воде 5 мин,затем в двух порциях дистиллированной воды и двух порциях 70%-го этанола

-на срез налить краситель(орсеин 4 г,70% этанол-100 мл,концентрированной соляной кислоты-2 мл)-на 4 часа

-промыть в проточной воде 10 мин

-дифференцировать солянокислым этанолом

-заключить в бальзам

РЕЗУЛЬТАТ:в цитоплазме гепатоцитов на светло-коричневом фоне тканевых элементов выявляются крупные округлые темно-коричневые включения однородного строения. Аналогично окрашиваются ядра лимфоцитов в перипортальных инфильтратах

Эластические волокна,медно-белковые комплексы окрашиваются также в коричневый цвет.

Результаты во многом определяются качеством красителя. Встречаются реактивы, не окрашивающие специфический субстрат. Поэтому при смене реактива необходимо апробировать его на материале, где уже был получен положительный результат.

Редко реактив пригоден более 2 недель, поэтому нужен свежий. Но все же встречаются орсеины, окрашивающие цитоплазму гепатоцитов диффузно, особенно на секционном материале. Поэтому предложены другие методы.

Высокоспецифичный метод для выявления НВ  антигена

1.Депарафинированные  и доведенные до воды срезы обрабатывают метанолом,содержащим 0,6% перекиси водорода, в течение 20 мин для подавления эндогенной пероксидазы.

2.Промывают в трех сменах фосфатного буфера(рН 7,2)

3.Инкубируют в растворе пероксидазы (5 мг на 100 мл),нанесенном на срезы, в течение 30 мин при комнатной температуре во влажной камере

4.Промывают в буфере

5.Обрабатывают диаминобензидином

6.Промывают в буфере

7.Докрашивают ядра гематоксилином Майера

РЕЗУЛЬТАТЫ: включения НВ  антигена темно-коричневого цвета


Артерия эластического типа. Аорта кошки — Мегаобучалка

Сердечно сосудистая система и органы кроветворения.

Артерия мышечного типа.

1 — внутренняя эластическая мембрана
(есть только у артерий)
2 — эластические мембраны в толще средней оболочки
(есть только у артерий)

1 — внутренняя оболочка
2 — средняя оболочка
3 — наружная оболочка
4 — внутренняя эластическая мембрана
(есть только у артерий)

 

Артерия (смешанного) мышечно-эластического типа.

 

Внутренняя оболочка Под эндотелием и хорошо выраженным подэндотелиальным слоем находится внутренняя эластическая мембрана (а не сплетение эластических волокон, как в аорте).
Средняя оболочка Уже отмечалось, что миоциты и эластические элементы (волокна и окончатые мембраны) содержатся в t. media данных сосудов в примерно равном количестве.
Наружная оболочка Пучки миоцитов располагаются также в t. externa (наряду с обычными компонентами этой оболочки - рыхлой соединительной тканью, vasa vasorum и адипоцитами).

 

Артерия эластического типа. Аорта кошки.

 

1 — внутренняя оболочка
2 — средняя оболочка
3 — наружная оболочка



3,а-б. Препарат — артерия эластического типа. Аорта. Окраска орсеином.
а)(Малое увеличение) Полный размер б)(Большое увеличение) Полный размер
1. Согласно п. 1.1.3.3, при окраске орсеином эластические компоненты окрашиваются в вишнёво-красный или коричневыйцвет. 2. а) В данном случае, благодаря этой окраске, в средней оболочке (II) аорты обнаруживаются многочисленные окончатые мембраны (1). б) На снимках они имеют вид толстых извитых линий, расположенных концентрически. 3. а) Внутренняя оболочка (I) в данном случае очень тонкая. б) Это особенность аорты кошки, из которой приготовлен препарат. 4. В наружной оболочке (III) эластические элементы представлены тонкими волокнами.

 

Набор красителей Orcein (гепатит B и эластичные волокна) (ab245881)

Обзор

  • Название продукта

    Набор красителей Orcein (гепатит B и эластичные волокна)

  • Тип образца

    Срезы тканей

  • Обзор продукции

    Набор

    Orcein Stain Kit (гепатит B и эластичные волокна) ab245881 можно использовать в гистологических процедурах для визуализации поверхностного антигена гепатита B (HBsAg), эластичных волокон и белков, связанных с медью.HBsAg выглядит как агрегаты неправильной формы в цитоплазматической области клеток. Этот реагент можно использовать на фиксированных формалином и залитых парафином срезах.

    HBsAg: темно-красный / коричневый
    Эластичные волокна: темно-красный / коричневый
    Copper Assoc. Белки: темно-красный / коричневый
    Фон: светло-красноватый / фиолетовый

    Контрольная ткань: Печень с известным гепатитом. Легкое для эластичного волокна. Любая хорошо закрепленная ткань разрезает 3-5 мкм.

    Другие продукты для окрашивания срезов тканей

    Дополнительные наборы и реагенты можно найти в специальном руководстве по окрашиванию или продукты для извлечения антигена, блокирования, усиления сигнала, визуализации, контрастного окрашивания и монтажа в руководстве по наборам IHC и реагентам.

Недвижимость

  • Инструкции по хранению

    Хранить при комнатной температуре. См. Протоколы.

  • Компоненты 1 комплект
    Дифференцирующее решение 1 x 125 мл
    Раствор Орсеина 1 x 125 мл
    дигидрат щавелевой кислоты 1 x 125 мл
    Перманганат калия раствор.(5%) 1 x 30 мл
    Раствор серной кислоты (3%) 1 x 30 мл

Изображения

  • Набор красителей Orcein (гепатит B и эластичные волокна) ab245881

    ab245881 Набор для окрашивания Orcein Stain Kit (гепатит B и эластичные волокна), окрашивающий фиксированный формалином и залитый парафином срез ткани.

Паспорта и документы

  • SDS скачать

    Страна / регион Выберите страну / регион

    Язык Выбор языка

  • Скачать брошюру

Список литературы (0)

ab245881 еще не упоминался в каких-либо публикациях.

Отзывы клиентов, вопросы и ответы

Orcein — обзор | ScienceDirect Topics

Причина как цирроза у детей в Индии, так и идиопатического токсикоза меди была неясна, но случайное открытие окрашивания гранулированным орсеином в биопсиях печени пациентов с циррозом в детстве в Индии дало первый ключ к разгадке [7]. Это предполагало сильное накопление меди, что впоследствии было подтверждено как при циррозе у детей в Индии, так и при идиопатическом токсикозе меди путем измерения содержания меди в биоптатах печени [8,9].Таким образом, цирроз в детстве в Индии казался формой токсикоза меди, но отличной от WD, поскольку он в первую очередь наблюдается у маленьких детей. Впоследствии было обнаружено, что пациентов с циррозом в детском возрасте в Индии обычно кормили молоком, которое хранилось или кипятилось в медной посуде (рис. 44.1), практика, которая наблюдалась менее чем у половины контрольной группы [11], и что такая практика привела к в очень высоких концентрациях меди в обработанном таким образом молоке [3,12]. Тогда стало ясно, что младенцы с циррозом индийского детства подвергались необычно высокой нагрузке на медь, что, вероятно, вызвало токсикоз меди.Это было достаточной причиной, чтобы воспрепятствовать использованию медной посуды, кампании, которая была связана с резким падением заболеваемости циррозом у детей в Индии [13]. Кроме того, были начаты испытания по удалению гриппа с d-пеницилламином. Хотя при прогрессировании заболевания не наблюдалось никакого эффекта, в не запущенных случаях лечение было вполне успешным [14]. Эти наблюдения породили гипотезу о том, что чрезмерное употребление меди необходимо для развития цирроза в детском возрасте у детей, но одного этого недостаточно, поскольку братья и сестры пациентов и другие младенцы в этих сообществах также подвергались такой же высокой нагрузке меди.Должен присутствовать второй фактор, например, токсин окружающей среды или генетическая предрасположенность [13]. Подобные случаи из других частей мира, и особенно большая серия из Тироля [10], также указали на высокое потребление меди в младенчестве как этиологический фактор. Опять же, этот фактор не объяснял, почему только у некоторых младенцев развивалась эта проблема, а у других, которые принимали такое же потребление, нет. Поскольку случаи из Тироля были совместимы с аутосомно-рецессивным наследованием и демонстрировали высокий уровень кровного родства, что также наблюдалось в других случаях [5], тогда была выдвинута гипотеза, что цирроз в детстве в Индии был вызван перегрузкой медью у генетически предрасположенных людей.Когда впоследствии болезнь, казалось, исчезла, в сочетании с отказом от медной посуды для приготовления и хранения грудного молока [3], был рассмотрен случай цирроза в детстве в Индии из-за перегрузки медью, которая вызывает заболевание печени у генетически предрасположенных младенцев и детей. четко сформулированы и, кажется, объясняют все аспекты патогенеза цирроза у детей в Индии. Затем несколько исследований попытались идентифицировать вовлеченный ген, сосредоточив внимание на генах-кандидатах как ATP7B и COMMD1 , но не смогли этого сделать [15,16].

Рисунок 44.1. Воздействие меди в детстве в сельской Индии.

На первой фотографии (вверху слева) изображена часть кухни в сельской Индии 1980-х годов. На выставке представлена ​​разнообразная медная и латунная посуда — кастрюли, а также сервировочные тарелки и стаканы. Обычно посуда, используемая для приготовления или разогрева молока, изготавливается из латуни (третья полка), а посуда, используемая для сервировки и еды, — из меди (верхняя полка). Движение против часовой стрелки: на второй фотографии изображен буйвол, которого доят, а молоко собирают в медный контейнер.На третьей фотографии изображен молочник — «дудваллах» — стоящий у своего велосипеда, чтобы доставить молоко, которое находится в медном контейнере. Каждое утро он возил молоко по домам поблизости. На последней фотографии (вверху справа) изображена мать в деревне в Индии, которая нагревает молоко в медном котле на «чулле», пока оно не закипит. Затем молоко подавали детям в медных стаканах. Такое кипячение молока было обычной практикой в ​​Индии в ту эпоху, поскольку молоко было сырым, а не пастеризованным.Таким образом, молоко находилось в тесном контакте с медью с момента его получения от коровы / буйвола до момента, когда оно попало к ребенку. Последнее воздействие меди было, вероятно, наиболее значительным, поскольку молоко буквально нагревали до кипения перед употреблением, чтобы предотвратить осложнения, связанные с приемом непастеризованного молока. Эта практика использования медных / латунных горшков прекратилась с тех пор, как была обнаружена связь с циррозом индийского детства.

Предоставлено: д-р А. Бавдекар, отделение педиатрии, больница KEM, Пуна, Индия.

Однако некоторые свидетельства, противоречащие этой гипотезе, уже были доступны, когда эта гипотеза была выдвинута. В серии, описывающей 120 случаев цирроза в детстве в Индии, все находились на грудном вскармливании, и у половины пациентов не использовалась латунная посуда для кипячения или хранения молока [17]. Кроме того, помимо обширной тирольской родословной, не было явных доказательств аутосомно-рецессивного наследования в семьях, пораженных циррозом в детстве индейцев [13]. Кроме того, крупное исследование из Индии, проведенное более 20 лет назад, резюме которого было опубликовано только недавно, еще раз показало, что накопление меди в печени является отличительной чертой цирроза в детстве в Индии, но не смогло подтвердить диетическое происхождение этого заболевания. избыток меди [2].

Микроволновый метод Orcein для определения поверхностного антигена гепатита B

ФИКСАЦИЯ: 10% буферный нейтральный формалин.

ТЕХНИКА: Парафиновые срезы толщиной 5 мкм.

РЕШЕНИЯ:

0,3% подкисленный перманганат калия (запас)

Перманганат калия ———————————————— ——— 0,3 г

Вода дистиллированная ———————————————— —————— 100.0 мл

Кислота серная концентрированная ——————————————— ——— 0,2 мл

Для использования разбавить равными частями дистиллированной воды.

1% раствор щавелевой кислоты

Щавелевая кислота ———————————————— ———————- 1,0 г

Вода дистиллированная ———————————————— —————— 100,0 мл

1% раствор орсеина

Орсейн, К.I. (Ред. 1) 1242 —————————————— ————- 1,0 г

Спирт, 70% ——————————————— ———————- 100,0 мл

Кислота соляная, концентрированная ——————————————— — 1,0 мл

Дайте раствору постоять при комнатной температуре не менее одной недели перед использованием.

Поверхностный антиген гепатита B (HbsAg) ——————————- коричневый (диффузная цитоплазматическая)

Медь-связывающий белок ——————————————- коричневый, мелкий цитоплазматические гранулы

Эластичные волокна ———————————————— ——— коричневый

Некоторые орсеиновые красители не дают удовлетворительных результатов окрашивания.Неудовлетворительные красители либо перекрашивают срез, либо не окрашивают HbsAg должным образом. Красители, сертифицированные Комиссией по биологическим пятнам как орсеин, проверяются на их способность окрашивать HbsAg. Окрашивание можно производить при комнатной температуре путем окрашивания в течение 4-8 часов в растворе орсеина.

Деодхар, К.П. и др .: Окрашивание антигена гепатита В орсеином в парафиновых срезах биопсии печени. J. Clin. Дорожка. 28: 66-70, 1975.

Луна, Л.Г .: Модифицированный альдегидный фуксин для HBAg.Гисто-логика 8: 119-120, 1978.

Шиката, Т. и др.: Методы окрашивания австралийского антигена в парафиновых срезах. Яп. J. Exp. Med. 44: 25-36, 1974.

Орсеин Окрашивание, Кожа | Visiopharm · Программное обеспечение для анализа изображений патологии

Orcein Staining, Skin | Visiopharm · ПО для анализа изображений патологии

Приложение процесса

Отменить

# 10020

Толщина эпидермиса и содержание коллагена / эластина в дермальном слое, а также отношение к возрасту, полу, типу кожи, пигментации, содержанию крови, привычкам курения и участку тела важны в дерматологических исследованиях.Толщина эпидермиса часто изменяется при кожных заболеваниях, таких как псориаз, и поэтому ее измерение может быть важным параметром при оценке прогрессирования заболевания и эффекта лечения.
Толщина эпидермиса может существенно различаться даже в пределах среза ткани. По этой причине средняя арифметическая толщина оценивается как площадь эпидермиса, деленная на длину эпидермиса.

Рисунок 1

Срез кожи, окрашенный орсеином.

Рисунок 2

Срез кожи, окрашенный орсеином, с грубым контуром эпидермиса.Это выполняется автоматически.

Рисунок 3

Площадь (красный) и длина (зеленый) эпидермиса используются для расчета его средней арифметической толщины.

Рисунок 4

Дополнительное обнаружение эластина (синий) и коллагена (желтый) в срезе кожи. Это выполняется только в дерме.

Детали

Вспомогательные приложения

Вспомогательные приложения используются для дополнительных этапов процесса, например поиск области интереса (ROI).

TISSUE DETECT
Вспомогательный APP ’01 Tissue ROI ’может использоваться для автоматического определения интересующей области (ROI). Это позволит сэкономить время на последующих этапах анализа. Анализ проводится при меньшем увеличении и обнаруживает более крупные фрагменты ткани. Пыль и мелкие артефакты игнорируются. На этом этапе отсутствуют количественные выходные переменные (см. РИСУНОК 1 и 2).

КОЛИЧЕСТВО ЭЛАСТИНА / КОЛЛАГЕНА
Вспомогательное приложение APP ’03 Analyze Collagen Elastin ’сегментирует обнаруженную дерму на различные компоненты: коллаген и эластин.

Количественные выходные переменные

Конечной точкой для этого анализа является средняя арифметическая толщина эпидермиса:

  • Толщина эпидермиса = (Площадь эпидермиса) / (Длина эпидермиса)
  • Соотношение коллагена = (Площадь коллагена) / (Площадь дермы)
  • Отношение эластина = ( Площадь эластина) / (Площадь дермы)

Анализ можно расширить, включив также соотношение площадей (отношение эпидермиса к общей ткани) или другие соответствующие показатели.

Рабочий процесс

Шаг 1: Загрузите вспомогательное приложение для обнаружения ткани ’01 Tissue ROI ‘и запустите изображение для обработки.Это очерчивает ткань с интересующей областью (ROI) и экономит время на последующих этапах анализа.

Шаг 2: Загрузите приложение для количественного определения APP ’02 Analyze и запустите изображение, чтобы обнаружить эпидермис и рассчитать его толщину.

Шаг 3 (необязательно): Загрузите количественное определение APP ’03 Analyze Collagen Elastin ’и запустите изображения, чтобы сегментировать дерму на коллаген и эластин.

Методы

Перед анализом изображения важно очертить интересующую область, тем самым исключив из количественного анализа большую часть кожи, не являющейся эпидермисом.Это начертание выполняется автоматически, но также может быть выполнено вручную. Он не должен быть очень точным, если он удаляет участки ткани того же цвета, что и эпидермис. Сегментированный эпидермальный слой скелетирован, образуя его среднюю линию (см. РИСУНОК 3). Длина поверхности раздела между скелетом и исходным эпидермисом соответствует удвоенной длине эпидермиса. Наконец, выполняется сегментация очерченной дермы для определения содержания эластина и коллагена.

Ключевые слова

Кожа, эпидермис, толщина, псориаз, количественный, цифровая патология, анализ изображений, эластин, коллаген.

Успех

Ваше сообщение успешно отправлено!

Настройка конфиденциальности

Visiopharm A / S использует файлы cookie, в том числе сторонние файлы cookie, для улучшения взаимодействия с пользователем на нашем веб-сайте за счет защиты функций, создания статистики и сохранения ваших предпочтений в маркетинговых целях. Если вы принимаете все, вы соглашаетесь на использование файлов cookie для этих целей.

  • Essential
  • Маркетинг
  • Внешние носители
Печенье

Visiopharm A / S использует файлы cookie, в том числе сторонние файлы cookie, для улучшения взаимодействия с пользователем на нашем веб-сайте за счет защиты функций, создания статистики и сохранения ваших предпочтений в маркетинговых целях. Нажимая «Принять все», вы соглашаетесь на использование файлов cookie для этих целей. Вы можете выбрать, какие категории файлов cookie вы хотите разрешить. Обратите внимание, что в зависимости от выбранных вами настроек некоторые функции на нашем веб-сайте могут быть вам недоступны.

Имя Borlabs Cookie
Поставщик Владелец этого веб-сайта
Цель Сохраняет настройки посетителей, выбранные в поле Cookie Borlabs Cookie.
Имя файла cookie borlabs-cookie
Срок действия файла cookie 1 год

при поддержке Borlabs Cookie

Политика конфиденциальности

Aceto-Orcein Stain | VWR

Положения и условия

Спасибо, что посетили наш сайт.Эти условия использования применимы к веб-сайтам США, Канады и Пуэрто-Рико (далее «Веб-сайт»), которыми управляет VWR («Компания»). Если вы заходите на веб-сайт из-за пределов США, Канады или Пуэрто-Рико, пожалуйста, посетите соответствующий международный веб-сайт, доступный по адресу www.vwr.com, для ознакомления с применимыми условиями. Все пользователи веб-сайта подчиняются следующим условиям использования веб-сайта (эти «Условия использования»). Пожалуйста, внимательно прочтите эти Условия использования перед доступом или использованием любой части веб-сайта. Заходя на веб-сайт или используя его, вы соглашаетесь с тем, что вы прочитали, поняли и соглашаетесь соблюдать настоящие Условия использования с поправками, которые время от времени вносятся, а также Политику конфиденциальности компании, которая настоящим включена в настоящие Условия. использования. Если вы не желаете соглашаться с настоящими Условиями использования, не открывайте и не используйте какие-либо части веб-сайта.

Компания может пересматривать и обновлять настоящие Условия использования в любое время без предварительного уведомления, разместив измененные условия на веб-сайте. Продолжение использования вами веб-сайта означает, что вы принимаете и соглашаетесь с пересмотренными Условиями использования.Если вы не согласны с Условиями использования (в которые время от времени вносятся поправки) или недовольны Веб-сайтом, ваше единственное и исключительное средство правовой защиты — прекратить использование Веб-сайта.

Использование сайта

Информация, содержащаяся на этом веб-сайте, предназначена только для информационных целей. Хотя считается, что информация верна на момент публикации, вам следует самостоятельно определить ее пригодность для вашего использования. Не все продукты или услуги, описанные на этом веб-сайте, доступны во всех юрисдикциях или для всех потенциальных клиентов, и ничто в настоящем документе не предназначено как предложение или ходатайство в какой-либо юрисдикции или какому-либо потенциальному покупателю, где такое предложение или продажа не соответствует требованиям.

Приобретение товаров и услуг

Настоящие Условия и положения распространяются только на использование веб-сайта. Обратите внимание, что условия, касающиеся обслуживания, продаж продуктов, рекламных акций и других связанных мероприятий, можно найти по адресу https://us.vwr.com/store/content/externalContentPage.jsp?path=/en_US/about_vwr_terms_and_conditions.jsp , и эти условия регулируют любые покупки продуктов или услуг у Компании.

Интерактивные функции

Веб-сайт может содержать службы досок объявлений, области чата, группы новостей, форумы, сообщества, личные веб-страницы, календари и / или другие средства сообщения или связи, предназначенные для того, чтобы вы могли общаться с общественностью в целом или с группой ( вместе «Функция сообщества»).Вы соглашаетесь использовать функцию сообщества только для публикации, отправки и получения сообщений и материалов, которые являются надлежащими и относятся к конкретной функции сообщества. Вы соглашаетесь использовать веб-сайт только в законных целях.

A. В частности, вы соглашаетесь не делать ничего из следующего при использовании функции сообщества:

1. Опорочить, оскорбить, преследовать, преследовать, угрожать или иным образом нарушать законные права (например, право на неприкосновенность частной жизни и гласность) других.
2. Публикация, размещение, загрузка, распространение или распространение любых неуместных, непристойных, дискредитирующих, нарушающих авторские права, непристойных, непристойных или незаконных тем, названий, материалов или информации.
3. Загружайте файлы, содержащие программное обеспечение или другие материалы, защищенные законами об интеллектуальной собственности (или правами на неприкосновенность частной жизни), если вы не владеете или не контролируете права на них или не получили все необходимое согласие.
4. Загрузите файлы, содержащие вирусы, поврежденные файлы или любое другое подобное программное обеспечение или программы, которые могут повредить работу чужого компьютера.
5. Перехватить или попытаться перехватить электронную почту, не предназначенную для вас.
6. Рекламировать или предлагать продавать или покупать какие-либо товары или услуги для любых деловых целей, если такая функция сообщества специально не разрешает такие сообщения.
7. Проводите или рассылайте опросы, конкурсы, финансовые пирамиды или письма счастья.
8. Загрузите любой файл, опубликованный другим пользователем функции сообщества, который, как вы знаете или разумно должен знать, не может распространяться на законных основаниях таким образом или что у вас есть договорное обязательство сохранять конфиденциальность (несмотря на его доступность на веб-сайте).
9. Подделывать или удалять любые ссылки на автора, юридические или другие надлежащие уведомления, обозначения собственности или ярлыки происхождения или источника программного обеспечения или других материалов, содержащихся в загружаемом файле.
10. Предоставление ложной информации о принадлежности к какому-либо лицу или организации.
11. Участвовать в любых других действиях, которые ограничивают или препятствуют использованию веб-сайта кем-либо, или которые, по мнению Компании, могут нанести вред Компании или пользователям веб-сайта или подвергнуть их ответственности.
12. Нарушать любые применимые законы или постановления или нарушать любой кодекс поведения или другие правила, которые могут быть применимы к какой-либо конкретной функции Сообщества.
13. Собирать или иным образом собирать информацию о других, включая адреса электронной почты, без их согласия.

B. Вы понимаете и признаете, что несете ответственность за любой контент, который вы отправляете, вы, а не Компания, несете полную ответственность за такой контент, включая его законность, надежность и уместность. Если вы публикуете сообщения от имени или от имени вашего работодателя или другой организации, вы заявляете и гарантируете, что у вас есть на это право. Загружая или иным образом передавая материалы в любую часть веб-сайта, вы гарантируете, что эти материалы являются вашими собственными или находятся в общественном достоянии или иным образом свободны от проприетарных или иных ограничений, и что вы имеете право размещать их на веб-сайте.Кроме того, загружая или иным образом передавая материал в любую область веб-сайта, вы предоставляете Компании безотзывное, бесплатное право во всем мире на публикацию, воспроизведение, использование, адаптацию, редактирование и / или изменение таких материалов любым способом, в любые и все средства массовой информации, известные в настоящее время или обнаруженные в будущем во всем мире, в том числе в Интернете и World Wide Web, для рекламных, коммерческих, торговых и рекламных целей, без дополнительных ограничений или компенсации, если это не запрещено законом, и без уведомления, проверки или одобрения.

C. Компания оставляет за собой право, но не принимает на себя никакой ответственности (1) удалить любые материалы, размещенные на веб-сайте, которые Компания по своему собственному усмотрению сочтет несовместимыми с вышеуказанными обязательствами или иным образом неприемлемыми по любой причине. ; и (2) прекратить доступ любого пользователя ко всему или части веб-сайта. Однако Компания не может ни просмотреть все материалы до того, как они будут размещены на веб-сайте, ни обеспечить быстрое удаление нежелательных материалов после их размещения.Соответственно, Компания не несет ответственности за какие-либо действия или бездействие в отношении передач, сообщений или контента, предоставленных третьими сторонами. Компания оставляет за собой право предпринимать любые действия, которые она сочтет необходимыми для защиты личной безопасности пользователей этого веб-сайта и общественности; тем не менее, Компания не несет ответственности перед кем-либо за выполнение или невыполнение действий, описанных в этом параграфе.

D. Несоблюдение вами положений пунктов (A) или (B) выше может привести к прекращению вашего доступа к веб-сайту и может подвергнуть вас гражданской и / или уголовной ответственности.

Особое примечание о содержании функций сообщества

Любой контент и / или мнения, загруженные, выраженные или отправленные с помощью любой функции сообщества или любого другого общедоступного раздела веб-сайта (включая области, защищенные паролем), а также все статьи и ответы на вопросы, кроме контента, явно разрешенного Компания, являются исключительно мнениями и ответственностью лица, представляющего их, и не обязательно отражают мнение Компании.Например, любое рекомендованное или предлагаемое использование продуктов или услуг, доступных от Компании, которое публикуется через функцию сообщества, не является признаком одобрения или рекомендации со стороны Компании. Если вы решите следовать какой-либо такой рекомендации, вы делаете это на свой страх и риск.

Ссылки на сторонние сайты

Веб-сайт может содержать ссылки на другие веб-сайты в Интернете. Компания не несет ответственности за контент, продукты, услуги или методы любых сторонних веб-сайтов, включая, помимо прочего, сайты, связанные с Веб-сайтом или с него, сайты, созданные на Веб-сайте, или стороннюю рекламу, и не делает заявлений относительно их качество, содержание или точность.Наличие ссылок с веб-сайта на любой сторонний веб-сайт не означает, что мы одобряем, поддерживаем или рекомендуем этот веб-сайт. Мы отказываемся от всех гарантий, явных или подразумеваемых, в отношении точности, законности, надежности или действительности любого контента на любых сторонних веб-сайтах. Вы используете сторонние веб-сайты на свой страх и риск и в соответствии с условиями использования таких веб-сайтов.

Права собственности на контент

Вы признаете и соглашаетесь с тем, что все содержимое веб-сайта (включая всю информацию, данные, программное обеспечение, графику, текст, изображения, логотипы и / или другие материалы) и его дизайн, выбор, сбор, расположение и сборка являются являются собственностью Компании и защищены законами США и международными законами об интеллектуальной собственности.Вы имеете право использовать содержимое веб-сайта только в личных или законных деловых целях. Вы не можете копировать, изменять, создавать производные работы, публично демонстрировать или исполнять, переиздавать, хранить, передавать, распространять, удалять, удалять, дополнять, добавлять, участвовать в передаче, лицензировать или продавать какие-либо материалы в Интернете. Сайт без предварительного письменного согласия Компании, за исключением: (а) временного хранения копий таких материалов в ОЗУ, (б) хранения файлов, которые автоматически кэшируются вашим веб-браузером в целях улучшения отображения, и (в) печати разумного количество страниц веб-сайта; в каждом случае при условии, что вы не изменяете и не удаляете какие-либо уведомления об авторских правах или других правах собственности, включенные в такие материалы.Ни название, ни какие-либо права интеллектуальной собственности на любую информацию или материалы на веб-сайте не передаются вам, а остаются за Компанией или соответствующим владельцем такого контента.

Товарные знаки

Название и логотип компании, а также все связанные названия, логотипы, названия продуктов и услуг, появляющиеся на веб-сайте, являются товарными знаками компании и / или соответствующих сторонних поставщиков. Их нельзя использовать или повторно отображать без предварительного письменного согласия Компании.

Отказ от ответственности

Компания не несет никакой ответственности за материалы, информацию и мнения, предоставленные или доступные через Веб-сайт («Контент сайта»). Вы полагаетесь на Контент сайта исключительно на свой страх и риск. Компания не несет никакой ответственности за травмы или убытки, возникшие в результате использования любого Контента Сайта.
ВЕБ-САЙТ, СОДЕРЖАНИЕ САЙТА И ПРОДУКТЫ И УСЛУГИ, ПРЕДОСТАВЛЯЕМЫЕ ИЛИ ДОСТУПНЫЕ ЧЕРЕЗ САЙТ, ПРЕДОСТАВЛЯЮТСЯ НА УСЛОВИЯХ «КАК ЕСТЬ» И «ПО ДОСТУПНОСТИ», СО ВСЕМИ ОШИБКАМИ.КОМПАНИЯ И НИ ЛИБО, СВЯЗАННОЕ С КОМПАНИЕЙ, НЕ ДАЕТ НИКАКИХ ГАРАНТИЙ ИЛИ ЗАЯВЛЕНИЙ В ОТНОШЕНИИ КАЧЕСТВА, ТОЧНОСТИ ИЛИ ДОСТУПНОСТИ ВЕБ-САЙТА. В частности, НО БЕЗ ОГРАНИЧЕНИЯ ВЫШЕИЗЛОЖЕННОГО, НИ КОМПАНИЯ И НИ ЛИБО, СВЯЗАННОЕ С КОМПАНИЕЙ, НЕ ГАРАНТИРУЕТ ИЛИ ЗАЯВЛЯЕТ, ЧТО ВЕБ-САЙТ, СОДЕРЖАНИЕ САЙТА ИЛИ УСЛУГИ, ПРЕДОСТАВЛЯЕМЫЕ НА САЙТЕ ИЛИ ЧЕРЕЗ САЙТ, БУДУТ ТОЧНЫМИ, НАДЕЖНЫМИ ИЛИ БЕСПЛАТНЫМИ ИЛИ БЕСПЛАТНЫМИ ЧТО ДЕФЕКТЫ БУДУТ ИСПРАВЛЕНЫ; ЧТО ВЕБ-САЙТ ИЛИ СЕРВЕР, ДЕЛАЮЩИЙ ЕГО ДОСТУПНЫМ, СВОБОДНЫ ОТ ВИРУСОВ ИЛИ ДРУГИХ ВРЕДНЫХ КОМПОНЕНТОВ; ИНАЧЕ ВЕБ-САЙТ ОТВЕЧАЕТ ВАШИМ ПОТРЕБНОСТЯМ ИЛИ ОЖИДАНИЯМ.КОМПАНИЯ ОТКАЗЫВАЕТСЯ ОТ ВСЕХ ГАРАНТИЙ, ЯВНЫХ ИЛИ ПОДРАЗУМЕВАЕМЫХ, ВКЛЮЧАЯ ЛЮБЫЕ ГАРАНТИИ КОММЕРЧЕСКОЙ ЦЕННОСТИ, ПРИГОДНОСТИ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕННОЙ ЦЕЛИ И НЕ НАРУШЕНИЯ.
НИ ПРИ КАКИХ ОБСТОЯТЕЛЬСТВАХ КОМПАНИЯ ИЛИ ЕЕ ЛИЦЕНЗИАРЫ ИЛИ ПОДРЯДЧИКИ НЕ НЕСЕТ ОТВЕТСТВЕННОСТИ ЗА ЛЮБЫЕ УБЫТКИ ЛЮБОГО РОДА, ПРИ КАКИХ-ЛИБО ЮРИДИЧЕСКИХ ТЕОРИЯХ, ВЫЗВАННЫЕ ИЛИ В СВЯЗИ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ВАМИ ИЛИ НЕВОЗМОЖНОСТЬЮ ИСПОЛЬЗОВАТЬ ВЕБ-САЙТ, СОДЕРЖИМОЕ САЙТА, ЛЮБЫЕ УСЛУГИ, ПРЕДОСТАВЛЯЕМЫЕ НА ВЕБ-САЙТЕ ИЛИ ЧЕРЕЗ ВЕБ-САЙТ ИЛИ ЛЮБОЙ САЙТ, ВКЛЮЧАЮЩИЙ ПРЯМЫЕ, КОСВЕННЫЕ, СЛУЧАЙНЫЕ, СПЕЦИАЛЬНЫЕ, КОСВЕННЫЕ ИЛИ КАРАТНЫЕ УБЫТКИ, ВКЛЮЧАЯ, НО НЕ ОГРАНИЧИВАЯСЯ, ЛИЧНЫЕ ТРАВМЫ, ПОТЕРЯ ПРИБЫЛИ ИЛИ УБЫТКОВ , ВИРУСЫ, УДАЛЕНИЕ ФАЙЛОВ ИЛИ ЭЛЕКТРОННЫХ СООБЩЕНИЙ, ИЛИ ОШИБКИ, УПУЩЕНИЯ ИЛИ ДРУГИЕ НЕТОЧНОСТИ НА ВЕБ-САЙТЕ ИЛИ СОДЕРЖАНИИ САЙТА, ​​ИЛИ УСЛУГАХ, НЕОБХОДИМО ИЛИ НЕТ НЕОБХОДИМОСТИ КОМПАНИИ И ПРЕДОСТАВЛЯЛА ЛИ КОМПАНИЯ ВОЗМОЖНОСТЬ ЛЮБЫЕ ТАКИЕ УБЫТКИ, ЕСЛИ НЕ ЗАПРЕЩЕНЫ ПРИМЕНИМЫМ ЗАКОНОДАТЕЛЬСТВОМ.

Компенсация

Вы соглашаетесь возместить и обезопасить Компанию и ее должностных лиц, директоров, агентов, сотрудников и других лиц, участвующих в работе Веб-сайта, от любых обязательств, расходов, убытков и издержек, включая разумные гонорары адвокатам, возникающих в результате любое нарушение вами настоящих Условий использования, использование вами Веб-сайта или любых продуктов, услуг или информации, полученных с Веб-сайта или через него, ваше подключение к Веб-сайту, любой контент, который вы отправляете на Веб-сайт через любые Функция сообщества или нарушение вами каких-либо прав другого лица.

Применимое право; Международное использование

Настоящие условия регулируются и толкуются в соответствии с законами штата Пенсильвания без учета каких-либо принципов коллизионного права. Вы соглашаетесь с тем, что любые судебные иски или иски, вытекающие из настоящих Условий использования или связанные с ними, будут подаваться исключительно в суды штата или федеральные суды, расположенные в Пенсильвании, и вы тем самым соглашаетесь и подчиняетесь личной юрисдикции таких судов для цели судебного разбирательства любого такого действия.
Настоящие Условия использования применимы к пользователям в США, Канаде и Пуэрто-Рико. Если вы заходите на веб-сайт из-за пределов США, Канады или Пуэрто-Рико, пожалуйста, посетите соответствующий международный веб-сайт, доступный по адресу www.vwr.com, для ознакомления с применимыми условиями. Если вы решите получить доступ к этому веб-сайту из-за пределов указанных юрисдикций, а не использовать доступные международные сайты, вы соглашаетесь с настоящими Условиями использования и тем, что такие условия будут регулироваться и толковаться в соответствии с законами США и штата. Пенсильвании и что мы не делаем никаких заявлений о том, что материалы или услуги на этом веб-сайте подходят или доступны для использования в этих других юрисдикциях.В любом случае все пользователи несут ответственность за соблюдение местных законов.

Общие условия

Настоящие Условия использования, в которые время от времени могут вноситься поправки, представляют собой полное соглашение и понимание между вами и нами, регулирующее использование вами Веб-сайта. Наша неспособность реализовать или обеспечить соблюдение какого-либо права или положения Условий использования не означает отказ от такого права или положения. Если какое-либо положение Условий использования будет признано судом компетентной юрисдикции недействительным, вы, тем не менее, соглашаетесь с тем, что суд должен попытаться реализовать намерения сторон, отраженные в этом положении и других положениях Условия использования остаются в полной силе.Ни ваши деловые отношения, ни поведение между вами и Компанией, ни какая-либо торговая практика не может считаться изменением настоящих Условий использования. Вы соглашаетесь с тем, что независимо от какого-либо закона или закона об обратном, любые претензии или основания для иска, вытекающие из или связанные с использованием Сайта или Условий использования, должны быть поданы в течение одного (1) года после такой претензии или причины. иска возникла или будет навсегда запрещена. Любые права, прямо не предоставленные в настоящем документе, сохраняются за Компанией.Мы можем прекратить ваш доступ или приостановить доступ любого пользователя ко всему сайту или его части без предварительного уведомления за любое поведение, которое мы, по нашему собственному усмотрению, считаем нарушением любого применимого законодательства или наносящим ущерб интересам другого пользователя. , стороннего поставщика, поставщика услуг или нас. Любые вопросы, касающиеся настоящих Условий использования, следует направлять по адресу [email protected]

Жалобы на нарушение авторских прав

Мы уважаем чужую интеллектуальную собственность и просим наших пользователей поступать так же.Если вы считаете, что ваша работа была скопирована и доступна на Сайте способом, который представляет собой нарушение авторских прав, вы можете уведомить нас, предоставив нашему агенту по авторским правам следующую информацию:

  • электронная или физическая подпись лица, уполномоченного действовать от имени правообладателя;

  • описание работы, защищенной авторским правом, в отношении которой были нарушены ваши претензии;

  • идентификация URL-адреса или другого конкретного места на Сайте, где находится материал, который, по вашему мнению, нарушает авторские права;

  • ваш адрес, номер телефона и адрес электронной почты;

  • ваше заявление о том, что вы добросовестно полагаете, что спорное использование не разрешено владельцем авторских прав, его агентом или законом; и

  • ваше заявление, сделанное под страхом наказания за лжесвидетельство, о том, что приведенная выше информация в вашем уведомлении является точной и что вы являетесь владельцем авторских прав или уполномочены действовать от имени владельца авторских прав.

С нашим агентом для уведомления о жалобах на нарушение авторских прав на Сайте можно связаться по адресу: [email protected]

Ацето-орсеиновый краситель | Сарджент Велч

Положения и условия

Быстрый заказ, четкие ответы
Заказ у Sargent Welch быстро, легко и беспроблемно

Найдите здесь всю необходимую информацию, чтобы разместить заказ.

Условия продажи продукции

Все заказы регулируются Условиями продажи продуктов, доступными здесь.Размещая и заказывая, вы подтверждаете, что прочитали и согласны с Условиями продажи продуктов.

Условия доставки

Все заказы будут нести плату за доставку и обработку, добавленную к общей стоимости заказа. Стоимость доставки может варьироваться в зависимости от типа продукта, общего веса, места назначения, даты доставки и способа доставки. Заказы будут отправлены через курьерскую службу UPS по текущим опубликованным тарифам. Стоимость доставки указана на момент онлайн-заказа. Заказы, требуемые для отправки автомобильным транспортом, могут повлечь за собой дополнительную плату за доставку.За все заказы на сумму 24,99 долларов США или меньше (до налогообложения) будет взиматься дополнительная плата за обработку в размере 7 долларов США. Наши условия доставки указаны на условиях FOB, если не указано иное. Для получения дополнительной информации об определенных условиях доставки для вашей учетной записи обратитесь к своему менеджеру по работе с клиентами Sargent Welch. Посетите sargentwelch.com/repfinder, чтобы найти представителя в вашем регионе.

Закажите онлайн и сэкономьте!

Получите БЕСПЛАТНО стандартную наземную доставку для заказов на сумму от 250 долларов США при размещении заказа на сайте sargentwelch.com по промокоду FREESHIP250 . Общая сумма заказа должна быть не менее 250 долларов до налогообложения; общая сумма может включать живые и опасные материалы, однако эти материалы будут по-прежнему облагаться стандартными транспортными расходами и сборами. Исключая Аляску и Гавайи, а также некоторые грузовые перевозки автомобильным транспортом.

Плата за доставку химикатов и опасных грузов

Материалы, классифицированные D.O.T. как опасные. могут включать в себя, помимо прочего, химические вещества, микробиологические образцы или наборы для занятий, содержащие эти материалы.Если ваш заказ содержит предмет, классифицированный D.O.T. как опасный, за каждый заказ будет взиматься минимальная плата в размере 27,50 долларов США. Заказы на химические вещества и опасные материалы принимаются только от образовательных и научно-исследовательских учреждений; мы не отправляем химические вещества физическим лицам. Некоторые химические вещества теперь доступны в пакетах Poison Pack, чтобы ускорить доставку. Ранее эти химические вещества доставлялись в течение 7–14 дней, а стоимость доставки составляла 70 долларов США. Теперь добавленные пакеты Poison Pack позволяют доставить ваши химические вещества через UPS и прибыть в течение 3-4 дней, устраняя расходы на фрахт в размере 70 долларов США.Список химикатов, в которые входят ядовитые пакеты, можно найти на сайте sargentwelch.com/chemicalship.

Доставка живых материалов и гарантия

Все культуры микро-жизни будут доставлены вам в течение двух рабочих дней, если заказ будет сделан до 12:00 EST. Ваши образцы или культуры будут доставлены в хорошем состоянии, или мы вышлем им бесплатную замену. Запрос на дату доставки в среду, четверг или пятницу гарантирует здоровую доставку ваших живых образцов. Живые материалы не доставляются по понедельникам.При доставке во вторник может взиматься дополнительная плата за доставку. Свяжитесь со службой поддержки Sargent Welch (800-727-4368), чтобы организовать доставку материалов во вторник в прямом эфире. Чтобы получить купон на живые материалы, посетите sargentwelch.com/coupon. В случае плохой погоды мы можем отложить или отменить отправку, если она не будет доставлена ​​в безопасном месте. Если вы подозреваете, что погода может быть проблемой в вашем районе, посетите нашу страницу с материалами в реальном времени, чтобы узнать о последних обновлениях. Если ваша школа закрыта из-за погоды, позвоните в службу поддержки, чтобы сообщить нам об этом, и мы проведем для вас образец и перенесем расписание в удобное для вас время.

Бактерии и патогены

Отправка возбудителей болезней и бактериальных культур в вузы и частным лицам запрещена Федеральной службой здравоохранения. Государственные или местные власти могут потребовать разрешение, прежде чем мы сможем отправить вам патогены. Колледжам и университетам разрешается заказывать патогены и бактериальные культуры только через институциональный заказ на поставку.

Представление продукта

Мы делаем все возможное, чтобы обеспечить точность изображений продуктов, их описаний и цен перед публикацией.Однако из-за случайных изменений, вносимых поставщиками после даты публикации, внешний вид предметов может измениться или отличаться по цвету от того, что показано в каталоге. Мы гарантируем, что товары, которые вы получите, будут соответствовать всем техническим характеристикам и требованиям. Цены по каталогу и наличие продукта могут быть изменены. В случае возникновения типографской ошибки в ценообразовании мы не обязаны соблюдать неверно указанную цену. Посетите наш веб-сайт, чтобы узнать о последних обновлениях изображений, описаний, доступности и цен продуктов.

Ваши любимые товары, всегда в наличии
Тысячи наших самых продаваемых товаров всегда на складе и готовы к работе, когда они вам понадобятся, поэтому вам не придется ждать, пока появятся те, которые вы используете чаще всего. Товары отправляются в течение 48 часов с момента заказа, когда заказ поступает в электронном виде или по телефону до 13:00 EST. Обещание наличия на складе и 48-часовое время доставки исключают опасные химические вещества и исключительные объемы заказа, которые будут доступны во время выполнения заказа.Доступность может быть изменена в случае стихийного бедствия или стихийных бедствий, влияющих на поиск, доставку, транспортировку или доступность живых материалов, необходимых для производства продаваемых товаров. Сарджент Велч свяжется с заказчиком напрямую, чтобы сообщить о возникновении такого события и предоставить альтернативные материалы, когда они будут доступны. Текущие запасы и наличие всех продуктов доступны онлайн на каждой странице продукта.

Рекламные исключения

Если не указано иное, любой товар с ценой, заканчивающейся на «9» (т.е. 5,09 долл. США, 14,99 долл. США, 100,89 долл. США) исключены из специальных предложений, скидок и акций. Рекламные скидки не суммируются с другими предложениями, скидками или акциями. Предложения по бесплатной доставке включают только стандартную наземную доставку.

Кредит и выставление счетов

Кредит предоставляется всем учебным заведениям. Срок составляет 30 дней с даты выставления счета. Персональные заказы учителей всегда приветствуются. Для получения дополнительной информации по электронной почте [электронная почта защищена].

Налог с продаж

Налог с продаж (государственный и местный) будет включен в ваш счет. Если вы освобождены от налога с продаж, пожалуйста, предоставьте соответствующую документацию при размещении заказа.

100% гарантия возврата

Мы принимаем возврат товара по любой причине в течение 60 дней с момента покупки. Возвращаемые товары должны быть неиспользованными и в оригинальной упаковке. Чтобы вернуть товар для возврата, замены или кредита, отправьте электронное письмо [адрес электронной почты защищен] или позвоните по телефону 800-727-4368 , чтобы получить номер разрешения на возврат и дальнейшие инструкции по возврату.Пожалуйста, подготовьте номер вашего заказа, чтобы мы могли вам лучше помочь. В некоторых случаях может взиматься плата за пополнение запасов. Предметы, возвращенные без предварительного разрешения, не могут быть приняты или зачислены. Детали, на которые распространяется гарантия, будут заменены или отремонтированы по нашему усмотрению. Чтобы обеспечить скорейший возврат или замену, мы рекомендуем вам проверить все посылки сразу по прибытии, чтобы убедиться, что вы остались довольны. Может потребоваться проверка перевозчика.

Факты о Предложении штата Калифорния 65
Сарджент Уэлч обязуется обеспечивать вашу безопасность и соблюдать Закон штата Калифорния о безопасной питьевой воде и защите от токсичных веществ 1986 года.По состоянию на 30 августа 2018 г. требования к отчетности этого закона, более известного как Предложение 65, изменились. Эти изменения требуют, чтобы розничные торговцы, ведущие свою деятельность в штате Калифорния, обеспечивали более надежную и подробную маркировку товаров, содержащих определенные химические вещества, которые, как известно в штате Калифорния, являются опасными. В ответ мы добавили новые ярлыки, подобные показанной ниже, ко многим нашим пакетам продуктов и описаниям каталогов. Теперь вы можете видеть эти этикетки на некоторых продуктах и ​​упаковке, даже если вы не проживаете в штате Калифорния.Безопасность и состав наших продуктов не изменились. Наши продукты по-прежнему соответствуют самым высоким стандартам безопасности для вашего класса.

Дифференциальное окрашивание орсеином, Гимза, CMA и DAPI для сравнительного исследования хромосом 12 видов австралийской дрозеры (Droseraceae) на JSTOR

Абстрактный

Дифференциальные окрашивания орсеином, Гимза, CMA и DAPI сравнивали у 12 видов Drosera Западной Австралии.Здесь впервые указаны хромосомные числа D. roseana, D. barbigera, D. leioblasta, D. oreopodion, D. mannii, D. walyunga, D. sewelliae, D. helodes и D. echinoblasta. Заметная разница в количестве хромосом наблюдалась у Drosera dichrosepala (2n = 12) от числа хромосом в предыдущем отчете (2n = 18). Кариотипы видов обычно показывают, что степень асимметрии длины хромосом прямо пропорциональна средней длине хромосомы, тогда как количество хромосом обратно пропорционально.Бимодальные кариотипы наблюдались у D. oreopodion, D. walyunga, D. barbigera и D. echinoblasta, что, возможно, возникло в результате межвидовой гибридизации первых двух и фрагментации двух последних. Sat-хромосомы, обнаруженные у D. falconeri, D. sewelliae, D. helodes и D. echinoblasta, по-разному реагировали на дифференциальное окрашивание. Полосы C и флуоресценции в основном в терминальной области показали, что максимальное количество C-положительных сегментов, богатых гетерохроматином, сегментов, богатых GC, и сегментов, богатых AT, накапливается на концах хромосом Drosera.Некоторые хромосомы можно идентифицировать по их специфическим свойствам окрашивания. На основании числа хромосом, C- и флуоресцентных полос мы предполагаем, что D. helodes и D. sewelliae тесно связаны между собой.

Информация о журнале

Издается Ботаническим обществом Америки непрерывно с 1914 года. Американский журнал ботаники (AJB) является ведущим исследовательским журналом Общества. AJB публикует рецензируемые, инновационные, важные исследования, представляющие интерес для широкой аудитории ученых во всех областях биологии растений (например,g., биоразнообразие, структура, функции, развитие, генетика, эволюция, воспроизводство, систематика), все уровни организации (от молекулярной до экосистемной) и все группы растений и родственные им организмы (цианобактерии, водоросли, грибы и лишайники).

Информация об издателе

Wiley — глобальный поставщик контента и решений для рабочих процессов с поддержкой контента в областях научных, технических, медицинских и научных исследований; профессиональное развитие; и образование.Наши основные направления деятельности выпускают научные, технические, медицинские и научные журналы, справочники, книги, услуги баз данных и рекламу; профессиональные книги, продукты по подписке, услуги по сертификации и обучению и онлайн-приложения; образовательный контент и услуги, включая интегрированные онлайн-ресурсы для преподавания и обучения для студентов и аспирантов, а также для учащихся на протяжении всей жизни. Основанная в 1807 году компания John Wiley & Sons, Inc. уже более 200 лет является ценным источником информации и понимания, помогая людям во всем мире удовлетворять их потребности и реализовывать их чаяния.Wiley опубликовал работы более 450 лауреатов Нобелевской премии во всех категориях: литература, экономика, физиология и медицина, физика, химия и мир. Wiley поддерживает партнерские отношения со многими ведущими мировыми обществами и ежегодно издает более 1500 рецензируемых журналов и более 1500 новых книг в печатном виде и в Интернете, а также базы данных, основные справочные материалы и лабораторные протоколы по предметам STMS. Благодаря растущему предложению открытого доступа, Wiley стремится к максимально широкому распространению и доступу к публикуемому контенту, а также поддерживает все устойчивые модели доступа.Наша онлайн-платформа, Wiley Online Library (wileyonlinelibrary.com), является одной из самых обширных в мире междисциплинарных коллекций онлайн-ресурсов, охватывающих жизнь, здоровье, социальные и физические науки и гуманитарные науки.

.

Check Also

Профессия ит специалист: Профессия IT-специалист. Описание профессии IT-специалиста. Кто такой IT-специалист. . Описание профессии

Содержание Что такое IT специалист — Кто кем работаетСамые востребованные IT-профессии 2021 года / Блог …

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.