Понедельник , 20 сентября 2021
Главная / Разное / Липолитическим действием: Липолитики как действуют, липолитическое действие, липолитический эффект это

Липолитическим действием: Липолитики как действуют, липолитическое действие, липолитический эффект это

Содержание

Липолитики как действуют, липолитическое действие, липолитический эффект это

Мезотерапия — процедура, при которой фармакологические препараты вводятся подкожно с целью придания фигуре идеальных форм и улучшения состояния кожи. Это один из эффективных способов борьбы с лишним весом и устранения целлюлита в проблемных зонах. В ходе проведения мезотерапии применяются специальные мезококтейли, которые регулируют липидный обмен, помогают убрать недостатки в виде складок, уменьшить объемы тела, откорректировать область живота. 

Многих пациенток интересует, липолитики — что это и как действуют, какие отзывы? В коктейли входят несколько основных компонентов: дезоксихолат натрия, фосфотидилхолин, растительные экстракты, кофеин, кремний, L-карнитин. Выведение организмом продуктов распада происходит естественным путем: через кровеносную и лимфатическую системы. Зоны коррекции — область бедер и ягодиц, руки, плечи и спина, область щек и второго подбородка. Также вводят липолитики в живот — такая методика обеспечит быстрый эффект с первых сеансов.

Уколы врачи-косметологи рекомендуют как способ устранения локальных отложений и лечения целлюлита. Это коррекция фигуры без диеты и тренировок в спортзале, при этом в ходе проведения сеансов не наносится вреда для здоровья пациента. За счет особой техники введения иглы уколы безболезненны и обладают высокой эффективностью — способствуют быстрому похудению, уменьшению локальных накоплений. Предлагаем рассмотреть подробнее, липолитики — что это, как они действуют, куда колют и как проходит инъекционный липолиз?

Прежде чем попробовать инъекции, стоит разобраться что это за липолитики, как действуют и какой результат можно получить. С помощью инъекций можно решить проблему лишнего веса и подкожных отложений, убрать целлюлит. 

Жиросжигающие уколы

Липолитики — это средства на основе натуральных компонентов, которые расщепляют жировые клетки. В их состав входят ферменты сои, они биосовместимы и встречаются в виде пищевых добавок. Основным является компонент под названием лецитин, который вырабатывается печенью. В организме постоянно происходят процессы распада, и вещество принимает активное участие в расщеплении клеток жира. При малоподвижном образе жизни накапливаются излишки жира, которые откладываются в подкожную жировую клетчатку, на стенки сосудов. В таком случае синтез липидов преобладает над процессом их сжигания. Однако одного лецитина недостаточно, поэтому необходимо добавлять дополнительные элементы. 

При инъекционных методиках подразумевается подкожное введение комплексных препаратов — мезококтейлей, которые составляются индивидуально для каждого пациента. Добавление специальных компонентов помогает добиться помимо распада жировых тканей улучшения внешнего вида кожи на любых участках лица и тела. Результатом становится устранение лишних отложений. 

Инъекции липолитиков позволяют адресно воздействовать на клетки, улучшая их метаболизм, задействуя процесс расщепления клеток адипоцитов регулярными введениями коктейлей с комплексным составом. Достаточно от 4 до 6 сеансов, чтобы добиться эффекта похудения, уменьшить объемы живота или объемы щек, убрать бока, откорректировать зону бедер или область подбородка. 

Принцип действия лекарств

Многих пациенток интересуют эффективные и безопасные способы коррекции фигуры. Узнайте, как липолитики работают, и курс в нашей клинике поможет Вам избавиться от лишних сантиметров.

Механизм работы активных веществ следующий:

  • влияние на процессы липолиза;
  • переработка клеток жира в эмульсию;
  • улучшение метаболизма;
  • нормализация микроциркуляции крови.

После применения липолитиков достигнутый результат сохраняется долгое время — обработанный участок тела не накапливает жиров.

Инъекции липолитиков, в основе которых комплекс натуральных ферментов, восстанавливают нарушенный липидный обмен. Колоть их рекомендуется в проблемных местах. Врачи используют тонкие иглы, подбирая глубину введения индивидуально — от 6 до 12 мм. Уколы безболезненные. В результате липолиза пациенту не наносится вреда.

Разновидности

У женщин, которые хотят убрать жировые отложения с проблемных участков на лице и теле, часто возникают вопросы: чем различаются прямые и непрямые липолитики, что ждать от инъекционного липолиза?

Препараты выпускаются в форме инъекций. Они способствуют распаду жиров, но их липолитическое действие выражается по-разному.

Использование прямых липолитиков позволяет добиться большего эффекта при локальных отложениях — они уничтожают мембрану жировой клетки, воздействуют непосредственно на подкожно-жировую клетчатку.

Действие непрямых липолитиков более мягкое и щадящее — они способствуют похудению, улучшают внешний вид проблемных областей, в областях введения препарата состояние кожи становится лучше. Они оказывают только косвенное влияние на процесс сжигания жира. Стоит отметить, что в клетках улучшается микроциркуляция, ускоряется метаболизм, также препараты оказывают лимфодренажный эффект. 

Однако чаще всего применяются первые, самые известные среди них:

  • фосфатидилхолин — один из самых эффективных фосфолипидов группы лецитинов;
  • дезоксихолат натрия — один из важных компонентов мезококтейлей, который в естественном виде встречается в желчи;

Мезотерапевтические препараты уменьшают объемы жировой ткани изнутри, поэтому часто на курсах мезотерапии вводят прямые липолитики в живот и другие проблемные зоны. Они дают быстрый и заметный результат — заметное уменьшение объема бедер, избавление от галифе, боков, двойного подбородка, коррекция локальных отложений на теле и лице.

Компоненты липолитиков — натуральный комплекс биосовместимых веществ, поэтому они не дают побочных эффектов. В составе есть элементы, улучшающие лимфоток и кровообращение. В итоге жирные кислоты, образующиеся в ходе липолиза, не возвращаются в первоначальное состояние. 

Мезотерапия является эффективным методом снижения веса и альтернативой спорту, ее проводят курсами. В современной косметологии применяют липолитики непрямые и прямые, они оказывают липолитическое действие разной интенсивности, стимулируют выведение излишков жира.

Как проходит процедура

Уколы липолитиками активно используются для избавления от жировых отложений. Целью является активация естественных жиросжигающих процессов в организме, которые называются липолизом.

Путем инъекций действующее вещество вводится в дерму с помощью тонких игл. Глубину прокола во время сеансов врач определяет в индивидуальном порядке для каждого случая. 

Основные этапы:

  1. До начала сеанса производится сбор анамнеза, подбор активных компонентов для составления коктейля. В состав мезококтейлей входят вещества, способные расщеплять жировые клетки.
  2. Во время проведения липолиза коктейль вводится врачом-косметологом с помощью специальных тончайших игл. Обычно требуется 1-3 ампулы объемом 5-10 мл для каждой зоны воздействия. При необходимости используется аппликационная анестезия, снижающая чувствительность. Благодаря инъекционному введению состава удается добиться устранения лишних жировых отложений. Липолитики помогают пациенткам похудеть в любой части тела на 4-6 см и стать стройнее.
  3. Участок кожи обрабатывается специальными кремами с успокаивающим эффектом. После сеанса пациенту рекомендуется отдохнуть и выпить стакан воды, чтобы быстрее вывести из организма продукты распада. Реабилитационный период длится 2-3 дня.

При мезотерапии препараты вводятся в дерму на глубину не более 6 мм, при липолизе — на 10-12 мм. Это позволяет доставлять лекарство прямо к клеткам. При инъекциях липолитиков у пациента не возникает болезненных ощущений, только легкое жжение, затем может появиться небольшая отечность. Длительность косметологической процедуры составляет не более 15-20 минут.

Мезотерапия липолитиками получила положительные отзывы пациентов. Во время проведения процедуры липолиза в организме происходит распад липидов. Врачи-косметологи используют препараты с натуральным составом, их вводят в живот и другие участки. Липолитическое действие сохраняется в течении нескольких лет. Уколы красоты также устраняют целлюлит.

Показания

  • отложения на животе, бедрах, спине, ягодицах;
  • наличие двойного подбородка, объемных щек;
  • поражение кожи целлюлитом.

Противопоказания

  • беременность и период грудного вскармливания;
  • плохая свертываемость крови;
  • злокачественные новообразования;
  • хронические инфекции и воспаление;
  • нарушения в работе иммунной системы;
  • сахарный диабет;
  • камни в желчном пузыре, патологии;
  • аллергические реакции на состав.

О наличии заболеваний и патологий следует уведомить врача-косметолога. Также рекомендуется выбрать другие способы похудения.

Эффективность 

Сегодня косметология предлагает безопасные и безболезненные методики похудения. После прохождения курса липолитиков Вы сможете смоделировать фигуру и улучшить форму лица. Количество сеансов зависит от состояния пациента, его возраста, веса и выраженности проблемы, зоны обработки. 

Рекомендованный курс — 6 процедур, интервал между которыми составляет не более 2 недель. Стоимость услуги весьма демократичная.

Результатом введения коктейлей становится устранение лишних подкожных накоплений и достижение идеальных параметров. Достигнутый после процедуры липолитический эффект сохраняется длительное время. Уколы красоты рекомендуется совмещать с ручным или аппаратным массажем, обертываниями, прессотерапией, термолифтингом.

 

Липолитический коктейль PPC — Центры эпиляции и косметологии

Ваша конфиденциальность очень важна для нас. Мы хотим, чтобы Ваша работа в Интернет по возможности была максимально приятной и полезной, и Вы совершенно спокойно использовали широчайший спектр информации, инструментов и возможностей, которые предлагает Интернет.

Личная информация, собранная при оформлении заявки (или в любое другое время) преимущественно используется для подготовки Продуктов или Услуг в соответствии с Вашими потребностями. Ваша информация не будет передана или продана третьим сторонам.

Какие данные собираются на сайте

При добровольной регистрации на скидку вы отправляете свое Имя и Телефон через форму.

С какой целью собираются эти данные

Имя используется для обращения лично к вам, а ваш e-mail для отправки вам писем рассылок, новостей саммита, полезных материалов.

Ваши имя и телефон не передаются третьим лицам, ни при каких условиях кроме случаев, связанных с исполнением требований законодательства.

Вы можете отказаться от получения писем рассылки и удалить из базы данных свои контактные данные в любой момент, кликнув на ссылку для отписки, присутствующую в каждом письме.

Как эти данные используются

При помощи этих данных собирается информация о действиях посетителей на сайте с целью улучшения его содержания, улучшения функциональных возможностей сайта и, как следствие, создания качественного контента и сервисов для посетителей.

Вы можете в любой момент изменить настройки своего браузера так, чтобы браузер блокировал все файлы cookie или оповещал об отправке этих файлов. Учтите при этом, что некоторые функции и сервисы не смогут работать должным образом.

Как эти данные защищаются

Для защиты Вашей личной информации мы используем разнообразные административные, управленческие и технические меры безопасности. Наша Компания придерживается различных международных стандартов контроля, направленных на операции с личной информацией, которые включают определенные меры контроля по защите информации, собранной в Интернет.

Наших сотрудников обучают понимать и выполнять эти меры контроля, они ознакомлены с нашим Уведомлением о конфиденциальности, нормами и инструкциями.

Тем не менее, несмотря на то, что мы стремимся обезопасить Вашу личную информацию, Вы тоже должны принимать меры, чтобы защитить ее.

Мы настоятельно рекомендуем Вам принимать все возможные меры предосторожности во время пребывания в Интернете. Организованные нами услуги и веб-сайты предусматривают меры по защите от утечки, несанкционированного использования и изменения информации, которую мы контролируем. Несмотря на то, что мы делаем все возможное, чтобы обеспечить целостность и безопасность своей сети и систем, мы не можем гарантировать, что наши меры безопасности предотвратят незаконный доступ к этой информации хакеров сторонних организаций.

В случае изменения данной политики конфиденциальности вы сможете прочитать об этих изменениях на этой странице или, в особых случаях, получить уведомление на свой e-mail.

Красота и уход :: Косметика :: Уход за телом :: Гели для тела :: Histomer

«Histomer Гель для обертывания с дренажным и липолитическим действием»   — это профессиональное средство, разработанное шведскими учеными для устранения целлюлита на самой серьезной стадии. Гель воздействует на поврежденные целлюлитом участки тела. Под влиянием образованной на коже пленки и созданной ею парниковым эффектом, компоненты геля проникают в ткани в несколько раз сильнее. 

Назначение:

Гель Histomer для профессионального применения разработан для лечения целлюлита поздней стадии, когда фибросклеротическая дегенерация жировой ткани очевидна и приводит к нарушениям циркуляции и серьезным функциональным проблемам.

Действие:

Гель стимулирует циркуляцию и оказывают липолитическое действие.

В составе:

Экстракты хистомерных клеток, жирорастворимые микрогранулы, растительные экстракты: гуарана, конский каштан, иглица шиповатая.

Способ применения:

Распределить необходимое количество массажного геля на поверхности кожи и завернуть тело пленкой для обертывания. Оставить на 20-25 минут. В завершение процедуры вмассировать остатки геля и провести полный массаж по назначению с помощью профессиональных м

Страна производства:

Италия

Производитель:

Histomer

Моделирующее обертывание с липолитическим действием 2 кг Perfect Body Pack «Slim» Janssen Cosmetics / Янсен Косметикс

Обертывание Perfect Body Pack «Slim» от Janssen Cosmetics / Янсен Косметикс подтягивает кожу, что особенно важно в период потери массы тела, например после строгой диеты, а также после беременности и кормления грудью. Силуэт быстро восстанавливает свое природное изящество, контуры становятся четкими и подтянутыми. Этот эффект достигается благодаря экстракту микроводоросли Nannochloropsis oculata: он формирует защитную и лифтинг-пленку на поверхности кожи, стимулирует синтез коллагена и эффективно борется с оксидативным стрессом. При регулярном использовании кожа вновь обретает упругость и эластичность.

Активизирует липолиз. Уменьшает объемы, моделирует контур тела. Обеспечивает пролонгированный лифтинг-эффект, подтягивает и укрепляет кожу. Способствует выведению токсинов и жидкости из тканей. Обладает роскошной нежной текстурой. Освежает и восстанавливает кожу.

Активные компоненты:

  • Экстракт Nannochloropsis oculata: микроводоросль, полученная биотехнологическим путем; богата полисахаридами, витаминами B12 и C, а также аминокислотами; оказывает мгновенный и пролонгированный лифтингэффект; стимулирует синтез коллагена; обладает антиоксидантным действием.
  • Кофеин: оказывает липолитическое действие; активизирует клеточный метаболизм; эффективно борется с целлюлитом; освежает, тонизирует.
  • Атлантическая морская соль: освежает и заряжает энергией, минеральные вещества в ее составе стабилизируют гидролипидную пленку кожи.
  • Масло мяты перечной: дарит восхитительный аромат.
  • Ментол, содержащейся в листьях мяты, усиливает кровообращения и укрепляет сосуды.
  • Каолин: тонкоизмельченная белая глина придает обертыванию равномерную пастообразную консистенцию и наделяет его хорошими адгезивными и абсорбирующими свойствами.

Применение: Проведите глубокое очищение кожи с помощью Oxygenating Body Scrub.Поместите Perfect Body Pack в чашу. Определите количество продукта в зависимости от размеров целевой области (приблизительно 50-100 г необходимо для локальной области тела и 200 г – для всего тела).С помощью кисти или ладонями нанесите Perfect Body Pack на кожу тела. Затем оберните пленкой и укройте одеялом.Оставьте на 20-30 минут в зависимости от самочувствия клиента. Смойте остатки маски под душем или удалите с помощью теплых влажных компрессов. При этом не используйте мыло или гели для душа. В финале легкими массажными движениями нанесите Perfect Bust Formula на область бюста и/или Body Lotion “ISOFLAVONIA” на кожу всего тела.

Не проводите уход непосредственно после процедуры депиляции.

Избегайте контакта с глазами и слизистыми оболочками. Тщательно вымойте руки после нанесения продукта.

Обертывание с водорослями


  1. ПАО «Волгоградэнергосбыт»
  2. Главная
  3. Услуги
  4. SPA-программы

Сделав даже 2-3 обертывания с водорослями, вы навсегда станете их поклонницей! Водоросли и морская соль содержат ценных микроэлемент магний, который мы быстро теряем во время стресса. Стресс пагубно влияет на наше здоровье и, конечно же, красоту. Поэтому первый шаг к красоте и здоровью – избавиться от стресса. И в этом нам помогут обертывания с водорослями. Обратите внимание, что в каждую процедура включен массаж.

Антицеллюлитное и липолитическое обертывание.

Цель процедуры — уменьшение признаков целлюлита, жировых отложений, повышение упругости кожи. Первый этап — массаж тела для перераспределения энергии с использованием антицеллюлитного масла (20мин). Второй этап – обертывание всего тела (+ голова + лицо) на основе натуральных измельченных морских водорослей (фукус, ламинария, литатамниум). Водоросли – это настоящая кладовая ценных элементов и соединений в биодоступной форме! Благодаря своему составу, водоросли обладают антицеллюлитным, липолитическим и тонизирующим действием, насыщают кожу витаминами и микроэлементами, стимулируют клеточные обмены, увлажняют, повышают эластичность и упругость кожи.
Продолжительность процедуры 1 час 20 мин.

Тонизирующее обертывание

Цель процедуры — повышение упругости кожи, устранение отёков и уменьшение жировых отложений. кожи. Первый этап — массаж тела для перераспределения энергии с использованием лимфодренажного масла (20мин). Второй этап – обертывание всего тела (+ голова + лицо) на основе натуральных измельченных морских водорослей (фукус, ламинария, литатамниум). Водоросли – это настоящая кладовая ценных элементов и соединений в биодоступной форме! Благодаря своему составу, водоросли обладают антицеллюлитным, липолитическим и тонизирующим действием, насыщают кожу витаминами и микроэлементами, стимулируют клеточные обмены, увлажняют, повышают эластичность и упругость кожи.
Продолжительность процедуры 1 час 20 мин.

Успокаивающее обертывание

Цель процедуры – помочь телу справиться со стрессом, уменьшить жировые отложения и целлюлит, усилить обмен веществ. Первый этап — массаж тела для перераспределения энергии с использованием антицеллюлитного масла (20мин). Второй этап – обертывание всего тела (+ голова + лицо) на основе натуральных измельченных морских водорослей (хондрус, ламинария, литатамниум). Водоросли – это настоящая кладовая ценных элементов и соединений в биодоступной форме! Благодаря своему составу, водоросли обладают антицеллюлитным, липолитическим и тонизирующим действием, насыщают кожу витаминами и микроэлементами, стимулируют клеточные обмены, увлажняют, повышают эластичность и упругость кожи.
Продолжительность процедуры 1 час 20 мин.

Лимфодренажное обертывание

Цель процедуры – восстановить энергетический баланс, обогатить кожу витаминами и минералами, усилить вывод токсинов. Первый этап — массаж тела для перераспределения энергии с использованием антицеллюлитного масла Инь и крема (15мин). Второй этап – массаж тела для перераспределения энергии с использованием тонизирующего масла Ян и крема (15мин). Третий этап — обертывание всего тела с помощью специального препарата. Oceanic Seaweed (масло розмарина, лимона, эвкалипта, экстракт морских водорослей гелидиум калькареум и феодактилум трикорнитум, белая глина) благодаря своему богатому составу оказывает иммуномодулирующее и регенерирующее действие, усиливает выведение токсинов, восстанавливает барьерную функцию эпидермиса, обогащает кожу витаминами и микроэлементами в идеальных для усвоения пропорциях. Водоросли гелидиум калькареум содержат уникальный компонент родистерол, который запускает процессы расщепления жировой ткани.
Продолжительность процедуры 1 час 20 мин.

Детокс-обертывание

Цель процедуры — выведение токсинов, утончение силуэта. Первый этап – обертывание на основе специального препарата Oceanic Seaweed. Второй этап — массаж тела для перераспределения энергии с использованием крема (30мин). Oceanic Seaweed (масло розмарина, лимона, эвкалипта, экстракт морских водорослей гелидиум калькареум и феодактилум трикорнитум, белая глина) благодаря своему богатому составу оказывает иммуномодулирующее и регенерирующее действие, усиливает выведение токсинов, восстанавливает барьерную функцию эпидермиса, обогащает кожу витаминами и микроэлементами в идеальных для усвоения пропорциях. Водоросли гелидиум калькареум содержат уникальный компонент родистерол, который запускает процессы расщепления жировой ткани.
Продолжительность процедуры 1 час 30 мин.

Наименование процедурыПродолжительностьЦена, руб
Антицеллюлитное и липолитическое обертывание1 час 20 мин1200
Тонизирующее обертывание1 час 20 мин1400
Успокаивающее обертывание1 час 20 мин1400
Лимфодренажное обертывание1 час 20 мин1700
Детокс-обертывание1 час 30 мин1600






Janssen — Perfect Body Pack «Slim»

Процедуры омоложения кожи, всегда сопряжены с профессиональным обертыванием. Препарат Perfect Body Pack «Slim» Моделирующее обертывание с липолитическим действием — это инновационная разработка от немецкой косметической компании. Он эффективно подтягивает кожу, потерявшую свою упругость вследствие родов, процедур похудения или отсутствия физических нагрузок. Препарат обладает лифтинг-эффектом, насыщает кожу минералами и восстанавливает коллагеновые и эластановые волокна. Он обеспечивает заметное подтягивание кожи в тех местах, где был применен. Использовать его необходимо в профессиональных салонах, под наблюдением косметолога.

Состав

В составе средства присутствует морская соль, которая питает кожу ценными минералами. Белая глины очищает и адсорбирует токсины, заживляет мелкие ранки и эффективно омолаживает. Масло перечной мяты дает невероятную свежесть и аромат, которым наполняется кожа. Препарат богат на витамины В и С, увлажняющие полисахариды и аминокислоты.

Применение

Обертывающая маска наносится на очищенную кожу или отдельные ее участки. После нанесения, тело укутывается специальной пленкой и накрывается термоодеялом. Вся процедура длиться 20-30 минут, индивидуально для каждого пациента. Смывается маска теплой водой, с применением очищающих гелей.

Действие

Моделирующее обертывание гарантирует великолепный лифтинг-эффект и подтяжку увядшей кожи. Компоненты препарата тщательно очищают тело и выводят токсины. Кожа приобретает упругость и свежесть, она разглаживается и становится более плотной на ощупь. Процедура обертывания стимулирует клеточный метаболизм, благодаря которому, кожа обновляется и омолаживается, ее ткани укрепляются и получают комплекс ценных морских минералов.

Препарат Perfect Body Pack «Slim» Моделирующее обертывание с липолитическим действием гарантирует великолепный лифтинг-эффект и подтяжку увядшей кожи. Компоненты препарата тщательно очищают тело и выводят токсины.

Janssen Body Perfect Body Pack Slim Моделирующее обертывание с липолитическим действием —

Janssen Body Perfect Body Pack «Slim»

Perfect Body Packs от JANSSEN COSMETICS – это готовые к использованию обертывания для тела, направленные на детоксикацию, лифтинг и улучшение фигуры.
Каждое обертывание для тела обладает индивидуальным ароматом и уникальным направленным действием, определяемым составом продукта. Использование пленки в процедуре обертывания обеспечивает приятное тепло на протяжении всего времени действия продукта и заметно активизирует обменные процессы в коже.
Perfect Body Pack “SLIM” подтягивает кожу, что особенно важно в период потери массы тела, например после строгой диеты, а также после беременности и кормления грудью. Силуэт быстро восстанавливает свое природное изящество, контуры становятся четкими и подтянутыми. Этот эффект достигается благодаря экстракту микроводоросли Nannochloropsis oculata: он формирует защитную и лифтинг-пленку на поверхности кожи, стимулирует синтез коллагена и эффективно борется с оксидативным стрессом. При регулярном использовании кожа вновь обретает упругость и эластичность.

Активизирует липолиз. Уменьшает объемы, моделирует контур тела. Обеспечивает пролонгированный лифтинг-эффект, подтягивает и укрепляет кожу. Способствует выведению токсинов и жидкости из тканей. Обладает роскошной нежной текстурой. Освежает и восстанавливает кожу.

Активные компоненты: Экстракт Nannochloropsis oculata: микроводоросль, полученная биотехнологическим путем; богата полисахаридами, витаминами B12 и C, а также аминокислотами; оказывает мгновенный и пролонгированный лифтингэффект; стимулирует синтез коллагена; обладает антиоксидантным действием. Кофеин: оказывает липолитическое действие; активизирует клеточный метаболизм; эффективно борется с целлюлитом; освежает, тонизирует. Атлантическая морская соль: освежает и заряжает энергией, минеральные вещества в ее составе стабилизируют гидролипидную пленку кожи. Масло мяты перечной: дарит восхитительный аромат. Ментол, содержащейся в листьях мяты, усиливает кровообращения и укрепляет сосуды. Каолин: тонкоизмельченная белая глина придает обертыванию равномерную пастообразную консистенцию и наделяет его хорошими адгезивными и абсорбирующими свойствами.

Применение:

  1. Накройте кушетку пленкой.
  2. Проведите глубокое очищение кожи с помощью Oxygenating Body Scrub.
  3. Поместите Perfect Body Pack в чашу. Определите количество продукта в зависимости от размеров целевой области (приблизительно 50-100 г необходимо для локальной области тела и 200 г – для всего тела).
  4. С помощью кисти или ладонями нанесите Perfect Body Pack на кожу тела. Затем оберните пленкой и укройте одеялом.
  5. Оставьте на 20-30 минут в зависимости от самочувствия клиента.
  6. Смойте остатки маски под душем или удалите с помощью теплых влажных компрессов. При этом не используйте мыло или гели для душа.
  7. В финале легкими массажными движениями нанесите Perfect Bust Formula на область бюста и/или Body Lotion “ISOFLAVONIA” на кожу всего тела.
  8. Позвольте клиенту отдохнуть на протяжении 10-15 минут.

Совет: Предложите клиенту чашку травяного чая. Существует большое разнообразие вкусных чайных смесей, которые борются с оксидативным стрессом и заряжают энергией. Не проводите уход непосредственно после процедуры депиляции. Избегайте контакта с глазами и слизистыми оболочками. Тщательно вымойте руки после нанесения продукта.

Форма выпуска: баночка 2 кг.

 

Регулирование липолиза в адипоцитах

Annu Rev Nutr. Авторская рукопись; доступно в PMC 2010 15 июня.

Опубликован в окончательной отредактированной форме как:

PMCID: PMC2885771

NIHMSID: NIHMS211108

Департамент диетологии и токсикологии Калифорнийского университета, Беркли, Калифорния, окончательная редакция 94720

Версия этой статьи доступна на Annu Rev Nutr См. другие статьи в PMC, в которых цитируется опубликованная статья.

Abstract

Липолиз триацилглицериновых запасов белой жировой ткани приводит к высвобождению глицерина и неэтерифицированных жирных кислот, которые попадают в сосудистую сеть для использования другими органами в качестве энергетических субстратов. В ответ на изменения состояния питания скорость липолиза точно регулируется с помощью гормональных и биохимических сигналов. Эти сигналы модулируют активность липолитических ферментов и дополнительных белков, обеспечивая максимальную чувствительность жировой ткани к изменениям потребности в энергии и ее доступности.Недавно был идентифицирован ряд новых триацилглицеридных липаз адипоцитов, включая деснутрин / ATGL, что значительно расширило наши представления о липолизе адипоцитов. Мы также начали лучше понимать роль ряда неферментативных белков, которые имеют решающее значение для распада триацилглицеридов. В этом обзоре представлен обзор основных медиаторов липолиза и регуляции этого процесса путем изменения статуса питания и потребления питательных веществ.

Ключевые слова: адипоцит, липолиз, триацилглицеридлипаза, перилипин, деснутрин / ATGL, гормоночувствительная липаза

ВВЕДЕНИЕ

Триацилглицерин (ТАГ) белой жировой ткани (WAT) является основным запасом энергии у высших эукариот.Этот пул липидов находится в постоянном движении, что является результатом в значительной степени бесполезного цикла липолиза и повторной этерификации (55). Во время дефицита энергии WAT претерпевает сдвиг в сторону более высоких чистых скоростей липолиза, который можно определить как гидролиз TAG с образованием жирных кислот (ЖК) и глицерина, которые высвобождаются в сосудистую сеть для использования другими органами в качестве энергетических субстратов. Липолиз протекает упорядоченно и регулируемым образом, при этом на каждом этапе действуют разные ферменты. ТАГ гидролизуется последовательно с образованием диацилглицерина (ДАГ), затем моноацилглицерина (МАГ) с высвобождением ЖК на каждой стадии.MAG гидролизуется с высвобождением окончательной ЖК и глицерина. Хранение запасов энергии в виде ТАГ и способность быстро мобилизовать эти резервы в виде ЖК для удовлетворения потребностей в энергии представляет собой высоко адаптированный метаболический ответ. Высвобождение ЖК из ТАГ путем липолиза адипоцитов также важно для обеспечения субстратом печеночного синтеза липопротеинов очень низкой плотности (ЛПОНП). Циркулирующие ЖК являются основным источником субстрата для производства печенью липопротеинов, богатых ТАГ (34, 80), а нарушение липолиза жировой ткани подавляет синтез ЛПОНП (44, 94, 134).

Изменения липолиза часто связаны с ожирением, включая увеличение базальной скорости липолиза, что может способствовать развитию инсулинорезистентности, а также нарушение реакции на стимулированный липолиз (65, 102). Ожирение характеризуется, прежде всего, избытком WAT и увеличением размера адипоцитов в результате увеличения накопления TAG. Ожирение стало распространенной проблемой для здоровья из-за его тесной связи с рядом заболеваний, включая диабет 2 типа, гипертонию и атеросклероз (133).Здесь мы рассмотрим липолиз адипоцитов и основные факторы питания, контролирующие этот процесс. дает обзор нутритивной регуляции липолиза адипоцитов.

Регуляция липолиза адипоцитов.

ГИДРОЛИЗ ТРИАЦИЛГЛИЦЕРОЛА

До недавнего времени считалось, что инициация гидролиза ТАГ в жировой ткани контролируется гормоночувствительной липазой (HSL) (109). Однако создание HSL-нулевых моделей мышей ясно продемонстрировало существование остаточной HSL-независимой активности ТАГ-липазы, что свидетельствует о наличии ранее не идентифицированных ферментов адипоцитов с ТАГ-гидролазной активностью (44, 94, 134).В последние годы были идентифицированы и охарактеризованы новые липазы жировой ткани. Все они представляют собой сериновые эстеразы, содержащие общий структурный элемент — альфа / бета-гидролазную складку — и консервативную каталитическую диаду или триаду, состоящую из пентапептидного мотива G X S X G, а также активного аспартата или глутамата. (D / E) трипептид GG и активный гистидин (H). Исследования по определению относительного вклада каждого фермента в липолиз адипоцитов продолжаются.

Гормоночувствительная липаза

Жировая ткань HSL (E.C. 3.1.1.3) представляет собой цитоплазматический белок массой 84 кДа с продемонстрированной активностью против широкого спектра субстратов, включая ТАГ, ДАГ, сложные эфиры холестерина (ХЭ) и сложные эфиры ретинила (51). Относительная активность жирной ацилгидролазы HSL in vitro в одиннадцать раз выше по отношению к DAG, чем к TAG, и в два раза выше по отношению к CE (51). HSL проявляет предпочтение в отношении активности против жирных кислот в положении sn-1 или sn-3 (99). До недавнего времени считалось, что HSL является основным ферментом, ответственным практически за всю активность гидролаз ТАГ и ДАГ в адипоцитах, а также за активность гидролазы нейтрального холестерилового эфира (NCEH).Чтобы выяснить функциональную роль HSL in vivo, несколько лабораторий создали модели мышей с нулевым HSL (44, 94, 134). Хотя между этими моделями наблюдались различия, многое было сделано в отношении относительного вклада HSL в гидролиз TAG адипоцитов. Например, исследования показали, что хотя активность NCEH действительно отсутствовала в HSL-нулевых адипоцитах, значительная часть катехоламинов стимулировала липолиз (90, 94), и большая часть, если не весь, базальный липолиз сохранялась (30, 134).Более того, липолитический ответ на длительное голодание (> 48 ч) оказался нормальным у HSL-нулевых мышей, которые продемонстрировали адекватную или даже повышенную мобилизацию и окисление ЖК (30). HSL-опосредованный липолиз, однако, вносил важный вклад в высвобождение жирных ЖК. HSL-нулевые мыши демонстрировали более низкие уровни NEFA и TAG в сыворотке и сниженное накопление TAG в печени, что указывает на то, что HSL-независимый липолиз был недостаточным для поддержания выхода ЖК из жировой ткани на уровнях, которые могли бы удовлетворить нормальные потребности в энергетических субстратах и ​​синтезе VLDL (45, 132) .

Изучение физиологии HSL-нулевых мышей предлагает дополнительное понимание относительной важности HSL в гидролизе ТАГ in vivo. На нормальной диете HSL-нулевые мыши имели массу тела, аналогичную мышам дикого типа (47), а размер адипоцитов, как сообщается, был либо аналогичным, либо немного большим (94) — открытие, которое согласуется с ролью HSL в ЖК адипоцитов. мобилизация. Однако масса WAT у этих животных либо не изменилась (94), либо уменьшилась в размерах (134). Кроме того, на диете с высоким содержанием жиров аблация HSL была связана со значительным защитным эффектом против развития ожирения (47).Этот результат был неожиданным, но его можно объяснить тем фактом, что в отсутствие HSL адипоциты претерпевают компенсаторное снижение повторной этерификации ЖК, что приводит к снижению ресинтеза ТАГ и увеличению высвобождения ЖК в сосудистой сети (144). Хотя этот компенсаторный ответ мог затруднить измерение истинного вклада HSL в мобилизацию жирных кислот жировой ткани, из ряда исследований ясно, что HSL не требуется строго для инициации гидролиза ТАГ.Этот факт становится еще более очевидным, когда обнаруживается, что DAG, но не TAG, накапливается в адипоцитах HSL-нулевых мышей (44). Относительный вклад HSL в липолиз DAG обсуждается ниже.

Деснутрин / жировая триглицерид-липаза

В 2004 году, используя микроматрицу крысиной кДНК-микроматрицы адипоцит-специфичных генов, мы идентифицировали и охарактеризовали новую липазу ТАГ адипоцитов, которую мы назвали деснутрин (130). Деснутрин представляет собой белок массой 54 кДа, который содержит N-концевой пататин-подобный домен, который обнаруживается во многих ацилгидролазах растений и характеризуется консервативным серином в мотиве G X S X G, альфа / бета-гидролазе. fold, консервативный аспартат, принадлежащий мотиву D X (G / A), и богатую глицином область (130).Этот же фермент впоследствии был идентифицирован двумя другими лабораториями в результате поиска в базе данных белков, содержащих консервативный пентапептидный мотив G X S X G и альфа / бета-гидролазную складку, и был назван липазой триглицерида жиров (ATGL) (145) или iPLA2ζ (53, 145). Мышиный деснутрин / ATGL обнаруживается преимущественно в жировой ткани, но он также обнаруживается в гораздо меньших количествах в других тканях, особенно в сердечных и скелетных мышцах и семенниках. Когда клетки содержат жировые запасы, такие как дифференцированные клетки 3T3-L1 (145), а также клетки HeLa, выращенные в среде, богатой олеиновой кислотой (115), деснутрин / ATGL обнаруживается как в цитоплазме, так и тесно связан с липидной каплей (115). , 130, 145).Было обнаружено, что в клетках COS-7, в которых отсутствуют значительные липидные капли, деснутрин / ATGL относительно однородно распределен в цитоплазме (130). Факторы, управляющие субклеточным распределением деснутрина / ATGL, включая механизмы, с помощью которых цитоплазматический фермент получает доступ к своему субстрату и потенциальную транслокацию в липидную каплю, еще предстоит определить.

Несколько линий доказательств указывают на то, что деснутрин / ATGL является TAG-специфической липазой. Мы показали, что сверхэкспрессия деснутрина / ATGL в клетках COS-7 увеличивала высвобождение FFA в среду, уменьшая внутриклеточные запасы ТАГ, не влияя на внутриклеточные запасы фосфолипидов (130).О подобном влиянии на уровень ТАГ также сообщалось в клетках 293HEK (62), тогда как было показано, что экспрессия деснутрина / ATGL в адипоцитах 3T3-L1 увеличивает высвобождение как глицерина, так и ЖК (144). In vitro гидролазная активность ТАГ была продемонстрирована для фермента, очищенного путем экспрессии в клетках насекомых Sf9 и клетках 293HEK, а также в клетках COS-7 (53, 130, 145). Специфичность деснутрина / ATGL в отношении ТАГ также была исследована. Циммерманн и др. (144) приготовили цитозольные экстракты из клеток HepG2, инфицированных аденовирусным деснутрином / ATGL, и инкубировали их с радиоактивно меченными триолеином и диолеиновыми субстратами.Они обнаружили значительно более высокую активность липазы ТАГ (примерно в шесть-десять раз выше), чем активность липазы ДАГ, что указывает на первичную роль фермента в катализе первой, лимитирующей стадии стадии липолиза. Этот вывод был подтвержден работой с клетками COS-7, демонстрирующей 21-кратное увеличение накопления DAG в клетках, трансфицированных деснутрином / ATGL, по сравнению с HSL, а также умеренное увеличение уровней MAG (144). Экстракты из клеток COS-7, временно экспрессирующих деснутрин / ATGL, обладали активностью против сложных эфиров холестерина и сложных эфиров ретинила, которая была сопоставима с контрольными значениями (144), что дополнительно демонстрирует специфическую роль деснутрина / ATGL в гидролизе TAG.

Пищевая регуляция деснутрина / ATGL дополнительно подтверждает роль этого фермента в мобилизации запасов ТАГ в ответ на повышенную потребность в энергии. Мы показали, что деснутрин / ATGL индуцируется голоданием у мышей и подавляется повторным кормлением (130). Регулирование мРНК деснутрина / ATGL глюкокортикоидами может объяснить это, поскольку было обнаружено, что дексаметазон сильно повышает регуляцию фермента в зависимости от концентрации и дозы в преадипоцитах 3T3-L1 (130). Мы также обнаружили, что деснутрин / ATGL подавляется у мышей ob / ob и db / db, что дополнительно подтверждает роль фермента в расщеплении жира и предполагает возможную роль в развитии ожирения (130).

Относительная важность деснутрина / ATGL в липолизе проиллюстрирована исследованиями абляции гена и функциональной потери фермента. Было показано, что миРНК, направленная против деснутрина / ATGL, значительно снижает высвобождение глицерина и ЖК из адипоцитов 3T3-L1 (144), что указывает на нарушение липолиза, который не компенсируется присутствием других липаз. В подтверждение этого обработка цитозольных экстрактов мышиных WAT и BAT антителами деснутрина / ATGL снижала высвобождение ЖК примерно на две трети (144).Это снижение было более выраженным, когда использовались адипоциты от HSL-нулевых мышей, открытие, которое предполагает наличие кооперативности между двумя ферментами, и действительно, наблюдается синергетический эффект на липолиз, когда клетки котрансфицируют как деснутрином / ATGL, так и HSL (144). ). Следовательно, для достижения оптимальных скоростей липолиза, вероятно, требуется экспрессия обеих ацилгидролаз. Глобальная потеря функции гена деснутрина / ATGL у мышей привела к увеличению веса и сдвигу в пользу углеводов вместо жира в качестве основного источника топлива во время голодания, указывая на то, что in vivo деснутрин / ATGL, вероятно, также участвует в липолизе жировой ткани (43).Однако неожиданно вес жировых подушечек WAT был увеличен только примерно в два раза, что позволяет предположить, что могут присутствовать другие липазы TAG, которые могут частично компенсировать потерю деснутрина / ATGL. Также удивительным было открытие, что потеря деснутрина / ATGL была связана с преждевременной смертью. Это произошло в результате эктопического накопления жира в сердце, когда было обнаружено, что уровни ТАГ кардиомиоцитов увеличились в двадцать раз к 12-недельному возрасту. Внематочное накопление жира было очевидно и в других тканях. Этот эффект наблюдался, несмотря на более благоприятный липидный профиль плазмы и повышенную чувствительность к инсулину.Общая активность липазы была резко снижена в нескольких тканях, включая WAT и BAT, а также сердечную мышцу, скелетную мышцу, яички и печень. Это открытие подчеркивает потенциальную метаболическую важность внутриклеточного гидролиза ТАГ в тканях, отличных от жировой ткани, и указывает на то, что деснутрин / ATGL может играть решающую роль в высвобождении ЖК во многих тканях. Для проверки этой гипотезы потребуется создание моделей условного нокаута, лишенных деснутрина / ATGL в отдельных тканях.

Триацилглицерин гидролазы

Soni et al. (116) были первой группой, которая сообщила об открытии новой липазы ТАГ, которая может способствовать не-HSL-опосредованному липолизу ТАГ в адипоцитах. Другие впоследствии подтвердили присутствие триацилглицерин гидролазы (TGH; карбоксилэстераза 3; EC 3.1.1.1) в жировой ткани (10). TGH представляет собой микросомальную липазу 60 кДа, которая содержит каталитическую триаду с серином активного центра, расположенным в G-мотиве G X S X (68). TGH проявляет активность против длинно-, средне- и короткоцепочечных TAG, а также, как сообщается, гидролизует нейтральные сложные эфиры холестерина (88), но ему не хватает активности фосфолипазы или ацил-CoA тиоэстеразы (69).Фермент экспрессируется преимущественно в печени, где он участвует в мобилизации внутриклеточных запасов ТАГ и, вероятно, играет важную роль в синтезе богатых ТАГ липопротеинов очень низкой плотности (ЛПОНП) (39).

Однако недавно TGH был идентифицирован и в других тканях, включая почки, сердце, кишечник и жировую ткань (26). В клетках 3T3-L1 экспрессия TGH повышается в десять раз при дифференцировке преадипоцитов в адипоциты (25) из-за, по крайней мере частично, регуляции транскрипции адипогенным фактором транскрипции C / EBPα (136).Эти находки предполагают функциональную роль TGH в зрелой жировой клетке, и действительно, Soni с коллегами (116) идентифицировали TGH как липазу адипоцитов, используя функциональную протеомику. В этом исследовании они подвергли инфранатант и фракции жировой лепешки, полученные из интраабдоминальной WAT мыши, хроматографии на агарозе, связанной с олеиновой кислотой. Один из двух основных пиков элюированной активности эстеразы содержал значительную активность липазы, и было обнаружено, что эта фракция также содержит TGH. Следовательно, вероятно, что TGH способствует липолизу жировой ткани.Однако для определения относительного вклада этой липазы в общую мобилизацию ЖК из ТАГ в адипоцитах потребуются дополнительные молекулярные и генетические исследования.

Используя поиск в базе данных сериновых эстераз альфа / бета-гидролазной складки, которые также содержат дипептидные мотивы G X S X G и His-Gly, Okazaki et al. (90) обнаружили ранее не аннотированный ген, который индуцируется в клетках 3T3-L1 во время дифференцировки в адипоциты. Этот белок имеет высокую степень гомологии последовательности с TGH (> 70%), а также аналогичную субклеточную локализацию, и поэтому был назван TGH-2.Также подобно TGH, TGH-2 проявляет активность в отношении моно- и три-, но не диолеина, со значительным предпочтением TAG с короткоцепочечными жирными кислотами. Было обнаружено, что TGH-2 экспрессируется преимущественно в печени, но также присутствует в жировой ткани и почках, индуцируется голоданием и ингибируется повторным кормлением. Молекулярные исследования с использованием siRNA, направленной против TGH-2 в адипоцитах 3T3-L1, продемонстрировали 10% снижение стимулированного изопротеренолом высвобождения глицерина, в то время как сверхэкспрессия TGH-2, как было обнаружено, увеличивала высвобождение глицерина на 20%.Необходимы дальнейшие исследования для определения относительного вклада этой новой липазы в базальный липолиз и активность липазы in vivo в жировой ткани. Однако эти результаты предполагают роль TGH-2 в мобилизации накопленного ТАГ во время повышенного спроса на энергию.

Адипонутрин

Адипонутрин представляет собой белок, содержащий домен пататина 45 кДа, который высоко экспрессируется, прежде всего, в жировой ткани (9). Он имеет высокую степень гомологии последовательности с деснутрином, включая позиционирование G X S X G и мотивов активного сайта DGG (9).Экстракты из клеток насекомых (53, 62) и млекопитающих (53, 62), трансфицированных адипонутрином, обладают функциональной активностью ТАГ липазы, которая требует серина в активном центре (G X S X G-мотив) при анализе in vitro (62). Однако сверхэкспрессия адипонутрина не влияет на гидролиз ТАГ в клетках 293 НЕК, в отличие от деснутрина / ATGL и других белков, содержащих домен пататина, которые усиливают гидролиз ТАГ в этих клетках (62). Кроме того, в отличие от других известных липаз, экспрессия адипонутрина резко повышается у животных, которые были восстановлены после голодания, тогда как мРНК адипонутрина почти не обнаруживается у голодных животных (9).Хотя мРНК деснутрина / ATGL подавляется у крыс с ожирением (130), мРНК адипонутрина индуцируется в 50 раз (9). Эта дифференциальная регуляция адипонутрина по сравнению с другими липазами предполагает, что in vivo этот фермент может выполнять основную функцию, отличную от липолиза. In vitro было показано, что адипонутрин, очищенный из клеток насекомых, также обладает ацилтрансферазной активностью (53), что соответствует анаболической, а не катаболической роли в метаболизме адипоцитов. Очевидно, что необходима дополнительная работа для выяснения роли этого фермента, если таковая имеется, в липолизе адипоцитов.

GS2 и GS2-Like

GS2 был идентифицирован Jenkins et al. (53) в виде липазы TAG с доменом гомологии пататина, который включает комбинацию мотивов G / A X G XX G и G X S X G, консервативных в кальций-независимой фосфолипазе A 2 члена семьи. Анализ in vitro продемонстрировал активность триолеингидролазы в отношении GS2, которая превышает активность адипонутрина или деснутрина (53). Активность липазы GS2 впоследствии была подтверждена в кератиноцитах (35) и в 293 клетках HEK, сверхэкспрессирующих этот фермент (62).Сверхэкспрессия родственного белка GS2-Like в клетках HEK 293 также приводит к снижению накопления ТАГ, что предполагает функциональную роль обоих этих белков в липолизе in vivo (62). Транскрипты GS2 были идентифицированы только у людей (62). Относительный вклад GS2 и GS2-Like в липолиз в белой жировой ткани еще предстоит определить.

ГИДРОЛИЗ ДИАЦИЛГЛИЦЕРОЛА

Вторая стадия липолиза включает гидролиз DAG с образованием MAG и неэтерифицированной жирной кислоты.Эта реакция происходит со скоростью в 10-30 раз выше, чем гидролиз ТАГ, который является инициирующей и ограничивающей скорость стадией липолиза (40). На сегодняшний день единственной липазой DAG, идентифицированной в адипоцитах, является HSL.

Максимальная скорость гидролиза DAG HSL in vitro в 11 раз выше, чем у TAG (51). Как описано выше, исследования моделей мышей с дефицитом HSL подтвердили важность HSL для разрушения DAG. В то время как мыши, лишенные жирового HSL, могут достигать почти нормальной скорости гидролиза ТАГ, эти животные демонстрируют сильно притупленную активность липазы DAG, и в результате DAG накапливается в жировых тканях (44).Сообщалось о подавлении активности ряда CoA-зависимых ацилтрансфераз у HSL-нулевых мышей, и считается, что это способствует поддержанию нормального веса перед лицом полного удаления этого важного липолитического фермента (144). Метаболическая судьба накопленного DAG в адипоцитах HSL-нулевых мышей еще предстоит определить. Высвобождение глицерина и жирных кислот было нормальным или даже повышенным у голодных HSL-нулевых мышей, что свидетельствует о полном распаде ТАГ (94). Нарушение реэтерификации DAG ацилтрансферазами может привести к нормализованному высвобождению ЖК, образующегося при гидролизе TAG.Однако высвобождение глицерина будет нарушено. Ни TGH, ни ATGL / деснутрин не проявляют значительной активности липазы DAG (90, 145). Таким образом, результаты, полученные на мышах с нулевым HSL, предполагают, что адипоциты могут содержать дополнительные, менее активные липазы DAG, а также липазы TAG.

ГИДРОЛИЗ МОНОАЦИЛГЛИЦЕРОЛА

Моноглицерид липаза (MGL) представляет собой гидролазу 33 кДа, очищенную в 2500 раз из жировой ткани крысы в ​​1975 году Tornqvist & Belfrage (129). В 1986 г. соответствующие роли HSL и MGL в гидролизе TAG были прояснены, когда было обнаружено, что изолированный HSL гидролизует ацилглицерин с накоплением MAG in vitro, тогда как высвобождение глицерина притупляется за счет селективного удаления MGL путем иммунопреципитации (31).

MGL гидролизует 1 (3) и 2-сложноэфирные связи MAG с равной скоростью и не проявляет каталитической активности in vitro против DAG, TAG или сложных холстериловых эфиров (57). MGL содержит складку альфа / бета-гидролазы, характерную для известных липаз (57). Предполагается, что он состоит из 302 аминокислот (57). MGL относится к ряду микробных белков, включая эстеразы, лизофосфолипазы и галопероксидазы (58). В первичной последовательности идентифицированы два липазных мотива: сериновый мотив активного центра G X S X G и дипептид HG (57).Каталитическая триада MGL образована Ser-122, Asp-239 и His-269. Было показано, что мутация любого из этих трех остатков полностью устраняет липазную и эстеразную активности MGL (57).

РОЛЬ БЕЛКОВ, СВЯЗАННЫХ С ЛИПИДНЫМИ КАПЛЯМИ, В ЛИПОЛИЗЕ

Перилипин является основным белком, обнаруживаемым в ассоциации с липидными каплями в адипоцитах (42). Анализ липидных капель из клеток яичника китайского хомячка (СНО) с помощью масс-спектрометрии выявил, помимо перилипина, более 40 структурных и сигнальных белков, а также ферменты, участвующие в синтезе, хранении и использовании липидов, что позволяет предположить, что липидная капля следует рассматривать как метаболическую органеллу, а не как инертное хранилище (70).Липолиз требует, чтобы растворимые липазы получали доступ к высокогидрофобному субстрату ТАГ и чтобы гидрофобные продукты этой реакции были удалены. Известно, что ряд цитозольных, а также связанных с липидными каплями белков регулирует скорость базального и / или стимулированного липолиза.

Perilipin

Perilipin A и B представляют собой изоформы перилипина, которые возникают в результате дифференциального сплайсинга (41). Перилипин А является преобладающей изоформой, обнаруживаемой в зрелых адипоцитах, и он был одним из первых идентифицированных белков, ассоциированных с липидными каплями.Таким образом, он был тщательно изучен. Многие данные подтверждают сложную роль перилипиновых белков в регуляции как базального, так и стимулированного липолиза адипоцитов.

В нестимулированных условиях исследования клеточного фракционирования и конфокальной микроскопии показывают, что деснутрин / ATGL (145) и значительная часть HSL (до 50% клеточного уровня) локализуются в липидной капле (84). Считается, что присутствие перилипинов A и B, покрывающих липидную каплю, действует как защитный барьер, который ограничивает доступ липаз ТАГ к нейтральным липидным субстратам, чтобы предотвратить неограниченный базальный липолиз (15).Эту идею подтверждают физиологические и метаболические эффекты удаления перилипина у мышей. У мышей без перилипина постоянно повышен базальный липолиз, что приводит к заметному снижению массы WAT и меньшему размеру адипоцитов (78, 106, 127). Мыши с нулевым перилипином также демонстрируют значительную устойчивость к ожирению, вызванному диетой (78, 106, 127), что объясняется, по крайней мере частично, повышенным бета-окислением жирных кислот, продуктов липолиза (106), что следует из компенсаторная индукция генов, участвующих в липидном и энергетическом обмене, и подавление генов, участвующих в биосинтезе липидов (20).Эктопическая экспрессия перилипина А, как и ожидалось, увеличивает запасы ТАГ за счет ингибирования гидролиза (15, 127). Преадипоциты 3T3-L1, трансфицированные перилипином A, хранили в 6–30 раз больше ТАГ, чем контрольные клетки 3T3-L1, в результате 5-кратного снижения скорости липолиза (15). Было обнаружено, что в клетках СНО перилипин А ингибирует гидролиз ТАГ на 87% в клетках, поддерживаемых в нестимулированных условиях (127). Хотя перилипин A явно сдерживает действие липаз ТАГ в базовых условиях, этот белок играет совершенно иную роль в стимулированном липолизе адипоцитов.

Удаление перилипина связано с почти максимальной скоростью липолиза в базовых условиях (78). Однако потеря функциональных белков перилипина также вызывает резкое ослабление стимулированной липолитической активности (78, 127). В качестве мишени для фосфорилирования, опосредованного протеинкиназой A (PKA; цАМФ-зависимая протеинкиназа), до шести сайтов (Ser-81, Ser-223, Ser-277, Ser-434, Ser-492 и Ser-517) перилипин A сильно регулируется липолитическими стимулами, которые действуют через путь бета-адренергический рецептор / аденилатциклаза (117, 125, 128, 140).Исследования на клетках CHO демонстрируют, что PKA-опосредованное фосфорилирование только перилипина A достаточно для увеличения липолиза (126). Напротив, мутация сайтов фосфорилирования перилипина А снижает вклад этого белка в стимулированный липолиз (84, 117). В адипоцитах присутствие белков перилипина в липидной капле, по-видимому, необходимо для PKA-опосредованной стимуляции транслокации HSL (84, 125). Хотя недавние данные показывают, что эти перилипины не должны фосфорилироваться, чтобы опосредовать транслокацию HSL из цитозоля на поверхность липидной капли, фосфорилирование, по-видимому, необходимо для достижения максимально стимулированного липолиза после активации PKA (84).PKA-зависимое фосфорилирование перилипина A может облегчить взаимодействие с HSL на липидной капле, тем самым увеличивая активность фермента (84). Совместная экспрессия перилипина А и HSL в клетках CHO приводит к кооперативному эффекту, который вызывает более быстро ускоренный липолиз после стимуляции PKA, чем это очевидно в клетках, которые экспрессируют один из белков по отдельности (125).

Перилипин A может также влиять на липолиз, регулируя распределение и архитектуру липидных капель в адипоцитах.Хроническая стимуляция липолиза в адипоцитах 3T3-L1 приводит к тому, что большие перинуклеарные липидные капли фрагментируются на множество микролипидных капель, покрытых перилипином А (76). Этому диспергированию препятствует стабильная экспрессия перилипина А, который был мутирован для предотвращения фосфорилирования серина 492 (76). Активация перилипина А посредством PKA-опосредованного фосфорилирования может, таким образом, увеличивать липолиз за счет увеличения площади поверхности нейтральных липидных капель, доступных для атаки липазами (76, 85). Взятые вместе, эти исследования показывают, что экспрессия перилипина и состояние фосфорилирования являются критическими регуляторами липолиза в адипоцитах.В неадипоцитах связанный с перилипином белок, связанный с дифференцировкой адипоцитов, белок / адипофилин заменяет перилипин на поверхности капель хранения нейтральных липидов, хотя этот белок в значительной степени отсутствует в зрелых адипоцитах (13).

Белок, связывающий жирные кислоты жиров

Белок, связывающий жирные кислоты жиров (aFABP / ALBP / aP2), является членом цитозольных липидсвязывающих белков, которые несут как жирные кислоты, так и ретиноевую кислоту в адипоцитах (79). Максимальные скорости липолиза требуют удаления жирных кислот из адипоцита, чтобы предотвратить накопление продуктов реакции и ингибирование липаз с помощью обратной связи.Постулируется, что aFABP / ALBP / aP2 действует как молекулярный шаперон, облегчая перемещение жирных кислот из адипоцитов после их освобождения из клеточных запасов ТАГ липазами (22). Исследования абляции гена aFABP / ALBP / aP2 на мышах дают представление об относительной роли aFABP / ALBP / aP2 в липолизе. Сообщалось о снижении базального липолиза у мышей с aFABP / ALBP / aP2-нулевым по сравнению с однопометными мышами дикого типа (22, 49), а также было показано, что стимулированный липолиз в адипоцитах, выделенных от этих мышей, ослаблен (22, 110) .В соответствии со снижением скорости оттока жирных кислот, было обнаружено, что внутриклеточные уровни жирных кислот в три раза выше в адипоцитах из нулевых aFABP / ALBP / aP2 по сравнению с дикими типами (22). Однако другие не наблюдали различий в базальной или стимулированной скорости липолиза в адипоцитах, выделенных из мышей, не обладающих aFABP / ALBP / aP2, по сравнению с однопометными мышами дикого типа (110). В этом исследовании наблюдалась компенсаторная индукция липид-связывающего белка кератиноцитов, которая, как сообщается, преодолевает функциональные эффекты потери адипоцит-специфичного aFABP / ALBP / aP2 (110).Внутриклеточные липид-связывающие белки могут быть важными регуляторами липолиза. Дальнейшие исследования необходимы для определения относительной роли этих белков в липолизе адипоцитов.

Caveolin-1

Кавеолы ​​и кавеолярные белки участвуют в регуляции множества функций внутри клеток (23, 93, 103). Кавеолин-1 обнаруживается в особенно больших количествах в жировой ткани и сильно индуцируется во время дифференцировки фибробластов 3T3-L1 в зрелые адипоциты (107).Хотя кавеолин-1 обычно обнаруживается в кавеолах плазматических мембран, протеомный анализ показал, что в адипоцитах кавеолин-1 также локализуется в липидной капле (14, 23, 93, 103). Роль кавеолина-1 в липолизе была предположена в исследованиях мышей, не содержащих кавеолин-1. Эти животные заметно ослабили липолитическую активность в белой жировой ткани (23) и не смогли показать нормальное увеличение неэтерифицированных ЖК в сыворотке, которое ожидается при голодании, что позволяет предположить, что кавеолин-1 играет роль в активации липолиза (24).Мыши с нокаутом кавеолина-1 также не могут должным образом высвобождать жирные кислоты из запасов ТАГ в коричневой жировой ткани в ответ на голодание, что приводит к нарушению термогенеза (24). Регуляция передачи сигнала, опосредованной циклическим АМФ (цАМФ), может способствовать влиянию кавеолина-1 на липолиз (101). Было показано, что кавеолин-1 напрямую взаимодействует с каталитической субъединицей PKA для ингибирования цАМФ-зависимой передачи сигналов in vivo (101). Однако у мышей с нокаутом было показано, что, в то время как активность PKA значительно увеличивалась в отсутствие кавеолина-1, фосфорилирование перилипина резко снижалось (23).Активация β3-адренорецептора приводит к образованию лиганд-индуцированного комплекса между перилипином, кавеолином-1 и каталитической субъединицей PKA в адипоцитах (23). Таким образом, кавеолин-1 может способствовать PKA-опосредованному фосфорилированию перилипина, тем самым способствуя усилению стимуляции липолиза.

CGI-58

Мутации в CGI-58 (сравнительная идентификация гена 58), также известном как ABHD5 (белок 5, содержащий альфа / бета-гидролазный домен), оказались причиной редкого аутосомно-рецессивного заболевания, называемого чанарин. -Синдром Дорфмана (CDS) (67).CDS характеризуется чрезмерным накоплением ТАГ в клетках многих органов, а клинические проявления включают ихтиоз, катаракту, атаксию, нейросенсорную тугоухость и умственную отсталость (67). CGI-58 по структуре напоминает липазы; однако в нем отсутствует консервативный серин активного сайта, который был заменен аспарагином (66). В адипоцитах 3T3-L1 CGI-58 локализуется в липидной капле и, как было показано, напрямую взаимодействует (139) и колокализируется с перилипином A (121). Однако, когда клетки обрабатывают агентами, способствующими липолизу, они рассеиваются из липидной капли (121).Недавно Lass et al. (66) продемонстрировали, что CGI-58 стимулирует липолиз in vitro и является активатором ATGL, но не HSL. При добавлении к цитозольным экстрактам жировой ткани мыши CGI-58 стимулировал липолиз, тогда как очищенный CGI-58 не проявлял липазной активности in vitro. Кроме того, они показали, что мутантные формы CGI-58 не могут активировать ATGL. Хотя CGI-58, по-видимому, играет роль в липолизе, необходимы дополнительные исследования для выяснения молекулярного механизма его активации ATGL, а также его физиологической роли в живых организмах.

Другие белки, участвующие в гидролизе ТАГ

Аквапорин 7 — это белок, переносящий воду и глицерин, экспрессирующийся в плазматической мембране адипоцитов (46, 50, 75). У мышей с дефицитом аквапорина 7 нарушено высвобождение глицерина в ответ на голодание и лечение бета-адренергическими агонистами, хотя высвобождение ЖК из адипоцитов и уровни FFA в плазме сопоставимы с таковыми, наблюдаемыми у однопометников дикого типа (75). У этих животных развивается возрастное ожирение, вызванное индукцией глицеринкиназы и повышенным накоплением ТАГ (53).

Липотранзин был идентифицирован дрожжевым двугибридным скринингом библиотеки кДНК адипоцитов 3T3-L1 как белок, взаимодействующий с HSL (123). Считается, что он действует как стыковочный белок, который опосредует гормонально индуцированную транслокацию HSL из цитоплазмы в липидную каплю (123).

TIP47 — ассоциированный с липидными каплями белок семейства PAT с неизвестной функцией (36). TIP47 ингибирует гидролиз ретиниловых эфиров GS2 и HSL в кератиноцитах человека, предполагая, что в адипоцитах он может иметь аналогичную антилиполитическую функцию с другими белками семейства PAT, такими как перилипин или белок / адипофилин, связанный с дифференцировкой жировой ткани (36).

ПИТАТЕЛЬНАЯ РЕГУЛИРОВКА ЛИПОЛИЗА

Пищевая регуляция липолиза происходит на нескольких уровнях в ответ на изменение метаболических условий и потребления питательных веществ. Острая и быстрая регуляция липолиза жировой ткани происходит для поддержания поставок энергетических субстратов во время постабсорбтивного состояния и для эффективного хранения избыточного топлива после еды. Хроническое воздействие экстремальных состояний питания, таких как ожирение или голодание, также вызывает метаболические адаптации, включая изменения липолиза.И, наконец, все больше данных указывает на то, что воздействие определенных метаболически активных питательных веществ в рационе также может регулировать липолиз.

СТИМУЛЯЦИЯ ЛИПОЛИЗА ВО ВРЕМЯ ГОДА

Голодание резко стимулирует липолиз, повышая концентрацию в сыворотке крови жирных кислот и глицерина, которые действуют как окислительные субстраты для поддержания энергетических потребностей других метаболических тканей. Катехоламины являются основными активаторами липолиза, индуцированного натощак. Метаболические пути, посредством которых эти молекулы действуют, чтобы стимулировать гидролиз ТАГ и высвобождение ЖК, были тщательно изучены и подробно рассмотрены (6, 17, 18, 29, 63, 64 и ссылки, содержащиеся в них).Катехоламин норэпинефрин связывает бета-адренорецепторы на плазматической мембране адипоцитов. Эти рецепторы связаны с Gs-белками, которые передают стимулирующий сигнал аденилатциклазе для образования циклического АМФ (цАМФ). цАМФ связывает PKA, заставляя регуляторные субъединицы диссоциировать от каталитически активных субъединиц, что приводит к увеличению активности фермента (60).

PKA катализирует полифосфорилирование HSL по нескольким сайтам, включая неактивирующий сайт (Ser-563), а также два дополнительных сайта (Ser-659 и Ser-660), которые вызывают активацию и последующую транслокацию этой липазы из цитозоля в липидная капля (4, 51, 120).Как обсуждалось выше, PKA также фосфорилирует перилипин на липидной капле, что приводит к изменениям, которые усиливают стимулированный липолиз, включая перемещение перилипина от липидной капли (21), перилипин-опосредованное ремоделирование липидных капель, что увеличивает площадь поверхности, доступную для липолитической атаки. (75) и перилипин-опосредованная активация активности HSL на поверхности липидной капли (84, 125). Результаты исследований на HSL-нулевых мышах предполагают, что липолиз, стимулированный катехоламинами, может также включать другие липазы ТАГ.Обработка адипоцитов, выделенных от HSL-нулевых мышей, бета-адренергическим агонистом изопротеренолом вызывает усиленный липолиз, хотя и на более низком уровне по сравнению с адипоцитами от животных дикого типа (91). Это предполагает, что некоторые или все недавно открытые ТАГ-липазы адипоцитов могут быть прямыми мишенями для PKA-опосредованного фосфорилирования и активации, и действительно, Zimmerman et al. (145) ранее показали, что деснутрин / ATGL фосфорилируется, хотя он не является мишенью для PKA. Это также предполагает, что PKA может косвенно активировать не-HSL-опосредованный липолиз TAG.Было показано, что одной экспрессии перилипина достаточно для обеспечения PKA-опосредованного липолиза в клетках CHO, в которых отсутствует HSL (126). Фосфорилирование перилипина с помощью PKA может приводить к изменениям, которые увеличивают активность липаз, связанных с множественными липидными каплями. Возможные механизмы включают содействие доступу растворимых липаз к гидрофобным субстратам, облегчение образования комплексов между липазами и белками, связанными с липолизом, и стабилизацию липаз на поверхности липидной капли.Необходимы дальнейшие исследования для выяснения природы PKA-опосредованного липолиза в отсутствие HSL.

Глюкагон стимулирует липолиз в изолированных адипоцитах мыши (48, 114) и человека (96), независимо от антагонистических эффектов на действие инсулина. Лечение глюкагоном вызывает повышение активности аденилатциклазы, что приводит к увеличению уровня цАМФ внутриклеточных адипоцитов (95, 96). Ингибирующий желудочный полипептид конкурирует с глюкагоном за связывание с рецептором глюкагона и может ингибировать стимулированный глюкагоном липолиз в адипоцитах, что указывает на то, что глюкагон опосредует липолиз, по крайней мере частично, посредством прямой активации его рецептора (27).Хотя действие глюкагона в первую очередь специфично для печени, сообщалось, что рецепторы глюкагона присутствуют в мембранах жировой ткани человека (83), что позволяет предположить, что прямое действие глюкагона, вероятно, играет важную роль в регулировании липолиза человека, а также грызунов.

ИНГИБИРОВАНИЕ ЛИПОЛИЗА ВО ВРЕМЯ ПРАВИЛЫ

Повторное кормление ослабляет липолиз адипоцитов, в первую очередь за счет мощного антилиполитического действия инсулина. Этот регуляторный путь также был тщательно изучен и проанализирован (6, 17, 18, 29, 63 и ссылки, содержащиеся в них).Быстрая и острая регуляция липолиза инсулином включает как цАМФ-зависимые, так и цАМФ-независимые механизмы. ЦАМФ-зависимое подавление липолиза инсулином включает активацию фосфодиэстеразы 3B (63). Связывание инсулина вызывает аутофосфорилирование его рецептора, что приводит к активации и последующему фосфорилированию тирозина субстратов рецептора инсулина и связыванию регуляторной субъединицы p85 фосфатидилинозитолкиназы-3 (PI3K). Активированный PI3K аутофосфорилирует свое инозитоловое кольцо, регуляторную субъединицу p85 и каталитические субъединицы p110, за чем следует фосфорилирование и активация протеинкиназы B / Akt (PKB / Akt).PKB / Akt фосфорилирует и активирует фосфодиэстеразу 3B, которая расщепляет цАМФ в адипоцитах, высвобождая PKA из активации и уменьшая липолиз за счет снижения опосредованной фосфорилированием активации HSL и перилипина. ЦАМФ-независимая регуляция липолиза инсулином включает стимуляцию протеинфосфатазы-1 посредством фосфорилирования ее регуляторной субъединицы (100). Активированная протеинфосфатаза-1 быстро дефосфорилирует и деактивирует HSL, вызывая снижение скорости липолиза (73, 92, 100, 119, 143).

Инсулин также может подавлять липолиз в адипоцитах 3T3-L1 за счет подавления мРНК деснутрина / ATGL (59). Напротив, экспрессия мРНК HSL не регулируется краткосрочными изменениями нутритивного статуса (124). Помимо ингибирующего действия на ферменты гидролиза ТАГ, инсулин также снижает измеримую скорость липолиза (на что указывает высвобождение свободных жирных кислот и глицерина из интактных клеток), способствуя повторной этерификации жирных кислот (16). Это служит для усиления очевидного подавления гидролиза ТАГ инсулином и физиологического эффекта гормона.

AMP-активированная протеинкиназа (AMPK) в качестве главного сенсора внутриклеточной энергии участвует в регуляции метаболизма глюкозы и липидов (33, 86). Активация AMPK в адипоцитах 5-аминоимидазол-4-карбоксиамид-1-бета-D-рибофуранозидом (AICAR) ингибирует липолиз (32, 33, 112). Инфузия AICAR тучным крысам Zucker, а также худым однопометникам снижает концентрацию ТАГ и ЖК в плазме, а также обмен глицерина (37), тогда как у мышей, лишенных субъединицы AMPK-alpha2, наблюдается повышенное ожирение и увеличение массы тела (98, 131). ).Однако другие обнаружили, что активация AMPK также может играть роль в стимуляции максимальной скорости липолиза с помощью цАМФ (86). Молекулярные события и мишени, лежащие в основе регуляции липолиза с помощью AMPK, еще предстоит понять.

ЛИПОЛИЗ ПРИ ОЖИРЕНИИ

Ожирение связано с увеличением базального липолиза (102), но снижением липолиза, стимулированного катехоламинами (65). Нарушение чувствительности адипоцитов к передаче сигналов инсулина, включая антилиполитические эффекты этого гормона, может способствовать усилению базального липолиза при ожирении.Сообщалось о снижении опосредованного инсулином подавления липолиза адипоцитов у крыс с ожирением (118), а также у женщин с висцеральным ожирением (3, 54), хотя в нескольких других исследованиях на людях сообщается, что антилиполитические эффекты инсулина хорошо сохраняются даже у субъекты с сильно нарушенной инсулино-опосредованной регуляцией глюкозы (7, 8, 11, 52). Как у страдающих ожирением, так и у пациентов, не страдающих ожирением, голодание и снижение веса вызывают значительное повышение чувствительности к антилиполитическим эффектам инсулина (7, 28, 71).

Избыточная экспрессия гена лептина в адипоцитах и ​​повышенные уровни лептина в кровотоке также могут способствовать усилению базального липолиза при ожирении (74). Обработка адипоцитов, выделенных от худых мышей, лептином, стимулирует липолитическую активность (33). Обработка адипоцитов, выделенных от мышей ob / ob с ожирением и дефицитом лептина, приводит к еще большей стимуляции липолиза (33). Более того, хроническое (112) или острое (32) периферическое введение лептина также стимулирует гидролиз ТАГ жировой ткани у крыс, что приводит к увеличению скорости липолиза в 9–16 раз.Липолитическое действие лептина зависит от рецептора лептина, поскольку тучные крысы fa / fa Zucker (112) и db / db мышей (32), у которых есть инактивирующая мутация длинной формы рецептора лептина, устойчивы к лептину. -индуцированный липолиз. Повышенный уровень циркулирующего лептина может также усиливать липолиз, противодействуя антилиполитическим эффектам инсулина (86). Лептин нарушает несколько метаболических эффектов инсулина, включая способность гормона ингибировать липолиз, опосредованный бета-адренорецепторами, и активацию PKA (86).

Липолиз, стимулируемый бета-адренорецепторами, нарушается при ожирении (65). Адипоциты субъектов с ожирением имеют более низкие уровни активности аденилатциклазы в условиях, стимулируемых гормонами, по сравнению с адипоцитами из контрольной группы, не страдающей ожирением (77). Этому эффекту могут способствовать изменения адренергических сигнальных путей. Ожирение связано со снижением липолитического эффекта катехоламинов в жировой ткани (65). Адипоциты крыс Zucker с ожирением имеют более высокий уровень антилиполитических α2-адренорецепторов по сравнению с адипоцитами тощих однопометников (19).Напротив, адипоциты мышей с ожирением экспрессируют в два раза более низкие уровни Gsα, субъединицы GTP-связывающего белка, через который бета-адренорецепторы стимулируют аденилатциклазу (38). Пострецепторные дефекты также могут способствовать нарушению гормонально-стимулированного липолиза. Было показано, что максимальная липолитическая способность снижается в адипоцитах, выделенных от субъектов с ожирением, по сравнению с адипоцитами от субъектов без ожирения после стимуляции устойчивым к фосфодиэстеразе аналогом цАМФ дибутирил-цАМФ (65).Это открытие указывает на нарушение действия цАМФ ниже воздействия ожирения на передачу сигналов адренергических рецепторов, активацию аденилатциклазы, связанную с G-белком, или уровни цАМФ. HSL и перилипин A являются основными мишенями для цАМФ-зависимой активации PKA. Снижение уровней HSL (65) и перилипина (135) в жировой ткани у лиц с ожирением может способствовать нарушению катехоламинового липолиза через пострецепторный дефект. Снижение веса у лиц с ожирением вызывает существенное повышение и нормализацию чувствительности к катехоламиновой стимуляции липолиза (77) без изменения количества β-адренорецепторов (102).

Продукция фактора некроза опухоли альфа (TNFα) увеличивается в адипоцитах у лиц с ожирением и может способствовать усилению базального липолиза при ожирении (97, 104, 105). Этот цитокин сигнализирует аутокринным / паракринным образом через рецептор TNFα, чтобы активировать митоген-активируемые протеинкиназы p44 / 42 и JNK, которые, в свою очередь, подавляют мРНК перилипина и экспрессию белка (104, 105). Исследования специфических ингибиторов p44 / 42 и JNK подтверждают, что TNFα-опосредованное увеличение липолиза в значительной степени связано со снижением уровней перилипина в адипоцитах (104, 105), а более низкие уровни перилипина были обнаружены в жировой ткани у субъектов с ожирением. (135).

РЕГУЛИРОВАНИЕ ЛИПОЛИЗА АДИПОЦИТОВ С ПОМОЩЬЮ ПИЩЕВЫХ СОЕДИНЕНИЙ

Кальций

Более высокое потребление кальция связано с уменьшением ожирения и снижением риска ожирения в различных эпидемиологических исследованиях (108 и ссылки в них). Кроме того, было показано, что добавление кальция способствует снижению веса у людей с ожирением, потребляющих калорийную диету (142), и у мышей с ожирением с ограничением калорий (111), а также, как сообщается, ингибирует восстановление веса во время возобновления кормления у мышей (122). ).Считается, что усиленный липолиз способствует этим открытиям, и действительно, сообщалось, что острое потребление кальция значительно коррелирует с окислением жиров у людей (82). В нескольких исследованиях изучались молекулярные механизмы, лежащие в основе потенцирования липолиза адипоцитов пищевым кальцием. Увеличение пищевой кальциевой обратной связи подавляет секрецию паратироидного гормона (ПТГ) и, следовательно, активацию 25-гидроксихолекальциферола до 1,25-дигидроксикальциферола (витамин D 3 ; VD 3 ) (87).Адипоциты являются мишенями для действия этих гормонов (141). ПТГ стимулирует дозозависимое повышение уровня внутриклеточного кальция в адипоцитах, что связано как с увеличением притока, так и с мобилизацией внутриклеточных запасов (89). Также было показано, что VD 3 вызывает повышение уровня внутриклеточного кальция (111). Повышенный уровень внутриклеточного кальция в адипоцитах человека подавляет липолиз, стимулируемый путём β-адренергических рецепторов (111, 138), что приводит к снижению уровня цАМФ и снижению фосфорилирования HSL (138).Эти эффекты, по-видимому, опосредуются в первую очередь активацией фосфодиэстеразы 3B (138). Низкое потребление кальция с пищей и повышенная циркулирующая VD 3 также могут оказывать косвенное ингибирующее действие на липолиз адипоцитов, регулируя использование липолитических субстратов для энергетического метаболизма (111, 122). Обратное регулирование уровней внутриклеточного кальция в адипоцитах кальцитропными гормонами может способствовать влиянию пищевого кальция на ожирение.

Кофеин

Липолитический эффект кофеина и других метилксантинов, полученных из чая и кофе, хорошо изучен и охарактеризован.Эти соединения стимулируют липолиз за счет увеличения клеточных уровней цАМФ посредством двух основных механизмов. Первый — антагонизм A1-аденозиновых рецепторов (72). Эти рецепторы преобладают на дифференцированных зрелых адипоцитах, где они ингибируют активность аденилатциклазы и подавляют липолиз (12). Антагонизм A1-рецепторов приводит к снижению активности аденилатциклазы и усилению липолиза (72). Метилксантины также подавляют активность фосфодиэстеразы, предотвращая распад цАМФ и стимулируя липолиз в жировых клетках (2, 95).Прием кофеина увеличивает обмен липидов (2) и концентрацию свободных жирных кислот в сыворотке крови (5, 61). Таким образом, высокое потребление метилксантинов также может способствовать снижению веса и поддержанию веса за счет усиленного окисления жиров и термогенеза (137).

Этанол

Острое употребление этанола оказывает антилиполитическое действие, которое вызывает значительное снижение содержания свободных жирных кислот в сыворотке (1) и снижение окисления липидов всего тела (113). Повышенный уровень ацетата в плазме может способствовать этому эффекту (1, 113).Сообщалось, что хроническое употребление этанола у крыс подавляет липолиз адипоцитов, опосредованный бета-адренорецепторами, вероятно, за счет повышенной активации фосфодиэстеразы 4 (56). Это привело к снижению активации PKA, стимулированной бета-адренорецепторами, и снижению активирующего фосфорилирования перилипина A и HSL (56). Сообщалось также, что хроническое потребление этанола связано со снижением секреции ПТГ, что также может способствовать усилению липолиза за счет снижения уровней внутриклеточного кальция в адипоцитах (81).

ОБЗОР И БУДУЩИЕ НАПРАВЛЕНИЯ

Липолиз адипоцитов — сложный процесс, который точно контролируется путем интеграции множества разнообразных гормональных и биохимических сигналов. Нарушение этой регуляции может способствовать развитию ожирения и связанных с ним патологий. В последнее время было сделано много захватывающих достижений, включая открытие основных липаз ТАГ, которые способствуют липолизу адипоцитов in vivo. Однако многое еще предстоит выяснить в отношении функционирования in vivo и относительного вклада этих липаз в общий липолиз адипоцитов.По мере создания генетических мышейных моделей этих ферментов наше понимание липолиза адипоцитов, вероятно, в ближайшем будущем резко улучшится.

КРАТКИЕ СВЕДЕНИЯ

  1. Липолиз точно регулируется множеством гормональных и биохимических сигналов, которые сходятся на адипоцитах, чтобы регулировать функцию липаз и неферментативных вспомогательных белков.

  2. Гидролиз ТАГ ограничивает скорость липолиза и катализируется одной или несколькими новыми липазами, которые включают деснутрин / ATGL и TGH.

  3. Основные регуляторы липолиза включают липолитические активаторы глюкагон и катехоламины, а также антилиполитический агент инсулин.

  4. Диетические компоненты также могут регулировать липолиз. К ним относятся диетический кальций, этанол и кофеин.

БУДУЩИЕ ВОПРОСЫ

  1. Создание мышей с дефицитом деснутрина / ATGL, особенно в жировой ткани, поможет выяснить роль этой липазы in vivo в липолизе жировой ткани.

  2. Генетические мышиные модели с дефицитом других липаз ТАГ также будут необходимы для определения их относительного вклада в липолиз.

  3. Роль датчика энергии AMPK в обеспечении липолиза остается неясной. Для решения этой проблемы требуется дополнительная работа.

  4. Было обнаружено, что некоторые пищевые вещества регулируют липолиз. Учитывая бремя хронических заболеваний, связанных с ожирением, открытие пищевых веществ, стимулирующих липолиз, будет представлять большой интерес.

Глоссарий

4 2 P
WAT белая жировая ткань
TAG триацилглицерид
FA
Липолиз гидролиз ТАГ с образованием неэтерифицированных жирных кислот (ЖК) и глицерина, которые высвобождаются в сосудистую сеть для использования другими органами в качестве энергетических субстратов
HSL гормоночувствительная липаза
липаза триглицерида жировой ткани
TGH триацилглицеридгидролаза
MGL моноглицерид липаза
PKA PKA 643 протеин-кин теинкиназа B
PTH паратироидный гормон
VD 3 1,25 (OH) 2 витамин D 3

ЛИТЕРАТУРА.Абрамсон Э.А., Арки РА. Острый антилиполитический эффект этилового спирта и ацетата у человека. J. Lab. Clin. Med. 1968; 72: 105–17. [PubMed] 2. Acheson KJ, Gremaud G, Meirim I., Montigon F, Krebs Y, et al. Метаболические эффекты кофеина у человека: окисление липидов или бесполезный цикл? Являюсь. J. Clin. Nutr. 2004; 79: 40–46. [PubMed] 3. Альбу Дж. Б., Кури М., Шур М., Мерфи Л., Мэтьюз Д. Э., Пи-Саньер FX. Системная резистентность к антилиполитическому действию инсулина у чернокожих и белых женщин с висцеральным ожирением.Являюсь. J. Physiol. 1999; 277: E551–60. [PubMed] 4. Anthonsen MW, Ronnstrand L, Wernstedt C, Degerman E, Holm C. Идентификация новых сайтов фосфорилирования в гормон-чувствительной липазе, которые фосфорилируются в ответ на изопротеренол и регулируют активационные свойства in vitro. J. Biol. Chem. 1998. 273: 215–21. [PubMed] 5. Arciero PJ, Gardner AW, Calles-Escandon J, Benowitz NL, Poehlman ET. Влияние приема кофеина на кинетику NE, окисление жиров и расход энергии у молодых и пожилых мужчин.Являюсь. J. Physiol. 1995; 268: E1192–98. [PubMed] 6. Арнер П. Липолиз жировых клеток человека: биохимия, регуляция и клиническая роль. Best Pract. Res. Clin. Эндокринол. Метаб. 2005; 19: 471–82. [PubMed] 7. Арнер П., Болиндер Дж., Энгфельдт П., Хеллмер Дж., Остман Дж. Влияние ожирения на антилиполитический эффект инсулина в изолированных жировых клетках человека, полученных до и после приема глюкозы. J. Clin. Инвестировать. 1984. 73: 673–80. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] 8. Арнер П., Энгфельдт П., Скарфорс Э., Лителл Х., Болиндер Дж.Связывание рецептора инсулина и метаболические эффекты инсулина в подкожной жировой ткани человека при нелеченном инсулинозависимом сахарном диабете. UPS. J. Med. Sci. 1987. 92: 47–58. [PubMed] 9. Baulande S, Lasnier F, Lucas M, Pairault J. Адипонутрин, трансмембранный белок, соответствующий новой связанной с диетой и ожирением мРНК, специфически экспрессируемой в жировой линии. J. Biol. Chem. 2001; 276: 33336–44. [PubMed] 10. Birner-Gruenberger R, Susani-Etzerodt H, Waldhuber M, Riesenhuber G, Schmidinger H, et al.Липолитический протеом жировой ткани мыши. Мол. Клетка. Протеомика. 2005; 4: 1710–17. [PubMed] 11. Болиндер Дж., Лителл Х., Скарфорс Э., Арнер П. Влияние ожирения, гиперинсулинемии и непереносимости глюкозы на действие инсулина в жировой ткани шестидесятилетних мужчин. Диабет. 1986; 35: 282–90. [PubMed] 12. Borglum JD, Vassaux G, Richelsen B, Gaillard D, Darimont C и др. Изменения экспрессии аденозиновых A1- и A2-рецепторов при дифференцировке жировых клеток. Мол. Клетка.Эндокринол. 1996; 117: 17–25. [PubMed] 13. Brasaemle DL, Barber T, Wolins NE, Serrero G, Blanchette-Mackie EJ, Londos C. Белок, связанный с дифференцировкой жировой ткани, представляет собой повсеместно экспрессируемый белок, связанный с каплями запаса липидов. J. Lipid Res. 1997; 38: 2249–63. [PubMed] 14. Brasaemle DL, Dolios G, Shapiro L, Wang R. Протеомный анализ белков, связанных с липидными каплями базальных и липолитически стимулированных адипоцитов 3T3-L1. J. Biol. Chem. 2004; 279: 46835–42.[PubMed] 15. Brasaemle DL, Rubin B, Harten IA, Gruia-Gray J, Kimmel AR, Londos C. Перилипин A увеличивает хранение триацилглицерина за счет снижения скорости гидролиза триацилглицерина. J. Biol. Chem. 2000; 275: 38486–93. [PubMed] 16. Кэмпбелл П.Дж., Карлсон М.Г., Хилл Дж.О., Нурджан Н. Регулирование метаболизма свободных жирных кислот инсулином у людей: роль липолиза и повторной этерификации. Являюсь. J. Physiol. 1992; 263: E1063–69. [PubMed] 17. Кэри ГБ. Механизмы регуляции липолиза адипоцитов.Adv. Exp. Med. Биол. 1998. 441: 157–70. [PubMed] 18. Кармен Г.Ю., Виктор С.М. Сигнальные механизмы, регулирующие липолиз. Сотовый сигнал. 2006; 18: 401–8. [PubMed] 19. Carpene C, Rebourcet MC, Guichard C, Lafontan M, Lavau M. Увеличение сайтов связывания альфа-2-адренорецепторов и антилиполитический эффект в адипоцитах крыс с генетическим ожирением. J. Lipid Res. 1990; 31: 811–19. [PubMed] 20. Кастро-Чавес Ф., Йечур В.К., Саха П.К., Мартинес-Ботас Дж., Вутен ЕС и др. Скоординированная активация окислительных путей и подавление биосинтеза липидов лежат в основе устойчивости к ожирению у мышей с нокаутом перилипина: профиль экспрессии генов микроматрицы.Диабет. 2003. 52: 2666–74. [PubMed] 21. Клиффорд Г. М., Лондос С., Кремер Ф. Б., Вернон Р. Г., Йеман С. Дж.. Транслокация гормоночувствительной липазы и перилипина при липолитической стимуляции адипоцитов крыс. J. Biol. Chem. 2000; 275: 5011–15. [PubMed] 22. Коу Н.Р., Симпсон М.А., Бернлор Д.А. Направленное разрушение гена липид-связывающего белка адипоцитов (протеина aP2) нарушает липолиз жировых клеток и увеличивает клеточные уровни жирных кислот. J. Lipid Res. 1999; 40: 967–72. [PubMed] 23.Коэн А.В., Разани Б., Шуберт В., Уильямс Т.М., Ван XB и др. Роль кавеолина-1 в модуляции липолиза и образования липидных капель. Диабет. 2004; 53: 1261–70. [PubMed] 24. Коэн А.В., Шуберт В., Брасемле Д.Л., Шерер П.Е., Лисанти МП. Экспрессия кавеолина-1 важна для собственно негибкого термогенеза в коричневой жировой ткани. Диабет. 2005; 54: 679–86. [PubMed] 25. Dolinsky VW, Gilham D, Hatch GM, Agellon LB, Lehner R, Vance DE. Регулирование экспрессии триацилглицерингидролазы жирными кислотами с пищей и рецепторами, активируемыми пероксисомальными пролифераторами.Биохим. Биофиз. Acta. 2003; 1635: 20–28. [PubMed] 26. Долинский VW, Sipione S, Lehner R, Vance DE. Клонирование и экспрессия кДНК триацилглицерингидролазы мыши и структура соответствующего гена. Биохим. Биофиз. Acta. 2001; 1532: 162–72. [PubMed] 27. Dupre J, Greenidge N, McDonald TJ, Ross SA, Rubinstein D. Ингибирование действий глюкагона в адипоцитах желудочным ингибитором полипептида. Обмен веществ. 1976; 25: 1197–99. [PubMed] 28. Энгфельдт П., Болиндер Дж., Остман Дж., Арнер П.Влияние голодания и возобновления питания на антилиполитический эффект инсулина в жировых клетках человека, полученных от субъектов с ожирением. Диабет. 1985; 34: 1191–97. [PubMed] 29. Fain JN, Garcija-Sainz JA. Адренергическая регуляция обмена адипоцитов. J. Lipid Res. 1983; 24: 945–66. [PubMed] 30. Фортье М., Ван С.П., Моридж П., Семаш М., Мфума Л. и др. Гормон-чувствительный липазно-независимый липолиз адипоцитов во время бета-адренергической стимуляции, голодания и пищевой жировой нагрузки. Являюсь.J. Physiol. Эндокринол. Метаб. 2004; 287: E282–88. [PubMed] 31. Fredrikson G, Tornqvist H, Belfrage P. И гормоночувствительная липаза, и моноацилглицерин липаза необходимы для полной деградации триацилглицерина адипоцитов. Биохим. Биофиз. Acta. 1986; 876: 288–93. [PubMed] 32. Fruhbeck G, Aguado M, Gomez-Ambrosi J, Martinez JA. Липолитический эффект введения лептина in vivo на адипоциты мышей худой и ob / ob, но не db / db мышей. Biochem. Биофиз. Res. Commun.1998. 250: 99–102. [PubMed] 33. Fruhbeck G, Aguado M, Martinez JA. Липолитический эффект лептина in vitro на адипоциты мышей: доказательства возможной аутокринной / паракринной роли лептина. Biochem. Биофиз. Res. Commun. 1997; 240: 590–94. [PubMed] 34. Фукуда Н, Онтко Я. Взаимодействие между синтезом, окислением и этерификацией жирных кислот в производстве печенью липопротеинов, богатых триглицеридами. J. Lipid Res. 1984; 25: 831–42. [PubMed] 35. Гао Дж. Г., Саймон М.Идентификация новой гидролазы ретинилового эфира кератиноцитов как трансацилазы и липазы. J. Invest. Дерматол. 2005; 124: 1259–66. [PubMed] 36. Гао Дж. Г., Саймон М. Молекулярный скрининг регуляторов липазы GS2: ингибирование гидролиза ретинилового эфира кератиноцитов с помощью TIP47. J. Invest. Дерматол. 2006; 126: 2087–95. [PubMed] 37. Геттис Т.В., Харкнесс П.Дж., Уотсон П.М. Бета-3-адренорецептор подавляет стимулируемую инсулином секрецию лептина изолированными адипоцитами крысы. Эндокринология.1996; 137: 4054–57. [PubMed] 38. Геттис Т.В., Рамкумар В., Ухинг Р.Дж., Седжер Л., Тейлор Иллинойс. Изменения уровней мРНК, экспрессии и функции GTP-связывающих регуляторных белков в адипоцитах мышей с ожирением (C57BL / 6J-ob / ob) J. Biol. Chem. 1991; 266: 15949–55. [PubMed] 39. Gilham D, Alam M, Gao W., Vance DE, Lehner R. Триацилглицерин гидролаза локализована в эндоплазматическом ретикулуме с помощью необычной последовательности извлечения, где она участвует в сборке VLDL без использования липидов VLDL в качестве субстратов.Мол. Биол. Клетка. 2005. 16: 984–96. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] 40. Giudicelli H, Combes-Pastre N, Boyer J. Липолитическая активность жировой ткани. IV. Активность диацилглицерин липазы жировой ткани человека. Биохим. Биофиз. Acta. 1974. 369: 25–33. [PubMed] 41. Гринберг А.Г., Иган Дж. Дж., Век С.А., Моос М.С., Лондон С., Киммел А.Р. Выделение кДНК перилипинов А и В: последовательность и экспрессия липидных капель ассоциированных белков адипоцитов. Proc. Natl. Акад. Sci. СОЕДИНЕННЫЕ ШТАТЫ АМЕРИКИ. 1993; 90: 12035–39.[Бесплатная статья PMC] [PubMed] 42. Greenberg AS, Egan JJ, Wek SA, Garty NB, Blanchette-Mackie EJ, Londos C. Perilipin, главный гормонально регулируемый адипоцит-специфический фосфопротеин, связанный с периферией капель хранения липидов. J. Biol. Chem. 1991; 266: 11341–46. [PubMed] 43. Хеммерле Г., Ласс А., Циммерманн Р., Горкевич Г., Мейер С. и др. Дефектный липолиз и измененный энергетический обмен у мышей, лишенных липазы триглицеридов жиров. Наука. 2006; 312: 734–37.[PubMed] 44. Haemmerle G, Zimmermann R, Hayn M, Theussl C, Waeg G и др. Дефицит гормоночувствительной липазы у мышей вызывает накопление диглицеридов в жировой ткани, мышцах и семенниках. J. Biol. Chem. 2002; 277: 4806–15. [PubMed] 45. Хеммерле Г., Циммерманн Р., Штраус Дж. Г., Кратки Д., Ридерер М. и др. Дефицит гормон-чувствительной липазы у мышей изменяет липидный профиль плазмы, влияя на тканеспецифический паттерн экспрессии липопротеинлипазы в жировой ткани и мышцах.J. Biol. Chem. 2002; 277: 12946–52. [PubMed] 46. Хара-Чикума М., Сохара Э., Рай Т., Икава М., Окабе М. и др. Прогрессирующая гипертрофия адипоцитов у мышей с дефицитом аквапорина-7: проницаемость адипоцитов по глицерину как новый регулятор накопления жира. J. Biol. Chem. 2005; 280: 15493–96. [PubMed] 47. Харада К., Шен В.Дж., Патель С., Нату В., Ван Дж. И др. Устойчивость к ожирению, вызванному диетой с высоким содержанием жиров, и измененной экспрессии генов, специфичных для жировой ткани, у мышей с дефицитом HSL. Являюсь. J. Physiol.Эндокринол. Метаб. 2003; 285: E1182–95. [PubMed] 48. Хеккемейер С.М., Баркер Дж., Дакворт В.С., Соломон СС. Исследования биологического действия и деградации глюкагона в перифузированной изолированной жировой клетке крысы. Эндокринология. 1983; 113: 270–76. [PubMed] 49. Герцель А. В., Смит Л. А., Берг А. Х., Клайн Г. В., Шульман Г. И. и др. Липидный метаболизм и уровни адипокина у нулевых и трансгенных мышей, связывающих жирные кислоты. Являюсь. J. Physiol. Эндокринол. Метаб. 2006; 290: E814–23. [PubMed] 50.Хибусе Т., Маэда Н., Фунахаши Т., Ямамото К., Нагасава А. и др. Дефицит аквапорина 7 связан с развитием ожирения за счет активации жировой глицеринкиназы. Proc. Natl. Акад. Sci. СОЕДИНЕННЫЕ ШТАТЫ АМЕРИКИ. 2005; 102: 10993–98. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] 51. Холм С. Молекулярные механизмы, регулирующие чувствительную к гормонам липазу и липолиз. Biochem. Soc. Пер. 2003. 31: 1120–24. [PubMed] 52. Ховард Б.В., Климс И., Васкес Б., Брэди Д., Нагулеспаран М., Унгер Р.Х. Антилиполитическое действие инсулина у пациентов с ожирением с устойчивостью к его глюкорегуляторному действию.J. Clin. Эндокринол. Метаб. 1984. 58: 544–48. [PubMed] 53. Дженкинс CM, Манкусо DJ, Ян В., Sims HF, Гибсон Б., Валовой RW. Идентификация, клонирование, экспрессия и очистка трех новых членов семейства кальций-независимых фосфолипаз А2 человека, обладающих активностью триацилглицерин-липазы и ацилглицеринтрансацилазы. J. Biol. Chem. 2004. 279: 48968–75. [PubMed] 54. Джонсон Дж. А., Фрид СК, Пи-Суньер FX, Альбу Дж. Б.. Нарушение действия инсулина в подкожных адипоцитах у женщин с висцеральным ожирением.Являюсь. J. Physiol. Эндокринол. Метаб. 2001; 280: E40–49. [PubMed] 55. Кальдерон Б., Майорек Н., Берри Е., Зевит Н., Бар-Тана Дж. Цикл жирных кислот у голодных крыс. Являюсь. J. Physiol. Эндокринол. Метаб. 2000; 279: E221–27. [PubMed] 56. Канг Л., Надь Л.Е. Хроническое питание этанолом подавляет липолиз, стимулируемый бета-адренорецепторами, в адипоцитах, выделенных из эпидидимального жира. Эндокринология. 2006; 147: 4330–38. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] 57. Карлссон М., Контрерас Дж. А., Хеллман Ю., Торнквист Н., Холм К.Клонирование кДНК, распределение в тканях и идентификация каталитической триады моноглицерид липазы. Эволюционная связь с эстеразами, лизофосфолипазами и галопероксидазами. J. Biol. Chem. 1997; 272: 27218–23. [PubMed] 58. Karlsson M, Reue K, Xia YR, Lusis AJ, Langin D, et al. Экзон-интронная организация и хромосомная локализация гена моноглицерид липазы мыши. Ген. 2001; 272: 11–18. [PubMed] 59. Кершоу Э., Хамм Дж. К., Верхаген Л. А., Перони О., Катич М., Флиер Дж. С..Жировая триглицерид-липаза: функция, регуляция инсулином и сравнение с адипонутрином. Диабет. 2006; 55: 148–57. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] 60. Ким С., Сюонг Н.Х., Тейлор С.С. Кристаллическая структура комплекса между каталитической и регуляторной (RIalpha) субъединицами PKA. Наука. 2005. 307: 690–96. [PubMed] 61. Кобаяси-Хаттори К., Моги А., Мацумото Ю., Такита Т. Влияние кофеина на жировой и липидный обмен у крыс, получавших диету с высоким содержанием жиров. Biosci. Biotechnol.Biochem. 2005; 69: 2219–23. [PubMed] 62. Lake AC, Sun Y, Li JL, Kim JE, Johnson JW и др. Экспрессия, регуляция и активность триглицеридгидролазы членов семейства адипонутринов. J. Lipid Res. 2005; 46: 2477–87. [PubMed] 63. Лангин Д. Контроль высвобождения жирных кислот и глицерина при липолизе жировой ткани. C. R. Biol. 2006; 329: 598–607. обсуждение 653–55. [PubMed] 64. Large V, Peroni O, Letexier D, Ray H, Beylot M. Метаболизм липидов в белых адипоцитах человека.Диабет Метаб. 2004. 30: 294–309. [PubMed] 65. Большой V, Рейнисдоттир С., Лангин Д., Фредби К., Кланнемарк М. и др. Снижение экспрессии и функции липазы, чувствительной к гормонам адипоцитов, в подкожных жировых клетках у субъектов с ожирением. J. Lipid Res. 1999; 40: 2059–66. [PubMed] 66. Ласс А., Циммерманн Р., Хеммерле Г., Ридерер М., Шойсволь Г. и др. Жировая триглицерид-липаза-опосредованный липолиз клеточных жировых запасов активируется CGI-58 и дефектен при синдроме Чанарина-Дорфмана.Cell Metab. 2006; 3: 309–19. [PubMed] 67. Лефевр С., Джобард Ф., Ко Ф., Буаджар Б., Карадуман А. и др. Мутации в CGI-58, гене, кодирующем новый белок подсемейства эстеразы / липазы / тиоэстеразы, при синдроме Чанарина-Дорфмана. Являюсь. J. Hum. Genet. 2001; 69: 1002–12. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] 68. Ленер Р., Вэнс ДЕ. Клонирование и экспрессия кДНК, кодирующей микросомальную липазу печени, которая мобилизует накопленный триацилглицерин. Biochem. J. 1999; 343 (Pt. 1): 1–10. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] 69.Ленер Р., Вергер Р. Очистка и характеристика микросомальной триацилглицерингидролазы печени свиньи. Биохимия. 1997; 36: 1861–68. [PubMed] 70. Лю П., Инь И, Чжао И, Манди Д.И., Чжу М., Андерсон Р.Г. Капельки липидов клеток K2 яичников китайского хомячка, по-видимому, являются метаболическими органеллами, участвующими в мембранном движении. J. Biol. Chem. 2004; 279: 3787–92. [PubMed] 71. Lofgren P, Hoffstedt J, Naslund E, Wiren M, Arner P. Проспективные и контролируемые исследования действия инсулина и катехоламинов на жировые клетки у женщин с ожирением после снижения веса.Диабетология. 2005; 48: 2334–42. [PubMed] 72. Лондос С., Купер Д.М., Шлегель В., Родбелл М. Аналоги аденозина ингибируют аденилатциклазу адипоцитов с помощью GTP-зависимого процесса: основа действия аденозина и метилксантинов на производство и липолиз циклического АМФ. Proc. Natl. Акад. Sci. СОЕДИНЕННЫЕ ШТАТЫ АМЕРИКИ. 1978; 75: 5362–66. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] 73. Лондос К., Хоннор Р. К., Диллон Г. С.. цАМФ-зависимая протеинкиназа и липолиз в адипоцитах крыс. III. Множественные режимы инсулиновой регуляции липолиза и регуляции инсулиновых ответов регуляторами аденилатциклазы.J. Biol. Chem. 1985; 260: 15139–45. [PubMed] 74. Lonnqvist F, Arner P, Nordfors L, Schalling M. Сверхэкспрессия гена ожирения (ob) в жировой ткани людей с ожирением. Nat. Med. 1995; 1: 950–53. [PubMed] 75. Маэда Н., Фунахаши Т., Хибусе Т., Нагасава А., Кишида К. и др. Адаптация к голоданию за счет транспорта глицерина через аквапорин 7 в жировой ткани. Proc. Natl. Акад. Sci. СОЕДИНЕННЫЕ ШТАТЫ АМЕРИКИ. 2004. 101: 17801–6. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] 76. Марцинкевич А., Готье Д., Гарсия А., Брасемле Д.Л.Фосфорилирование серина 492 перилипина А направляет фрагментацию и диспергирование липидных капель. J. Biol. Chem. 2006; 281: 11901–9. [PubMed] 77. Мартин Л.Ф., Клим С.М., Ваннуччи С.Дж., Диксон Л.Б., Лэндис Дж.Р., ЛаНуэ К.Ф. Изменения активности аденилатциклазы адипоцитов у людей с патологическим ожирением и ранее страдающих ожирением. Операция. 1990; 108: 228–34. обсуждение 234–35. [PubMed] 78. Мартинес-Ботас Дж., Андерсон Дж. Б., Тесье Д., Лапиллон А., Чанг Б. Х. и др. Отсутствие перилипина приводит к похуданию и обращает вспять ожирение у мышей Lepr (db / db).Nat. Genet. 2000; 26: 474–79. [PubMed] 79. Матарезе V, Бернлор Д.А. Очистка липидсвязывающего белка адипоцитов мыши. Характеристика как белка, связывающего жирные кислоты и ретиноевую кислоту. J. Biol. Chem. 1988; 263: 14544–51. [PubMed] 80. Mayes PA, Topping DL. Регулирование липогенеза печени свободными жирными кислотами плазмы: одновременные исследования секреции липопротеинов, синтеза холестерина, кетогенеза и глюконеогенеза. Biochem. J. 1974; 140: 111–14. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] 81.Маккарти MF, Томас CA. Избыток ПТГ может способствовать увеличению веса, препятствуя индуцированному катехоламинами липолизу, что влияет на влияние кальция, витамина D и алкоголя на массу тела. Med. Гипотезы. 2003. 61: 535–42. [PubMed] 82. Мелансон Э.Л., Шарп Т.А., Шнайдер Дж., Донаху В.Т., Грюнвальд Г.К., Хилл Дж. Связь между потреблением кальция и окислением жиров у взрослых людей. Int. J. Obes. Relat. Метаб. Disord. 2003. 27: 196–203. [PubMed] 83. Мерида Э., Дельгадо Э., Молина Л.М., Вильянуэва-Пенакаррильо М.Л., Вальверде И.Присутствие глюкагона и глюкагоноподобных пептид-1- (7-36) амидных рецепторов в солюбилизированных мембранах жировой ткани человека. J. Clin. Эндокринол. Метаб. 1993; 77: 1654–57. [PubMed] 84. Miyoshi H, Souza SC, Zhang HH, Strissel KJ, Christoffolete MA и др. Перилипин способствует липолизу адипоцитов, опосредованному чувствительной к гормонам липазой, через механизмы, зависимые и независимые от фосфорилирования. J. Biol. Chem. 2006; 281: 15837–44. [PubMed] 85. Мур HP, Silver RB, Mottillo EP, Bernlohr DA, Granneman JG.Перилипин нацелен на новый пул липидных капель для липолитической атаки гормонально-чувствительной липазой. J. Biol. Chem. 2005; 280: 43109–20. [PubMed] 86. Muller G, Ertl J, Gerl M, Preibisch G. Лептин ухудшает метаболические действия инсулина в изолированных адипоцитах крысы. J. Biol. Chem. 1997; 272: 10585–93. [PubMed] 87. Мюррей Р.К., Граннер Д.К., Мэйс Пенсильвания, Родвелл VW. Биохимия Харпера. Appleton & Lange; Стэмфорд, Коннектикут: 2000. стр. 927. 88. Натараджан Р., Гош С., Гроган В.Каталитические свойства очищенной цитозольной гидролазы холестерилового эфира печени крысы. Biochem. Биофиз. Res. Commun. 1996; 225: 413–19. [PubMed] 89. Ni Z, Smogorzewski M, Massry SG. Влияние паратиреоидного гормона на цитозольный кальций адипоцитов крыс. Эндокринология. 1994; 135: 1837–44. [PubMed] 90. Окадзаки Х., Игараси М., Ниси М., Тадзима М., Секия М. и др. Идентификация нового члена семейства карбоксилэстераз, который гидролизует триацилглицерин: потенциальная роль в липолизе адипоцитов.Диабет. 2006; 55: 2091–97. [PubMed] 91. Окадзаки Х., Осуга Дж., Тамура Й., Яхаги Н., Томита С. и др. Липолиз в отсутствие гормоночувствительной липазы: свидетельство общего механизма регуляции отдельных липаз. Диабет. 2002; 51: 3368–75. [PubMed] 92. Olsson H, Belfrage P. Регуляторные и базальные участки фосфорилирования гормоночувствительной липазы дефосфорилируются протеинфосфатазой-1, 2A и 2C, но не протеинфосфатазой-2B. Евро. J. Biochem. 1987. 168: 399–405.[PubMed] 93. Остермайер А.Г., Пачи Дж. М., Цзэн Ю., Люблин Д. М., Мунро С., Браун Д. А.. Накопление кавеолина в эндоплазматическом ретикулуме перенаправляет белок к каплям, запасающим липиды. J. Cell Biol. 2001; 152: 1071–78. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] 94. Осуга Дж., Ишибаши С., Ока Т., Ягю Х., Тозава Р. и др. Целенаправленное нарушение гормоночувствительной липазы приводит к мужскому бесплодию и гипертрофии адипоцитов, но не к ожирению. Proc. Natl. Акад. Sci. СОЕДИНЕННЫЕ ШТАТЫ АМЕРИКИ. 2000; 97: 787–92. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] 95.Peers DG, Davies JI. Значение кофеиноподобного действия различных пуринов, пиримидинов и производных на фосфодиэстеразу жировой ткани. Biochem. J. 1971; 124: P8–9. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] 96. Переа А., Клементе Ф., Мартинелл Дж., Вильянуэва-Пенакаррильо М.Л., Вальверде И. Физиологический эффект глюкагона в изолированных адипоцитах человека. Horm. Метаб. Res. 1995; 27: 372–75. [PubMed] 97. Prins JB, Niesler CU, Winterford CM, Bright NA, Siddle K, et al. Фактор некроза опухоли-альфа вызывает апоптоз жировых клеток человека.Диабет. 1997; 46: 1939–44. [PubMed] 98. Цянь Х., Хаусман Г.Дж., Комптон М.М., Азаин М.Дж., Хартцелл Д.Л., Бейле, Калифорния. Лептиновая регуляция гамма-рецепторов, активируемых пролифератором пероксисом, фактора некроза опухолей и разобщающей экспрессии белка-2 в жировых тканях. Biochem. Биофиз. Res. Commun. 1998. 246: 660–67. [PubMed] 99. Raclot T, Leray C, Bach AC, Groscolas R. Селективная мобилизация жирных кислот не основана на их позиционном распределении в триацилглицеринах белых жировых клеток.Biochem. J. 1995; 311 (Pt. 3): 911–16. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] 100. Ragolia L, Begum N. Протеиновая фосфатаза-1 и действие инсулина. Мол. Клетка. Biochem. 1998. 182: 49–58. [PubMed] 101. Разани Б., Рубин К.С., Лисанти МП. Регуляция цАМФ-опосредованной передачи сигнала посредством взаимодействия кавеолинов с каталитической субъединицей протеинкиназы A. J. Biol. Chem. 1999; 274: 26353–60. [PubMed] 102. Рейнисдоттир С., Лангин Д., Карлстром К., Холм К., Росснер С., Арнер П.Влияние снижения веса на регуляцию липолиза в адипоцитах женщин с ожирением верхней части тела. Clin. Sci. (Лондон) 1995; 89: 421–29. [PubMed] 103. Робенек М.Дж., Северс Н.Дж., Шлаттманн К., Пленц Г., Циммер К.П. и др. Липиды разделяют кавеолин-1 из мембран ER на липидные капли: обновление модели биогенеза липидных капель. FASEB J. 2004; 18: 866–68. [PubMed] 104. Райден М., Арвидссон Э., Бломквист Л., Пербек Л., Дикер А., Арнер П. Мишени для индуцированного TNF-альфа липолиза в адипоцитах человека.Biochem. Биофиз. Res. Commun. 2004; 318: 168–75. [PubMed] 105. Райден М., Дикер А., ван Хармелен В., Хаунер Х., Брунберг М. и др. Картирование ранних сигнальных событий в липолизе, опосредованном фактором некроза опухоли альфа, в жировых клетках человека. J. Biol. Chem. 2002; 277: 1085–91. [PubMed] 106. Саха ПК, Кодзима Х., Мартинес-Ботас Дж., Сунехаг А.Л., Чан Л. Метаболические адаптации в отсутствие перилипина: усиление бета-окисления и снижение продукции глюкозы в печени, связанные с периферической резистентностью к инсулину, но нормальной толерантностью к глюкозе у мышей с нулевым перилипином.J. Biol. Chem. 2004. 279: 35150–58. [PubMed] 107. Scherer PE, Lisanti MP, Baldini G, Sargiacomo M, Mastick CC, Lodish HF. Индукция кавеолина во время адипогенеза и ассоциация GLUT4 с везикулами, богатыми кавеолином. J. Cell Biol. 1994; 127: 1233–43. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] 108. Шрагер С. Диетическое потребление кальция и ожирение. Варенье. Board Fam. Практик. 2005; 18: 205–10. [PubMed] 109. Шварц Дж. П., Юнгас Р. Л.. Исследования гормоночувствительной липазы жировой ткани.J. Lipid Res. 1971; 12: 553–62. [PubMed] 110. Шонесси С., Смит Э. Р., Кодукула С., Сторч Дж., Фрид С. К.. Метаболизм адипоцитов у мышей с нокаутом адипоцитов, связывающих жирные кислоты, связывающие белок (aP2 — / -), после кратковременного кормления с высоким содержанием жиров: функциональная компенсация кератиноцитами [коррекция керитиноцитов] жирных кислот, связывающих белок. Диабет. 2000; 49: 904–11. [PubMed] 111. Ши Х, Дириенсо Д., Земель МБ. Влияние диетического кальция на липидный обмен в адипоцитах и ​​регуляцию массы тела у трансгенных мышей с ограничением энергии aP2-agouti.FASEB J. 2001; 15: 291–93. [PubMed] 112. Siegrist-Kaiser CA, Pauli V, Juge-Aubry CE, Boss O, Pernin A, et al. Прямое действие лептина на коричневую и белую жировую ткань. J. Clin. Инвестировать. 1997; 100: 2858–64. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] 113. Siler SQ, Neese RA, Hellerstein MK. De novo липогенез, липидная кинетика и липидный баланс всего тела у людей после острого употребления алкоголя. Являюсь. J. Clin. Nutr. 1999; 70: 928–36. [PubMed] 114. Славин Б.Г., Онг Ю.М., Керн П.А.Гормональная регуляция активности гормоночувствительной липазы и уровней мРНК в изолированных адипоцитах крыс. J. Lipid Res. 1994; 35: 1535–41. [PubMed] 115. Смирнова Е., Гольдберг Е.Б., Макарова К.С., Лин Л, Браун В.Дж., Джексон КЛ. ATGL играет ключевую роль в деградации липидных капель / адипосом в клетках млекопитающих. EMBO Rep. 2006; 7: 106–13. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] 116. Сони К.Г., Ленер Р., Метальников П., О’Доннелл П., Семаш М. и др. Карбоксилестераза 3 (EC 3.1.1.1) является основной липазой адипоцитов.J. Biol. Chem. 2004. 279: 40683–89. [PubMed] 117. Соуза С.К., Мулиро К.В., Лискум Л., Лиен П., Ямамото М.Т. и др. Модуляция гормоночувствительной липазы и протеинкиназы А-опосредованного липолиза перилипином А в восстановленной аденовирусной системе. J. Biol. Chem. 2002; 277: 8267–72. [PubMed] 118. Стивенс Дж., Грин М.Х., Кайзер Д.Л., Поль С.Л. Резистентность к инсулину в адипоцитах крыс с ожирением, получавших питание и голодание: диссоциация двух действий инсулина. Мол. Клетка. Biochem. 1981; 37: 177–83. [PubMed] 119.Стральфорс П., Хоннор Р. Инсулино-индуцированное дефосфорилирование гормоночувствительной липазы. Корреляция с липолизом и активностью цАМФ-зависимой протеинкиназы. Евро. J. Biochem. 1989. 182: 379–85. [PubMed] 120. Su CL, Sztalryd C, Contreras JA, Holm C, Kimmel AR, Londos C. Мутационный анализ реакции транслокации гормон-чувствительной липазы в адипоцитах. J. Biol. Chem. 2003. 278: 43615–19. [PubMed] 121. Субраманиан V, Ротенберг А., Гомес С., Коэн А.В., Гарсия А. и др.Перилипин А опосредует обратимое связывание CGI-58 с липидными каплями в адипоцитах 3T3-L1. J. Biol. Chem. 2004. 279: 42062–71. [PubMed] 122. Солнце X, Земель МБ. Кальций и молочные продукты подавляют восстановление веса и жира во время потребления ad libitum после ограничения энергии у трансгенных мышей aP2-agouti. J. Nutr. 2004. 134: 3054–60. [PubMed] 123. Syu LJ, Saltiel AR. Липотранзин: новый стыковочный белок для гормоночувствительной липазы. Мол. Клетка. 1999; 4: 109–15. [PubMed] 124.Sztalryd C, Kraemer FB. Регулирование гормоночувствительной липазы во время голодания. Являюсь. J. Physiol. 1994; 266: E179–85. [PubMed] 125. Sztalryd C, Xu G, Dorward H, Tansey JT, Contreras JA, et al. Перилипин A необходим для транслокации гормоночувствительной липазы во время липолитической активации. J. Cell Biol. 2003. 161: 1093–103. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] 126. Tansey JT, Huml AM, Vogt R, Davis KE, Jones JM и др. Функциональные исследования нативных и мутировавших форм перилипинов: роль в липолизе триацилглицеринов, опосредованном протеинкиназой А.J. Biol. Chem. 2003. 278: 8401–6. [PubMed] 127. Tansey JT, Sztalryd C, Gruia-Gray J, Roush DL, Zee JV и др. Удаление перилипина приводит к тому, что у худых мышей наблюдается аберрантный липолиз адипоцитов, повышенная выработка лептина и устойчивость к ожирению, вызванному диетой. Proc. Natl. Акад. Sci. СОЕДИНЕННЫЕ ШТАТЫ АМЕРИКИ. 2001; 98: 6494–99. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] 128. Tansey JT, Sztalryd C, Hlavin EM, Kimmel AR, Londos C. Центральная роль перилипина A в метаболизме липидов и липолизе адипоцитов. МСБМБ Жизнь.2004. 56: 379–85. [PubMed] 129. Торнквист Х., Белфраг П. Очистка и некоторые свойства моноацилглицерин-гидролизующего фермента жировой ткани крысы. J. Biol. Chem. 1976; 251: 813–19. [PubMed] 130. Виллена Дж. А., Рой С., Саркади-Надь Е., Ким К. Х., Сул Х. С. Деснутрин, ген адипоцитов, кодирующий новый белок, содержащий домен пататина, индуцируется голоданием и глюкокортикоидами: эктопическая экспрессия деснутрина увеличивает гидролиз триглицеридов. J. Biol. Chem. 2004; 279: 47066–75.[PubMed] 131. Villena JA, Viollet B, Andreelli F, Kahn A, Vaulont S, Sul HS. Вызванное ожирение и гипертрофия адипоцитов у мышей, лишенных AMP-активируемой протеинкиназы-альфа-субъединицы. Диабет. 2004; 53: 2242–49. [PubMed] 132. Voshol PJ, Haemmerle G, Ouwens DM, Zimmermann R, Zechner R, et al. Повышенная чувствительность печени к инсулину вместе со снижением запасов триглицеридов в печени у мышей с дефицитом липазы, чувствительных к гормонам. Эндокринология. 2003. 144: 3456–62. [PubMed] 133.Валли А.Дж., Блейкмор А.И., Фрогель П. Генетика ожирения и прогнозирование риска для здоровья. Гм. Мол. Genet. 2006; 15 (Приложение 2): R124–30. [PubMed] 134. Ван С.П., Лаурин Н., Химмс-Хаген Дж., Рудницки М.А., Леви Е. и др. Фенотип жировой ткани дефицита гормоночувствительной липазы у мышей. Ожирение. Res. 2001; 9: 119–28. [PubMed] 135. Ван И, Салливан С., Трухильо М., Ли М.Дж., Шнайдер С.Х. и др. Экспрессия перилипина в жировой ткани человека: эффекты тяжелого ожирения, пола и депо.Ожирение. Res. 2003; 11: 930–36. [PubMed] 136. Вэй Э., Ленер Р., Вэнс ДЭ. C / EBPalpha активирует транскрипцию триацилглицерин гидролазы в адипоцитах 3T3-L1. Biochem. J. 2005; 388: 959–66. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] 137. Вестертерп-Плантенга М.С., Лежен М.П., ​​Ковач Е.М. Снижение веса и поддержание веса в зависимости от привычного потребления кофеина и добавок зеленого чая. Ожирение. Res. 2005; 13: 1195–204. [PubMed] 138. Сюэ Б., Гринберг А.Г., Кремер Ф. Б., Земель МБ.Механизм ингибирования внутриклеточного кальция ([Ca2 +] i) липолиза в адипоцитах человека. FASEB J. 2001; 15: 2527–29. [PubMed] 139. Ямагути Т., Омацу Н., Мацусита С., Осуми Т. CGI-58 взаимодействует с перилипином и локализуется в липидных каплях. Возможное участие неправильной локализации CGI-58 в синдроме Чанарина-Дорфмана. J. Biol. Chem. 2004. 279: 30490–97. [PubMed] 140. Ямагути Т., Омацу Н., Омукаэ А., Осуми Т. Анализ партнеров взаимодействия перилипина и ADRP на липидных каплях.Мол. Клетка. Biochem. 2006. 284: 167–73. [PubMed] 141. Земель МБ. Регулирование риска ожирения и ожирения диетическим кальцием: механизмы и последствия. Варенье. Coll. Nutr. 2002; 21: 146–51С. [PubMed] 142. Земель МБ, Томпсон В., Милстед А., Моррис К., Кэмпбелл П. Кальций и молочные продукты ускоряют потерю веса и жира во время ограничения энергии у взрослых с ожирением. Ожирение. Res. 2004; 12: 582–90. [PubMed] 143. Чжан Дж., Хупфельд С.Дж., Тейлор С.С., Олефски Дж. М., Цзянь Р. Я. Инсулин нарушает передачу бета-адренергических сигналов к протеинкиназе А в адипоцитах.Природа. 2005; 437: 569–73. [PubMed] 144. Zimmermann R, Haemmerle G, Wagner EM, Strauss JG, Kratky D, Zechner R. Снижение этерификации жирных кислот компенсирует пониженную липолитическую активность в гормоночувствительной липазодефицитной белой жировой ткани. J. Lipid Res. 2003; 44: 2089–99. [PubMed] 145. Циммерманн Р., Штраус Дж. Г., Хеммерле Г., Шойсволь Г., Бирнер-Грюнбергер Р. и др. Мобилизации жира в жировой ткани способствует липаза триглицеридов жиров. Наука.2004. 306: 1383–86. [PubMed]

Механизм антилиполитического действия аципимокса на изолированные адипоциты крысы

  • 1.

    Howard BV (1987) Метаболизм липопротеинов при сахарном диабете. J Lipid Res 28: 613–628

    PubMed Google ученый

  • 2.

    Исследовательская группа, Европейское общество атеросклероза (1988) Регулирование и лечение гиперлипидемии у взрослых: политическое заявление Европейского общества атеросклероза.Eur Heart Journal 9: 571–600

    Google ученый

  • 3.

    Tornvall P, Walldius GW (1991) Сравнение никотиновой кислоты и аципимокса при гипертриглицеридемии — влияние на липиды, липопротеины сыворотки, толерантность к глюкозе и толерантность. J Int Med 230: 415–421

    Google ученый

  • 4.

    Сиртори ЧР, Джанфранчески Дж., Сиртори М. и др. (1981) Снижение триглицеридемии и повышение уровня холестерина липопротеинов высокой плотности после лечения аципимоксом, новым ингибитором липолиза.Атеросклероз 38: 267–271

    PubMed Google ученый

  • 5.

    Stuyt PMJ, Stalenhoef AFH, Demacker PNM, Van’t Laar A (1985) Сравнительное исследование эффектов аципимокса и клофибрата при гиперлипопротеинемии типа III и типа IV. Атеросклероз 55: 51–62

    PubMed Google ученый

  • 6.

    Болл М.Дж., Велла М., Риклесс JPD и др. (1986) Acipimox в лечении пациентов с гиперлипидемией: двойное слепое испытание.Eur J Clin Pharmacol 31: 201–204

    PubMed Google ученый

  • 7.

    Crepaldi G, Avogaro P, Descovich GC et al. (1988) Липидснижающая активность аципимокса в плазме у пациентов с гиперлипопротеинемией II и IV типа: результаты многоцентрового исследования. Атеросклероз 70: 115–121

    PubMed Google ученый

  • 8.

    Lovisolo PP, Briatco-Vangosa G, Orsini G, Ronchi R, Angelucci R, Valzelli G (1981) Фармакологический профиль нового антилиполитического агента: 5-метилпиразин-2-карбоновая кислота 4- оксид (аципимокс) I.Механизм действия. Pharmacological Res Comm 13: 151–161

    Google ученый

  • 9.

    Стирлинг К., МакАлир М., Reckless JPD et al. (1985) Влияние аципимокса, производного никотиновой кислоты, на липолиз в жировой ткани человека и на синтез холестерина в слизистой оболочке тощей кишки человека. Clin Sci 68: 83–88

    PubMed Google ученый

  • 10.

    Reaven GM, Hollenbeck C, Jeng C-Y, Wu MS, Chen Y-D I (1988) Измерение свободных жирных кислот, лактата и инсулина в плазме в течение 24 часов у пациентов с NIDDM.Диабет 37: 1020–1024

    PubMed Google ученый

  • 11.

    Randle PJ, Garland PB, Hales CN, Newsholme EA (1963) Жирно-кислотный цикл глюкозы: его роль в чувствительности к инсулину и метаболических нарушениях при сахарном диабете. Ланцет I: 785–789

    Артикул Google ученый

  • 12.

    Фулчер Г.Р., Уокер М., Каталано С., Агиус Л., Альберти КГММ (1992) Метаболические эффекты подавления уровней неэтерифицированных жирных кислот с помощью аципимокса у страдающих ожирением субъектов NIDDM.Диабет 41: 1400–1408

    PubMed Google ученый

  • 13.

    Yeaman SJ (1990) Гормоночувствительная липаза — многоцелевой фермент, участвующий в метаболизме липидов. Biochim Biophys Acta 1052: 128–132

    PubMed Google ученый

  • 14.

    Fain JN, Malbon CC (1979) Регулирование аденилатциклазы аденозином. Mol Cell Biochem 25: 143–169

    PubMed Google ученый

  • 15.

    Moreno FJ, Shepherd RE, Fain JN (1979) Влияние НАД, никотинамида и никотиновой кислоты на накопление циклического АМФ жировыми клетками. Naunyn-Schmiedebergs Arch Pharmacol 306: 179–183

    PubMed Google ученый

  • 16.

    Kather H, Simon B (1979) Двухфазные эффекты простагландина E 2 на аденилатциклазу жировых клеток человека. J Clin Invest 64: 609–612

    PubMed Google ученый

  • 17.

    Fain JN (1980) Гормональная регуляция мобилизации липидов из жировой ткани. Биохимические действия Гормоны VII: 119–204

    Google ученый

  • 18.

    Stralfors P, Bjorgell P, Belfrage P (1984) Гормональная регуляция гормоночувствительной липазы в интактных адипоцитах — идентификация фосфорилированных участков и влияние на фосфорилирование липолитических гормонов и инсулина. Proc Natl Acad Sci USA 81: 3317–3321

    PubMed Google ученый

  • 19.

    Smith CJ, Vasta V, Degerman E, Belfrage P, Manganiello VC (1991) Гормон-чувствительная циклическая GMP-ингибированная циклическая AMP-фосфодиэстераза в адипоцитах крыс. J Biol Chem 266: 13385–13390

    PubMed Google ученый

  • 20.

    Иллиано Г., Куатрекасас П. (1972) Модуляция активности аденилатциклазы в мембранах печени и жировых клеток инсулином. Наука 175: 906–908

    PubMed Google ученый

  • 21.

    Londos C, Honnor RC, Dhillon GS (1985) цАМФ-зависимая протеинкиназа и липолиз в адипоцитах крысы. III. Множественные режимы инсулиновой регуляции липолиза и регуляции инсулиновых ответов регуляторами аденилатциклазы. J Biol Chem 260: 15139–15145

    PubMed Google ученый

  • 22.

    Egan JJ, Greenberg AS, Chang M-K, Wek SA, Moos Jr MC, Londos C (1992) Механизм стимулированного гормонами липолиза в адипоцитах: транслокация гормон-чувствительной липазы в каплю хранения липидов.Proc Natl Acad Sci USA 89: 8537–8541

    PubMed Google ученый

  • 23.

    Cheng H-C, Kemp BE, Pearson RB et al. (1986) Мощный синтетический пептидный ингибитор цАМФ-зависимой протеинкиназы. J Biol Chem 261: 989–992

    PubMed Google ученый

  • 24.

    Kraemer FB, Patel S, Saedi MS, Sztalryd C (1993) Обнаружение гормоночувствительной липазы в различных тканях I.Экспрессия слитого белка HSL / бактерий и образование антител против HSL. J Lipid Res 34: 663–671

    PubMed Google ученый

  • 25.

    Kather H, Wieland E (1984) Глицерин. Люминометрический метод. В: Bergmeyer HU (ред.) Методы ферментативного анализа, Том 6. Verlag Chemie Weinheim, Германия, стр. 510–518

    Google ученый

  • 26.

    Gilman AG (1970) Анализ связывания с белками аденозин-3 ‘, 5’-циклического монофосфата.Proc Natl Acad Sci USA 67: 305–312

    PubMed Google ученый

  • 27.

    Laemelli UK, Favre M (1973) Созревание головки бактериофага T4. J Mol Biol 80: 575–599

    PubMed Google ученый

  • 28.

    Hales CN, Luzio JP, Siddle K (1978) Гормональный контроль липолиза жировой ткани. Biochem Soc Symp 43: 97–135

    PubMed Google ученый

  • 29.

    Sengupta K, Long KJ, Allen DO (1981) Взаимосвязь между изопротеренолом, циклическим АМФ, циклической АМФ-зависимой протеинкиназой и липолизом в перфузируемых жировых клетках. J Pharmacol Exp Ther 218: 128–133

    PubMed Google ученый

  • 30.

    Litosch I, Hudson H, Mills I., Li S-Y, Fain JN (1982) Форсколин как активатор накопления циклического АМФ и липолиза в адипоцитах крыс. Mol Pharmacol 22: 109–115

    PubMed Google ученый

  • 31.

    Fain JN, Wieser PB (1975) Влияние аденозиндезаминазы на накопление циклического аденозинмонофосфата, липолиз и метаболизм глюкозы в жировых клетках. J Biol Chem 250: 1027–1034

    PubMed Google ученый

  • 32.

    Aitchison RED, Clegg RA, Vernon RG (1982) Липолиз адипоцитов крыс во время беременности и кормления грудью. Biochem J 202: 243–247

    PubMed Google ученый

  • 33.

    Saggerson ED (1986) Чувствительность липолиза адипоцитов к стимулирующим и ингибирующим агонистам при гипотиреозе и голодании. Biochem J 238: 387–394

    PubMed Google ученый

  • 34.

    Wieser PB, Fain JN (1975) Инсулин, простагландин E 1 , фенилизопропиладенозин и никотиновая кислота как регуляторы метаболизма жировых клеток. Эндокринология 96: 1221–1225

    PubMed Google ученый

  • 35.

    Aktories K, Gunter S, Jakobs KH (1981) Na + усиливает опосредованное аденозиновым рецептором ингибирование аденилатциклазы адипоцитов. Eur J Pharmacol 71: 157–160

    Статья PubMed Google ученый

  • 36.

    Olansky L, Myers GA, Pohl SL, Hewlett EL (1983) Содействие липолизу в адипоцитах крыс токсином коклюша: обращение эндогенного ингибирования. Proc Natl Acad Sci USA 80: 6547–6551

    PubMed Google ученый

  • 37.

    Aktories K, Jakobs KH, Schultz G (1980) Никотиновая кислота ингибирует аденилатциклазу адипоцитов гормоноподобным образом. FEBS Letts 115: 11–14

    Статья Google ученый

  • 38.

    Aktories K, Schultz G, Jakobs KH (1980) Регулирование аденилатциклазы в адипоцитах хомяка. Подавление простагландинами, агонистами α-адренорецепторов и никотиновой кислотой. Naunyn-Schmiedebergs Arch Pharmacol 312: 167–173

    PubMed Google ученый

  • 39.

    Kather H, Aktories K, Schultz G, Jakobs KH (1983) Белок, активирующий островки, отличает антилиполитический механизм инсулина от механизма других антилиполитических соединений. FEBS Letts 161: 149–152

    Статья Google ученый

  • 40.

    Лондос С., Купер ДМФ, Родбелл М. (1981) Рецептор-опосредованная стимуляция и ингибирование аденилатциклаз: жировая клетка как модельная система. В: Dumont JE, Greengard P, Robison GA (eds) «Достижения в исследовании циклических нуклеотидов», том 14.Raven Press, New York, pp 163–167

    Google ученый

  • 41.

    Greenberg AS, Egan JJ, Wek SA, Garty NB, Blanchette-Mackie EJ, Londos C (1991) Perilipin, главный гормонально регулируемый адипоцит-специфический фосфопротеин, связанный с периферией капель хранения липидов. J Biol Chem 266: 11341–11346

    PubMed Google ученый

  • 42.

    Stralfors P, Honnor RC (1989) Инсулино-индуцированное дефосфорилирование гормоночувствительной липазы.Корреляция с липолизом и активностью цАМФ-зависимой протеинкиназы. Eur J Biochem 182: 379–385

    PubMed Google ученый

  • 43.

    Egan JJ, Greenberg AS, Chang M-K, Londos C (1990) Контроль эндогенного фосфорилирования основного субстрата цАМФ-зависимой протеинкиназы в адипоцитах с помощью инсулина и β-адренергической стимуляции. J Biol Chem 265: 18769–18775

    PubMed Google ученый

  • 44.

    Musatti L, Maggi E, Moro E, Valzelli G, Tamassia V (1981) Биодоступность и фармакокинетика у человека аципимокса, нового антилиполитического и гиполипемического агента. J Int Med Res 9: 381–386

    PubMed Google ученый

  • Липолитическое действие нового альфа-2-адренергического антагониста семейства пиперазинопиримидинов: RP 55462.

    Abstract

    Недавние исследования продемонстрировали липидомобилизирующий эффект in vitro, вызванный введением альфа-2-адренергического антагониста, и сосредоточили внимание на предполагаемый терапевтический интерес таких соединений в лечении ожирения в качестве адъювантов в программах ограничения калорийности.Мы изучили влияние RP 55462 [6-хлор-4- (изопропиламино) -5- (метил) -2, пиперазинопиримидин], нового соединения-антагониста альфа-2-адренорецепторов семейства пиперазинопиримидинов, на функцию жировых клеток. Альфа-2-блокирующие свойства этого агента, которые первоначально были определены в головном мозге, были подтверждены на адипоцитах. RP 55462 конкурировал с сайтами связывания [3H] иохимбина на мембранах жировых клеток человека и ингибировал антилиполитическое действие соединений альфа-2-агонистов (UK 14304, клонидин и адреналин) в жировых клетках человека и хомяка.Также было замечено, что один только RP 55462 способен активировать липолиз в изолированных жировых клетках различных видов (человек, крыса, хомяк и собака). Более того, липолитический ответ, индуцированный изопротеренолом или синактеном, в значительной степени усиливался в присутствии RP 55462 в жировых клетках крыс, которые в наименьшей степени тестировались на альфа-2-адренергические реакции. RP-55462-зависимая стимуляция липолиза не зависела от присутствия других антагонистов альфа-2-адренорецепторов (идазоксана, йохимбина или фентоламина). Внутривенное введение RP 55462 настороженным собакам способствовало увеличению концентраций неэстерифицированной кислоты в плазме, что отражало его липидомобилизирующее действие.Таким образом, это исследование фокусирует внимание на новом соединении-антагонисте альфа-2, которое проявляет липид-мобилизирующее действие in vivo, что может быть связано с его свойствами антагониста альфа-2-адренорецепторов. Поскольку липолитическая активность RP 55462, выявленная в исследованиях in vitro, по-видимому, не зависит от его альфа-2-адренолитических свойств; необходимы дальнейшие исследования для определения механизма такого липолитического эффекта, а также его возможного участия в условиях in vivo.

    Катехоламин-индуцированный липолиз вызывает диссоциацию комплекса mTOR и ингибирует захват глюкозы адипоцитами

    Значимость

    Жировая ткань поддерживает метаболический гомеостаз во время голодания и приема пищи.Когда питательных веществ много, анаболические сигналы опосредуются инсулином, стимулируя адипоциты поглощать глюкозу для хранения энергии. В отсутствие питательных веществ катаболическая передача сигналов инициирует липолиз или высвобождение липидов для использования энергии и опосредуется катехоламинами. Эти противоположные пути эволюционно законсервированы и предотвращают бесполезные циклы, но могут привести к метаболическим нарушениям, таким как резистентность к инсулину, если их не регулировать должным образом. Здесь мы определяем новый механизм, посредством которого липолиз подавляет инсулино-стимулированное поглощение глюкозы адипоцитами.Этот сигнальный механизм, вероятно, способствует инсулинорезистентности, когда липолиз активен, например, во время сильного стресса или ожирения, и это новое понимание может привести к новым подходам к лечению гипергликемии.

    Abstract

    Анаболические и катаболические сигналы противостоят друг другу в жировой ткани для поддержания клеточного и организменного гомеостаза, но эти пути часто не регулируются при метаболических нарушениях. Хотя давно установлено, что стимуляция β-адренорецептора ингибирует инсулино-стимулированный захват глюкозы в адипоцитах, механизм остается неясным.Здесь мы сообщаем, что β-адренергическое подавление захвата глюкозы требует липолиза. Мы также показали, что липолиз подавляет захват глюкозы, ингибируя мишень рапамицина (mTOR) 1 и 2 у млекопитающих посредством диссоциации комплекса. Кроме того, мы показываем, что продукты липолиза ингибируют mTOR посредством диссоциации комплекса in vitro. Эти находки раскрывают ранее нераспознанный внутриклеточный сигнальный механизм, посредством которого липолиз блокирует путь фосфоинозитид-3-киназа-Akt-mTOR, что приводит к снижению захвата глюкозы.Этот ранее неустановленный механизм регуляции mTOR, вероятно, способствует развитию инсулинорезистентности.

    Жировая ткань играет важную роль в поддержании энергетического гомеостаза всего тела, накапливая или высвобождая питательные вещества. Этот баланс контролируется противоположными сигнальными путями, где анаболические процессы активируются инсулином (INS), а катаболические действия активируются катехоламинами. Важный безответный вопрос в биологии жировой ткани заключается в том, как индуцированная катехоламином β-адренергическая передача сигналов противодействует стимулированному инсулином захвату глюкозы (1-6).Удивительно, но механизм, лежащий в основе этого хорошо известного физиологического ответа в адипоцитах, до сих пор неизвестен.

    Когда питательных веществ много, инсулин выделяется поджелудочной железой и стимулирует абсорбцию глюкозы и жирных кислот в жировой ткани, где они упаковываются и хранятся в виде триацилглицерина (ТАГ) в каплях клеточного липида. Передача сигналов инсулина в адипоцитах обеспечивается путем фосфоинозитид-3-киназы (PI3K) –Akt – mTOR. mTOR — это высококонсервативная серин / треониновая протеинкиназа, которая функционирует в любом из двух различных мультипротеиновых комплексов: mTOR-комплекс 1 (mTORC1) и mTOR-комплекс 2 (mTORC2).mTORC1 определяется в первую очередь ассоциацией mTOR с raptor, тогда как mTORC2 включает mTOR с rictor (7). Важно отметить, что фосфорилирование mTORC2 Akt по S473 необходимо для активности Akt на AS160, что необходимо для захвата глюкозы в ответ на инсулин (8–11). Следует отметить, что как для mTORC1, так и для mTORC2 целостность этих белковых комплексов важна для специфичности киназного субстрата и правильной передачи сигналов (12, 13).

    Во время голодания или стресса катехоламины высвобождаются симпатической нервной системой для активации липолиза.Стимуляция β-адренорецептора на адипоцитах активирует аденилатциклазу (AC), что приводит к повышению активности цАМФ и протеинкиназы A (PKA). PKA инициирует липолиз путем прямого фосфорилирования гормоночувствительной липазы (HSL) и перилипина (14⇓ – 16) и непрямой активации липазы триглицеридов жиров (ATGL) (17⇓ – 19). Липолиз включает гидролиз ТАГ, хранящегося в липидной капле, с образованием диацилглицерина (ДАГ), моноацилглицерина (МАГ), жирных кислот и глицерина. Эти липолитические продукты являются важными энергетическими субстратами, которые могут действовать как предшественники других липидов и влиять на передачу сигналов в клетках.Однако их потенциальная роль как сигнальных молекул недооценивается (20).

    В этом исследовании мы раскрываем механизмы, которые связывают β-адренергическую стимуляцию с ингибированием инсулино-стимулированного поглощения глюкозы. А именно, мы показываем, что активация липолиза имеет решающее значение. Более того, мы обнаружили, что сами продукты липолиза вызывают ингибирование mTOR за счет диссоциации комплекса, что ингибирует захват глюкозы в адипоцитах. Этот механизм регуляции mTOR (т.е. путем диссоциации комплекса) имеет большое значение для регуляции клеточного метаболизма и, вероятно, способствует гипергликемии, вызванной стрессом, и инсулинорезистентности, вызванной ожирением.

    Результаты

    Ингибирование захвата глюкозы, индуцированное катехоламином, и передача сигналов инсулина требует липолиза.

    Мыши, лишенные ATGL, демонстрируют улучшенную толерантность к глюкозе и устойчивы к инсулинорезистентности, вызванной диетой с высоким содержанием жиров (21⇓ – 23). Дефицит ATGL также улучшает передачу сигналов инсулина в белой жировой ткани (21). Эти наблюдения указывают на то, что липолиз вызывает инсулинорезистентность. Кроме того, известно, что стимуляция β-адренорецептора в изолированных адипоцитах резко ингибирует стимулируемое инсулином поглощение глюкозы (2, 3, 6).Чтобы изучить возможную роль липолиза в эффектах действия катехоламинов, мы сравнили поглощение глюкозы в первичных адипоцитах мышей WT и ATGL — / — во время лечения изопротеренолом, агонистом β-адренергических рецепторов. Как сообщалось ранее, изопротеренол ингибировал захват глюкозы в адипоцитах дикого типа; однако здесь мы показываем, что это ингибирование было устранено в отсутствие ATGL (фиг. 1 A и фиг. S1 A ). Как и ожидалось, липолиз эффективно блокировался в адипоцитах ATGL — / — даже во время лечения изопротеренолом (рис.S1 B ). Восстановление поглощения глюкозы также наблюдалось в культивируемых адипоцитах 3T3-L1 после ингибирования липазы с помощью E600, общего ингибитора липазы, который необратимо связывается с активным центром липаз (рис. S1 C ). Кроме того, передача сигналов инсулина, необходимая для транслокации GLUT4, была восстановлена ​​в адипоцитах ATGL — / — по сравнению с WT (фиг. 1 B и фиг. S1 D и E ). Взятые вместе, эти данные показывают, что липолиз необходим для опосредованного катехоламином ингибирования захвата глюкозы адипоцитами.

    Рис. 1.

    Катехоламин-индуцированное ингибирование захвата глюкозы и передачи сигналов инсулина требует липолиза. ( A ) Анализ поглощения глюкозы с радиоактивной меткой в ​​WT по сравнению с первичными адипоцитами мыши ATGL — / — . Изолированные адипоциты обрабатывали инсулином (10 нМ) или без него в присутствии или в отсутствие изопротеренола (0,1 мкМ) в течение 30 минут, а затем [U- 14 C] -d-глюкозы (10 мкМ) в течение 20 минут. Все анализы содержали аденозиндезаминазу (ADA) (2 единицы / мл). ( B ) Вестерн-блот-анализ передачи сигналов инсулина в первичных адипоцитах мыши WT и ATGL — / — , обработанных, как в A , перед добавлением глюкозы.Каждый график представляет собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего из трех экспериментов. Звездочки указывают на значительную разницу (*** P <0,001).

    Путь β-адренергических / цАМФ ухудшает передачу сигналов инсулина, ингибируя комплексы mTOR.

    Подобно изопротеренол-опосредованному ингибированию передачи сигналов инсулина, обработка адипоцитов форсколином, мощным активатором AC, ингибирует передачу сигналов инсулина (4, 5). Мы обнаружили, что действие форсколина значительно ингибировало mTORC1 и -2 в ответ на инсулин, что измерялось по фосфорилированию S6K (T389) и Akt (S473), соответственно (рис.2 А ). Хотя передача сигналов ниже комплексов mTOR ингибировалась, передача сигналов выше по течению не затрагивалась, как показано фосфорилированием тирозина рецептора инсулина и PDK1-опосредованным фосфорилированием Akt в T308 (фиг. 2 A ). Аналогичные результаты наблюдались в первичных адипоцитах крыс, обработанных изопротеренолом перед стимуляцией инсулином (фиг. S2 A ), и ингибирование AS160 как в культивируемых адипоцитах 3T3-L1, так и в первичных адипоцитах крыс (фиг. 2 A и фиг.S2 A ) демонстрирует, что активность AC играет роль в ослаблении поглощения глюкозы. Эффекты активности AC на mTOR были подтверждены обработкой проницаемым через мембрану аналогом цАМФ cpt-cAMP, ингибитором фосфодиэстеразы (PDE) 3-изобутил-1-метилксантин (IBMX) и изопротеренолом, демонстрируя, что повышенного уровня цАМФ достаточно для ингибирования mTOR. в адипоцитах (рис. 2 B и рис. S2 B ). Активацию липолиза адипоцитов измеряли по фосфорилированию HSL (рис.2 A и B и рис. S2 A ) и высвобождение глицерина (рис. S2 C и D ). Кроме того, обработка форсколином не влияла на фосфорилирование хищника AMPK (рис. S2 E ). Интересно, что форсколин не ингибирует передачу сигналов инсулина в фибробластах 3T3-L1 перед дифференцировкой в ​​адипоциты или в первичные гепатоциты мыши (рис. S2 F ). Взятые вместе, эти данные демонстрируют, что активность цАМФ ингибирует mTOR в адипоцитах, что может играть роль в наблюдаемом вызванном катехоламином снижении поглощения глюкозы.

    Рис. 2.

    Путь β-адренорецепторов / цАМФ нарушает передачу сигналов инсулина, ингибируя комплексы mTOR. ( A ) Вестерн-блоттинг и количественный анализ культивированных адипоцитов 3T3-L1, обработанных форсколином или без него (FSK, 10 мкМ), рапамицином (Rap, 20 нМ) или Torin1 (250 нМ) за 30 мин до лечения инсулином (INS) , 10 нМ) в течение 15 мин. ( B ) Вестерн-блоттинг и количественный анализ культивированных адипоцитов 3T3-L1, обработанных форсколином или без него (FSK, 10 мкМ), Cpt-cAMP (Cpt, 100 мкМ), изопротеренолом (ISO, 5 мкМ) или IBMX (200 мкМ). мкМ) за 30 мин до лечения инсулином (INS, 10 нМ) за 15 мин.Каждый график представляет собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего из трех экспериментов. Звездочки указывают на значительную разницу (* P <0,05 или ** P <0,01, соответственно).

    cAMP-опосредованное ингибирование mTOR требует PKA и липазной активности.

    Основная роль цАМФ в адипоцитах заключается в активации PKA, что приводит к липолизу за счет активации липазы и фосфорилирования перилипина (14⇓ – 16). Чтобы исследовать механизм cAMP-опосредованного ингибирования mTOR, мы фармакологически ингибировали PKA во время лечения форсколином и инсулином.АТФ-конкурентный ингибитор PKA, H89, значительно ингибировал активность PKA и восстанавливал активность как mTORC1, так и -2 в ответ на инсулин (фиг. 3 A и C ). Кроме того, блокирует действие липазы с помощью E600; атглистатин, специфический ингибитор ATGL; или CAY10499, специфический ингибитор HSL, обращал опосредованное цАМФ ингибирование mTOR (фиг. 3 B и C и фиг. S3 A ). Интересно, что блокирование действия липазы индуцировало фосфорилирование S6K во время лечения одним форсколином (рис.3 B ), тогда как адипоциты постоянно демонстрируют ингибирование mTORC1 в ответ на повышенный уровень цАМФ (24–26). Эта, казалось бы, парадоксальная тенденция может быть похожа на активацию цАМФ mTORC1 в других типах клеток (27), когда ингибирующие эффекты липолиза отсутствуют. Этого не наблюдалось в активности mTORC2 на Akt (фиг. 3 B ). Ингибирование липазы также блокировало липолиз, что измерялось по высвобождению глицерина (фиг. S3 B ). Взятые вместе, эти данные демонстрируют, что повышенный уровень цАМФ действует через PKA и активацию липолиза, нарушая активность mTOR в адипоцитах.

    Рис. 3.

    cAMP-опосредованное ингибирование mTOR требует активности PKA и липазы. ( A ) Вестерн-блоттинг культивированных адипоцитов 3T3-L1, предварительно обработанных H89 (10 мкМ) в течение 20 минут перед обработкой форсколином и инсулином, как на фиг. 2 A . ( B ) Вестерн-блоттинг культивированных адипоцитов 3T3-L1, предварительно обработанных диэтил-п-нитрофенилфосфатом (E600, 150 мкМ) или атглистатином (10 мкМ) перед обработкой форсколином и инсулином, как на фиг. 2 A . ( C ) Количественный анализ pS6K (T389) и pAKT (S473) из экспериментов в A и B .Каждый график представляет собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего из трех экспериментов. Звездочки указывают на значительную разницу (* P <0,05 или ** P <0,01, соответственно).

    Липолитические продукты ингибируют активность mTOR in vitro.

    Липолиз производит DAG, MAG, жирные кислоты и глицерин за счет действия липазы на TAG. Чтобы определить, ответственны ли эти липолитические продукты за опосредованное липолизом ингибирование mTOR, мы исследовали их способность ингибировать очищенный рекомбинантный mTOR (рис.4 A ) in vitro. Мы экстрагировали липиды из адипоцитов, обработанных липолитическими агентами форсколином или изопротеренолом или без них, и включили эти липиды в анализы киназы mTOR. Мы показываем, что липиды, экстрагированные из культивируемых адипоцитов, подвергающихся липолизу, последовательно ингибировали mTOR, тогда как липиды из контрольных клеток не имели никакого эффекта (фиг. 4 B и фиг. S4 A ). Липиды, экстрагированные из первичных адипоцитов мышей дикого типа, показали аналогичные результаты; однако липиды из контрольных или обработанных изопротеренолом адипоцитов мыши ATGL — / — не влияли на mTOR (рис.4 С ). Важно отметить, что хотя липиды, экстрагированные из контрольных клеток, не ингибировали mTOR, обработка липидов липазой in vitro действительно генерировала ингибирующие липиды (фиг. 4 D ). Чтобы исследовать, какие липиды могут быть ответственны за ингибирование mTOR, мы включили определенные жирные кислоты или глицеролипиды в анализ киназы mTOR. Они не показали значительного влияния на активность mTOR (фиг. 4 E ), предполагая, что это может быть конкретный липид, высвобождающийся во время липолиза, а не липолитические продукты в целом, которые ингибируют mTOR.Чтобы убедиться, что активность киназы была обусловлена ​​исключительно очищенным mTOR, мы показали полное ингибирование Torin1 (фиг. S4 B ) и кинетический анализ активности mTORC1 in vitro (фиг. S4 C ). Эти данные демонстрируют, что липолитические продукты ингибируют mTOR in vitro, предполагая, что они могут способствовать индуцированному катехоламинами ингибированию захвата глюкозы в адипоцитах.

    Рис. 4.

    Липолитические продукты ингибируют активность mTOR in vitro. ( A ) Окрашивание Кумасси при очистке рекомбинантного mTORC1, показывающее mTOR (верхняя полоса) и raptor (нижняя полоса).( B ) Анализы радиоактивной киназы mTOR in vitro с использованием очищенного рекомбинантного mTORC1 и 4E-BP1 в качестве субстрата. Липидный носитель или липиды, экстрагированные из культивируемых адипоцитов 3T3-L1, обработанных форсколином или без него (FSK, 10 мкМ) в течение 30 минут, не добавляли к анализу за 10 минут до добавления [γ- 32 P] -ATP. ( C ) Анализ киназы mTOR, как в B , с использованием липидов, экстрагированных из первичных адипоцитов мышей WT или ATGL — / — после обработки изопротеренолом (ISO, 10 мкМ) или без него в течение 30 мин.( D ) Анализы киназы mTOR, как в B , с использованием липидов, экстрагированных из культивированных адипоцитов 3T3-L1. Липиды обрабатывали липазой или без нее in vitro перед добавлением их в анализ киназы mTOR. ( E ) Анализы киназы mTOR, как в B , где DAG (в частности, 1-пальмитоил-2-олеоил-sn-глицерин), MAG (в частности, 2-олеоил-глицерин), олеат или пальмитат были добавлены, как указано . Каждый график представляет собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего из трех экспериментов. Звездочки указывают на значительную разницу (* P <0.05 или ** P <0,01 соответственно).

    Липолитические продукты ингибируют mTOR посредством комплексной диссоциации.

    В наших попытках очистить mTOR из адипоцитов мы наблюдали, что комплексы mTOR 1 и 2 диссоциировали в клетках, обработанных форсколином, по сравнению с контролем (фиг. 5 A и фиг. S5 A ). Подобно спасению передачи сигналов mTOR, показанному на фиг.3 B и C , атглистатин спасает ассоциацию mTORC1 и -2 в культивируемых адипоцитах (фиг.5 B ), предполагая, что механизм индуцированного форсколином ингибирования mTOR происходит через диссоциацию комплекса mTOR. В дополнение к данным по захвату глюкозы и передаче сигналов инсулина на фиг. 1, диссоциация mTORC2 также наблюдалась у WT и спасалась в первичных адипоцитах мыши ATGL — / — (фиг. 5 C ). Эти данные демонстрируют, что липолиз необходим для наблюдаемой диссоциации комплекса mTOR. Кроме того, липидные экстракты из культивированных адипоцитов, обработанных форсколином, вызывали диссоциацию комплекса mTOR in vitro, тогда как липиды из адипоцитов, обработанных носителем, не влияли на комплекс (рис.S5 B ). Чтобы количественно показать диссоциацию mTOR in vitro, мы очистили комплекс mTOR с флуоресцентной меткой, состоящий из меченого Венерой mTOR и меченного Cerulean хищника или риктора (фиг. 5 D ). Этот рекомбинантный комплекс mTOR был полезен, поскольку флуоресцентные белковые метки могут быть обнаружены спектрофотометрически. В нашем анализе диссоциации mTOR обнаруженная эмиссия Венеры или Cerulean непосредственно представляет присутствие mTOR или raptor / rictor, соответственно (рис. S5 C ), и диссоциация может быть эффективно и количественно определена in vitro.Мы использовали этот анализ, чтобы показать, что липиды, экстрагированные из адипоцитов, обработанных форсколином, диссоциируют mTORC1 и -2 in vitro, тогда как липиды, экстрагированные из необработанных клеток, метаболиты, которые распределяются в водную фазу, или липиды из фибробластов 3T3-L1 перед дифференцировкой или первичные гепатоциты. нет эффекта (рис. 5 E ). В дополнение к передаче сигналов инсулина, показанной на фиг. 3, ингибирование липазы также блокирует диссоциацию mTOR (фиг. 5 F ). Липиды, полученные в результате обработки экстрактов клеток адипоцитов липазой in vitro, также вызывали диссоциацию mTOR, тогда как липиды, обработанные носителем, не вызывали (рис.5 G ). Взятые вместе, эти данные показывают, что липолитические продукты способствуют ингибированию mTOR за счет диссоциации комплекса mTOR.

    Рис. 5.

    Липолитические продукты ингибируют mTOR за счет диссоциации комплекса. ( A ) Вестерн-блот-анализ коиммунопреципитации mTORC1 и mTORC2 против raptor и rictor, соответственно, где культивированные адипоциты обрабатывали форсколином (FSK, 10 мкМ), рапамицином (Rap, 20 нМ) или Torin1 (250 нМ) или без него. за 30 мин до лечения инсулином (INS, 10 нМ) за 15 мин.( B ) Вестерн-блот-анализ коиммунопреципитации mTORC1 и mTORC2 против mTOR, где культивированные адипоциты обрабатывали атглистатином (10 мкМ) или без него в течение 1 ч перед обработкой форсколином и инсулином, как в A . ( C ) Вестерн-блот-анализ ассоциации mTORC2 с использованием коиммунопреципитации против mTOR, где первичные адипоциты мыши WT или ATGL — / — обрабатывали инсулином или без него (10 нМ) в присутствии или в отсутствие изопротеренола (0.1 мкМ) в течение 30 мин, как на рис. 1 A и B перед добавлением глюкозы. ( D ) Иллюстративное представление анализа диссоциации mTOR. ( E ) Анализ диссоциации mTOR, в котором культивированные адипоциты 3T3-L1 обрабатывали форсколином или без него (10 мкМ) перед лизисом клеток и органической экстракцией ( Материалы и методы ). Очищенные флуоресцентно меченые mTORC1 или mTORC2 инкубировали либо с лизатом, либо с экстрагированными органическими или водными фазами культивированных адипоцитов или лизатом фибробластов или гепатоцитов в течение 30 минут перед промывкой и обнаружением флуоресценции.( F ) Анализ диссоциации mTOR, в котором культивированные адипоциты 3T3-L1 обрабатывали ДМСО в качестве контроля, диэтил-п-нитрофенилфосфатом (E600, 150 мкМ) или атлистатином (10 мкМ) перед обработкой форсколином и инкубацией с флуоресцентным mTOR, как в . E . ( G ) Анализ диссоциации mTOR, в котором липиды экстрагировали из культивированных адипоцитов 3T3-L1 и обрабатывали липазой или без нее in vitro, а затем инкубировали с mTOR, как в E . Каждый график представляет собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего из трех экспериментов.# указывает на значительное отличие от контроля ( # P <0,0001).

    Ингибирование захвата глюкозы, индуцированное торином-1, не зависит от липолиза.

    Активность mTOR необходима для облегчения индуцированного инсулином захвата глюкозы адипоцитами (8–11). Здесь мы показываем, что стимуляция изопротеренолом β-адренергического рецептора и прямое ингибирование mTOR с помощью Torin1 ингибируют захват глюкозы в первичных адипоцитах мышей дикого типа, тогда как одного прямого ингибирования mTOR достаточно для блокирования захвата глюкозы в отсутствие ATGL (рис.6 А ). Кроме того, в то время как стимуляция β-адренорецептора подавляет передачу сигналов инсулина только в адипоцитах WT (рис. 1 B и рис. S1 D и E ), Torin1 ингибирует передачу сигналов инсулина как в WT, так и в ATGL — / — адипоцитов (рис.6 В ). Взятые вместе, эти данные предполагают, что ингибирование mTOR липолизом является вероятным механизмом индуцированного катехоламином ингибирования захвата глюкозы в адипоцитах.

    Рис. 6.

    Индуцированное Torin1 ингибирование поглощения глюкозы не зависит от липолиза.( A ) Анализ поглощения глюкозы с радиоактивной меткой в ​​WT по сравнению с первичными адипоцитами мыши ATGL — / — . Изолированные адипоциты обрабатывали или без Torin1 (250 нМ) в течение 10 минут перед обработкой или без инсулина (10 нМ) в присутствии или в отсутствие изопротеренола (0,1 мкМ) в течение 30 минут с последующим добавлением [U- 14 C] -d-глюкоза (10 мкМ) в течение 20 мин. Все анализы содержали аденозиндезаминазу (ADA) (2 единицы / мл). ( B ) Вестерн-блот-анализ передачи сигналов инсулина в первичных адипоцитах мыши WT и ATGL — / — , обработанных, как в A , перед добавлением глюкозы.( C ) Иллюстрация предложенного механизма, связывающего стимуляцию β-адренорецептора с нарушением захвата глюкозы адипоцитами. Каждый график представляет собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего из трех экспериментов. Звездочки указывают на значительную разницу (*** P <0,001).

    Обсуждение

    Главный вывод этого исследования заключается в том, что липолиз резко ингибирует стимулируемое инсулином поглощение глюкозы в адипоцитах. Способность катехоламинов снижать захват глюкозы адипоцитами известна в течение десятилетий и неоднократно подтверждена документально (2-6), но механизм остается неясным.Здесь мы не только показываем, что липолиз необходим для опосредования этого ингибирования захвата глюкозы, но и что механизм ингибирования может происходить через диссоциацию комплексов mTOR и последующее ингибирование стимулируемой инсулином активности Akt. Интересно, что передача сигналов mTOR и комплексная ассоциация восстанавливаются, когда липолиз ингибируется, а липолитические продукты, которые распределяются в органическую фазу, способны напрямую диссоциировать mTOR in vitro, предполагая, что эти липиды могут действовать как сигнальные молекулы для регулирования действия инсулина.Липолитические продукты, произведенные in vitro, также ингибируют mTOR посредством диссоциации, что позволяет предположить, что дальнейшая ферментативная активность не требуется для липолиза, чтобы опосредовать эти эффекты на mTOR. Хотя недавно было показано, что липолитические продукты могут активировать рецепторы, активируемые пролифератором пероксисом (PPAR) α и δ (28), потенциально влияя на передачу сигналов инсулина через экспрессию PTEN, наши открытия, что липолиз не влияет на передачу сигналов инсулина выше mTOR, предполагает, что это не так. механизм инсулинорезистентности в нашей модели.

    Липотоксичность — одна из исследуемых гипотез для объяснения механизмов, с помощью которых ожирение вызывает инсулинорезистентность. Также известная как теория липидных метаболитов, липотоксичность характеризуется избытком липидов, которые могут действовать как сигнальные молекулы, подавляя передачу сигналов инсулина (29–31). Предыдущие данные показали, что инсулинорезистентность часто связана с накоплением липидов в печени и скелетных мышцах, а высокий уровень циркулирующих липолитических продуктов может коррелировать с ожирением и инсулинорезистентностью при диабете 2 типа (32, 33).Важно отметить, что накопление липидов в печени, как было показано, специфически ингибирует передачу сигналов инсулина за счет снижения целостности и активности комплекса mTORC2 (34). Кроме того, уровни базального липолиза повышаются при ожирении (35, 36), а снижение липолиза из-за дефицита липазы у мышей снижает резистентность к инсулину, вызванную диетой (22, 37). Взятые вместе, эти наблюдения предполагают участие липолитических продуктов в развитии инсулинорезистентности, и здесь мы демонстрируем, что липиды, высвобождаемые во время липолиза, оказывают локальное влияние на передачу сигналов mTOR и стимулируемое инсулином поглощение глюкозы в адипоцитах.

    Хотя инсулинорезистентность зависит от действия инсулина во многих тканях, у мышей GLUT4 — / — , специфичных для жировой ткани, развивается системная резистентность к инсулину и гипергликемия (38), тогда как гиперэкспрессия GLUT4, специфическая для жировой ткани, приводит к повышенной чувствительности к инсулину in vivo (39). Это указывает на то, что нарушения действия инсулина только в жировой ткани достаточно, чтобы вызвать инсулинорезистентность всего тела и гипергликемию. Наша предыдущая работа также демонстрирует, что нарушение действия инсулина из-за снижения экспрессии риктора в жировой ткани приводит к инсулинорезистентности всего тела и гипергликемии (11).Взятые вместе, наша работа показывает ингибирование комплекса mTOR как остро регулируемое событие, которое приводит к нарушению передачи сигналов инсулина в адипоцитах, что может влиять на развитие системной инсулинорезистентности. Это исследование также демонстрирует ранее не идентифицированный механизм диссоциации и ингибирования комплекса mTOR липолитическими продуктами. Этот механизм подчеркивает важность липолиза в регуляции клеточных сигнальных событий как потенциального следствия высвобождения запасов энергии.

    В дополнение к механистическим деталям противоположных действий анаболической и катаболической передачи сигналов в жировой ткани, наши результаты напрямую указывают на липолиз как на механизм, лежащий в основе резистентности жировой ткани к инсулину во время острых стрессовых событий, и могут дать представление об инсулинорезистентности, вызванной ожирением.Острая гипергликемия часто развивается после травмы или серьезного хирургического вмешательства, особенно хирургического вмешательства в брюшной полости (40), после тяжелых ожоговых травм или сепсиса. При отсутствии лечения это состояние, называемое гипергликемией, вызванной стрессом, способствует смертности и задерживает заживление послеоперационных больных и пациентов в отделениях интенсивной терапии (41). Хотя влияние стресса на действие инсулина хорошо известно, механистическая связь остается неясной. Реакция на стресс — это эволюционная адаптация, которая сохраняет глюкозу для жизненно важных тканей, таких как мозг, во время травмы.Этот ответ характеризуется быстрой активацией нейроэндокринной и воспалительной систем, вызывающей метаболическое состояние стресса. В результате анаболические процессы подавляются, тогда как катаболические процессы, такие как липолиз, усиливаются, высвобождая субстраты для заживления тканей (41–43). Наше открытие о том, что липолиз играет ключевую роль в снижении передачи сигналов инсулина, предполагает, что он может быть фактором, способствующим развитию гипергликемии, вызванной стрессом.

    У людей с ожирением, хотя катехоламиновая стимуляция липолиза иногда ослаблена, базальные уровни липолиза обычно повышены.Таким образом, помимо острых событий, исследованных в этом отчете, интересно рассмотреть роль липолиза и ингибирования сигнальных путей mTOR в жировой ткани в развитии инсулинорезистентности, вызванной ожирением, с течением времени. Помимо β-адренергической стимуляции, липолиз усиливается воспалительными цитокинами, натрийуретическими пептидами, гормонами роста и кортизолом (44), подчеркивая, что многие факторы могут вносить свой вклад в этот механизм инсулинорезистентности.Хотя мы показали, что острая стимуляция липолиза может ингибировать захват глюкозы за счет диссоциации комплекса mTOR, необходимы дальнейшие исследования для определения вклада липолиза в инсулинорезистентность, вызванную ожирением.

    В этом исследовании мы определили новый механизм передачи сигналов адипоцитов, посредством которого липолитические продукты диссоциируют комплексы mTOR, что приводит к снижению стимулируемого инсулином захвата глюкозы (рис. 6 C ). Эта модель имеет значение для инсулинорезистентности, вызванной ожирением, и гипергликемии, вызванной стрессом, и демонстрирует, что липолитические продукты могут действовать как сигнальные молекулы для регулирования клеточных процессов.Это также дает представление о механизмах противоположной регуляции анаболической и катаболической передачи сигналов в жировой ткани.

    Материалы и методы

    Экстракция липидов и диссоциация mTOR in vitro.

    Адипоциты 3T3-L1 из 6-см планшетов или 100 мкл упакованных изолированных адипоцитов дважды промывали PBS, гомогенизировали в 100 мкл буфера A (1 мМ EDTA, 1 мМ EGTA, 1 мМ DTT, 0,1% Tween 20, 10 мМ фосфат натрия и 50 мМ β-глицерофосфат, pH 7,4), с добавлением 1 мМ фенилметилсульфонилфторида, 10 мкг / мл лейпептина, 10 мкг / мл апротинина, 10 мкг / мл пепстатина и 0.LR микроцистина 5 мкм и гомогенаты центрифугировали при 16000 × g в течение 10 мин. Всего добавляли 400 мкл гексана / этилацетата (1: 1) и смешивали с супернатантами в течение 30 минут с последующим центрифугированием при 8000 × g в течение 2 минут. Водную и органическую фазы разделяли и органический растворитель выпаривали. Высушенный липидный остаток солюбилизировали суспензией в буфере А (содержащий 0,1% Твин 20) и смешивали с флуоресцентно меченным иммунным комплексом mTOR – Raptor или mTOR – Rictor на шариках в течение 30 мин при комнатной температуре.Затем шарики трижды промывали, переносили в 96-луночный планшет и определяли выбросы Венеры и Церулеана. Для обработки липазой in vitro ресуспендированные липиды обрабатывали липазой (2 единицы / мл) в течение 30 минут при комнатной температуре, и липиды реэкстрагировали, как описано. Рекомбинантные флуоресцентно меченые комплексы mTOR-Raptor и mTOR-Rictor были созданы путем временной трансфекции в клетки HEK293T с использованием липофектамина 2000 (Invitrogen). Плазмиды HA-Venus-mTOR и FLAG-Cerulean-Raptor / FLAG-Cerulean-Rictor трансфицировали с использованием 40 и 10 мкг плазмиды на 15-см планшет, соответственно, и липофектамина 2000 при соотношении ДНК: липофектамин 2: 1.

    Статистический анализ.

    Значения выражены как средние значения ± SEM. Сравнение между двумя группами одного и того же лечения (стимулированного инсулином) проводилось с использованием теста Стьюдента t . Сравнения между более чем двумя группами проводились с помощью однофакторного дисперсионного анализа с апостериорным анализом Даннета (INS установлен в качестве контроля). Данные представлены в трех экземплярах из трех отдельных экспериментов, если не указано иное. Значимость обозначена * P <0,05, ** P <0.01, *** P <0,001 или # P <0,0001 соответственно.

    Реагенты антител, культура клеток, вестерн-блоттинг и количественный анализ, уход за животными, выделение первичных адипоцитов, поглощение глюкозы, иммунопреципитация mTOR, очистка mTOR, анализ киназы mTOR, а также измерения глицерина, глицеролипидов и жирных кислот подробно описаны в материалах SI и Методы .

    Благодарности

    Мы благодарим Эвана Таддео за выделение первичных гепатоцитов мыши.Это исследование финансировалось грантами Американской диабетической ассоциации для младших преподавателей 7-11-JF-21 и R01 1R01DK101946 (для TEH), R01 R01DK096076 (для Нидерландов), грантами от бельгийских Fonds de la Recherche Scientifique (для PPR), American Heart Предфинансовая стипендия ассоциации 14PRE20480252 (для GRM) и стипендии Телеви (для С. Бланквэрта).

    Сноски

    • Вклад авторов: G.R.M., L.W., and T.E.H. спланированное исследование; G.R.M., L.W., V.R., S.G.S., R.C.G., S.Борода, J.M.E., S. Blancquaert, and T.E.H. проведенное исследование; G.R.M., L.W. и T.E.H. внесены новые реагенты / аналитические инструменты; G.R.M., L.W., P.P.R., N.L. и T.E.H. проанализированные данные; и G.R.M. и T.E.H. написал газету.

    • Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

    • Эта статья представляет собой прямое представление PNAS.

    • Эта статья содержит вспомогательную информацию на сайте www.pnas.org/lookup/suppl/doi:10.1073/pnas.1410530111/-/DCSupplemental.

    Липолиз — определение, механизм и процесс

    Липолиз Определение

    Липолиз — это процесс расщепления жиров в нашем организме с помощью ферментов и воды или гидролиза. Липолиз происходит в наших запасах жировой ткани — жировых тканях, которые смягчают и выстилают наши тела и органы. Фактически, жиры можно рассматривать просто как запасенную энергию. Жиры готовы и доступны, когда наши запасы глюкозы заканчиваются между приемами пищи, и имеет смысл проводить липолиз, поскольку он будет способствовать перемещению этих накопленных жиров через наш кровоток.Разделение этой «потенциальной энергии» на свободно движущиеся жирные кислоты может затем позволить их использовать или использовать в качестве топлива!

    Липолиз на самом деле связан с различными процессами в нашем организме. Свободные жирные кислоты являются жизненно важными коммуникаторами от клетки к клетке, являются основным ингредиентом глюконеогенеза и клеточного дыхания и могут активировать транскрипцию белков, таких как разобщающие протонные каналы, выстилающие нашу митохондриальную мембрану, что будет препятствовать синтезу АТФ без нарушения дыхательной цепи. .В общем, липолиз — это ключевой биологический процесс, поддерживающий жизнь; хотя в последнее время он получил новое значение в косметических клиниках по всему миру из-за его обещания избавиться от нежелательного жира! Хотя, по их тезке, оба процесса технически «лизируют» или расщепляют жиры, способ, которым они достигают этого, очевидно отличается — последний использует холодные лазеры или тепло для уменьшения жировых клеток.

    Механизм липолиза

    Триглицериды, несомненно, являются основной энергетической молекулой в эукариотических клетках.Триглицерид — это производное глицерина, которое хранится в виде липидных капель в наших жировых тканях, и здесь происходит липолиз. Давайте начнем с описания липолиза в общих чертах. Эти липидные капли сначала подвергаются действию липолитических ферментов, которые строго регулируются и будут получать доступ к этим каплям в случае фосфорилирования.

    Эти липазы будут последовательно гидролизовать наши триглицериды до их компонентов глицерина и жирных кислот, пока у нас не останутся только глицерины, и это происходит с тремя ферментативными реакциями.Расщепление жиров называется бета-окислением или окислением «жирных кислот», потому что триглицериды окисляются до самых основных функциональных частей. Таким образом, у нас остаются свободные жирные кислоты и глицерин, которые могут войти в другие метаболические пути или найти новую цель. Давайте углубимся в детали.

    Рисунок 1

    На изображении изображен механизм липолиза, расщепление триглицеридов на жирные кислоты и глицерин.

    Первая и ограничивающая скорость стадия липолиза включает фермент липазу триглицерида жировой ткани (или ATGL), которая чувствительна к гормонам.ATGL гидролизует наш триацилглицерин в диацилглицерин, теряя свободную жирную кислоту, которая будет свободно мобилизоваться в нашем кровотоке. На полученный диацилглицерин затем воздействует гормоночувствительная липаза (HSL), которая удаляет другую жирную кислоту с образованием молекулы моноацилглицерина. Наконец, моноацилглицерин липаза (MGL) будет расщеплять монацилглицерин до единственной молекулы глицерина.

    На рисунке ниже показаны основные «судьбы», если хотите, образующихся жирных кислот и глицерина.Жирные кислоты могут подвергаться бета-окислению и превращаться в ацетил-КоА. Конечно, ацетил-КоА наиболее известен как жизненно важная стартовая молекула, которая запускает цикл Кребса в клеточном дыхании. Это перепрофилирование жизненно важно, когда запасы глюкозы низки во время голодания или даже между приемами пищи, поскольку клеточное дыхание может продолжать работать и поддерживать жизнь. Точно так же свободный глицерин может вступать в процесс гликолиза. Обычно глюкоза превращается в G6P на первом этапе гликолиза. В случае низкого уровня глюкозы глицерин будет преобразован в дигидроксиацетонфосфат и войдет в процесс гликолиза во второй контрольной точке, чтобы поддерживать процесс гликолиза.Таким образом, жиры являются лучшим запасом энергии, поскольку они обеспечивают продолжение клеточного дыхания и выработку АТФ.

    Рисунок 2

    На рисунке показан липолиз и пути, по которым жирные кислоты и компоненты глицерина принимают.

    Регламент липолиза

    Как и любой жизненно важный биологический процесс, липолиз регулируется в соответствии с нашими потребностями. В любой момент было бы чрезвычайно вредно иметь тонны свободных жирных кислот, протекающих через наш кровоток. Это подтвердит любой человек с высоким уровнем холестерина или артериальными бляшками.Таким образом, липолиз — и его обратный процесс, липогенез — необходимо противодействовать регулированию и иметь высокую чувствительность к уровням определенных гормонов и белков. Например, стимулирующие гормоны, такие как адреналин, норадреналин, кортизол, глюкагон и гормон роста , вызывают липолиз . Ключевые гормоны глюкагон и адреналин будут использовать одни и те же пути для индукции липолиза с небольшими различиями.

    И глюкагон, и адреналин будут служить лигандами, которые будут связываться с рецепторами, связанными с G-белком, на поверхности жировых клеток.Затем G-белки активируют аденилатциклазу и активируют превращение АТФ в цАМФ. Мы могли бы признать цАМФ широко распространенным вторичным посредником многих других биологических путей. Точно так же здесь цАМФ активирует протеинкиназу A (PKA), которая будет расходовать молекулу АТФ на фосфорилирование и повышающую регуляцию активности гидролиза нашего фермента HSL, также известного как наш второй фермент в пути липолиза. В результате у нас остаются свободные жирные кислоты и глицерин, которые затем могут вступать в метаболические пути, например, для противодействия низкому содержанию сахара в крови.Понятно, что HSL считался ферментом, определяющим скорость липолиза, в течение некоторого времени до того, как TAG липаза (или ATG, наш первый фермент) была открыта как ключевой липолитический этап инициативы. Давайте быстро разберемся, почему глюкагон и адреналин могут запускать липолиз.

    Глюкагон-индуцированный липолиз

    Глюкагон — это пептидный гормон, который синтезируется клетками поджелудочной железы в случае падения глюкозы и, следовательно, уровня инсулина. Затем глюкагон заставит нашу печень разрушить запасы гликогена и высвободить столь необходимую глюкозу в нашу кровь.И наоборот, когда у нас высокий уровень глюкозы и инсулина, инсулин у здоровых людей позволяет глюкозе выходить из кровотока и поглощаться инсулинозависимыми тканями. Конечно, у диабетиков ткани больше не будут хорошо реагировать на инсулин, и этот сахар не достигнет тканей и вместо этого вызовет хаос в кровотоке.

    Если вернуться к липолизу, запасы глюкагона невелики и быстро расходуются. С другой стороны, жировые запасы огромны и готовы к использованию.Здесь ключевую роль играет глюкагон. Глюкагон будет связываться с рецепторами, связанными с G-белком глюкагона, на мембранах жировых клеток и запускать путь активации HSL, описанный ранее. Высвобождающийся глицерин может затем попасть в печень или почки, где он в конечном итоге превратится в GA3P и войдет в гликолиз и наш путь глюконеогенеза для синтеза остро необходимой глюкозы (см. Рисунок 2).

    Липолиз, индуцированный адреналином

    Рис. 3

    Диаграмма конкретно иллюстрирует липолиз, индуцированный адреналином через G-белок опосредованный путь.

    Адреналин также будет связывать рецепторы G-белка на мембранах жировых клеток, однако они будут специфически связывать бета-адренорецепторы. Это связывание также приведет к фосфорилированию гормоночувствительной липазы под действием цАМФ / PKA, что в конечном итоге приведет к высвобождению свободных жирных кислот и глицерина. Адреналин известен своей связью с нашей инстинктивной реакцией «бей или беги». Это гипервозбуждение возникает, когда мы воспринимаем нападение или угрозу нашему выживанию. Таким образом, логично предположить, что адреналин запускает липолиз и, как следствие, ускорение метаболических процессов.Если мы когда-нибудь будем голодать, наше тело непременно отреагирует на эту угрозу и использует запасы жировой энергии, чтобы отреагировать и поддержать жизнь любой ценой.

    Липолиз в популярной культуре

    Как вкратце упоминалось выше, забавным фактом является то, что липолиз стал популярным термином в косметическом мире. Не следует путать с путями липолиза жировой ткани, подробно описанными в этой статье, лазерный липолиз и даже инъекционный липолиз — это клинически проверенные методы уменьшения количества жировых клеток без операции липосакции.Неинвазивное уменьшение жира стало новым косметическим продуктом и обещает воздействовать на жировые клетки за счет использования тепла, охлаждения (с помощью лазеров или радиочастоты) или, что реже, инъекций дезоксихолевой кислоты без нарушения окружающих тканей.

    Тест

    1. Какой из следующих ферментов является ферментом, определяющим скорость липолиза?
    A. HSL
    B. ATGL
    C. MGL
    D. Ни один из вышеперечисленных

    Ответ на вопрос № 1

    B правильный.Как упоминалось выше, исследователи обнаружили, что первый этап липолиза, опосредованный ATGL, по совпадению является этапом, определяющим скорость липолиза. Ранее считалось, что это HSL, поскольку он подвергается фосфорилированию.

    2. Что из следующего вызывает липолиз?
    A. Высокий уровень инсулина / низкий уровень адреналина
    B. Высокий уровень инсулина / высокий уровень адреналина
    C. Низкий уровень инсулина / высокий уровень адреналина
    D. Низкий уровень инсулина / низкий уровень адреналина

    Ответ на вопрос № 2

    C правильный.Низкий уровень инсулина и высокий уровень адреналина вызывают липолиз. Это имеет смысл, если наше тело постоянно реагирует на обратную связь. Когда уровни глюкозы и инсулина низкие, нам нужны жиры для поддержания глюконеогенеза и клеточного дыхания. Высокий уровень адреналина возникает перед лицом угрозы для жизни, которая потребует согласованного расходования жировой энергии.

    Ссылки

    • Binienda, Z et al. «Роль свободных жирных кислот в физиологических условиях и митохондриальной дисфункции.”SCIRP: Food and Nutrition Sciences, Vol. 4 No. 9A, 2013. Источник:
    • Американское общество пластических хирургов (2018). «Нехирургическое уменьшение жира: минимально инвазивные процедуры». Plasticsurgery.org. По состоянию на 29 мая 2018 г. по адресу
    • Ward, Colin (2015). «Липолиз и липогенез». Диапедия: 51040851148 рев. нет.17. По состоянию на 29 мая 2018 г. по адресу
    • Engelking, Larry R. (2014). «Глава 70 — Липолиз». Учебник ветеринарной физиологической химии (3-е издание), страницы 444-449. По состоянию на 30 мая 2018 г. по адресу
    • Fruhbeck, G et al. «Регулирование липолиза адипоцитов». Nutr Res Rev.2014 июн; 27 (1): 63-93. Doi: 10.1017 / S095442241400002X

    Антилиполитическое действие толбутамида на коричневые жировые клетки — Scholars @ UT Health San Antonio

    TY — JOUR

    T1 — Антилиполитическое действие толбутамида на коричневые жировые клетки 9000 —

    Fain , Джон Н.

    AU — Rosenthal, Judith W.

    AU — Ward, Walter F.

    PY — 1972/1

    Y1 — 1972/1

    N2 — Толбутамид блокировал липолитическое действие эпинефрина, теофиллина и дибутирил-3 ‘, 5’-АМФ на бурых жировых клетках. Не было корреляции между содержанием циклического АМФ или АТФ в коричневых жировых клетках и способностью толбутамида ингибировать липолиз. В присутствии адреналина толбутамид усиливал циклическое накопление, но ингибировал липолиз. Концентрация адреналина, которая вызывала максимальную активацию липолиза, оказывала лишь небольшое влияние на циклический АМФ.Теофиллин не усиливал липолитическое действие адреналина, но заметно увеличивал накопление циклического АМФ. Толбутамид оказывал незначительное влияние даже в концентрации 1 мг / мл на активность растворимой фосфодиэстеразы циклического АМФ гомогенатов бурых жировых клеток. Ингибирование липолитического действия дибутирил-3 ‘, 5’-АМФ толбутамидом и обнаружение того, что толбутамид может увеличивать накопление циклического АМФ в условиях, когда ингибируется липолиз, позволяют предположить, что он влияет на системы, участвующие в действии, а не на накопление циклического АМФ. AMP в коричневых жировых клетках.

    AB — Толбутамид блокировал липолитическое действие адреналина, теофиллина и дибутирил-3 ‘, 5’-АМФ на коричневые жировые клетки. Не было корреляции между содержанием циклического АМФ или АТФ в коричневых жировых клетках и способностью толбутамида ингибировать липолиз. В присутствии адреналина толбутамид усиливал циклическое накопление, но ингибировал липолиз. Концентрация адреналина, которая вызывала максимальную активацию липолиза, оказывала лишь небольшое влияние на циклический АМФ. Теофиллин не усиливал липолитическое действие адреналина, но заметно увеличивал накопление циклического АМФ.Толбутамид оказывал незначительное влияние даже в концентрации 1 мг / мл на активность растворимой фосфодиэстеразы циклического АМФ гомогенатов бурых жировых клеток. Ингибирование липолитического действия дибутирил-3 ‘, 5’-АМФ толбутамидом и обнаружение того, что толбутамид может увеличивать накопление циклического АМФ в условиях, когда ингибируется липолиз, позволяют предположить, что он влияет на системы, участвующие в действии, а не на накопление циклического АМФ. AMP в коричневых жировых клетках.

    UR — http: // www.scopus.com/inward/record.url?scp=0015262751&partnerID=8YFLogxK

    UR — http://www.scopus.com/inward/citedby.url?scp=0015262751&partnerID=8YFLogxK

    02 U2-90- 10.12 1-52

    DO — 10.1210 / endo-90-1-52

    M3 — Артикул

    C2 — 4333014

    AN — SCOPUS: 0015262751

    VL — 90

    SP — 52

    EP — 59

    JO — Эндокринология

    JF — Эндокринология

    SN — 0013-7227

    IS — 1

    ER —

    липолитическое действие — Итальянский перевод — Linguee

    Растительная джалуроновая кислота, которая помогает поддерживать кожу мягкой и увлажненной, и GemmoSlim, экстракт почек фикуса

    […]

    Carica (обыкновенный инжир), который

    […] выполняет интерес ti n g липолитическое действие , u se для борьбы […]

    образование жировых отложений.

    натур. Пос.

    Acido Jaluronico Vegetale, che aiuta a mantenere morbida e idratata la pelle e GemmoSlim, un estratto delle

    […]

    gemme di Ficus Carica, Che svolge

    […] un’inte re ssant e attività lipolitica, uti le per c ontrastare […]

    la formazione dei cuscinetti di grasso.

    натур. Пос.

    Процедура может быть адаптирована для достижения максимальной пользы для вашего

    […] кожа и ее особые потребности: тонизирование, дренаж e o r липолитическое действие .

    unahotels.it

    Il trattamento è personalizzabile

    […]

    rendendo pi spiccata, a seconda delle caratteristiche del

    […] soggett o tratta to, l ’ azione t oni fic ante, d r en ante oppre 73 Lip

    unahotels.it

    Наконец, t h e липолитическое действие o f t его программа […]

    направлен на запуск энергетических механизмов, использующих жирные кислоты в качестве субстрата

    […]

    для биохимических реакций, что способствует их устранению.

    vupiesse.com

    I nf ine l ’ azione lipolitica di q ues до pr и ramma è […]

    mirata all’attivazione dei meccanismi energetici — migliorare il circolo

    […]

    (косметические «рискалданти» или «вазотониканти»)

    vupiesse.com

    Когда развитие целлюлита перешло в стадию 3, навсегда оседая в дерме, оно составляет

    […]

    необходимо для интеграции

    […] дренажное действие с эффективным т.е. n t липолитическое действие i n o rder для разрушения жировой ткани […]

    с особо эффективной обработкой.

    helan.это

    Quando il processo cellulitico si è evoluto sino al terzo stadio insinuandosi

    […]

    стабильная дерма è

    […] needario in te grare l ‘ azione d ren ante co n un’ener gi ca a ttiv it липол agr edir e gli аккумулятор […]

    adiposi cont trattamenti

    […]

    specifici e di sicura efficacia.

    helan.it

    Жидкий и кристаллический жир с консистенцией и прозрачностью геля, но с мягкостью и удобоукладываемостью масла, что позволяет долго и

    […]

    эффективный массаж, сочетающий необходимые мануальные навыки с проникновением

    […] активные вещества имеют нг и липолитическое действие .

    beautyspa.it

    Un grasso fluido e cristallino con la consistenza e la trasparenza di un gel ma la morbidezza e la lavorabilità di un olio per consentire un lunged

    […]

    efficace Massaggio Che combina alla specifica manualità la capacity di far

    […] Penetrare pri NC ipi a tti vi ad azione lipolitica .

    beautyspa.it

    Содержит ферменты папайи, морских водорослей аозаин, родистерин-красных водорослей с st ro n g липолитическим действием .

    esensamediterana.com

    Contiene enzimi di papaia, alg he (Aosaina, Rhodysterol ) ed estratti Vegetali (estratto di Mate).

    esensamediterana.com

    Средство двойного действия уменьшает целлюлит

    […]

    жировых отложений, помогает

    местных […] микроциркуляция и стимуляция la t e липолитическое действие f o r a тонизировано и реконструировано […]

    контур тела.

    atahotels.it

    Trattamento cel lu lite doppia azione str aordi na riam en te efficace pe r исключить […]

    i depositi adiposi e migliorare la microcircolazione cutanea.

    atahotels.it

    Эффект сауны за счет воздействия тепла,

    […]

    стимулирует кровеносные сосуды к расширению и поглощению

    […] активные ингредиенты wi t h липолитическое действие a n d ускоряет удаление жира.

    helan.it

    L’Effetto Sauna, mediante l’azione del calore, agevola la dilatazione

    […]

    dei vasi sanguigni e l’assorbimento di

    […] Принцип ii Att ivi ad azione lipolitica, pe r a ccele ra re lo […]

    scioglimento dei grassi.

    helan.it

    Основа лечения — морские водоросли, кофеин, коллаген, эластин, отборные растительные экстракты и витамины А,

    […]

    C, E: комбинация

    […] что улучшает восстановление a n d липолитическое действие o f t he активные ингредиенты, […]

    при специальном массаже

    […]

    уменьшает скопление жира и реконструирует ткани.

    gerards.it

    Protagonisti del trattamento: Alghe, Caffeina, Collagene, Elastina, estratti Vegetali selezionati,

    […]

    Витамин A, C, E: la

    […] loro siner gi a pote nzi a l ’azione rid ucente e lipolitica de i r ..]

    mentre un Massaggio Mirato

    […]

    scioglie gli exculi e rimodella i tessuti.

    gerards.it

    Это h как a липолитический a c ti влияние на жировые клетки и d a n n t транспорт глюкозы.

    etatpur.co.uk

    Svolge un ‘at tiv ità lipolitica s ull ec ellul e ad ipos ee порт или дель глюкозио.

    etatpur.it

    Органолептические свойства: типичный вкус мясного продукта с

    […]

    Достаточный протеолитический распад

    […] в постных частях a n d липолитических b r ea k вниз в жирных […]

    детали, в связи с хорошим созреванием, без

    […]

    посторонняя карболовая кислота, рыбная мука или другая мука и необходимая степень влажности; запах и отдушки из приятного аромата, характерного для продукта, высвобождаются при прокалывании жирных частей — а не постных частей около основной вены — иглой из конской кости; консистенция продукта на ощупь при нарезке по центру, чему способствует снятие оболочки, не жирный и не имеет патины на поверхности; внутренняя и внешняя части однородны, что является признаком правильного постепенного обезвоживания и созревания; цвет среза однородный, без пятен; постные части красные, а жирные — розоватые.Продукт требует периода созревания не менее 60 дней.

    eur-lex.europa.eu

    Organolettiche: il sapore tipico di un prodotto carneo con

    […]

    sufficiente degradazione

    […] proteolitica sull a parte ma gra e lipolitica ne lla pa rte g ra ssa, dovute […]

    ad una buona stagionatura,

    […]

    non presenta sapori estranei di acido fenico, farina di pesce o altro, ed ha un giusto grado di sapidità; l’odore e il profumo di una gradevole Fragranza caratteristica del prodotto, sono rilevanti mediante steccatura con osso di cavallo sulle parti grasse e non su quelle magre, vicino alla vena Principale; la consistenza al tatto e al taglio media, Facility distacco del budello, non mostra untuosità o patina superficiale, Presenta omogeneità tra le parti interne ed esterne, index dell’avvenuta gradient disidratazione e stagionatura; «Цветные цветы», «Приватные макки и униформа»; di colore rosso nella parte magra e tendenzialmente roseo nella parte grassa.

    eur-lex.europa.eu

    Эмульгирование позволяет увеличить объем поверхности

    […] Отношение

    , улучшающее

    […] абсорбция липидов и t h e action o f t h e липолитик zy mes, которые действуют на […]

    поверхность липидных капель.

    tecnologie-mediche.com

    Эмульсификация, позволяющая добавлять в отчет

    […]

    суперфайлы favorendo

    […] l’assorbimento de i lipid i e l ’ azione d egl i enzi mi lipolitici ch 11 g..]

    delle gocce lipidiche.

    tecnologie-mediche.com

    ß-рецепторы также можно подразделить на ß1, ß2 и ß3 типы, последние

    […]

    , из которых строго считается

    […] отвечает за t h e липолитический a n d термогенные эффекты […]

    адренорецепторов, при взаимодействии

    […]

    с двумя другими типами ß-рецепторов, как известно, контролирует сердечные эффекты.

    biovea.net

    Бета-приемники могут иметь скрытые суддивизи неи типов Бета-1, Бета-2 и Бета-3, несколько качеств и

    […]

    ampiamente ritenuto essere il

    […] ответственный de gli eff tt i lipolitici e t ermo geni ci degli […]

    agentti adrenergici, mentre le Interazioni

    […]

    с другими типами бета-рецептов с уведомлениями для контроля над эффективностью сердца.

    biovea.com

    Caffein e, a липолитический a c ti ve признан за его похудение […]

    properties, активный ингредиент в косметических продуктах для борьбы с целлюлитом.

    etatpur.co.uk

    La caffe in a, s osta nz a lipolitica n ot a pe r le s ue proprietà […]

    снелленти, является основным принципом использования косметических продуктов против целлюлита.

    etatpur.it

    Массажный номер le d « Action 3 » f acilitates t h e lipolytic fe карат фукуса, кофеина и кайенского перца.

    atahotels.it

    Un massagg io den min ato «Action 3» f вокруг risce l ‘ eff ett o lipolitico Fucie , d el la Caffeina […]

    e del Peperoncino di Caienna.

    atahotels.it

    В нескольких исследованиях было обнаружено липолитический e f или центов кортизола, хотя […]

    при некоторых условиях кортизол может несколько подавлять липолиз.

    weneedideas.ca

    Diversi studi Hanno

    […] dimos tr ato un ef fet to lipolitico di co rtiso lo , anche […]

    , в котором содержится много ингредиентов, кортизола, способного сопрягать унпо-ла-липолиз.

    weneedideas.ca

    Внешний вид «Salva Cremasco» характеризуется наличием тонкой корки, состоящей из поверхностной микрофлоры, которая во время созревания позволяет

    […]

    Другие формы аборигенных микробов

    […] отвечает за спецификацию if i c липолитический a n d протеолитическая активность […]

    , который будет учрежден позже.

    eur-lex.europa.eu

    L’aspetto del «Salva Cremasco» противоречит определению для присутствия унылой Crosta costituita da una microflora di superficie che nel corso della stagionatura

    […]

    сохранить успешный импианто другой формы microbiche autoctone che

    […] svolgono speci fi ca at tiv ità lipolitica e pr ote oliti ca .

    eur-lex.europa.eu

    Весь день посвящен процедурам для похудения: ваша цель — почувствовать себя легче и подтянуться с помощью специальных процедур и массажа, направленных на удаление локализованного жира и формирование фигуры.Для лечения используется зеленый

    . […]

    кофе, семена которого богаты

    […] вещества, известные как t he i r липолитические e f fe cts, а кофеин […]

    способствует увеличению обмена веществ.

    vspa.it

    La giornata — это посвященное всем, что касается: oggi il vostro obiettivo è sentirvi più leggeri e in forma, cont trattamenti e massaggi ad hoc, исключение местных языков и моделирование силуэта, anche grazie al caffè verde, i

    […]

    cui semi sono notoriamente ricchi di

    […] sostan ze ad eff tt o lipolitico e d alla caf fe ina che […]

    способствует ускорению метаболизма.

    vspa.it

    (1967) ранее продемонстрировал, что

    […] октопамин имел ca n t липолитический e f fe ct, но этот синефрин […]

    был примерно в 3,5 раза мощнее,

    […]

    также указывает на то, что эти компоненты Advantra Z® обладают высокой специфичностью в отношении β3-рецепторов.

    biovea.net

    (1967) aveva prevdentemente dimostrato che l’octopamina aveva un

    […] signifi ca tivo eff ett o lipolitico, ma che la s in efrina […]

    эпохи около 3,5 вольт-пикового напряжения;

    […]

    указывает на то, что эти компоненты Advantra Z® имеют уникальную специфику для рецепторов Beta-3.

    biovea.com

    Синефрин активирует бета-3

    […] адренорецепторы и диспла ys a липолитический a n d термогенетическая емкость […]

    , поскольку он повышает уровень норадреналина.

    prozis.com

    La Sinefrina attiva i

    […] beta-3-adrenocettori e h a una c apa cit lipolitica e ter mog enica i n quanto […]

    aumenta i livelli di norepinefrina.

    prozis.com

    стимулирует микроциркуляцию Ультразвук включает расширение и сжатие кристалла с пьезоэлектрическими свойствами

    […]

    для создания звуковых волн очень высокой частоты, микромассажных тканей кожи человека

    […] с высокоэффективным ti v e липолитическим e f fe ct.

    mayabeauty.com

    Gli ultrasuoni, onde sonore ad altissima freza prodotte dalla

    […]

    Расширение и сжатие кристаллов

    […] proprietà piezo -elettriche, eser ci tano un […]

    micromassaggio sul tessuto umano.

    mayabeauty.com

    Мат является предметом специального немецкого исследования, в котором перечислены все его применения, по сравнению с

    […]

    физических и умственных усилий и результаты аналептиков, диуретиков, положительных инотропных и

    […] chronotro pi c , липолитический a n d гликоген.

    naturdieta.com

    Мой приятель — это создатель одной студии, специфической для Tedesco Che Elenca Tutti i Suoi Impieghi,

    […]

    contro lo sforzo fisico e mentale e gli esiti analettici, diuretici, inotropi e

    […] cronotropi positiv i, glic oge no e lipolitici .

    naturdieta.com

    Само собой разумеется, что это, в свою очередь, улучшает

    […] антикатаболический / анаболический a n d липолитический e f fe кумароилдопамина […]

    и кофеолдопамин.

    prozis.com

    È chiaro che a sua volta questo porta al massimo gli effetti

    […] anticatabolici / anab olic i e lipolitici d i coum aroi ld opamina […]

    е кофеоилдопамина.

    prozis.com

    Далее следует заявка

    […]

    роскошного современного геля с 23-каратным золотом, кофеином, карнитином, эсцином и

    […] коэнзим, wi t h липолитический r e su lts.

    termedisaturnia.it

    Applicazione di un lussuoso e avanzato gel con oro 23 carati, caffeina, carnitina, escina e

    […] coenzima A p er ​​un ef fet to lipolitico .

    termedisaturnia.it

    Их функция — развитие аромата продукта, а

    […] вкус через t он i r липолитический a n d протеолитический эффект, […]

    стабилизация цвета и ограничение подкисления

    eur-lex.europa.eu

    La loro funzione и sviluppare il sapore e l’aroma

    […] attve rs o l ’ az ion e lipolitica e pr ote oliti ca con стабилизатор […]

    del colore e controllo dell’acidificazione

    eur-lex.europa.eu

    Драгоценная биогрязь для похудения и дренажа содержит хлореллу

    […]

    водорослей, люпин белый и

    […] форсколин, эспертина с hi g h липолитик a c ti vity.Ростки пшеницы […]

    масло питающее кожу и

    […]

    улучшает нанесение массажа, улучшая проникновение продуктов.

    golfnspa.it

    Il prezioso bio-fango ad azione snellente e drenante contiene alga clorella,

    […]

    lupino bianco, индийская фосколина, ред

    […] espertina a fort e az io ne lipolitica, l oli o di g erme di […]

    Grano Nutre la pelle e Favorisce

    […]

    l’esecuzione del massaggio per una migliore пенетрационе деи продуктов.

    golfnspa.it

    Статья 5 (3) Регламента Совета (ЕС) № 44/2001 от 22 декабря 2000 г. о юрисдикции, признании и исполнении судебных решений по гражданским делам и

    […]

    по коммерческим вопросам должно быть

    […] интерпретируется как означающее, что t a n действие r e la ссылка на нарушение […]

    товарного знака, зарегистрированного в

    […]

    Государство-член из-за использования рекламодателем ключевого слова, идентичного этой торговой марке, на веб-сайте поисковой системы, работающем под национальным доменом верхнего уровня другого государства-члена, может быть передано в суды любого государства-члена. в котором зарегистрирован товарный знак, или суды государства-члена по месту учреждения рекламодателя.

    eur-lex.europa.eu

    L’articolo 5, punto 3, del regolamento (CE) n.44/2001 del Consiglio, del 22 dicembre 2000, Concerente lacomptenza giurisdizionale, il riconoscimento e l’esecuzione delle Decisioni in materia civile e

    […]

    commerciale, Deve Essere Interceptato nel

    […] senso c he d i un a controversia r elat iva al la violazione […]

    di un marchio registrato in

    […]

    uno Stato membersro a causa dell’uso, da parte di un insertzionista, di una parola chiave identity a detto marchio sul sito Internet di un motore di ricerca operante con un dominio nazionale di primo livello di un altro Statombro Possono Essere Investiti sia i giudici dello stato members in cui story marchio è registrato, sia i giudici dello stato members luogo di stabilimento dell’inserzionista.

    eur-lex.europa.eu

    О правильном толковании первого предложения первого абзаца статьи 1 Конвенции от 27 сентября 1968 г. о юрисдикции и приведении в исполнение судебных решений по гражданским и торговым делам с поправками, внесенными Конвенцией от 9 октября 1978 г. о присоединении к Королевство Дания, Ирландия и Соединенное Королевство Великобритании и Северной Ирландии, Конвенцией от 25 октября 1982 года о присоединении Греческой Республики и Конвенцией от 26 мая 1989 года о присоединении Королевства Испании и Португальской Республики , «гражданские дела»

    […]

    в значении данного положения

    […] не распространяется на , например, a l действие b r или ght физическими лицами […]

    в Договаривающемся государстве против

    […]

    другому Договаривающемуся Государству о компенсации за убытки или ущерб, понесенные правопреемниками жертв действий, совершенных вооруженными силами в ходе войны на территории первого Государства.

    eur-lex.europa.eu

    L’art. 1, primo comma, prima frase, della Convenzione 27 settembre 1968, Concerente la comptenza giurisdizionale e l’esecuzione delle delle Decisioni in materia civile e commerciale, come modificata dalla Convenzione 9 ottobre 1978, relativa all’adesioneca del Regno di Danimarland e del Regno Unito di Gran Bretagna e Irlanda del Nord, dalla Convenzione 25 ottobre 1982, relativa all’adesione della Repubblica ellenica, e dalla Convenzione 26 maggio 1989, relativa all’adesione del Regno di Spagna e della Repubblica translate portoghesese nel senso che non rientra

    […]

    nella «materia civile», ai termini di

    […] сказка di sposi zio ne, un’azione giu diz ial e pro mo ssa da […]

    человек, занимающийся рыбной ловлей в uno Stato contraente

    […]

    nei confronti di un altro Stato Contraente e Volta ad ottenere il risarcimento del danno subìto dagli aventi diritto delle vittime di azioni delle forze armate nell’ambito di operazioni di Guerra sul Territorio del Primo Stato.

    eur-lex.europa.eu

    В c iv i l действие f i le d против […]

    Farmoplant (ныне Эдисон) провинции Масса-Каррара и муниципалитетов Масса

    […]

    и Carrara за ущерб, причиненный аварией, произошедшей на предприятии Farmoplant в Массачусетсе в 1988 году, суд Генуи отклонил ходатайства истцов с просьбой о том, чтобы суд запросил мнение технического эксперта и назначил слушание для ответа на окончательные аргументы. .

    edison.it

    N ell ‘azione civ ile Promossa co ntro […]

    Farmoplant (ora Edison) в провинции Масса-Каррара и в общинах Масса-и-ди-Каррара

    […]

    за все данные, полученные в результате согласования всех видов прессы, стабилизации Farmoplant, в Массачусетсе, 1988 года, в суде Генуи, ответственного за использование современной технической информации для управления заключением судебного разбирательства.