Воскресенье , 22 мая 2022
Главная / Разное / Ботулотоксин типа а что это: Ботулотоксин типа А (БТА)

Ботулотоксин типа а что это: Ботулотоксин типа А (БТА)

Содержание

Ботулотоксин типа А

Ботулинотоксин типа А является снижающим сократимость мышц веществом. Действие осуществляется за счет блокировок нервного импульса. На мышцы оказывается расслабляющий эффект, за счет чего снижается тонус в области лба и бровей. Это позволяет быстро убрать горизонтальные и вертикальные морщины, разглаживают лицо. Расслабление мимических мышц позволяет в минимальные сроки достигнуть эффект омоложения.

Изначально ботулинотоксин типа А использовали для лечения косоглазия и прочих заболеваний. Однако позже был обнаружен эффект омоложения при вводе препарата, и он стал активно применяться в индустрии красоты.

На сегодняшний день наиболее востребованными инъекциями являются препараты Ботокс, Дипорт, Лантокс и прочие. Такие средства эффективны не только для разглаживания морщин, но и используются для снижения потливости подмышек.

Введение препарата оказывает прямое воздействие на нервную систему человека. Поэтому процедуры должен выполнять сертифицированный специалист с медицинским образованием.

Препараты вводятся под кожу при помощи специальных игл. В некоторых случаях используется анестезирующий крем для снижения болевых ощущений.

Курсы «Ботулинотоксин типа А»

Эффективное действие ботулинотоксинов типа А привело к постоянному росту популярности препарата как среди мужчин, так и среди женщин. Поэтому косметолог с навыками использования таких препаратов всегда будет пользоваться спросом у клиентов.

Академия образования «Планета красоты» подготовила курсы «Ботулинотоксин типа А», на котором студент получат все необходимые навыки для работы с препаратом. Заведение имеет все необходимые лицензии для проведения образовательной деятельности в данной сфере.

Занятия проводят опытные специалисты-практики по специально разработанной программе. Для отработки навыков приглашаются живые модели, что дает опыт работы с реальными клиентами. После успешного прохождения курса выдается сертификат международного образа.

Программа курса охватывает следующие темы:

  1. Введение.
  2. Механизм действия препаратов на основе ботулотоксина типа А.
  3. Показания и противопоказания.
  4. Обзор современных препаратов представленных на косметологическом рынке и их особенности.
  5. Разведение и хранение препаратов.
  6. Коррекция горизонтальных морщин лба: схема введения препарата и анатомические особенности области.
  7. Коррекция межбровной области: схема, дозировки.
  8. Коррекция периорбитальной области: схема, дозировки.
  9. Лечение гипергидроза: особенности разведения и введения препарата.
  10. Протокол процедуры.
  11. Рекомендации пациентам после процедуры.

 

Ботулизм

\n

\nСпоры, вырабатываемые Clostridium botulinum устойчивы к высоким температурам и широко распространенные в окружающей среде. При отсутствии кислорода эти споры прорастают, развиваются и начинают выделять токсины. Существует 7 разных форм ботулотоксина – типы A – G. Четыре из них (типы A, B, E и в редких случаях F) вызывают ботулизм человека. Типы C, D и E вызывают болезнь у млекопитающих, птиц и рыб.

\n

\nБотулотоксины попадают в организм при потреблении продуктов, не прошедших надлежащую обработку, в которых бактерии или споры выживают и вырабатывают токсины. Основной причиной ботулизма человека является пищевая интоксикация, но он может быть вызван кишечной инфекцией у детей грудного возраста, раневыми инфекциями и в результате вдыхания.

\n

Симптомы пищевого ботулизма

\n

\nБотулотоксины нейротоксичны и поэтому оказывают воздействие на нервную систему. Для пищевого ботулизма характерен нисходящий вялый паралич, который может приводить к дыхательной недостаточности.

\n

\nРанними симптомами являются сильная утомляемость, слабость и головокружение, за которыми обычно следуют затуманенное зрение, сухость во рту, а также затрудненные глотание и речь. Могут также иметь место рвота, диарея, запор и вздутие живота. По мере прогрессирования болезни может появляться слабость в шее и руках, после чего поражаются дыхательные мышцы и мышцы нижней части тела. Температура не повышается и потери сознания не происходит.

\n

\nПричиной этих симптомов является не сама бактерия, а вырабатываемый ею токсин. Симптомы обычно появляются через 12–36 часов (минимум через 4 часа и максимум через 8 дней) после экспозиции. Показатели заболеваемости ботулизмом низкие, но показатели смертности высокие в случае, если не будет быстро поставлен правильный диагноз и незамедлительно предоставлено лечение (введение на ранних стадиях антитоксина и интенсивная искусственная вентиляция легких). Болезнь может заканчиваться смертельным исходом в 5–10% случаев.

\n

Экспозиция и передача

\n

Пищевой ботулизм

\n

\nC. botulinum является анаэробной бактерией — это означает, что она может развиваться только при отсутствии кислорода. Пищевой ботулизм развивается в случае, когда бактерии C. botulinum растут и вырабатывают токсины в пищевых продуктах до их потребления. C. botulinum вырабатывает споры, которые широко распространены в окружающей среде, включая почву, а также речную и морскую воду.

\n

\nРост бактерий и выработка токсина происходят в продуктах с низким содержанием кислорода и при определенном сочетании температуры хранения и параметров консервации. Чаще всего это происходит в пищевых продуктах легкой консервации, а также в продуктах, не прошедших надлежащей обработки, консервированных или бутилированных в домашних условиях. В кислой среде (pH менее 4,6) развития C. botulinum не происходит, и поэтому в кислых продуктах токсин не вырабатывается (однако низкий уровень pH не разрушает токсинов, выработанных ранее). Для предотвращения роста бактерий и выработки токсина используются также низкие температуры хранения в сочетании с определенными уровнями содержания соли и/или кислотности.

\n

\nБотулотоксин обнаружен в широком ряде пищевых продуктов, включая низкокислотные консервированные овощи, такие как зеленая фасоль, шпинат, грибы и свекла; рыбу, такую как консервированный тунец, ферментированная, соленая и копченая рыба; и мясные продукты, такие как ветчина и сосиски. Продукты питания меняются в зависимости от стран и отражают местные особенности питания и методики консервации пищевых продуктов. Иногда ботулотоксины обнаруживаются в продуктах промышленного приготовления.

\n

\nНесмотря на то, что споры C. botulinum устойчивы к высоким температурам, токсин, вырабатываемый бактериями, которые развиваются из спор в анаэробных условиях, разрушается при кипячении (например, при температуре внутри >85C в течение пяти или более минут). Поэтому, чаще всего причиной ботулизма человека являются готовые к употреблению продукты в упаковках с низким содержанием кислорода.

\n

\nДля выяснения причины и предотвращения дальнейших случаев заболевания необходимо незамедлительно получить образцы продуктов, причастных к предполагаемым случаям заболевания, поместить их в надлежащие герметически закрытые контейнеры и направить в лаборатории.

\n

Детский ботулизм

\n

\nДетский ботулизм развивается, в основном, у детей в возрасте до 6 месяцев. В отличие от пищевого ботулизма, вызываемого потреблением уже выработанных токсинов в пищевых продуктах (см. пункт «a» выше), детский ботулизм развивается в случае, когда дети проглатывают споры C. botulinum, из которых развиваются бактерии, колонизирующие кишечник и выделяющие токсины. У большинства взрослых людей и детей старше 6 месяцев этого не происходит, потому что естественные защитные механизмы кишечника, формирующиеся позже, предотвращают прорастание спор и рост бактерий.

\n

\nКлинические симптомы у детей грудного возраста включают запор, потерю аппетита, слабость, измененный плач и четко выраженную утрату способности держать головку. Существует несколько вероятных источников инфицирования детским ботулизмом, но определенное число случаев заболевания ассоциируется с медом, зараженным спорами. Поэтому, родителям и лицам, осуществляющим уход за детьми, не следует давать мед детям в возрасте до 1 года.

\n

Раневой ботулизм

\n

\nРаневой ботулизм развивается редко, в случаях, когда споры попадают в открытую рану и способны размножаться в анаэробных условиях. Симптомы схожи с пищевым ботулизмом, но могут появляться через две недели. Эта форма болезни связана с токсикоманией, в частности с инъекциями героина.

\n

Ботулизм в результате вдыхания

\n

\nБотулизм редко развивается в результате вдыхания. Такие случаи не происходят в естественных условиях, они связаны, например, со случайными или предумышленными событиями (такими как биотерроризм), которые приводят в высвобождению токсинов в аэрозолях. Клиническая картина в случае ботулизма, развивающегося в результате вдыхания, схожа с клинической картиной при пищевом ботулизме. Средняя летальная доза для людей оценивается на уровне 2 нанограммов ботулотоксина на килограмм веса тела, что примерно в 3 раза превышает аналогичный показатель в случаях пищевого ботулизма.

\n

\nСимптомы появляются через 1–3 дня после вдыхания токсинов или через более длительный период времени в случае более низких уровней интоксикации. Симптомы развиваются так же, как и при пищевом ботулизме, и на завершающей стадии происходит паралич мышц и недостаточность дыхания.

\n

\nПри подозрении на воздействие токсина путем вдыхания аэрозоли необходимо предотвратить дополнительное воздействие на пациента и других людей. Следует снять с пациента одежду и хранить ее в полиэтиленовых пакетах до тех пор, пока она не будет тщательно выстирана в воде с мылом. Пациент должен принять душ и незамедлительно пройти дезинфекцию.

\n

Другие типы интоксикации

\n

\nТеоретически ботулизм может передаваться через воду в результате проглатывания токсина, выработанного ранее. Однако, учитывая тот факт, что при обработке воды (такой как кипячение или дезинфекции 0,1-процентным раствором гипохлорита) токсин разрушается, такой риск считается низким.

\n

\nБотулизм неопределенного происхождения обычно регистрируется среди взрослых людей в тех случаях, когда не установлен источник пищевого или раневого ботулизма. Эти случаи сопоставимы с детским ботулизмом и могут происходить при изменении нормальной флоры кишечника в результате хирургических вмешательств или терапии антибиотиками.

\n

\nЗарегистрированы неблагоприятные реакции на чистый токсин, используемый среди пациентов в медицинских и/или косметических целях, дополнительную информацию см. ниже в разделе «Ботокс»).

\n

Ботокс

\n

\nБактерия C. botulinum используется для производства ботокса — фармацевтического препарата, применяемого преимущественно для инъекций в клинических и косметических целях. Для ботокса используется очищенный и сильно разбавленный ботулинический нейротоксин типа А. Процедуры проводятся в медицинских учреждениях в соответствии с потребностями пациента и обычно хорошо переносятся, хотя в редких случаях наблюдаются побочные реакции.

\n

Диагностирование и лечение

\n

\nДиагноз обычно ставится на основе истории болезни и клинического осмотра при последующем лабораторном подтверждении, включающем демонстрацию присутствия ботулотоксина в сыворотке, стуле или пищевых продуктах или выращивание культуры C. botulinum в образцах стула, раневой жидкости или пищевых продуктов. Иногда ставится ошибочный диагноз ботулизма, так как его часто принимают за инсульт, синдром Гийена-Барре или тяжелую миастению.

\n

\nПосле постановки клинического диагноза необходимо как можно скорее ввести антитоксин. Раннее введение антитоксина эффективно снижает показатели смертности. В случае тяжелого ботулизма требуется поддерживающая терапия, в частности искусственная вентиляция легких, которая может требоваться в течение нескольких недель и даже месяцев. Антибиотики не требуются (за исключением случаев раневого ботулизма). Существует вакцина против ботулизма, но она редко используется, так как ее эффективность не оценена полностью и были зарегистрированы неблагоприятные реакции.

\n

Профилактика

\n

\nПрофилактика пищевого ботулизма основана на надлежащей практике приготовления пищевых продуктов, в частности во время тепловой обработки/стерилизации, и гигиене.

\n

\nПищевой ботулизм можно предотвращать путем инактивации бактерии и ее спор в стерилизованных путем нагрева (например, в автоклаве) или консервированных продуктах или путем подавления роста бактерий и выработки токсинов в других продуктах. Вегетативные формы бактерии могут быть уничтожены при кипячении, но споры могут оставаться жизнеспособными даже при кипячении в течение нескольких часов. Тем не менее, споры можно уничтожить путем тепловой обработки при очень высоких температурах, например при промышленном консервировании

\n

\nПромышленной тепловой пастеризации (включая пастеризованные продукты в вакуумной упаковке и продукты горячего копчения) может быть недостаточно для уничтожения всех спор и, поэтому, безопасность этих продуктов должна быть основана на предотвращении бактериального роста и выработки токсина. Низкие температуры в сочетании с содержанием соли и/или кислой средой препятствуют росту бактерий и выработке токсина.

\n

\nБрошюра ВОЗ «Пять важнейших принципов безопасного питания» служит основой образовательных программ для подготовки лиц, занимающихся обработкой и приготовлением пищевых продуктов, и для просвещения их потребителей. Они особенно важны для предотвращения пищевых отравлений.

\n

\nЭто следующие пять принципов:

\n
    \n
  • соблюдайте чистоту;
  • \n
  • отделяйте сырое от готового;
  • \n
  • проводите тщательную тепловую обработку;
  • \n
  • храните продукты при безопасной температуре;
  • \n
  • используйте чистую воду и чистое пищевое сырье.
  • \n
\n

Деятельность ВОЗ

\n

\nВспышки ботулизма происходят редко, но они являются чрезвычайными ситуациями в области общественного здравоохранения, которые требуют быстрого распознания для выявления источника инфекции, определения типа вспышки болезни (среди естественных, случайных или потенциально преднамеренных), предотвращения других случаев заболевания и эффективного лечения пострадавших пациентов. Успех лечения в значительной мере зависит от раннего диагностирования и быстрого введения ботулинического антитоксина.

\n

\nРоль ВОЗ в принятии ответных мер на вспышки ботулизма, которые могут иметь международное значение, заключается в следующем:

\n
    \n
  • Эпиднадзор и выявление: ВОЗ поддерживает усиление национальных систем эпиднадзора и международного предупреждения для обеспечения быстрого выявления вспышек болезней на местах и принятия эффективных международных ответных мер. Основным инструментом ВОЗ для проведения эпиднадзора, осуществления координации и принятия ответных мер является Международная сеть органов по безопасности пищевых продуктов (ИНФОСАН), которая связывает национальные органы государств-членов, ответственных за управление событиями в области безопасности пищевых продуктов. Эта сеть находится в совместном управлении ФАО и ВОЗ.
  • \n
  • Оценка риска: в основе ответных мер ВОЗ лежит методология оценки риска, которая включает определение типа вспышки болезни — является ли она естественной, случайной или, возможно, преднамеренной. ВОЗ также предоставляет научные оценки в качестве основы для международных стандартов безопасности пищевых продуктов, руководящих принципов и рекомендаций, разрабатываемых Комиссией Кодекс Алиментариус.
  • \n
  • Изоляция источника инфекции: ВОЗ координирует деятельность с национальными и местными органами для сдерживания дальнейшего распространения вспышек болезней.
  • \n
  • Оказание содействия: ВОЗ координирует действия международных учреждений, экспертов, национальных лабораторий, авиакомпаний и коммерческих организаций по мобилизации оборудования, средств и материалов, необходимых для принятия ответных мер, включая поставки и введение ботулинического антитоксина.
  • \n
\n

 

«,»datePublished»:»2018-01-10T10:22:00.0000000+00:00″,»image»:»https://www.who.int/images/default-source/imported/foodborne-trematodiases-jpg.jpg?sfvrsn=3f9ed163_0″,»publisher»:{«@type»:»Organization»,»name»:»World Health Organization: WHO»,»logo»:{«@type»:»ImageObject»,»url»:»https://www.who.int/Images/SchemaOrg/schemaOrgLogo.jpg»,»width»:250,»height»:60}},»dateModified»:»2018-01-10T10:22:00.0000000+00:00″,»mainEntityOfPage»:»https://www.who.int/ru/news-room/fact-sheets/detail/botulism»,»@context»:»http://schema.org»,»@type»:»Article»};

Резистентность к ботулотоксину: что известно?

В журнале Toxins недавно опубликована обзорная статья, посвящённая иммуногенности ботулотоксина, — Immunogenicity Associated with Botulinum Toxin Treatment. В настоящее время наиболее широко применяется ботулотоксин типа А, значительно реже — типа В (в России он пока не доступен). Будучи безопасным и эффективным методом лечения, в редких случаях ботулотоксин может вызывать образование антител, которые уменьшают или полностью нивелируют его терапевтический эффект. Наличие антител связывают с короткими периодами между введениями и с так называемыми «подкалываниями» (бустер-инъекции), с более высокими однократными дозами, а также с высоким содержанием антигенного белка. К другим факторам, влияющим на иммуногенность, относятся свойства отдельного серотипа ботулотоксина, например его формуляция, особенности производства и хранения. Некоторые из более новых формуляций, содержащих очищенный основной нейротоксин, лишённый дополнительных белков, могут обладать в целом более низкой иммуногенностью. В настоящее время для определения антител используется несколько методов, включая как структурные анализы (например, вестерн-блот, иммуноферментный анализ и анализ иммунопреципитации, с помощью которых невозможно отличить нейтрализующие антитела от не нейтрализующих), так и биоанализы с использованием мышей (анализ на защиту мышей и мышиный гемидиафрагмальный анализ). Тем не менее до сих пор не показано чёткой взаимосвязи между выявляемыми этими методами антителами и клиническим ответом на лечение ботулотоксином. Различают первичную и вторичную резистентность к ботулотоксину.
Первичная резистентность характеризуется отсутствием какого-либо клинического эффекта после самого первого введения препарата и всех последующих. Это довольно редкое явление. В ряде случаев первичная резистентность может быть связана с низкой дозой препарата, неверно выбранными мышцами для введения, наличием контрактур, неверными показаниями для введения, нарушением условий хранения препарата (и как следствие деградацией лекарства), а также с вакцинацией против ботулотоксина (например, пентавалентной вакциной против серотипов А–Е у американских солдат во время войны в Персидском заливе) или ботулизма в анамнезе. Высказывались предположения, что у некоторых людей вакцинация против столбняка может приводить к образованию антител, связывающихся и с ботулотоксином, учитывая их схожесть по структуре более, чем на 50 % (перекрёстное связывание показано in vitro, но не клинически).
Предпринимались попытки и поиска мутаций в генах, кодирующих мишени, с которыми связываются тяжёлые цепи ботулотоксинов типа А и В. Для ботулотоксина типа А это гены белков SV2 A, B и C. Для ботулотоксина типа В — ген синаптотагминов 1 и 2. Кроме того, проводился поиск потенциально патогенных мутаций в генах, кодирующих мишени для лёгких цепей: SNAP-25 (для типа А) и синаптобревина (для типа В). Проанализировав данные секвенирования 126 216 экзомов и 15 136 геномов, Carle et al. (2017) и Pirazzini et al. (2018) не обнаружили каких-либо вариантов, которые могли бы обладать функциональной значимостью в отношении влияния на связывание цепей ботулотоксина со своими мишенями. Есть данные, что некоторые аллели главного комплекса гистосовместимости (DQA1*01:02 и DQB1*06:04) предрасполагают к образованию нейтрализующих антител против ботулотоксина.
Вторичной резистентностью обозначается ситуация, при которой вначале у пациента отмечался клинический эффект хотя бы после одной инъекции, однако отсутствовал при последующих введениях. Стоит отметить, что существует много потенциальных причин для того, почему у первоначально отвечавших на терапию пациентов перестал проявляться терапевтический эффект от введения ботулотоксина. Образование нейтрализующих антител является лишь одной из них.
Другие возможные причины схожи с таковыми для первичной резистентности, включая неадекватную дозу препарата, неверные мишени и (или) показания для введения и нарушение условий хранения препарата. Нейтрализующие антитела относятся, как правило, к классу IgG и являются сероспецифичными. Однако лица с антителами против ботулотоксина А имеют высокие шансы выработать антитела и против типа В. Чаще всего нейтрализующие антитела образуются против эпитопа на связывающем участке тяжёлой цепи. Считается, что антитела против нетоксичных дополнительных белков не влияют на эффективность препарата. Однако стимулировать образование нейтрализующих антител могут сопутствующие компонентные белки в формуляции ботулотоксина. Например, в экспериментах Blümel et al. (2006) с вакцинацией кроликов абоботулотоксином А, инкоботулотоксином А и онаботулотоксином А оказалось, что первый ботулотоксин чаще всего приводил к образованию нейтрализующих антител. При последующем анализе было высказано предположение, что это может быть связано с выявленным в составе абоботулоксина А флагеллина — конституционального белка двигательного аппарата бактерий, который известен как иммунологический адъювант и взаимодействует с toll-подобными рецепторами 5-го типа, инициируя ответ врождённого иммунитета, что может провоцировать активацию приобретённого иммунного звена.
С исторических позиций нередко упоминают пример, когда применение до 1997 г. менее очищенного онаботулоксина А приводило к его большей иммуногенности. Оригинальная формуляция, выпускавшаяся до 1997 г., содержала большую долю (до 90 %) неактивного предшественника ботулотоксина, который становился активным лишь после действия бактериальной протеазы. Наличие неактивного предшественника токсина повышало иммуногенность препарата в 6 раз по сравнению с современной формуляцией.
На текущий момент данные о потенциальной иммуногенности по наиболее частым препаратам следующие: онаботулотоксин А — 0,2–3,6 %, абоботулотоксин А — 0,9–3,6 %, инкоботулотоксин А — 0–0,5 %, римаботулотоксин В — 18–42,4 %. При поиске в Pubmed и Google не удалось найти данных об иммуногенности активно продвигаемого отечественного ботулотоксина. Однако наткнулся на занятную публикацию результатов исследования от 2018 г. Frevert et al. в журнале Clinical, Cosmetic and Investigational Dermatology (входит в Q1).
В исследовании авторы провели сравнение содержания собственно ботулотоксина с использованием иммуноферментного анализа «сэндвич»-типа в нескольких препаратах, применяющихся в странах Азии: Ботулакс (Республика Корея), Медитоксин (Республика Корея), Набота (Республика Корея), Релатокс (Россия) и Ксеомин (Германия). Анализ проводился в лаборатории, которая прошла успешную инспекцию американского регулятора (FDA). Во флаконе Ксеомина 100 ЕД было выявлено 416 пкг нейротоксина (неактивного предшественника нейротоксина не было обнаружено), что составило 0,240 ЕД активности на 1 пкг нейротоксина. Ботулакс и Набота содержали 844 и 754 пкг нейротоксина, соответственно, что почти в 2 раза больше, чем в Ксеомине (416 пкг) в эквивалентном 100 ЕД флаконе. Однако доля неактивного нейротоксина в них составила 103 % и 81 % по отношению к Ксеомину, в котором его не было обнаружено. Следовательно, активность ботулотоксина на 1 пкг составила для Ботулакса и Наботы 0,118 и 133 ЕД соответственно. Медитоксин и Релатокс содержали 575 и 579 пкг нейротоксина, что было несколько выше, чем в Ксеомине, в то время как доля неактивного нейротоксина составила 38 и 33 % соответственно. Это значит, что активность на 1 пкг нейротоксина составила 0.174 для Медитоксина и 0,173 для Релатокса.
Таким образом, несмотря на то что Ботулакс и Набота содержали в эквивалентном объёме больше нейротоксина, чем Ксеомин, в них присутствовало большое количество неактивного нейротоксина. Кроме того, в Медитоксине и Релатоксе тоже содержалось несколько больше нейротоксина, чем в Ксеомине, однако оба препарата так же содержали большое количество неактивного нейротоксина. Это, безусловно, свидетельствует о возможных необсуждаемых публично проблемах с производством указанных лекарств. Кроме того, это создаёт предпосылки для развития вторичной резистентности при повторных введениях плохо очищенных препаратов из-за риска образования нейтрализующих антител, а это сведёт на нет попытки применения альтернативных препаратов ботулотоксина. Такая резистентность может быть перекрёстной к другим препаратам ботулотоксина, даже более высоко очищенным.
Отдельное внимание в обзоре уделено клиническим тестам на резистентность. Тесты с инъекцией в короткий разгибатель пальцев или кивательную мышцу требуют применения электромиографии для оценки результатов, в то время как пробное введение ботулотоксина в медиальные отделы правой брови (20 ЕД она- или инкоботулотоксина либо 50 ЕД абоботулотоксина) или лобную мышцу оцениваются визуально. Инъекции в бровь рассматриваются как более предпочтительные по косметическим соображениям. Существует также тест на оценку уменьшения потоотделения после введения ботулотоксина в область гипотенара, однако эта проба требует стандартизированных условий помещения и применения нингидрина.
Профилактика и коррекция резистентности к терапии ботулотоксином сложна. В настоящее время считается, что с этими целями необходимо дождаться спонтанного исчезновения нейтрализующих антител (это может занять от 10 до 78 мес, т. е. от 1–6 лет), после чего перейти к менее иммуногенным формуляциям ботулотоксина или к иммунологически альтернативному типу ботулотоксина. Интересно, что применение плазмафереза может помочь удалить нейтрализующие антитела и возобновить терапию ботулотоксином раньше, однако это сопряжено с дополнительными рисками и высокой стоимостью. Внутривенное введение иммуноглобулинов в дозах до 35 г не показало эффективности в отношении уменьшения нейтрализующих антител.
Кстати, знаете ли вы, что осенью 2019 г. зарегистрирован второй отечественный препарат ботулотоксина типа А — Миотокс (данные доступны на сайте http://grls.rosminzdrav.ru). Вероятно, в контексте правила «третий лишний»… Никаких публикаций в Pubmed о нём не нашлось.

Автор Юрий Селивёрстов
Читать в источнике…

Ботулинотерапия

Ботулинотерапия

Ботулотоксин (ботулинический токсин, токсин ботулизма) – нейротоксин белковой природы, вырабатываемый бактериями Clostridium botulinum. Ботулинический токсин известен науке как один из сильнейших ядов, однако он находит эффективное применение в современной медицине. 
Вырабатываемые бактериями clostridium botulinum токсины принято обозначать латинскими буквами (от A до G). В начале ХХ века ученые впервые проявили интерес к ботулотоксинам, а именно к ботулотоксину типа А, как возможному лекарственному средству. В результате исследований был получен высокоочищенный кристаллический ботулотоксин типа А. На сегодняшний день это единственный ботулотоксин в нашей стране (за рубежом и тип В), разрешенный для клинического применения. 
Первым в медицинской практике ботулотоксин в конце 70-х годов применил американский офтальмолог Алан Скотт. Он вводил очищенный токсин в микродозах в орбитальную мышцу глаза для лечения блефароспазма – непроизвольного сокращения мышцы, приводящего к стойкому спазматическому смыканию век.

Сегодня ботулотоксин используется для лечения:

  • Фокальных и генерализованных дистоний (блефароспазм, гемифасциальный спазм, спастическая кривошея, писчий спазм)
  • Спастичности (постинсультная, посттравматическая, последствия нейроинфекций, ДЦП)
  • Бруксизма (скрежет зубами), дисфункции височно-нижнечелюстного сустава
  • Локальной хронической  боли, миофасциального болевого синдрома
  • Локального гипергидроза (ладоней, стоп,подмышечных впадин)
  • Хронической головной боли (хроническая головная боль напряжения, мигрень)
  • Сиалореи (слюнотечение)

При внутримышечной инъекции ботулотоксина развиваются локальный миорелаксирующий эффект, что клинически проявляется в выраженном расслаблении инъецированных мышц и значительном уменьшении боли в них.

Клиническое миорелаксирующее действие препарата после проведенной инъекции начинает проявляться через несколько дней: в мелких мышцах лица, гортани, кисти — через 2–7 дней, в крупных мышцах шеи, конечностей и туловища — через 7–14 дней, в коже и экзокринных железах — через 1–5 дней. 

Лечение препаратами на основе ботулотоксина должно осуществляться квалифицированным врачом со строгим соблюдением локализации и дозировки  вводимого препарата.

С целью повышения качества лечения (эффект зависит от точности инъецирования в заинтересованную мышцу) инъекции проводятся с использованием:

  • КТ-навигации,
  • УЗИ-навигации,
  • ЭМГ-навигации.

Ботулотоксин типа А

       Современными препаратами на основе токсина ботулизма типа являются Ботокс , Диспорт и др. производители этого препарата. Это разные фирменные названия одного и того же препарата — нейротоксина типа А, который вырабатывает микроорганизм  Clostridiumbotulinum. Для коррекции морщин этот нейротоксин очищается и разводится до безопасной дозы. «Ботокс» выпускает американская фирма Allergan, «Диспорт» — французская фирма Beafour — Ipsen-Speywood.  Ботокс обеспечивает чуть быстрее наступающий эффект разглаживания морщин, а диспорт, в свою очередь, способен аккумулировать полученный результат: с каждой последующей процедурой его дозировка будет меньше, чем ботокса. В любом случае, коррекция морщин для обоих этих препаратов не представляет никакой проблемы. 

Необходимость в проведении коррекции морщин появляется сегодня зачастую уже в тридцатилетнем возрасте. Взгляните на собственное лицо. Наверняка напряженная работа, ежедневные стрессы, или наоборот — частый смех и улыбка на лице, то есть фактически — частые сокращения мимических мышц приводят к появлению сначала едва заметных, а потом — все более видимых морщин. Бороться с ними можно не только при помощи скальпеля: наилучшая альтернатива оперативному вмешательству – Ботулотоксин типа А. Насколько необходима коррекция морщин именно вам, можно определить, просто подойдя к зеркалу: если у вас уже есть морщины на лбу, вокруг глаз и около рта, которые усиливаются при улыбке смехе или нахмуренности, значит пора.

Ботулотоксин типа А способен локально вызывать расслабление мимических мышц, что в дальнейшем препятствует их напряжению и углублению кожных складок. Ботулотоксин типа А позволяет на длительный срок привести к эффективной коррекции морщин на вашем лице. По сути, Ботулотоксин типа А просто выключают из работы определенные мышцы, ответственные за появление морщин.

Действие Ботулотоксина типа А можно подкреплять препаратами гиалуроновой кислоты, ваше лицо преобразится значительно, и терапевтическая коррекция морщин не будет отличаться от проведенной пластической операции.

 

Показания к применению:

— коррекция морщин

— в области лба

— переносицы

— вокруг глаз

— коррекция внешности

— коррекция формы бровей

— коррекция уголков рта

— устранение потливости (гиперкератоз) в проблемных зонах (ладони, стопы, спина, подмышки, лицо т.д.)

 

Процедура введения ботулоксина типа А:

Коррекция морщин – серьезная процедура, требующая ответственного отношения. Перед сеансом врач-дерматолог собирает подробную информацию о здоровье пациента, его типе кожи. Следующий этап — сама процедура введения ботокса, диспорта или другого сертифицированного препарата этой группы. Пациент ложится на удобное кресло. Врач обрабатывает операционное поле 0.5% спиртовым раствором хлоргексидина, выполняет маркировку линий введения препарата, высчитывает количество единиц препарата, проводит местную анастезию и вводит сам препарат нужной дозировки, которая имеет большое значение для разных зон введения (лицо, подмышки, стопы, спина, ладони). Косметический эффект (коррекция морщин) наступает через 3–7 дней с момента введения препарата и длится на протяжении 6–8 месяцев. Если пациенту недостаточно введенного препарата коррекцию можно повторить в течении двух недель. Через 6–8 месяцев инъекцию следует сделать вновь для поддержания положительного эффекта. С каждой последующей инъекцией коррекция морщин сохраняется дольше.

 

Противопоказания:

— Миастения (о любых нервно-мышечных нарушениях следует рассказать врачу, так как диспорт и ботокс  влияют на нервные волокна и его использование для коррекции морщин возможно только при здоровой нервной ткани)

— Нарушения свёртываемости крови

— Воспалительный и/или инфекционный процесс в областях предполагаемых инъекций

— Общие заболевания в стадии обострения

— Приём лекарственных средств: антибиотиков, антикоагулянтов, антиагрегантов, реланиума, баклофена

— Хронические обструктивные заболевания лёгких

— Беременность и период грудного вскармливания

— Возраст младше 16 лет

— Нежелательно проводить процедуру в первые дни менструального цикла. 

 

Результат

Коррекция морщин на 6–8 месяцев. За это время Вы отвыкаете от привычки морщить лицо, и даже после полного прекращения лечения, морщины становятся менее выраженными. Таким образом, можно сказать, что действие ботулотоксина типа А продолжается в течение всей жизни: нет привычки хмуриться – нет и морщин, возникающих от нее.

 

Рекомендации после проведения процедуры:

— не принимать горизонтальное положение в течение 4 часов после процедуры

— не ложиться спать в течение 4 часов после процедуры

— совершать активные мимические движения в течение 1 часа

— не загорать в течение 3 дней

— не принимать антибиотики — аминогликозиды (канамицин, стрептомицин и др.), транквилизаторы Памы (фенозепам, тазепам и др.) в течение 2-х недель после процедуры (действие этих препаратов будет снижать эффективность ботокса / диспорта)

— ограничить посещение сауны, бани, бассейна в течение 7 дней.

наши цены на инъекционные методики 

 

Лабораторная диагностика ботулизма в СПб

Ботулизм — острое инфекционное заболевание. Его вызывают токсины, продуцируемые бактериями Clostridium botulinum. Ботулинические токсины поражают нервную систему, прочно связываясь нервными клетками. В результате инфекции возникают параличи, парезы (снижение силы мышц из-за повреждения нервных путей).

В числе первых нарушается нервно-мышечная передача к мышцам глотки, гортани, глаз. Угнетаются функции дыхательных мышц вплоть до полного паралича. Возникают парезы желудочно-кишечного тракта, диафрагмы, межрёберных мышц. Развивается гипоксия всех видов. Без специфического лечения человек, инфицированный ботулизмом, умирает: смертельная доза составляет всего 0,3 микрограмма ботулотоксина.

Бактерии Clostridium botulinum распространены в природе, где представлены в вегетативной форме (самая опасная) и спорах. Вегетативные формы, которые и есть источник ботулотоксина, обнаруживают в кишечнике диких и домашних животных, рыб, птиц. Если они попадают во внешнюю неблагоприятную среду: в почву, в озёрный и речной ил, то сохраняются в ней в виде спор.

Все возбудители ботулизма имеют Н-антигены, по наличию которых их делят на 6 типов — А, В, С, D, Е, F. Особенно опасны для человека — А, В, Е. Каждый тип требует специфической сыворотки при лечении, с чем связаны сложные анализы при диагностике заболевания.

Любые загрязнённые почвой, даже в малом количестве, продукты могут содержать вегетативные формы, споры Clostridium botulinum. Но поражение вызывают те, которые сохранялись без или почти без воздуха. Потому так опасны консервы, вяленая рыба и мясо, в которых возникают идеальные условия для развития вегетативной формы возбудителя и образования ботулотоксина.

Заражение, вызванное спорами, возникает, если почва попала в рану, где в анаэробных условиях споры развиваются в вегетативную форму с выделением токсинов.

перейти к анализам

 Симптомы и осложнения заболевания

Симптомы

Инкубационный период при ботулизме длится до 24 часов, редко — до 3 дней.

Первыми признаками поражения могут стать:

  • острая боль в животе с локализацией в эпигастральной области;

  • рвота и жидкий стул 4—10 раз в сутки;

  • общее недомогание, головная боль;

  • повышение температуры от 37 °С до 39-40 °С.

К концу инкубационного периода проявляются основные симптомы поражения:

  • нарушается острота зрения, больной жалуется на «туман, сетку в глазах», возникает двоение предметов;

  • появляется мышечная слабость, сухость во рту;

  • изменяется голос, нередко возникает гнусавость, далее — осиплость, хрипота, полная потеря голоса;

  • нарушается глотание, в тяжёлом случае наступает афагия — невозможность принять ни жидкую, ни твёрдую пищу;

  • возникает стойкий запор.

Перечисленные симптомы проявляются в разных комбинациях, с неодинаковой силой, в различной последовательности, а отдельные отсутствуют. Обязательный фон состояния к концу инкубационного периода — сухость во рту, усиливающаяся мышечная слабость, запор.

Осложнения

Типичные осложнения при ботулизме:

  • аспирационная пневмония — инфекция, возникающая из-за того, что пища или содержимое желудка попали в лёгкие по причине паралитического воздействия ботулотоксинов;

  • ателектаз — безвоздушность лёгкого или его части, вызванная спадением альвеол. Проявляется одышкой, болью в груди, цианотичным оттенком кожи;

  • гнойный паротит — воспаление околоушной слюнной железы вследствие проникновения микробов изо рта в железу;

  • острая дыхательная недостаточность — состояние, при котором даже при максимальном усилии человек не может вдохнуть необходимое количество воздуха и вывести из лёгких углекислый газ;

  • вторичные инфекции, связанные с инвазивной терапией;

  • сывороточная болезнь — заболевание, развивающееся после получения гетерологичной противоботулинической сыворотки;

  • ботулинический миозит — воспаление мышц, чаще — икроножных.

Биоматериалы для анализа на ботулизм

Биоматериалами для диагностирования ботулизма являются:

  • венозная кровь;

  • каловые массы, моча;

  • рвотные массы;

  • промывные воды желудка;

  • подозрительные пищевые продукты, которые употреблял больной, при возможности — почву, с которой соприкасался, воду;

  • секционные материалы (при раневом заражении).

Виды лабораторной диагностики ботулизма



Микробиологическая диагностика

Для проведения микробиологической диагностики из исследуемого биоматериала выделяют возбудителя и определяют моноспецифический токсин (А, В, Е и др.).

Возбудитель обнаруживается путём посевов на питательные анаэробные среды. Для определения токсина используют биологическую пробу и реакцию нейтрализации на лабораторных мышах. Группе животных (обычно 5) вводят специально приготовленную жидкость с экстрактом культуры, полученной в исследовании биоматериала. Двум грызунам вводят живой материал, а трём — обезвреженный разными видами сыворотки по типам специфического токсина.

Если две мыши, которым вводили живой материал, умирают, диагноз считается подтверждённым. Специфический токсин и необходимую для лечения сыворотку определяют по одному выжившему животному из трёх, которым вводили культуры Clostridium botulinum с сывороткой.

Бактериологическая проба

Бактериологическое исследование основано на особенностях жизненного цикла Clostridium botulinum. Собранный биоматериал помещают в пробирки на питательные среды и наблюдают за ростом бактерий. Клостридии типов А,B,С,D растут при температуре 30-40 °С, типа Е — 25-37 °С, типа G — 30-37 °С. 


Иммунодиагностика

Для иммуноферментного анализа используют венозную кровь. Из неё получают сыворотку, в которую вводят соответствующие заболеванию антитела, помеченные ферментами. Образовавшийся иммунный комплекс вступает в реакцию с ферментом, что вызывает изменение цвета. Инструментальная оптическая оценка плотности цвета позволяет понять, заражён ли человек ботулизмом.

Метод дот-иммуноанализа

Этот метод позволяет поставить диагноз в течение 3 часов, что жизненно важно при заражении ботулизмом. С его помощью также можно определить, есть ли возбудители ботулизма в продуктах питания.

Для определения возбудителя исследуемый материал помещают на фильтре с содержанием противоботулинических антител. Затем фильтр обрабатывают проявителем, сравнивают полученную картину с клиническими образцами.

Если биоматериал содержит токсины, фильтр изменяет интенсивность цвета. По силе изменений с помощью контрольной шкалы определяют уровень интоксикации организма.

 Расшифровка анализов крови при ботулизме

Хотя анализ крови при ботулизме не является показательным, он обязателен, потому что говорит о наличии негативных процессов в организме.

При ботулизме возможны следующие отклонения от нормы в показателях:

  • лейкоциты увеличены до 9х109 /л;

  • возросла скорость оседания эритроцитов — для мужчин выше 10мм/ч, для женщин — выше 15 мм/ч;

  • выше нормы — концентрация углекислого газа;

  • ниже нормы — кислотность крови;

  • ниже нормы — концентрация хлоридов;

  • выше нормы — содержание калия.

Нужно учитывать, что показатели могут быть не только выше или ниже нормы, но и приближены к пограничному состоянию.

Расшифровка анализа каловых масс:

количество дефекаций в сутки на начальном этапе инкубации — 8—20 раз;

  • консистенция — жидкая, пенистая, водянистая;

  • цвет — желтоватый, жёлто-зелёный;

  • запах — без изменений, обычный;

  • слизь — в умеренном количестве;

  • кровь — возможна;

  • свободная вода — в небольшом количестве;

  • зелень — в небольшом количестве;

  • гной — в большинстве случаев.

Профилактика ботулизма

Клостридии переходят в вегетативную форму, продуцирующую яд, при благоприятных условиях — температуре 30-40 °С и отсутствии воздуха или минимальном его объёме.


Такие условия возникают в первую очередь в домашних консервах — главной причине заражения ботулизмом. Если на овощах, в мясе, грибах в консервы попали споры, они перейдут в вегетативную форму. Особенно опасны грибы, которые невозможно полностью отмыть от почвы и прочих загрязнений. Потенциальный «рассадник» ботулизма — заражённая колбаса, слабосолёная рыба, ветчина, произведённые с нарушением технологии.

Убить споры в домашних условиях крайне трудно. Если вегетативные формы, ботулотоксин разрушаются при нагревании до 100 °С за 10 минут, то споры выдерживают кипячение при 100 °С в течение 6 часов! Они чрезвычайно устойчивы к замораживанию, засухе, даже высокой концентрации соли.

Что делать, чтобы избежать заражения?


  • Не употреблять в пищу грибы, законсервированные в домашних условиях — при обычной (негерметичной) засолке, сушке, мариновании ботулотоксин не образуется.

  • Не консервировать испорченные, давно снятые овощи, ягоды, фрукты.

  • Живую рыбу следует сразу потрошить, промывать под проточной водой и хранить замороженной.

  • Перед употреблением любых консервов их лучше прокипятить в 15 минут — за это время ботулотоксин разлагается.

  • Вздутые банки нужно утилизовать — их ни в коем случае нельзя вскрывать и есть содержимое.

  • Свежие овощи, фрукты, ягоды необходимо тщательно промывать, по возможности — с хозяйственным мылом: в нём содержится щёлочь, которая губительна для возбудителя и токсинов.

Берегите себя!

Если у вас возникли хотя бы единичные симптомы из перечисленных выше, вам срочно нужно обратиться к врачу. Помните — при этом заболевании важен каждый час и даже каждая минута.


Применение ботулинического токсина типа А в лечении детей с детским церебральным параличом (ДЦП)

ИНФОРМАЦИЯ ДЛЯ РОДИТЕЛЕЙ

Ботулинотерапия – это единственный эффективный и безопасный метод коррекции высокого тонуса мышц у больных ДЦП.

С момента открытия в 80-е годы ХХ столетия накоплен грандиозный опыт применения ботулинического токсина типа А – БТА (Диспорт) в нейропедиатрии: более 1 000 научных исследований и публикаций, основанных на результатах 45000 инъекционный сессий. Итоги лечения около 10 000 детей с ДЦП показали высокую эффективность использования препаратов ботулинического токсина типа А (БТА) в нейрореабилитациии и, самое главное, самый высокий уровень безопасности для жизни и здоровья детей, безопасность класса А.


Что такое ботулинотерапия? Чем она может помочь ребёнку с ДЦП?

Ботолинотерапия – это метод лечения различных заболеваний с использованием препаратов ботулинического токсина. В нейропедиатрии ботулотоксин используют для нормализации повышенного тонуса мышц и снижения выраженности слюнотечения преимущественно у больных ДЦП.

Ботулинический токсин вырабатывает бактерия Clostridium botulinum, различные виды которой синтезируют несколько типов нейротоксинов. Наиболее изучены и используются в клинической практике два типа – А и В.

Ботулинический токсин типа А (Диспорт), применяют в нейропедиатрии. Он блокирует передачу импульса от нервного волокна к мышце. Это уменьшает сокращение мышц и приводит к обратимому снижению мышечного тонуса.

Так же при введении в слюнную железу ботулинический токсин типа А уменьшает интенсивность образования слюны. Данный механизм действия БТА используют для коррекции повышенного слюнотечения у детей и взрослых, страдающих хроническими неврологическими заболеваниями.


Как проходит процедура инъекции ботулинического токсина и к чему нужно быть готовыми?

Введение препарата производят непосредственно в мышцу, мышечный тонус которой планируют уменьшить. Поэтому продолжительность процедуры зависит от количества мышц, в которые врач будет вводить препарат, их называют мышцы-мишени. Количество мышц определяют накануне по результатам подробного исследования состояния двигательной сферы ребёнка.

Для коррекции повышенного слюнотечения препараты ботулинического токсина вводят непосредственно в слюнные железы (2 или 4).

Введение препарата предпочтительно проводить в условиях медицинского учреждения, соблюдая правила асептики и антисептики.

Вводить БТА может только врач, получивший специальный сертификат. Вы имеете право потребовать у специалиста продемонстрировать Вам его.

Есть несколько техник по введению БТА в мышцу: в одну, две или более точек. Существует мнение, что большое количество точек обусловливает лучшее распространение препарата в мышце, обеспечивая более быстрое наступление эффекта. Однозначно наукой это не доказано.

Инъекцию чаще проводят, используя инсулиновый шприц с тонкой иголочкой.


Насколько болезненны уколы препаратов ботулинического токсина?

Пациенты описываю ощущения, как неприятное покалывание, лёгкое жжение в месте инъекции. К сожалению, дети могут реагировать достаточно бурно на процедуру.  Во-первых, это связано с изначальным страхом перед уколами. Попав в процедурный кабинет и увидев шприц, ребёнок уже настраивается на болезненную процедуру. Во-вторых, чаще всего уколов несколько. В-третьих, ребёнка для точности инъекции зачастую приходится держать, а это вызывает дополнительное беспокойство и негативную реакцию. Сам укол не столь болезненный, но раз начав плакать, особенно в такой обстановке, ребёнку уже сложно остановиться.

У детей возможно применение местных обезболивающих кремов для уменьшения болевой чувствительности в месте инъекции. Специалисты в Европе и Северной Америке активно используют масочный наркоз и/или назначают лёгкие медикаментозные успокоительные средства. Это облегчает процедуру введения БТА в мышцы и препятствует формированию у ребёнка негативного отношения к лечению. В отечественной практике такой подход не столь популярен.

Несколько дней после инъекции не рекомендуется греть места уколов: не принимать ванну, отказаться от физиотерапевтических тепловых процедур и т.д.


Как проявляется эффект ботулинического токсина? Чего следует ожидать?

В первую очередь, под действием БТА становится заметным, что инъецированные мышцы становятся более растяжимыми, мягкими. Конечности с большей лёгкостью поддаются пассивным движениям, которые ранее из-за спастики были затруднены, а иногда и вовсе невозможны. Уменьшается, а зачастую и исчезает вовсе,  болезненность, которая до этого сопровождала процесс растяжения мышц, ношение туторов и занятия ЛФК.

Не стоит сразу ожидать на этом фоне улучшения походки и стремительного формирования двигательных навыков. Иногда Вы можете наблюдать ложное ухудшение. Это связано с тем, что при расслаблении мышц, сложившийся ранее неправильный стереотип движения ломается, а новый – ещё не успел сформироваться. Поэтому так важно активно заниматься кинезиотерапией после введения БТА.

После введения БТА в слюнные железы признаки уменьшения степени слюнотечения начинают проявляться в течение 2-3 недель, достигая максимума эффекта через 1-1,5 месяца.


Как долго будет длиться эффект от введения ботулинического токсина?

Действие лекарства проявляется не сразу, это занимает несколько дней. В среднем эффект становится заметен через 5-7 дней, однако Вы можете заметить положительные сдвиги уже через несколько часов после инъекции. Действие БТА нарастает в течение 3-4 недель, после чего остаётся стабильным в среднем 3-4 месяца. Зачастую у детей эффект может длиться значительно дольше: от 6 месяца до 1 года.


Как часто следует вводить ботулинический токсин? От чего это зависит?

БТА следует вводить, когда закончиться действие предыдущей инъекции, но не чаще, чем 1 раз в 3-4 месяца.


Как подготовить ребёнка к инъекции

ботулинического токсина?

В первую очередь хотим обратить Ваше внимание, что проводить инъекцию БТА возможно только при полностью удовлетворительном самочувствии Вашего ребёнка. Поэтому будьте внимательны к ребёнку, и при возникновении подозрения на простуду или другие заболевания обязательно сообщите об этом Вашему врачу. Возможно, дату инъекции придется перенести.

Как психологически подготовить ребёнка к предстоящей процедуре зависит от самого ребёнка. В большинстве случаев психологи советуют, чтобы ребёнок именно от Вас, узнал, что завтра ему «сделают укол». Старайтесь акцентировать его внимание на том, что после этого он станет лучше владеть своей рукой или ногой, уменьшаться болезненные ощущения. Во время процедуры постарайтесь сами сохранять спокойствие, подбодрить, поддержать ребёнка. Отвлеките его внимание от переживаний после процедуры, приготовьте какое-нибудь вознаграждение. Сделайте этот день праздником для ребёнка, несмотря на обстоятельства, подарите ему что-нибудь давно ожидаемое.


Каковы побочные эффекты препаратов ботулинического токсина?

Побочные эффекты БТА следует делить на локальные, или местные, и генерализованные (затрагивающие весь организм).

Часть местных реакций на укол БТА обусловлена введением препарата в мышцу. Вы могли не раз встречаться с этими побочными эффектами после банальных внутримышечных инъекций: болезненность, локальное кровоизлияние (синяк) и припухлость области укола. Они встречаются достаточно часто (до 30% случаев), но не сказываются отрицательным образом на здоровье ребёнка и в течение  1-2 дней сами-собою проходят.

К местным реакциям на введение БТА так же относят возможную повышенную слабость мышцы, в которую вводили препарат. Частота составляет 4% случаев. Данный эффект может длиться от 1 дня до 2 месяцев.  В некоторых случаях БТА может проникать в соседние мышцы и это иногда проявляется изменениями походки: дети могут спотыкаться, иногда даже падать. Если ситуация с походкой не меняется в положительную сторону в кратчайшее время, то специалисты, возможно, не будут делать повторную инъекцию или выберут другую схему для введения.

К общим побочным эффектам относят:

Эффект Количество инъекций, повлекших за собой побочные эффекты
Слабость в нескольких группах мышц 0,43%
Другие нарушения тонуса
(гипертония/дистония)
0,21%
Нарушения глотания 0,22%
Нарушения речи 0,14%
Нарушения мочеиспускания 0,22%
Боль 0,22%
Повышенная потливость 0,07%
Нарушения сна 0,07%
Повышенное слюнотечение 0,07%
Гриппоподобный синдром 0,07%

В таблице мы представили данные одного из широкомасштабных исследований. Специалисты проанализировали 1382 сеанса инъекций БТА, которые проводились 358 детям с ДЦП на протяжении 13 лет.


Мифы о ботулинотерапии

«Ботулотоксин – это яд. Он отравляет организм и опасен для жизни ребёнка, а иногда может даже привести к смерти».

Конечно, утверждение, что ботулинический токсин — это сильнодействующий яд, полностью соответствует действительности. Но в медицинских целях никогда не применяют чистый ботулинический токсин. Отравить этим лекарством ребёнка невозможно.

«Ботулинический токсин «сажает» почки и иммунитет».

Исследования, направленные на выявление побочных эффектов БТА не показали влияния препаратов БТА на функцию почек и иммунной системы. Пациенты с ДЦП склонны к частым простудным заболеваниям, а так же воспалительным заболеваниям органов моче-выделительной системы. Эти дети относятся к группе часто болеющих детей, и частота возникновения перечисленных заболеваний после проведения инъекции БТА не отличается при сравнении с теми детьми, кого не лечили БТА.

Токсического же воздействия на до этого здоровые почки, приведшего к тяжёлому нарушению функции почек, так называемая почечная недостаточность, на фоне  применения БТА в мировой и отечественной практике отмечено не было. И если среди Ваших знакомых или пациентов Вашего врача были такие случаи, то причиной не является введение БТА.

«Введение БТА отрицательно влияет на состояние самой мышцы. Она может атрофироваться и перестать работать вовсе».

Во-первых, хотим акцентировать Ваше внимание на том, что процесс атрофии в мышцах свойственен пациентам с ДЦП. Это происходит из-за нарушения проведения импульсов к мышце по нервам, нарушения кровообращения, (и конечно) но в большей степени – из-за отсутствия возможности нормального движения. С течением времени мышцы истончаются, теряют свою эластичность и мышечную силу. В более старшем возрасте это явление, к сожалению, может стать необратимым.

Под действием БТА ребёнку становятся доступны движения в гораздо большем объёме, чем до введения препарата, дети начинают активнее двигаться. Это значительно снижает вероятность развития мышечной атрофии.

Почему эффект от введения БТА в мышцу проходит через какое-то время?

Этот вопрос до сих пор остается открытым. Ранее считалось, что с течением времени от нерва прорастают новые окончания, которые начинают передавать сигнал мышце. Но последние исследования говорят нам о том, что это не единственный механизм, приводящий к возобновлению мышечной спастичности.

Носко А.С., к.м.н., врач-невролог.


Ботулинический токсин А – обзор

Ботулинический токсин

Ботулинический токсин-А (ВТХ-А) является одним из самых сильнодействующих токсинов, известных человеку. Инъекции BTX-A являются полезным дополнением к лечению паралича лицевого нерва без вялости, они используются для этой цели с 1987 года. с противоположной стороны, чтобы свести к минимуму общий риск эксцентрических сокращений, что, наряду с координированной лицевой терапией, помогает обратить вспять эффекты тиксотрофии.

BTX-A получают из анаэробной грамположительной палочки Clostridium botulinum , которая имеет множество подтипов, а именно. от A до G. Однако в клинической практике обычно используется BTX-A, который существует в трех вариантах: онаботулотоксин А, инкоботулотоксин А и абоботулотоксин А. Их коммерческие препараты существуют как Ботокс, Ксеомин и Диспорт соответственно. Они имеют аналогичные активные фрагменты, но различаются молекулярными структурами и, следовательно, способностью к диффузии. Каждый из них имеет разную силу разбавления перед использованием. 19

BTX-A работает одинаково, независимо от его торговой марки (рис. 6.8). BTX поглощается на уровне нервно-мышечного соединения (NMJ) в процессе эндоцитоза, и внутри этих пузырьков 20 он расщепляется на составляющие его тяжелую и легкую цепи, последняя из которых является активной частью, 150 кДа. белок. 1 Затем этот белок присоединяется к SNAP-25, белковой молекуле, которая, в свою очередь, деактивирует синаптобревин, тем самым подавляя высвобождение ацетилхолина (АХ) для продолжения скачкообразной проводимости.Эти эффекты обычно начинаются уже через 3-14 дней у пациентов и могут длиться от 4 до 6 месяцев.

Повторяющиеся инъекции BTX-A с течением времени могут вызвать атрофию мышц, а чрезмерное использование может привести к истощению мышц. Серийные инъекции BTX-A количественно снижают мышечную силу с течением времени, что сопровождается признаками прорастания коллатерального нерва после его повторного использования. Это особенно важно, учитывая, что лицевые мышцы представляют собой скелетные мышцы FaSyn-типа, особенно чувствительные к инъекциям BTX-A, и могут значительно ослабнуть при неоднократной передозировке из-за более низкого уровня тирозинкиназы специфического для мышц рецептора (MuSK). 21

Однако в случае синкинезии и в низких дозах, необходимых для разъединения актин-миозиновых поперечных мостиков, способствует снижению напряжения. Ключ к минимизации осложнений заключается в том, чтобы начать с низких доз BTX-A и увеличивать их в качестве дополнения к лечению, чтобы «разблокировать» напряженность из-за сокращения мышц-агонистов и антагонистов.

Ботулинический токсин типа А Применение, изображения и побочные эффекты

Что произойдет, если я пропущу дозу (Ботокс, Косметический ботокс)?

Поскольку ботулинический токсин имеет временный эффект и вводится через большие промежутки времени, пропущенная доза вряд ли нанесет вред.

Что произойдет, если я передозирую (ботокс, косметический ботокс)?

Обратитесь за неотложной медицинской помощью или позвоните в справочную службу Poison по телефону 1-800-222-1222.

Симптомы передозировки могут проявиться не сразу, но могут включать мышечную слабость, проблемы с глотанием и слабое или поверхностное дыхание.

Чего следует избегать после введения ботокса (Botox, Botox Cosmetic)?

Ботокс

может ухудшить ваше зрение или восприятие глубины. Избегайте вождения или опасной деятельности, пока не узнаете, как это лекарство повлияет на вас.

Избегайте слишком быстрого возвращения к обычной физической активности после инъекции.

Какие другие препараты повлияют на Ботокс (Ботокс, Ботокс косметический)?

Расскажите своему врачу обо всех ваших других лекарствах, особенно:

Этот список неполный. Другие лекарства могут влиять на Ботокс, включая лекарства, отпускаемые по рецепту и без рецепта, витамины и растительные продукты. Здесь перечислены не все возможные лекарственные взаимодействия.

Где я могу получить дополнительную информацию (Ботокс, косметика Ботокс)?

Ваш врач или фармацевт может предоставить дополнительную информацию о ботоксе (онаботулотоксине А).


Помните, храните это и все другие лекарства в недоступном для детей месте, никогда не делитесь своими лекарствами с другими и используйте это лекарство только по назначению.

Были предприняты все усилия, чтобы обеспечить точность, актуальность и полноту информации, предоставленной Cerner Multum, Inc. («Multum»), но никаких гарантий на этот счет не дается. Содержащаяся здесь информация о препарате может меняться с течением времени. Информация Multum была собрана для использования практикующими врачами и потребителями в Соединенных Штатах, и поэтому Multum не гарантирует, что использование за пределами Соединенных Штатов допустимо, если специально не указано иное.Информация о лекарствах Multum не поддерживает лекарства, не диагностирует пациентов и не рекомендует лечение. Информация о лекарствах Multum — это информационный ресурс, предназначенный для помощи лицензированным практикующим врачам в уходе за своими пациентами и/или для обслуживания потребителей, пользующихся этой услугой в качестве дополнения, а не замены опыта, навыков, знаний и суждений практикующих врачей. Отсутствие предупреждения для данного препарата или комбинации препаратов никоим образом не должно толковаться как указание на то, что препарат или комбинация препаратов являются безопасными, эффективными или подходящими для данного пациента.Multum не несет никакой ответственности за какой-либо аспект медицинского обслуживания, осуществляемого с помощью информации, предоставляемой Multum. Информация, содержащаяся здесь, не предназначена для охвата всех возможных способов применения, указаний, мер предосторожности, предупреждений, взаимодействий с лекарственными средствами, аллергических реакций или побочных эффектов. Если у вас есть вопросы о лекарствах, которые вы принимаете, проконсультируйтесь с врачом, медсестрой или фармацевтом.

Copyright 1996-2021 Cerner Multum, Inc.

Клиническое применение ботулотоксина

Решение о том, начинать ли пациенту лечение ботулотоксином, зависит от баланса рисков лечения с потенциальными улучшениями активной и пассивной функции, уровня боли, вторичных эффектов нежелательной мышечной активности и качества жизни.В Австралии практикующие врачи-специалисты, такие как офтальмологи, неврологи, хирурги, специалисты по реабилитации и педиатры, могут получить доступ к государственной схеме Раздела 100. Это предусматривает возмещение стоимости ботулотоксина типа А при следующих состояниях:

  • блефароспазм
  • спастическая кривошея
  • динамическая эквинусная деформация стопы, связанная с детским церебральным параличом, у детей двух лет и старше
  • Спастичность после инсульта.

Ботокс также одобрен для лечения косоглазия у детей и взрослых, очаговой спастичности конечностей, первичного гипергидроза подмышечных впадин и спастической дисфонии. Ботокс и Диспорт одобрены для лечения межбровных морщин на лбу.

Блефароспазм


При блефароспазме и гемифациальном спазме ботулинический токсин типа А вводят подкожно медиально и латерально в верхние и нижние круговые мышцы глаза.Риски включают воздействие на роговицу из-за уменьшения моргания и острую закрытоугольную глаукому из-за антихолинергического эффекта. 2

Цервикальная дистония (спастическая кривошея) (см. ссылку 3)

Пациенты с цервикальной дистонией имеют аномальные скручивания или устойчивые позы головы, шеи и плеч. Ботулинический токсин типа А вводят в мышцы шеи, чтобы уменьшить боль и вращение головы. В зависимости от положения головы может вводиться комбинация грудино-ключично-сосцевидной, ременной, паравертебральной, лестничной и трапециевидной мышц.Более чем у 50% пациентов будет наблюдаться значительное улучшение симптомов. Дисфагия является наиболее частым нежелательным явлением, которое в тяжелых случаях может привести к аспирационной пневмонии.

Фокальная дистония кисти (писчий спазм) (см. ссылку 4)

Очаговая дистония рук — это дистония, связанная с определенной задачей, которая может поражать людей, выполняющих повторяющиеся движения в течение продолжительных периодов времени. Целью лечения является уменьшение дистонической осанки и улучшение функции. Эффект может быть не таким хорошим, когда целью является улучшение сложных задач на мелкую моторику, например, у музыкантов.Электромиография или электрическая стимуляция используются для направления инъекций, и правильный выбор мышц жизненно важен для хорошего результата.

Гипергидроз (см. ссылку 5)


Гипергидроз — это состояние повышенной потливости подмышечных впадин, ладоней и подошв стоп. Перед началом лечения следует исключить причины вторичного гипергидроза, такие как гипертиреоз. Ботулинический токсин типа А вводят внутрикожно, побочные эффекты возникают редко.

Спастическая дисфония (фокальная дистония гортани) (см.6)


Спазм голосовых связок, обычно спазм приводящих мышц, может препятствовать общению и реагировать на инъекции ботулинического токсина типа А. Также возникает спазм отводящей мышцы, но он может быть менее чувствителен к лечению ботулиническим токсином типа А. Ларингоскопия и электромиография необходимы для диагностической оценки и инъекции. Следует избегать инъекций мышц гортани у пациентов, нуждающихся в общей анестезии для плановой операции.

Очаговая спастичность


Спастичность является одним из компонентов синдрома верхнего двигательного нейрона и определяется как зависящее от скорости увеличение мышечного тонуса.Ботулинический токсин типа А часто используется для лечения гипертонуса в сочетании с другими методами лечения, такими как шинирование, растяжение и укрепление мышц-антагонистов.

Дети

В идеале дети, получающие лечение, должны иметь доступ к многопрофильной клинике, где могут быть рассмотрены другие вмешательства при спастичности. Самая большая группа детей, получающих ботулинический токсин типа А для лечения спастичности, — это дети с церебральным параличом. Было показано, что лечение эффективно для уменьшения эквинусной походки у этих детей (инъекции в икроножные мышцы, подколенное сухожилие и сгибатели бедра), улучшения функции верхних конечностей (инъекции в мышцы плеча, локтя, запястья и сгибателей пальцев), уменьшения боли (инъекции в мышцы-сгибатели бедра). приводящие мышцы бедра) и снижение потребности в ортопедической хирургии. 7,8,9, 10 У детей с дистонией также может наступить улучшение после лечения ботулиническим токсином типа А, хотя выбор мышц и дозировка являются клинически сложными.

Детям со спастичностью и минимальной контрактурой, у которых есть функциональные цели или цели по уходу, лечение может принести пользу уже в возрасте 12–18 месяцев. В целом ботулинический токсин типа А менее эффективен, особенно в отношении нижних конечностей, после первого десятилетия жизни.

Взрослые

Спастичность у взрослых чаще всего наблюдается после приобретенной черепно-мозговой травмы, инсульта, рассеянного склероза и повреждения спинного мозга.Постановка целей перед лечением, наряду с характером пораженных групп мышц и аномалией тонуса, определяет выбор мышц. Было показано, что раннее лечение ботулиническим токсином типа А после инсульта снижает инвалидность и нагрузку на лиц, осуществляющих уход. 11, 12

Косметическое применение


Ботулинический токсин типа А используется для лечения межбровных морщин (корругационная мышца или мышца гордеца), гусиных лапок (латеральные волокна круговой мышцы глаза) и морщин на лбу (лобная мышца).

Другое применение


Ботулинический токсин типа А также показал клиническую пользу для пациентов с болезнью Паркинсона, уменьшая тремор челюстей и избыточное слюноотделение. 13 Он используется для облегчения сенсорных и двигательных симптомов, связанных с тиками, синдромом Туретта и синдромом беспокойных ног, а также для пациентов с мигренью, слюнотечением или нейрогенным мочевым пузырем.

Первичная резистентность к ботулиническому токсину типа A и B | Журнал эстетической хирургии

Ботулинический токсин (БТ) все чаще используется по косметическим показаниям и для лечения состояний с мышечной гиперактивностью благодаря его способности ингибировать высвобождение ацетилхолина в нервно-мышечном синапсе.Условия, при которых он показан, включают двигательные расстройства (спастичность, цервикальная дистония), урологические расстройства (гиперактивный мочевой пузырь), дерматологические состояния (подмышечный гипергидроз) и косметические применения. 1 BT не является лекарством от вышеупомянутых состояний, а обеспечивает временное облегчение симптомов; таким образом, пациенты могут нуждаться в многочисленных курсах лечения, как правило, каждые несколько месяцев. Наивный БТ ​​состоит из нейротоксина с молекулярной массой 150 кДа и комплекса до 6 других неклостридиальных белков, таких как гемагглютинины. 1 ВТ имеет 7 иммунологически различных серотипов, из которых два типа А и В. Различные серотипы работают через разные механизмы, ингибируя набор белков, комплекс SNARE, что вызывает вялый паралич целевой мышцы. 2 Различия между составами БТ могут включать бактериальный штамм, из которого он был получен, производственный процесс, а также количество и тип вспомогательных веществ. 1 В возникновении первичной резистентности к БТ и неэффективности терапии участвуют различные причины.При неэффективности терапии БТ типа А может быть реализовано использование БТ типа В. Показания для ботокса (онаботулотоксина А) включают временное улучшение внешнего вида глабеллярных морщин от умеренной до выраженной, связанных с активностью мышц, вызывающих сморщивание кожи, и/или мышцу гордеца, а также умеренных или выраженных латеральных морщин, связанных с активностью круговой мышцы глаза у взрослых пациентов (Botox, Allergan, Inc. , Ирвин, Калифорния). MyoBloc (rimabotulinumtoxinB, Solstice Neurosciences, Louisville, KY) показан для лечения цервикальной дистонии у взрослых и был одобрен для этого Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA) с 1999 года.

В этой статье мы рассматриваем факторы, влияющие на первичную резистентность BT типа А, и постулируем, может ли генетика играть определенную роль. Мы также изучаем преимущества и недостатки использования ботулинического токсина типа B не по прямому назначению для пациентов с резистентностью к типу A. Мы провели ретроспективный обзор карт двух пациентов, которых лечил один хирург и у которых была обнаружена первичная резистентность к ботулиническому токсину А. Наконец, мы также провели обзор литературы на предмет публикаций о первичной резистентности к БТ или неэффективности терапии.

ИСТОРИИ ДЕЛ

Пациент 1 — 44-летняя русская женщина из Москвы. Перед попыткой лечения с помощью БТ типа B пациент получил Рестилайн (Valeant Pharmaceuticals International Inc., Бриджуотер, Нью-Джерси) и Ксеомин (инкоботулотоксин А, Merz Aesthetics, Гринсборо, Северная Каролина) на лицо. Она также получила ботокс и диспорт (абоботулотоксин А, Ipsen Biopharmaceuticals Inc., Basking Ridge, NJ) до презентации. Первоначально причиной неэффективности лечения считалась неправильная техника инъекции, и никаких попыток взять кровь на антитела не предпринималось.После неудачного лечения первичной БТ типа А пациент успешно перенес лечение БТ типа В и был доволен результатами. Повторное введение через четыре месяца после первоначального успешного лечения дало частичный эффект. Пациент сообщил о значительно более высоком уровне боли при применении БТ типа В по сравнению с БТ типа А и решил не продолжать какое-либо лечение БТ в будущем.

Пациентка 2, 45-летняя русская женщина, у которой также наблюдалась неэффективность первичной терапии по поводу БТ типа А.Неверно, что она подвергалась воздействию каких-либо испорченных ботулином консервов. Попыток взять кровь на антитела не предпринималось. Затем она получила частично успешное лечение БТ типа В после неудачи первичного лечения БТ типа А. Она также сообщила о большей боли от введения БТ типа В и также решила не продолжать какое-либо лечение БТ в будущем.

ОБСУЖДЕНИЕ

Насколько нам известно, это одно из первых исследований, посвященных неэффективности первичной терапии БТ типа А в косметических целях и, следовательно, эффективности MyoBloc.Все три одобренных FDA продукта для терапии БТ типа А переносятся пациентами достаточно хорошо. В клинических испытаниях ботокса ® не было зарегистрировано серьезных нежелательных явлений. 3 Аналогичным образом, несмотря на то, что в одном исследовании, касающемся использования Диспорта для лечения межбровных морщин, 66% пациентов сообщили о побочных эффектах легкой или средней степени тяжести, считалось, что лечение не является причиной подавляющего большинства этих явлений. 3 Данные по Ксеомину менее многочисленны, так как это последний одобренный продукт для терапии БТ типа А, однако наиболее частыми побочными эффектами, о которых сообщалось в клинических испытаниях, были головные боли и назофарингит. 4 Однако неблагоприятные эффекты не обязательно означают неудачу; Терапия БТ может считаться неудачной, если пациент, врач или оба не удовлетворены предполагаемым результатом лечения. 5 Неэффективность терапии БТ классифицируется как первичная или вторичная. Первичная неудача терапии возникает после первого применения, тогда как вторичная терапия лечения неудачи изначально успешна, прежде чем неудача начнется в более поздний момент. В одном сообщении в литературе указано, что первичная резистентность к БТ типа А встречается с частотой 6.25% (3/16 пациентов) в некосметических целях. 6 Вторичная неудача терапии БТ типа А при некосметических аппликациях возникает примерно у 5-10% пациентов с некосметическими аппликациями. 7 Кроме того, неэффективность терапии может быть частичной или полной.

Неудача первичной терапии может быть результатом неправильного диагноза состояния, на которое можно частично воздействовать или лечить с помощью терапии БТ. Примерами неверных диагнозов являются врожденный птоз, тяжелая миастения, апраксия открывания век и расхождение век при предполагаемом блефароспазме.Другие неправильные диагнозы включают антеколлис и различные формы спастической кривошеи (цервикальная дистония). 5 Дополнительные причины неэффективности первичной терапии включают выбор целевых мышц, дозировку БТ и снижение эффективности БТ из-за неправильного обращения во время хранения и транспортировки. 5 Предполагаемые причины неэффективности первичной терапии включают ранее существовавшие антитела к БТ (АТ), хроническое воздействие ботулина в детстве, перекрестную реакцию других АТ (столбнячный токсин АБ) и аномалии акцепторов БТ; однако нет никаких доказательств, подтверждающих эти предположения.

Использование БТ типа В может быть реализовано при неэффективности первичной или вторичной терапии БТ типа А. Было показано, что БТ типа В вызывает больше местных и системных антихолинергических побочных эффектов, чем БТ типа А. К ним относятся сухость во рту, нарушение аккомодации, раздражение конъюнктивы, снижение потоотделения, дисфагия, изжога, запор, затрудненное опорожнение мочевого пузыря и сухость носа. слизистая оболочка. 8 Кроме того, в литературе редко упоминается тот факт, что инъекция БТ типа В очень болезненна.Это согласуется с предыдущим сообщением в литературе, указывающим, что инъекция БТ типа В более болезненна, чем инъекция БТ типа А. Dutton et al. 2 также сообщают, что тяжесть локальной боли значительно снижается, хотя и не устраняется, путем разбавления токсина в соотношении 1:1 консервированным физиологическим раствором. Таким образом, существенным недостатком использования MyoBloc при лечении резистентности типа А является крайний дискомфорт, который пациенты испытывают во время инъекции. Предыдущие исследования изучали эффективность лечения БТ типа В у пациентов с вторичной неэффективностью терапии БТ типа А в некосметических целях. 9 Эти исследования показывают, что, хотя БТ типа В может быть первоначально эффективна у некоторых пациентов с вторичной неудачей терапии БТ типа А, эти результаты, вероятно, носят временный характер. Дресслер и др. 9 сообщили, что у 86% пациентов в их исследовании развилась неудача терапии БТ типа В после 5 применений, которую нельзя было преодолеть путем удвоения дозы.

Существуют различные мнения относительно клинического значения продукции АБ при терапии БТ типа А, и связь между наличием АТ и успехом лечения неясна.Продукция АТ при терапии БТ типа А возникает, когда иммунная система идентифицирует токсин и/или его составные белки (которые присутствуют в препаратах Ботокс и Диспорт, но не Ксеомин) как чужеродные вещества; в ответ на исследования, предполагающие, что более низкая белковая нагрузка может минимизировать иммунный ответ, производители BT типа A стремились соответствующим образом снизить уровень белка. 10 Некоторые исследователи предположили, что Ксеомин обладает меньшим иммуногенным потенциалом, чем другие препараты БТ типа А, но стоит отметить, что производство АБ составляет менее 1% как для Ботокса, так и для Диспорта. 4 Для БТ типа А сообщения в литературе различаются в зависимости от того, существует ли взаимосвязь между производством АВ и успехом терапии БТ, а результаты могут зависеть от дизайна исследования и показаний к лечению. 1,11,12 Barnes и коллеги сообщили, что у 25 из 36 пациентов с резистентностью к БТ типа А не было антител к токсину типа А или комплексу токсинов. Барнс и др. 11 сообщают, что ни у одного из их субъектов, которые действительно ответили на терапию BT типа B, не было AB к токсину типа B или комплексу токсина типа B.

Каждый серотип BT имеет уникальный функциональный сайт связывания; следовательно, АТ к одному серотипу не должны влиять на реакцию на другой серотип. 2 Dutton и коллеги 2 сообщили о 12,5% частоте первичной неудачи БТ типа В у пациентов с неудачей терапии БТ типа А. Барнс и др. 11 сообщили о частоте неудач MyoBloc примерно в 64% (36/56 пациентов) при не косметических показаниях после неудачи БТ типа А. Даттон и др. 2 сообщили, что продолжительность лечения для BT типа B, по-видимому, меньше, чем для BT типа A, в среднем около 7.3 недели.

Barnes и коллеги 11 рекомендуют попробовать увеличить дозу БТ типа B до подтверждения неэффективности лечения. У пациентов может развиться вторичная неэффективность лечения БТ типа В, поскольку MyoBloc имеет более высокую антигенную нагрузку, чем Ботокс, что может вызвать более быстрое развитие блокирующих АТ. 5 Было высказано предположение, что АБ в БТ типа А могут способствовать неэффективности терапии БТ типа В. потенции. 8 Предлагаемый коэффициент конверсии для использования Ботокса и MyoBloc в нервно-мышечном соединении составляет 1:40, а для использования в вегетативных синапсах может быть 1:20. 8

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Насколько нам известно, это одно из первых исследований первичной устойчивости к БТ в косметических целях. Кроме того, мы исследовали возможность генетического влияния на устойчивость к БТ; однако в литературе нет доказательств, подтверждающих это. Утвержденные варианты лечения для пациентов с резистентностью к БТ типа А ограничены.В то время как БТ типа В может быть эффективным во время начальных курсов лечения, пациентам может потребоваться более частое лечение или они также могут перестать реагировать на лечение БТ типа В.

Финансирование

Авторы не получали финансовой поддержки исследования, авторства и публикации этой статьи.

Раскрытие информации

Авторы заявляют об отсутствии потенциального конфликта интересов в отношении исследования, авторства и публикации этой статьи.

ССЫЛКИ

1.

Клиническая значимость иммуногенности ботулинического токсина

,

Биопрепараты

,

2012

, том.

26

 

2

(стр. 

1

9

)2,  ,  .

Myobloc для лечения доброкачественного эссенциального блефароспазма у пациентов, невосприимчивых к ботоксу

22

 

3

(стр. 

173

177

)3,  ,  , и др.

Обзор онаботулотоксина А (ботокс)

,

Aestet Surg J

,

2013

, том.

33

 

Приложение 1

(стр.

9s

12s

)4,  ,  , et al.

IncobotulinumtoxinA в ​​клинической литературе

,

Aestet Surg J

,

2013

, vol.

33

 

Приложение 1

(стр.

23s

34s

)5.

Клиническая картина и лечение индуцированной антителами неудачи терапии ботулотоксином

19

 

Дополнение 8

(стр.

S92

S100

)6,  ,  ,  .

Результат селективной рамисэктомии при резистентной к ботулиническому токсину кривошеи

65

 

4

(стр. 

472

478

)7,  .

Тест EBD — клинический тест для выявления антител к ботулиническому токсину типа А

,

Mov Disord

,

1997

, том.

12

 

1

(стр.

95

99

)8,  .

Клиническое применение ботулинических токсинов, отличных от А: ботулинический токсин типа В

,

Neurotox Res

,

2006

, том.

9

 

2-3

(стр. 

121

125

)9,  ,  .

Ботулинический токсин типа B при неэффективности терапии ботулиническим токсином типа A, индуцированной антителами

250

 

8

(стр. 

967

969

)10,  ,  , и др.

Инкоботулотоксин А (Ксеомин): предыстория, механизм действия и производство

33

 

Приложение 1

(стр.

18s

22s

)11, ,  , и др.

Применение ботулинического токсина типа B в лечении пациентов, которые стали невосприимчивыми к ботулиническому токсину типа A — первоначальный опыт

12

 

12

(стр. 

947

955

)12,  ,  ,  ,  ,  .

Нейтрализующие антитела и вторичная неэффективность терапии после лечения ботулотоксином типа А: много шума из ничего?

,

Клин Нейрофармакол

,

2009

, том.

32

 

4

(стр. 

213

218

)13,  ,  .

Долгосрочная безопасность, эффективность, дозировка и развитие резистентности к ботулиническому токсину типа В при цервикальной дистонии

20

 

2

(стр.

233

237

)

© 2015 Американское общество эстетической пластической хирургии, Inc. Перепечатка и разрешение: [email protected]

границ | Долгосрочные эффекты с потенциальным клиническим значением ботулинического токсина типа А на механику мышц, подвергшихся воздействию

Введение

Широко используемый метод лечения спастичности, возникающей при различных состояниях, таких как церебральный паралич (ДЦП) (Graham et al., 2000; Крисвелл и др., 2006; Lukban et al., 2009), травмы спинного мозга (Adams and Hicks, 2005; Marciniak et al., 2008), рассеянный склероз (Hyman et al., 2000; Van Der Walt et al., 2012) и инсульт (Bakheit et al., 2012). al., 2000; Bhakta et al., 2000) представляет собой инъекцию ботулинического токсина типа А (БТХ-А). Токсин временно парализует мышцы, ингибируя выброс везикул, содержащих ацетилхолин, в синаптическую щель и, следовательно, передачу нервных импульсов к мышечным волокнам в нервно-мышечном соединении (Blasi et al., 1993; Брин, 1997; Хаммонд и др., 2015). Следствием этого является снижение мышечного тонуса (Grazko et al., 1995; Whelchel et al., 2004), что механически подразумевает ограниченную способность производства мышечной силы. Лечение BTX-A направлено на улучшение функции сустава (Love et al., 2001) за счет снижения пассивного сопротивления мышц в суставе (Sheean, 2001) и увеличения диапазона движений в суставе (Koman et al., 2000).

Понимание влияния BTX-A на мышечную механику имеет центральное значение, поскольку открытые мышцы продолжают служить двигателем движения, но это понимание остается ограниченным.Зависимое от длины снижение крутящего момента при разгибании колена (Longino et al., 2005) и мышечной силы (Yucesoy et al., 2012), продемонстрированное в предыдущих экспериментах на животных, указывает на сложные эффекты BTX-A на механику суставов. Кроме того, эксперименты в переднем отделе голени крыс ясно показали, что BTX-A не улучшает диапазон усилия мышц по длине (1 диапазон ) и повышает пассивные силы инъецированной передней большеберцовой (TA) мышцы (Yucesoy et al. др., 2012). Кроме того, сообщалось о распространении BTX-A через мышечную фасцию (Shaari et al., 1991). Сообщалось, что такое распространение снижает силу (Yaraskavitch et al., 2008; Frasson et al., 2012) и вызывает изменения в характеристиках длины и силы также мышц без инъекций (Yucesoy et al., 2012; Ates and Yucesoy, 2014, 2018; Ючесой и Атес, 2018). Примечательно, что эти изменения в краткосрочной перспективе включают эффекты, противоречащие целям лечения (т. е. снижение диапазона l , увеличение пассивных сил и повышение содержания внутримышечного коллагена) (Ates and Yucesoy, 2014).Анализ методом конечных элементов этого показал, что они действительно приписывают сохраняющуюся повышенную жесткость внеклеточного матрикса обнаженных мышц (Туркоглу и Ючесой, 2016), тестирование которого заслуживает большого внимания.

Неизвестно, сохраняются ли краткосрочные эффекты в долгосрочной перспективе, но это очень важно. Поэтому в модели крыс мы стремились проверить следующие гипотезы. В долгосрочной перспективе BTX-A (1) поддерживает диапазон 1 , (2) увеличивает пассивные силы инъецированной ТА мышцы и (3) распространяется на неинъецированные мышцы, также влияя на их активные и пассивные силы.

Материалы и методы

Оценка влияния BTX-A на мышечную механику

Хирургические и экспериментальные процедуры были одобрены Комитетом по этике экспериментов на животных Университета Богазичи. Самцов крыс линии Вистар разделили на две группы: контрольную ( n = 7; среднее значение ± стандартное отклонение: масса тела 386,3 ± 36,5 г и 406,9 ± 16,8 г для времени инъекции и эксперимента соответственно) и БТ-А ( n ). = 7, масса тела 394,7 ± 29,0 г и 404.3 ± 34,3 г для времени введения и опыта соответственно).

С помощью внутрибрюшинного введения кетамина (1 мг/кг) была наложена легкая седация. Затем была выбрита область, перевязанная в радиусе примерно 15 мм от центра надколенника, где был помещен маркер. Приводя голеностопный сустав к максимальному подошвенному сгибанию, а колено к приблизительному углу 90°, пальпаторно определяли TA-мышцу. В точке на 10 мм дистальнее большеберцовой кости устанавливали второй маркер. Отрезок линии был проведен между двумя маркерами, и место инъекции над мышцей ТА было определено как точка на 5 мм латеральнее второго маркера.В этом месте глубина ТА и толщина кожи составляли примерно 5–5,5 и 0,7–1 мм соответственно. Все инъекции производились исключительно в ТА, на глубину 3 мм, т. е. в поверхностную половину мышцы.

Флакон объемом 100 ЕД с вакуумно-высушенным комплексом ботулинического нейротоксина типа А (BTX-A) (BOTOX; Allergan Pharmaceuticals, Вестпорт, Ирландия) был восстановлен 0,9% солевым раствором. В группе BTX-A животные получали однократную внутримышечную инъекцию BTX-A.Суммарная доза составила 0,1 ЕД, а введенный объем – 20 мкл. В контрольной группе животным вводили однократно внутримышечно тот же объем 0,9% физиологического раствора исключительно. Все инъекции были выполнены за 1 месяц до тестирования. Животных содержали в стандартных клетках раздельно. Комната для ухода за животными была отрегулирована по температуре и поддерживала 12-часовой цикл темноты-света. Животные могли заниматься своей обычной деятельностью до дня эксперимента.

Хирургические процедуры

Животных анестезировали с помощью внутрибрюшинного введения раствора уретана (1.2 мл 12,5% раствора уретана на 100 г массы тела). При необходимости вводили дополнительные дозы (максимально 0,5 мл). Сразу после экспериментов животных подвергали эвтаназии с помощью передозировки раствора уретана.

Для предотвращения переохлаждения животных помещали на нагревательную подушку (Homoeothermic Blanket Control Unit; Harvard Apparatus, Holliston, MA, United States) во время операции и сбора данных. Контроль температуры тела на уровне 37°C был достигнут путем регулирования температуры нагретой подушки с использованием системы обратной связи, интегрированной с ректальным термометром.

Во время операции удалены кожа и двуглавая мышца бедра левой задней конечности. После обнажения переднего отдела голени была выполнена только ограниченная дистальная фасциотомия для удаления удерживателей (то есть поперечной связки голени и крестообразной связки голени). Следовательно, соединительные ткани мышечных брюшек внутри компартмента [т. е. TA, длинный разгибатель пальцев (EDL) и длинный разгибатель большого пальца стопы (EHL)] остались нетронутыми.

Референтное положение было выбрано как комбинация угла коленного сустава 120°; и угол голеностопного сустава 100°.Это положение совпадает с комбинацией положений колена и лодыжки, которую крыса достигает in vivo во время фазы опоры при ходьбе (Gruner et al., 1980). Сохраняя референтное положение, было сделано следующее: с помощью шелковой нити были связаны вместе четыре дистальных сухожилия мышцы EDL. На дистальные сухожилия мышц EDL, TA и EHL, а также на фиксированное место на голени наносили соответствующие маркеры. После этого дистальный комплекс сухожилий EDL, а также сухожилия TA и EHL разрезали как можно дистальнее.

Обнажение бедренного отдела выполнялось с двумя целями: (1) для достижения проксимального сухожилия EDL и (2) для обнажения седалищного нерва. Впоследствии, сохраняя небольшой кусок латерального мыщелка бедра прикрепленным, сухожилие отрезали от бедренной кости. Седалищный нерв отсекают от других тканей. После пересечения всех нервных ветвей, ведущих к мышцам бедренного отдела, седалищный нерв перерезали как можно проксимальнее.

Проксимальное сухожилие EDL, связанные дистальные сухожилия EDL, дистальные сухожилия TA и дистальные сухожилия мышц EHL были сшиты четырьмя отдельными кевларовыми нитями, чтобы обеспечить соединение с датчиками силы.

Экспериментальная установка

Для установки животного в экспериментальную установку (рис. 1А) была использована следующая процедура: (1) во избежание обструкции кевларовыми нитями, соединяющими дистальные сухожилия с датчиками силы, голеностопный сустав приводили в максимальное подошвенное сгибание. (180°), в котором стопа фиксировалась к стопорному зажиму. (2) Бедренная кость была зафиксирована бедренным зажимом таким образом, чтобы угол колена был установлен на 120°. (3) Стараясь обеспечить их выравнивание по линии натяжения мышцы, каждая нить из кевлара была подключена к отдельному датчику силы (BLH Electronics Inc., Кантон, Массачусетс, США). (4) Дистальный конец седалищного нерва был помещен на биполярный серебряный электрод (рис. 1В).

Рис. 1. Экспериментальная установка. (A) Каждое из дистальных сухожилий TA и EHL мышц, а также проксимальных и связанных дистальных сухожилий EDL (проксимального и дистального EDL соответственно) соединяли с отдельным датчиком силы кевларовыми нитями. На протяжении всего эксперимента EDL и EHL сохраняли постоянную длину мышечно-сухожильного комплекса.Исключительно была удлинена ТА мышца (Δ1 mt ТА ) до прогрессивно увеличивающейся длины, при которой выполнялись изометрические сокращения. Удлинение (указано двунаправленной стрелкой) начинали с активной длины провисания мышцы с шагом 1 мм путем изменения положения датчика силы ТА. На вставке показаны относительные размеры и положение мышц передней части голени. (B) Исходные экспериментальные условия для углов суставов составляют 120° и 100° для углов колена и лодыжки соответственно.Бедренная кость и стопа фиксировались металлическими скобами. Дистальный конец седалищного нерва накладывали на биполярный серебряный электрод.

Экспериментальные условия и процедура

В течение всего эксперимента комнатную температуру поддерживали на уровне 26°C. Для предотвращения обезвоживания мышцы и сухожилия регулярно промывали изотоническим солевым раствором. Дистальные и проксимальные сухожилия EDL и дистальные сухожилия мышц EHL все время удерживались в исходных положениях. Поэтому в ходе эксперимента их длины не меняли.Тем не менее, ТА была доведена до различной длины мышечно-сухожильного комплекса путем изменения положения его датчика силы. Изометрические силы всех мышц измерялись одновременно на каждой длине ТА. Измерение начинали с активной длины провисания ТА, и его длина увеличивалась с шагом в 1 мм до тех пор, пока не достигала 2 мм сверх его оптимальной длины. Длина мышечно-сухожильного комплекса ТА выражена как отклонение от его активной длины в расслабленном состоянии (Δl мт ТА ).

После доведения ТА до целевой длины мышцы все исследуемые мышцы максимально активировали постоянным током 2 мА (ширина квадратного импульса 0.1 мс) доставляли к седалищному нерву (STMISOC; BIOPAC Systems, Голета, Калифорния, США) по следующему протоколу стимуляции: (1) вызывали два подергивания. 2) через 300 мс после второго подергивания мышцы тетанизировались (цикл импульсов 400 мс, частота 100 Гц). (3) Через 200 мс после тетанического сокращения было вызвано еще одно подергивание. Каждое завершение этого протокола сопровождалось 2-минутным периодом восстановления для всех мышц. В течение восстановительного периода TA удерживался вблизи активной длины провисания. Однако длины EDL и EHL не изменились.

Оценка изменений внутримышечного содержания соединительной ткани в связи с BTX-A

В отдельной группе самцов крыс Wistar оценивали изменения внутримышечного содержания соединительной ткани, вызванные BTX-A. Животные были разделены на две группы: контрольную ( n = 6; среднее значение ± стандартное отклонение: масса тела 404,3 ± 31,0 г) и БТ-А ( n = 6, масса тела 413,3 ± 46,2 г).

Количество коллагена в каждой мышце определяли количественно с помощью колориметрического анализа содержания гидроксипролина (Carlson, 2014) через 1 месяц после инъекций.Вслед за вышеописанными хирургическими процедурами для обнажения передних мышц голени биоптаты удаляли быстро после эвтаназии животного. Чистота образцов мышц обеспечивалась тщательным удалением из образца всех сухожильных материалов. Мышечные биопсии подвергали мгновенной заморозке в жидком азоте и хранили при температуре -80°C перед проведением анализа в течение 4 недель после удаления. Короче говоря, каждую мышцу взвешивали перед гидролизом при 130°C в течение 12 часов в 5 н. HCl. Образцы гидролизата окисляли при комнатной температуре раствором хлорамина-Т в течение 25 мин.Затем примеси экстрагировали и отбрасывали обработкой толуолом. Для превращения продукта окисления в пиррол оставшийся водный слой, содержащий продукты гидроксипролина, нагревали в течение 30 мин в кипящей воде. Конечный продукт реакции пиррола затем удаляют при второй экстракции толуолом, и конечный раствор смешивают с реактивом Эрлиха в течение 30 мин. Поглощение образцов определяли при 560 нм в трех экземплярах с использованием спектрофотометра УФ-видимого диапазона (UV-1280; SHIMADZU, Киото, Япония).

Обработка данных

Способность мышечной ткани к механическому сопротивлению при тестируемой длине мышечно-сухожильного аппарата характеризуется мышечной силой в нестимулированном состоянии. Это называется пассивной мышечной силой ( F p ). Используя кривые сила-время, полученные экспериментально: (i) F p определяли через 100 мс после второго подергивания (рис. 2). (ii) Общая сила мышц определялась как средняя сила (для интервала 200 мс, через 150 мс после вызывания тетанической стимуляции) во время тетанического плато.Мышечная активная сила ( F a ) на длину мышечно-сухожильного комплекса была рассчитана путем вычитания F p из общей мышечной силы.

Рисунок 2. Типичные примеры кривых сила-время, измеренных в сухожилиях экспериментальных мышц как в контрольной группе, так и в группе BTX-A. Верхняя и нижняя панели: наложенные кривые сила-время TA, EDL дистальной, EDL проксимальной и EHL мышц, зарегистрированные при оптимальной длине TA мышцы.

Критерий наименьших квадратов был использован для подгонки данных для F p и F a с полиномиальной функцией:

y=a0=a1⁢x2+a2⁢x2+…+an⁢xn(1)

, где y представляет собой изометрическую мышечную силу (например, F p или F a ), а x представляет собой длину мышечно-сухожильного комплекса. a 0 , a 1 …a n — коэффициенты, определяемые в процессе подбора.

С помощью однофакторного дисперсионного анализа (ANOVA) был определен порядок полиномов (Neter et al., 1996). Наименьший порядок искали с критерием, что все еще обеспечивалось значительное улучшение описания изменений данных мышечной силы в зависимости от длины мышечно-сухожильного комплекса. Эти полиномы использовались для расчета среднего значения и стандартного отклонения (SD) данных: для каждой изучаемой мышцы были получены мышечные силы при различной длине комплекса TA мышца-сухожилие.Для каждой длины мышечно-сухожильного комплекса ТА усредняли мышечные силы, чтобы определить мышечную силу (среднее значение ± стандартное отклонение) в контрольной группе и группе BTX-A.

Силовые характеристики длины мышцы изучались с использованием четырех ключевых детерминант, определяемых следующим образом: (1) Оптимальная сила мышцы – это максимальная изометрическая сила, развиваемая активной мышцей. Оптимальная сила мышц часто рассматривается как показатель способности мышц производить силу. (2) Оптимальная длина мышцы – это длина мышцы, при которой достигается оптимальное усилие мышцы.(3) Активная провисающая длина мышцы — это наименьшая длина, при которой активная мышца все еще может оказывать ненулевое усилие. (4) Диапазон длин мышц при приложении силы — это диапазон длин от активной длины в расслабленном состоянии до оптимальной длины. В пределах потенциального диапазона движения сустава это рассматривается как метрика, указывающая на способность к движению с активным усилием.

Также для обработки этих ключевых детерминант были использованы полученные полиномы для определения: оптимальной силы ТА (т.т. е. максимальное значение активной мышечной силы подобранного полинома для каждой отдельной ТА мышцы), соответствующую оптимальную длину мышцы, а также активную длину ТА. Диапазон длины ТА при приложении активной силы (диапазон 90 432 1 90 433 90 434 90 435) определяли как диапазон длины мышцы между активной длиной провисания мышцы и оптимальной длиной мышцы.

Анализ

гидроксипролина использовался для количественной оценки изменений внутримышечного содержания коллагена в мышцах, подвергшихся воздействию BTX-A. Используя измеренные значения поглощения образцов мышц, определяли содержание гидроксипролина в отдельных мышцах на основе эталона (т.е., стандартная кривая регрессии, идентифицирующая парную информацию о заранее известных количествах гидроксипролина и их измеренных значениях поглощения) в виде мкг гидроксипролина, выраженного на мг сырой массы мышечной ткани. Содержание гидроксипролина переводили во внутримышечное содержание коллагена с помощью константы (7,46), характеризующей количество остатков гидроксипролина в одной молекуле коллагена (Neuman, Logan, 1950).

Статистический анализ

После использования теста Шапиро-Уилка для поиска нормального распределения в l диапазоне данных ТА, непарных t или Манна-Уитни Тест U использовался для проверки влияния инъекции BTX-A на этот показатель.

Двухфакторный ANOVA для повторных измерений (факторы: длина мышечно-сухожильного комплекса TA и группа животных) выполняли отдельно для силы каждой мышцы. Если были обнаружены значительные основные эффекты, были проведены апостериорные тесты Bonferroni для дальнейшего выявления значительных внутрифакторных различий.

Силы обеих групп были выровнены по оптимальной длине. Уменьшение мышечной активной силы рассчитывают на длину мышечно-сухожильного комплекса ТА как разницу в средней силе между контрольной группой и группой BTX-A.Это выражается в процентах от средней силы контрольной группы. Коэффициент ранговой корреляции Спирмена (ρ) был рассчитан для проверки того, коррелирует ли снижение активных сил ТА из-за инъекции BTX-A с длиной мышечно-сухожильного комплекса ТА. Корреляции считались значимыми при P < 0,05.

Критерий Шапиро-Уилка использовался для проверки нормального распределения данных о содержании коллагена. Количество коллагена, рассчитанное для каждой мышцы в группе BTX-A, сравнивали с таковым в контрольной группе с использованием непарного теста t или теста Манна-Уитни U , где это уместно.Различия считались достоверными при P < 0,05.

Результаты

Влияние BTX-A на мышечную механику

TA Характеристики силы и длины

ANOVA (факторы: длина ТА и группа животных) показал как значительное основное влияние на активные силы ТА, так и значительное взаимодействие. Апостериорное тестирование показало значительное влияние BTX-A на большую часть длины мышц (Δl mt TA ≥ -7 мм). Снижение активной силы ТА (например, 75,2, 48.3, и 52,8%, соответственно, при Δl мт ТА = -7 мм, Δl мт ТА = 0 мм и Δl мт ТА = 2 мм) обратно коррелировали с увеличением длины ТА мышцы (ρ = -0,94). , P < 0,001). Диапазон l группы БТХ-А (8,56 ± 2,05 мм) был достоверно уже по сравнению с контрольной группой (11,10 ± 1,58 мм) на 22,9%. Дисперсионный анализ также показал значительное основное влияние на пассивные силы ТА, но без существенного взаимодействия. По сравнению с контрольной группой пассивные силы выше в группе БТХ-А в среднем на 12.3% (рис. 3).

Рис. 3. Силы ТА как функция увеличения длины мышечно-сухожильной мышцы ТА. Активные и пассивные мышечные силы показаны как средние значения и значения стандартного отклонения для контрольной группы и группы BTX-A. Длину мышечно-сухожильного комплекса ТА выражают как отклонение от его оптимальной длины (Δl мт ТА ). Значимые различия между активной силой ТА в контрольной группе и группе BTX-A (тест Bonferroni post hoc ) обозначены *.

Силы EDL

ANOVA показал как в дистальном, так и в проксимальном, только значительное влияние группы животных на активные и пассивные силы EDL. Однако ни значительного влияния длины ТА, ни значимого взаимодействия обнаружено не было. BTX-A вызвал значительное снижение активной силы (в среднем на 66,8% дистально и 55,4% проксимально) и увеличение пассивной силы (в среднем на 62,5% дистально и более чем в два раза проксимально) по сравнению с контрольной группой (рис. 4А, В). .

Рис. 4. Силы EDL в зависимости от увеличения длины сухожилий мышц TA. Активные и пассивные силы EDL, измеренные от (A) дистального сухожилия, (B) от проксимального сухожилия и (C) проксимально-дистальной разницы активной силы EDL ( F EDL дистального F EDL проксимальный ). Изометрические мышечные силы показаны как средние значения и значения стандартного отклонения для контрольной группы и группы BTX-A. Длину мышечно-сухожильного комплекса ТА выражают как отклонение (Δl мт ТА ) от его оптимальной длины.

Анализ

ANOVA также показал значительное основное влияние обоих факторов на различия проксимально-дистальной активной силы EDL (рис. 4C), но без существенного взаимодействия. В то время как для контрольной группы были показаны как положительные, так и отрицательные различия проксимально-дистальной активной силы (дистальные силы EDL были выше, чем проксимальные для Δl mt TA ≤ -7 мм и наоборот при большей длине TA), для BTX- Группа A, проксимальные силы EDL были выше, чем дистальные силы для большей части длины TA (Δl мт TA ≥ -11 мм).Увеличение длины ТА изменило проксимально-дистальную разность активных сил, измеренную на самой короткой длине мышцы (Δl mt TA = –13 мм), значительно для Δl mt TA ≥ –8 мм и для Δl mt TA ≥ −9 мм для контрольной группы и группы БТХ-А соответственно.

Силы ЭХЛ

ANOVA показал значительное основное влияние обоих факторов на активные силы EHL, но без значительного взаимодействия, и только значительное влияние BTX-A на пассивные силы, но без значимого взаимодействия.BTX-A вызывал значительное снижение активной силы (в среднем на 28,8%) и увеличение пассивной силы (в среднем более чем в два раза) по сравнению с контрольной группой (рис. 5).

Рис. 5. Силы EHL в зависимости от увеличения длины сухожилия TA мышцы. Активные и пассивные мышечные силы показаны как средние значения и значения стандартного отклонения для контрольной группы и группы BTX-A. Длину мышечно-сухожильного комплекса ТА выражают как отклонение (Δl мт ТА ) от его оптимальной длины.

Изменения внутримышечного содержания соединительной ткани в связи с BTX-A

Как для мышц с инъекцией ТА, так и для мышц без инъекций EDL и EHL внутримышечное содержание соединительной ткани (рис. 6) было значительно выше в группе BTX-A по сравнению с контрольной группой (группа BTX-A: 21,61 ± 3,56, 14,94 ± 4,82 и 14,82 ± 4,32; контрольная группа: 7,49 ± 2,08, 6,55 ± 2,55 и 7,05 ± 3,81 мкг коллагена/мг мышцы; P = 0,005, 0,006 и 0,029 для TA, EDL и EHL соответственно. ).Обратите внимание, что мышечная масса в группе БТ-А была меньше, чем в контрольной группе (группа БТ-А: 0,35 ± 0,04, 0,10 ± 0,01 и 0,01 ± 0,003 г; контрольная группа: 0,65 ± 0,04, 0,16 ± 0,03, и 0,01 ± 0,01 г, P < 0,001 и P = 0,005 и 0,198 для TA, EDL и EHL соответственно).

Рисунок 6. Содержание коллагена в мышцах TA, EDL и EHL, показанное как среднее значение и стандартное отклонение для контрольной группы и группы BTX-A. Значимые различия между контрольной группой и группой BTX-A обозначены как .

Обсуждение

Отвергая первую гипотезу, настоящие данные указывают на уменьшенный диапазон 1 для инъецированной ТА мышцы. Гипотеза была основана на нашем предыдущем краткосрочном эксперименте (Yucesoy et al., 2012), который показал, в отличие от ожидаемого увеличения, никаких существенных изменений в диапазоне l . Однако это исследование показало, что в долгосрочной перспективе BTX-A приводит даже к сужению мышечного диапазона l .Повышенная пассивная сила инъецированной ТА мышцы подтверждает вторую гипотезу и согласуется с краткосрочными эффектами BTX-A, показанными ранее (Yucesoy et al., 2012). Активные и пассивные силы не только инъецированной мышцы, но и всех мышц в передней части голени были изменены, что указывает на распространение BTX-A также и на неинъецированные мышцы. Это подтверждает третью гипотезу. Повышенный уровень внутримышечного коллагена в сочетании с наблюдаемой мышечной атрофией согласуется с увеличением пассивных сил мышц.Следовательно, вызванные BTX-A изменения в структуре и механике как целевых, так и нецелевых мышц сохраняются и прогрессируют в долгосрочной перспективе.

Измененная механика мышц, подвергшихся воздействию BTX-A

Механизм воздействия BTX-A на мышечную механику и, в частности, то, как это отражается на диапазоне l мышц, был изучен с использованием моделирования методом конечных элементов (Turkoglu et al., 2014). Характерной детерминантой этого механизма был назван «эффект более длительного саркомера» (LSE).Короче говоря, смоделированные инактивированные мышечные волокна, которые представляют собой индуцированный BTX-A частичный мышечный паралич, не укорачиваются. Этот эффект отражается также на активированных через механические взаимодействия мышечных волокон и внеклеточного матрикса (ECM) (Yucesoy, 2010; Yucesoy and Huijing, 2012), что в целом приводит к ограниченному укорочению саркомеров в мышцах, подвергшихся воздействию BTX-A, по сравнению с их аналогами в мышцах. свободная мышца BTX-A. Из-за такой LSE (пожалуйста, см. иллюстрацию на Рисунке 7) саркомеры достигают максимальной выработки силы раньше, что приводит к смещению оптимальной длины мышцы в сторону ее меньшей длины.Это объясняет сужение l диапазона . Моделирование методом конечных элементов временной динамики лечения BTX-A также предсказало, что такой эффект BTX-A может стать более выраженным в долгосрочной перспективе (Turkoglu and Yucesoy, 2016). Это характеризовалось повышенной жесткостью ВКМ мышцы, что, как было показано, через более выраженную LSE вызывает устойчивое и/или увеличение смещения оптимальной длины мышцы в сторону меньшей длины. Этот механизм, вероятно, объясняет настоящие экспериментальные данные, которые, в отличие от серьезных эффектов, о которых сообщалось сразу (Yucesoy et al., 2012) показал суженный диапазон 90 432 1 90 433 90 434 90 435 для TA, подвергавшегося длительному воздействию BTX-A. Основываясь на этих более ранних исследованиях, мы считаем, что работа саркомеров большей длины в мышце, подвергшейся воздействию BTX-A, может быть правдоподобным механизмом, объясняющим настоящие результаты. Однако для того, чтобы подтвердить это, должны быть проведены конкретные новые тесты. Обратите внимание, что значительно более высокое общее содержание коллагена в мышцах, подвергшихся воздействию BTX-A, является важным текущим открытием. Это согласуется с показанными повышенными мышечными пассивными силами, а также с повышенной жесткостью ВКМ, рассмотренной в предыдущем моделировании методом конечных элементов.Проведенный анализ гидроксипролина объективно отражает изменения в содержании внутримышечной соединительной ткани, указывая на увеличение коллагена в мышцах, подвергшихся воздействию BTX-A. Поскольку коллаген является основным несущим компонентом ВКМ, этот анализ непосредственно дополнял нашу цель оценки влияния БТ-А на мышечную механику. Тем не менее, оценка экспрессии и ориентации специфических изоформ коллагена и других эластичных белков, таких как титин (Thacker et al., 2012), в будущих исследованиях может сделать анализ индуцированных BTX-A структурных и механических изменений всесторонним.

Рисунок 7. Эффект более длинного саркомера, иллюстрированный на основе Turkoglu et al. (2014). (A) Конечно-элементная модель мышц состоит из комбинаций последовательно расположенных мышечных элементов, каждый из которых образует целый пучок. Комбинация узлов модели вдоль одной стороны пучка называется интерфейсом пучка. Например, самый проксимальный интерфейс пучка представляет собой комбинацию узлов, обозначенных римскими цифрами от I до IV. Каждый интерфейс пучка обозначается числом от 1 до 17.Локальная длина изменяется вдоль направления мышечного волокна, т. е. анализируется направление деформации волокна. (B) Схематическое изображение изученных моделей BTX-A. Это достигается за счет отсутствия активации мышечных элементов (представляющих частичный паралич, вызванный BTX-A), расположенных в проксимальной половине (PHP), средней половине (MHP) и дистальной половине (DHP) мышцы: белые области показывают парализованные части мышц, тогда как более темные области показывают части, которые активируются максимально. Эти модели изучаются по сравнению с моделью без BTX-A (т.е., максимально задействована вся мышца). (C) Примером является характерный эффект BTX-A, т.е. более длительный эффект саркомера, показанный ранее (Turkoglu et al., 2014). Средняя деформация в направлении волокна представляет собой среднее значение локальных изменений длины в узлах с I по IV в каждом интерфейсе пучка. Следовательно, это показатель, характеризующий изменение длины саркомера в расчете на пучок. Средняя кривая деформации в направлении волокон для мышц без BTX-A локализована ниже, чем у моделей BTX-A, что указывает на то, что саркомеры в мышцах, подвергшихся воздействию BTX-A, достигают большей длины.

Эффекты BTX-A в целом и на механические взаимодействия между мышцами

BTX-A может влиять на межмышечные механические взаимодействия двумя путями: (1) В качестве высокодиффузионного токсина BTX-A может распространяться за пределы инъецированной мышцы через мышечную фасцию (Shaari et al., 1991), кровоток (Ansved et al. , 1997) и/или аксональные пути (Antonucci et al., 2008). Механические эффекты просачивания BTX-A в соседнюю мышцу (Yaraskavitch et al., 2008), в мышцы-синергисты внутри компартмента (Yucesoy et al., 2012, 2015; Атэс и Ючесой, 2014 г.; Yucesoy and Ates, 2018) и даже между антагонистическими компартментами (Ates and Yucesoy, 2018) сообщалось в нескольких исследованиях на животных. Это привело как минимум к снижению активной мышечной силы, но также привело к повышенному содержанию коллагена, жесткости и пассивной силе, а также к уменьшению диапазона 1 мышц без инъекций, подвергавшихся острому воздействию BTX-A путем диффузии. Эффекты BTX-A, исследованные в настоящее время в долгосрочной перспективе, подтвердили, что BTX-A приводит к снижению активной силы всех мышц-синергистов внутри компартмента.С другой стороны, клинически ожидается, что введение BTX-A улучшит баланс сил между агонистом и антагонистом (Gracies et al., 2007; Elvrum et al., 2012). Однако, предполагая, что внутриклеточное распространение BTX-A происходит у пациентов и эффективно в долгосрочной перспективе, влияние BTX-A на такой дисбаланс может быть не таким простым, как ослабление целевой мышцы для лучшего соответствия силе воздействия. антагонист. Вместо этого механически это может также включать ослабление антагониста. Тем не менее, BTX-A может уменьшать совместное сокращение мышц-антагонистов, которое преувеличено у детей с ДЦП (Ikeda et al., 1998). Тем не менее, это не может быть контролируемым эффектом. Что еще более важно, хотя положительные эффекты BTX-A против неврологической патологии вероятны, настоящие результаты предполагают, что одновременно возникающие механические эффекты могут быть неблагоприятными. (2) Мышцы связаны с суставом через сухожилия; однако их брюшки соединены между собой целостной системой миофасциальных соединительнотканных структур (например, коллагеновыми связями, обеспечивающими целостность между эпимизиями соседних мышц и укрепленными коллагеном сосудисто-нервными путями, соединяющими брюшки внутри- и межкомпартментных мышц).В условиях отсутствия BTX-A эпимышечная миофасциальная передача силы (EMFT) (Huijing, 2009; Yucesoy, 2010), т. е. межмышечные механические взаимодействия, происходящие через эти структуры соединительной ткани, оказывают значительное влияние на мышечную механику, включая следующее: анализ магнитно-резонансной томографии показывает гетерогенные локальные изменения длины (варьирующие, например, от 29% удлинения до 13% укорочения) вдоль мышечных волокон медиальной части икроножной мышцы после наложения пассивного растяжения (Pamuk et al., 2016) или субмаксимальной активации (Karakuzu et al., 2017). Анализ ультразвуковой визуализации сдвига показывает аналогичные локальные изменения жесткости мышц (например, модуль сдвига TA был выше в выпрямленном колене по сравнению с согнутым коленом в среднем на 27%, несмотря на то, что угол голеностопного сустава был ограничен) (Ates et al., 2018а). Эксперименты по мышечной механике указывают на изменения в характеристиках длины и силы мышцы в ответ на измененные механические условия, в которых работает целевая мышца: (i) в экспериментах на животных эти изменения, связанные с совместной активацией мышц-синергистов, включают повышенную амплитуду силы мышц-агонистов (т.г., на 17%) и смещение максимальной силы мышц на другую длину (например, на несколько миллиметров, что приводит к увеличению диапазона длины мышц на 24%) (Yucesoy et al., 2003a; Yucesoy and Huijing). , 2007). (ii) В интраоперационных экспериментах у пациентов с ДЦП было показано, что совместная активация мышц-синергистов и мышц-антагонистов приводит к аналогичным эффектам, изменяющим производство силы целевой спастической мышцей, по сравнению с эффектом, измеренным после ее активации отдельно (Ates et al., 2018b; Kaya). и другие., 2018, 2019, 2020). Однако ранее было показано, что кратковременное воздействие BTX-A влияет на EMFT (Yucesoy et al., 2015). Одним из характерных эффектов EMFT является разница в проксимально-дистальной силе (т. е. неравные мышечные силы, прилагаемые к обоим концам двусуставной мышцы, достигающие 35%) (Huijing and Baan, 2001; Yucesoy et al., 2003a, b). Это представляет собой чистую сумму эпимышечных миофасциальных нагрузок (т. е. сил, возникающих в результате растяжения межмышечных связей из-за изменения относительного положения мышц), действующих на мышцу (Yucesoy, 2010).Настоящие результаты показали, что воздействие BTX-A действительно влияет на разницу проксимально-дистальной силы для EDL-мышцы. При самых коротких длинах ТА для обеих групп животных активные силы EDL, приложенные дистально, были выше, чем приложенные проксимально. Это свидетельствует о том, что на брюшко ДЭС действуют проксимально направленные эпимышечные миофасциальные нагрузки. После наложения удлинения ТА направление этих нагрузок изменилось на дистальное в обеих группах, но амплитуда результирующей суммы эпимышечных миофасциальных нагрузок была выше в группе БТ-А.Ранее было показано, что BTX-A, введенный в TA, быстро устраняет разницу проксимально-дистальной силы EDL для всех изученных длин TA (Yucesoy et al., 2012). Более того, в специальном тесте, включающем исключительно относительные изменения положения EDL, которые сохраняли постоянную длину, были показаны минимальные различия проксимально-дистальной силы EDL, указывающие на уменьшение EMFT после воздействия BTX-A (Yucesoy et al., 2015). Хотя последний тест в настоящее время не проводился, результаты (i), напротив, не показывают уменьшения EMFT в долгосрочной перспективе, но, судя по повышенным дистально направленным миофасциальным нагрузкам, и (ii) указывают на то, что межмышечные связи соединительной ткани между TA и EDL должны быть жестче.Этот вопрос актуален, поскольку для пациентов с ХП недавние интраоперационные эксперименты показывают, что интерсинергическая ЭМПТ (Ates et al., 2018b; Kaya et al., 2018, 2019, 2020), а также интерантагонистическая ЭМПТ (Ates et al. , 2014, 2018b; Kaya et al., 2019, 2020) вызывают значительное увеличение спастической силы тонких и полусухожильных мышц (свыше 30%, до 70%). Это свидетельствует о том, что ЭМПТ изменяет спастическую способность подколенных сухожилий влиять на патологическое состояние в суставе. Поэтому в новых клинических исследованиях важно оценить, поддерживает ли длительное воздействие БТ-А или даже повышает жесткость структур соединительной ткани, обеспечивающих межмышечные механические связи.

Ограничения и последствия исследования

Установленное время для оценки выбранных долгосрочных эффектов BTX-A основано на концепциях, связанных с процессом экзоцитоза. Этот процесс позволяет высвобождать ацетилхолин в синаптическую щель нервно-мышечного соединения, и любое вмешательство, направленное на воздействие БТ-А, приводит к пресинаптической блокировке передачи сигнала и, как следствие, к мышечному параличу (Blasi et al., 1993; Brin, 1997; Kareem). , 2018). де Пайва и др.(1999) показали, что через 4 недели после инъекции BTX-A не происходит экзоцитоза в исходных нервных окончаниях. Однако (i) это меняется по прошествии 1 месяца (например, на 63-й день авторы показали восстановление экзоцитоза в родительских окончаниях) и (ii) образование сети отростков нервных окончаний происходит после инъекции BTX-A, показывая увеличение во времени. Таким образом, наш выбор оценки эффектов BTX-A через 1 месяц после инъекции позволяет избежать экзоцитоза в родительских окончаниях для последовательного тестирования и согласуется с более ранними исследованиями на животных (Longino et al., 2005; Минамото и др., 2007 г.; Яраскавич и др., 2008; Такер и др., 2012). Однако более ранние исследования, такие как de Paiva et al. (1999) предполагает, что из-за динамического процесса экзоцитоза, включающего различные влияния родительских окончаний и отростков нервных окончаний, для всестороннего понимания необходимо также изучить более долгосрочные эффекты BTX-A. Тем не менее, наше настоящее исследование проливает свет на такое понимание и указывает на наличие новых механических эффектов, которые могут повлиять на функцию обрабатываемой мышцы.

Обратите внимание на различия между протоколом инъекции, дозировкой и объемом BTX-A, используемыми в настоящем исследовании на животных, и в обычной клинической практике. Инъецированную ТА-мышцу определяли методом ручного размещения с использованием анатомических ориентиров и пальпации. Тем не менее, электрическая стимуляция, электромиография или инъекции BTX-A под ультразвуковым контролем предлагаются для клинического применения для повышения точности и специфичности локализации, особенно для глубоких и/или очень мелких мышц (Chin et al., 2005; Виссел и др., 2009 г.; Хайнен и др., 2010; Уолтер и Дресслер, 2014 г.). Тем не менее, Picelli et al. (2012) показали, что такое руководство не дает лучших результатов по сравнению с методом ручного размещения поверхностных мышц. Соответственно, мы были уверены в локализации поверхностной ТА мышцы в настоящее время, а также в стандартизации места и глубины инъекции в соответствии с протоколом, описанным в разделе «Материалы и методы». С другой стороны, оптимальная клиническая доза инъекции на целевую мышцу зависит от объема мышцы, степени спастичности и уровня вовлеченности мышц в патологический паттерн движения суставов пациента (Molenaers et al., 2010). Хайнен и др. (2010) сообщили, что безопасный диапазон общих доз для детей с ХП составляет от 1 до 25 ЕД/кг массы тела. В мышцах нижних конечностей клинические дозы БТ-А варьируют от 3 до 6 ЕД/кг (Koman et al., 1993; Frasson et al., 2012). Однако в настоящее время количество вводимого БТ-А составляет приблизительно всего 0,32 ЕД/кг. Таким образом, прямое сравнение показывает, что экспериментально используемое количество намного меньше, чем обычно используемое в клинических приложениях. Кроме того, в настоящее время вводимый объем (примерно 64 мкл/кг) меньше, чем клинически используемые объемы (2.5–8 мл/кг) в мышцах нижних конечностей (Koman et al., 2000, 1993; Frasson et al., 2012). Однако результаты указывают на существенное снижение измеренных сил, что свидетельствует об эффективности и, следовательно, о целесообразности настоящей дозы для целей исследования. Обратите также внимание на значительную изменчивость дозы и объема вводимых препаратов в исследованиях на животных, проведенных на разных видах. В пересчете на кг животного эти значения включают 8,3 ЕД и 0,83 мл для мыши (Carli et al., 2009), 1–10 ЕД и 0,1 мл для кролика (Borodic et al., 1994), а у кошек 3,5 ЕД и 0,23 мл (Яраскавич и др., 2008). Таким образом, с точки зрения дозы и объема инъекции BTX-A общим ограничением для исследований на животных является сложность установления явной связи с клинической практикой. Это относится и к настоящему исследованию. Тем не менее, исследования на животных действительно выявили новые важные явления, и настоящее исследование указывает на неизвестные ранее заметные долгосрочные эффекты BTX-A на механику подвергаемых воздействию мышц. Однако эти эффекты должны быть проверены в клиниках.

Поскольку вопрос о месте инъекции также связан с вводимой дозой, он также требует внимания. Вопреки общепринятой клинической практике, которая обычно предполагает несколько мест инъекции (Brin, 1997; Graham et al., 2000), в настоящее время инъекцию вводили только в среднее мышечное брюшко-мишень. Принимая во внимание высокую диффузионную способность BTX-A (Shaari et al., 1991), разделение общей дозы на мышцу между несколькими местами инъекции может быть эффективным для предотвращения распространения токсина в другие мышцы (Graham et al., 2000; Моленаерс и др., 2010). Настоящий протокол инъекции, включающий одно место, в которое вводилась вся доза, вероятно, способствовал проникновению токсина в соседние мышцы, не являющиеся мишенями. Тем не менее, также для протоколов, включающих несколько мест инъекции, было показано, что распространение BTX-A происходит за пределы места инъекции (Shaari et al., 1991). Это затрудняет контроль над эффектами лечения и считается побочным эффектом (Graham et al., 2000; Hyman et al., 2000). Напротив, Frasson et al. (2012) предположили, что обнаруженное ими распространение BTX-A от сгибателей стопы даже к антагонистам может способствовать улучшению походки у пациентов с ДЦП. В целом, такое распространение, которое, как указывалось в предыдущих исследованиях на животных, может происходить межкомпартментально (например, Ates and Yucesoy, 2018), предполагает, по крайней мере, неконтролируемые эффекты, происходящие в мышцах, не являющихся мишенями. Это должно быть специально протестировано в долгосрочной перспективе. Однако, принимая во внимание эффекты BTX-A, неблагоприятно влияющие на механику мышц, подвергшихся воздействию, как показано в настоящее время, контроль утечки токсина представляется весьма важным для контроля результата лечения.В частности, распространение BTX-A в биартикулярную мышцу влияет как на проксимальные, так и на дистальные суставы и, следовательно, может даже манипулировать движением в нецелевом суставе. Следовательно, структурные и функциональные эффекты BTX-A на мышцы, подвергшиеся воздействию также путем диффузии, заслуживают проверки в клиниках.

Заключение

В заключение, настоящие результаты показывают, что ранее сообщавшиеся острые эффекты BTX-A сохраняются и прогрессируют в долгосрочной перспективе. Более узкий диапазон l и повышенное пассивное сопротивление мышцы-мишени являются непреднамеренными механическими эффектами BTX-A, тогда как распространение BTX-A в другие мышцы указывает на наличие неконтролируемых механических эффектов.Эти результаты могут быть клинически значимыми, но их следует изучать у пациентов.

Заявление о доступности данных

Наборы данных, созданные для этого исследования, доступны по запросу соответствующему автору.

Заявление об этике

Исследование на животных было рассмотрено и одобрено Комитетом по этике экспериментов на животных Университета Богазичи.

Вклад авторов

CY и CK внесли свой вклад в разработку концепции и дизайна исследования и написали разделы рукописи.CK, EY и ZA-D внесли свой вклад в получение экспериментальных данных. СК провел статистический анализ и написал первый черновик рукописи. Все авторы внесли свой вклад в интерпретацию данных для работы, доработку рукописи, прочитали и одобрили представленную версию.

Финансирование

Эта работа была поддержана Советом по научным и технологическим исследованиям Турции (TÜBİTAK) в рамках гранта 116S393 для CY.

Конфликт интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Каталожные номера

Ансвед Т., Одергрен Т. и Борг К. (1997). Атрофия мышечных волокон в мышцах ног после лечения цервикальной дистонии ботулотоксином. Неврология 48, 1440–1442. doi: 10.1212/WNL.48.5.1440

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Антонуччи, Ф., Росси, К., Джанфранчески, Л., Россетто, О., и Калео, М. (2008). Дальние ретроградные эффекты ботулинического нейротоксина A. J. Neurosci. 28, 3689–3696.doi: 10.1523/JNEUROSCI.0375-08.2008

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Ates, F., Andrade, R.J., Freitas, S.R., Hug, F., Lacourpaille, L., Gross, R., et al. (2018а). На пассивную жесткость моноартикулярных мышц голени влияет угол коленного сустава. евро. Дж. Заявл. Физиол. 118, 585–593. doi: 10.1007/s00421-018-3798-y

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Атес Ф., Темелли Ю. и Юсесой К.А. (2018б). Влияние совместной активации мышц-антагонистов и синергистов на механику активированной спастической полусухожильной мышцы у детей с церебральным параличом. Гул. Мов. науч. 57, 103–110. doi: 10.1016/j.humov.2017.11.011

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Атес, Ф., Темелли, Ю., и Юсесой, К.А. (2014). Интраоперационные эксперименты показывают значимость межантагонистического механического взаимодействия для вклада спастических мышц в нарушение движений в суставах. клин. Биомех. 29, 943–949. doi: 10.1016/j.clinbiomech.2014.06.010

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Атес, Ф., и Юсесой, К.А. (2014). Эффекты ботулинического токсина типа А на неинъецированные двусуставные мышцы включают более узкий диапазон силы и увеличение пассивной силы. Мышечный нерв 49, 866–878. doi: 10.1002/mus.23993

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Атес, Ф.и Юсесой, Калифорния (2018). Ботулинический токсин типа А влияет на механику неинъецированных антагонистических мышц крыс. Дж. Мех. Поведение Биомед. Матер. 84, 208–216. doi: 10.1016/j.jmbbm.2018.05.027

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Бахейт, А.М.О., Тильманн, А.Ф., Уорд, А.Б., Поеве, В., Виссел, Дж., Мюллер, Дж., и соавт. (2000). Рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование с диапазоном доз для сравнения эффективности и безопасности трех доз ботулинического токсина типа А (Диспорт) с плацебо при спастичности верхних конечностей после инсульта. Инсульт 31, 2402–2406. doi: 10.1161/01.STR.31.10.2402

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Бхакта, Б. Б., Козенс, Дж. А., Чемберлен, М. А., и Бамфорд, Дж. М. (2000). Влияние ботулинического токсина типа А на инвалидность и нагрузку на лиц, осуществляющих уход, из-за спастичности руки после инсульта: рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование. Дж. Нейрол. Нейрохирург. Психиатрия 69, 217–221. doi: 10.1136/jnnp.69.2.217

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Блази, Дж., Chapman, E.R., Link, E., Binz, T., Yamasaki, S., Camilli, P., et al. (1993). Ботулинический нейротоксин а избирательно расщепляет синаптический белок SNAP-25. Природа 365, 160–163. дои: 10.1038/365160a0

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Бородик Г.Э., Ферранте Р., Пирс Л.Б. и Смит К. (1994). Гистологическая оценка дозозависимой диффузии и ответа мышечных волокон после терапевтических инъекций ботулинического токсина. Мов. Беспорядок. 9, 31–39. doi: 10.1002/mds.8700

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Брин, М.Ф. (1997). Ботулинический токсин: химия, фармакология, токсичность и иммунология. Мышечный нерв 6, 146–168. doi: 10.1002/(sici)1097-4598(1997)6

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Карли, Л., Монтекукко, К., и Россетто, О. (2009). Анализ диффузии различных составов ботулинического нейротоксина типа А, введенных в ногу мыши. Мышечный нерв 40, 374–380. doi: 10.1002/mus.21343

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Чин, Т.Ю.П., Наттрасс, Г.Р., Селбер, П., и Грэм, Х.К. (2005). Точность внутримышечной инъекции ботулинического токсина А при ювенильном церебральном параличе: сравнение ручного введения иглы и введения с помощью электрической стимуляции. Дж. Педиатр. Ортоп. 25, 286–291. doi: 10.1097/01.bpo.0000150819.72608.86

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Крисуэлл, С.Р., Краунер, Б.Е., и Расетт, Б.А. (2006). Применение ботулинотерапии при спастичности нижних конечностей у детей с детским церебральным параличом. Нейрохирург. Фокус 21, 1–7. doi: 10.3171/foc.2006.21.2.2

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

де Пайва, А., Менье, Ф.А., Молго, Дж., Аоки, К.Р., и Долли, Дж.О. (1999). Функциональная репарация двигательных концевых пластинок после отравления ботулиническим нейротоксином типа А: двухфазное переключение синаптической активности между нервными отростками и их родительскими окончаниями. Проц. Натл. акад. науч. США 96, 3200–3205. doi: 10.1073/pnas.96.6.3200

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Эльврум, А.К.Г., Брандвик, С.М., Сетер, Р., Ламвик, Т., Верейкен, Б., и Ролевелд, К. (2012). Эффективность тренировок с отягощениями в сочетании с ботулиническим токсином-А при использовании рук и рук у детей с церебральным параличом: исследование до вмешательства. BMC Педиатр. 12:91. дои: 10.1186/1471-2431-12-91

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Фрассон, Э., Далл’Ора Э., Бординьон М., Бриго Ф., Токко П., Примон Д. и др. (2012). Распространение ботулинического нейротоксина типа А в стандартных дозах присуще успешному лечению спастической эквинусной стопы при церебральном параличе: краткосрочное нейрофизиологическое и клиническое исследование. Дж. Чайлд Нейрол. 27, 587–593. дои: 10.1177/0883073811420874

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Грейси, Дж. М., Сингер, Б., и Данн, Дж. (2007). Роль инъекций ботулотоксина в лечении мышечной гиперактивности нижних конечностей. Инвалид. Реабилит. 29, 1789–1805 гг. дои: 10.1080/09638280701568437

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Graham, H.K., Aoki, K.R., Autti-Rämö, I., Boyd, R.N., Delgado, M.R., Gaebler-Spira, D.J., et al. (2000). Рекомендации по применению ботулотоксина типа А при лечении детского церебрального паралича. Осанка походки 11, 67–79. doi: 10.1016/S0966-6362(99)00054-5

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Грюнер, Дж.А., Альтман Дж. и Спивак Н. (1980). Влияние задержки развития мозжечка на локомоцию крысы. Кинематографический и электромиографический анализ. Экспл. Мозг Res. 40, 361–373. дои: 10.1007/BF00236145

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Хаммонд, К., Эль Фар, О., и Сигар, М. (2015). Высвобождение нейротрансмиттера. Сотовый. Мол. Нейрофизиол. 145–169. дои: 10.1016/B978-0-12-397032-9.00007-8

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Хайнен, Ф., Desloovere, K., Schroeder, A.S., Berweck, S., Borggraefe, I., van Campenhout, A., et al. (2010). Обновленный Европейский консенсус 2009 г. по применению ботулотоксина у детей с церебральным параличом. евро. Дж. Педиатр. Нейрол. 1, 45–66. doi: 10.1016/j.ejpn.2009.09.005

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Huijing, PA (2009). Эпимышечная миофасциальная передача силы: исторический обзор и значение для новых исследований. Лекция Международного общества биомеханики Мейбриджа, Тайбэй, 2007 г. Дж. Биомех. 42, 9–21. doi: 10.1016/j.jbiomech.2008.09.027

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Huijing, P.A., and Baan, G.C. (2001). Внемышечная передача миофасциальной силы в переднем отделе большеберцовой кости крысы: проксимально-дистальные различия в мышечной силе. Acta Physiol. Сканд. 173, 297–311. doi: 10.1046/j.1365-201X.2001.00911.x

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Хайман, Н., Гликман С., Сайер А., Ричардсон А., Дотт С., Барнс М. и др. (2000). Ботулинический токсин (Dysport ® ) лечение спастичности приводящих мышц бедра при рассеянном склерозе: проспективное, рандомизированное, двойное слепое, плацебо-контролируемое исследование с диапазоном доз. Дж. Нейрол. Нейрохирург. Психиатрия 68, 707–712. doi: 10.1136/jnnp.68.6.707

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Икеда, А. Дж., Абель, М. Ф., Граната, К. П., и Дамиано, Д. Л. (1998).Количественная оценка коконтракции при спастическом церебральном параличе. Электромиогр. клин. Нейрофизиол. 38, 497–504. doi: 10.1016/s0966-6362(98)

-0

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Каракузу, А., Памук, У., Озтурк, К., Акар, Б., и Ючесой, К.А. (2017). Магнитно-резонансная и диффузионно-тензорная визуализация указывают на гетерогенные напряжения вдоль медиальных пучков икроножных мышц человека, вызванные субмаксимальной активностью подошвенного сгибания. Дж. Биомех. 57, 69–78.doi: 10.1016/j.jbiomech.2017.03.028

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Карим, А.А. (2018). «Использование ботулинического токсина А при церебральном параличе», в Церебральный паралич — клинические и терапевтические аспекты , изд. IJ Al-Zwaini (Лондон: IntechOpen), 95–112. doi: 10.5772/intechopen.79551

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Кая, К.С., Билгили, Ф., Акалан, Н.Е., Темелли, Ю., Атеш, Ф. и Ючесой, К.А.(2019). Интраоперационные эксперименты в сочетании с анализом походки показывают, что активное состояние, а не пассивное, доминирует в ограничении движений спастических тонких мышц при церебральном параличе. клин. Биомех. 68, 151–157. doi: 10.1016/j.clinbiomech.2019.06.005

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Кая, К.С., Билгили, Ф., Акалан, Н.Е., и Юсесой, К.А. (2020). Интраоперационная проверка механики пассивного и активного состояния спастичной полусухожильной мышцы в условиях межмышечных механических взаимодействий и положения суставов, соответствующих походке. Дж. Биомех. 103:10955. doi: 10.1016/j.jbiomech.2020.109755

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Кая, К.С., Темелли, Ю., Атес, Ф., и Юсесой, К.А. (2018). Влияние интерсинергических механических взаимодействий на механическое поведение активированной спастичной полусухожильной мышцы у больных детским церебральным параличом. Дж. Мех. Поведение Биомед. Матер. 77, 78–84. doi: 10.1016/j.jmbbm.2017.08.040

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Коман, Л.А., Муни, Дж. Ф., Смит, Б., Гудман, А., и Малвейни, Т. (1993). Лечение церебрального паралича ботулотоксином: предварительное исследование. Дж. Педиатр. Ортоп. 13, 489–495. дои: 10.1097/01241398-199307000-00013

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Коман, Л. А., Муни, Дж. Ф., Смит, Б. П., Уокер, Ф., и Леон, Дж. М. (2000). Нервно-мышечная блокада ботулиническим токсином типа А при лечении спастичности нижних конечностей при церебральном параличе: рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование. Дж. Педиатр. Ортоп. 20, 108–115. дои: 10.1097/01241398-200001000-00022

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Лонгино, Д., Баттерфилд, Т. А., и Херцог, В. (2005). Частота и зависящие от продолжительности эффекты мышечной слабости, вызванной ботулиническим токсином. Дж. Биомех. 38, 609–613. doi: 10.1016/j.jbiomech.2004.04.017

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Лав, С. К., Валентайн, Дж. П., Блэр, Э. М., Прайс, К.Дж., Коул, Дж. Х., и Човель, П. Дж. (2001). Влияние ботулотоксина типа А на функциональные возможности ребенка со спастической гемиплегией рандомизированное контролируемое исследование. евро. Дж. Нейрол. 8, 50–58. doi: 10.1046/j.1468-1331.2001.00038.x

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Лукбан, М.Б., Росалес, Р.Л., и Дресслер, Д. (2009). Эффективность ботулинического токсина А при спастичности верхних и нижних конечностей у детей с церебральным параличом: сводка доказательств. J. Neural Transm. 116, 319–331. doi: 10.1007/s00702-008-0175-8

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Марсиниак, К., Рейдер, Л., и Ганьон, К. (2008). Применение ботулотоксина при спастичности после травмы спинного мозга. утра. Дж. Физ. Мед. Реабилит. 87, 312–317. doi: 10.1097/PHM.0b013e318168ceaf

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Минамото, В. Б., Халст, Дж. Б., Лим, М., Пис, В. Дж., Bremner, S.N., Ward, S.R., et al. (2007). Повышенная эффективность и снижение системных эффектов инъекции ботулинического токсина А после активных или пассивных манипуляций с мышцами. Дев. Мед. Детский Нейрол. 49, 907–914. doi: 10.1111/j.1469-8749.2007.00907.x

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Моленарс Г., ван Кампенхаут А., Фагард К., де Кат Дж. и Деслувер К. (2010). Применение ботулотоксина А у детей с детским церебральным параличом с очагом поражения нижних конечностей. Дж. Чайлд. Ортоп. 4, 183–195. doi: 10.1007/s11832-010-0246-x

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Нетер, Дж., Катнер, М., Вассерман, В., и Нахтсхайм, К. (1996). Прикладные линейные статистические модели. Хоумвуд, Иллинойс: McGraw-Hill/Irwin.

Академия Google

Нойман, Р. Э., и Логан, Массачусетс (1950). Определение коллагена и эластина в тканях. J. Biol. хим. 186, 549–556.

Академия Google

Памук, У., Каракузу А., Озтюрк К., Акар Б. и Юсесой К.А. (2016). Комбинированный анализ магнитно-резонансной и диффузионно-тензорной визуализации представляет собой мощный инструмент для оценки деформации вдоль мышечных волокон человека in vivo. Дж. Мех. Поведение Биомед. Матер. 63, 207–219. doi: 10.1016/j.jmbbm.2016.06.031

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Picelli, A., Tamburin, S., Bonetti, P., Fontana, C., Barausse, M., Dambruoso, F., et al. (2012). Инъекция ботулотоксина в икроножную мышцу при спастическом эквинусе у взрослых с инсультом. утра. Дж. Физ. Мед. Реабилит. 91, 957–964. дои: 10.1097/PHM.0b013e318269d7f3

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Шаари, К.М., Джордж, Э., Ву, Б.-Л., Биллер, Х.Ф., и Сандерс, И. (1991). Количественная оценка распространения ботулинического токсина через мышечную фасцию. Ларингоскоп 101, 960–964. дои: 10.1288/00005537-19

00-00006

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Шиан, Г.Л. (2001). Ботулинотерапия спастичности: почему так трудно показать функциональную пользу? Курс.мнение Нейрол. 14, 771–776. дои: 10.1097/00019052-200112000-00015

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Thacker, B.E., Tomiya, A., Hulst, J.B., Suzuki, K.P., Bremner, S.N., Gastwirt, R.F., et al. (2012). Пассивные механические свойства и связанные с ними белки изменяются при инъекции ботулинического нейротоксина А в нормальные скелетные мышцы. Дж. Ортоп. Рез. 30, 497–502. doi: 10.1002/jor.21533

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Туркоглу А.N., Huijing, P.A., и Yucesoy, CA (2014). Механические принципы воздействия ботулинического токсина на характеристики длины и силы мышц: оценка методом конечных элементов. Дж. Биомех. 47, 1565–1571. doi: 10.1016/j.jbiomech.2014.03.017

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Туркоглу, А. Н., и Ючесой, К. А. (2016). Моделирование эффектов ботулинического токсина на мышечную механику во времени лечения на основе неблагоприятной адаптации внеклеточного матрикса. Дж. Биомех. 49, 1192–1198. doi: 10.1016/j.jbiomech.2016.03.002

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Ван Дер Уолт А., Сунг С., Спелман Т., Марриотт М., Колбе С., Митчелл П. и др. (2012). Двойное слепое рандомизированное контролируемое исследование ботулинического токсина типа А при треморе, связанном с рассеянным склерозом. Неврология 79, 92–99. дои: 10.1212/WNL.0b013e31825dcdd9

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Уолтер, У.и Дресслер, Д. (2014). Инъекции ботулотоксина под ультразвуковым контролем в неврологии: техника, показания и перспективы. Эксперт преподобный Нейротер. 14, 923–936. дои: 10.1586/14737175.2014.936387

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Велчел, Д. Д., Бремер, Т. М., Брукс, П. М., Дарра, Н., и Коффилд, Дж. А. (2004). Молекулярные мишени ботулинического токсина в нервно-мышечном синапсе млекопитающих. Мов. Беспорядок. 19, С7–С16.doi: 10.1002/mds.20004

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Wissel, J., Ward, A.B., Erztgaard, P., Bensmail, D., Hecht, M.J., Lejeune, T.M., et al. (2009). Европейская консенсусная таблица по применению ботулотоксина типа А при спастичности у взрослых. J. Rehabil. Мед. 41, 13–25. дои: 10.2340/16501977-0303

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Яраскавич М., Леонард Т. и Херцог В. (2008). Ботокс вызывает функциональную слабость в неинъецированных мышцах, прилегающих к мышце-мишени. Дж. Биомех. 41, 897–902. doi: 10.1016/j.jbiomech.2007.11.016

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Ючесой, Калифорния (2010). Эпимышечная миофасциальная передача силы подразумевает новые принципы мышечной механики. Упр. Спортивная наука. Ред. 38, 128–134. дои: 10.1097/JES.0b013e3181e372ef

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Юсесой, К.А., и Атес, Ф. (2018). BTX-A имеет заметные эффекты, противоречащие некоторым целям лечения, в области трехглавой мышцы голени крысы, которые не ограничиваются инъецируемыми мышцами. Дж. Биомех. 66, 78–85. doi: 10.1016/j.jbiomech.2017.10.035

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Юсесой, К.А., Эмре Арикан, О., и Атес, Ф. (2012). Введение BTX-A в мышцу-мишень влияет на силы всех мышц в пределах интактного компартмента и эпимышечную миофасциальную передачу силы. Дж. Биомех. англ. 134:111002. дои: 10.1115/1.4007823

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Ючесой, К.А. и Хуйцзин, П.А. (2007). Существенные эффекты эпимышечной миофасциальной передачи силы на мышечную механику имеют большое значение для спастических мышц и восстановительной хирургии. Ж. Электромиогр. Кинезиол. 17, 664–679. doi: 10.1016/j.jelekin.2007.02.008

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Yucesoy, CA, и Huijing, P.A. (2012). Специально адаптированное использование метода конечных элементов для изучения мышечной механики в контексте фасциальной целостности: связанная модель волокнистого матрикса. Междунар. J. Многомасштабные вычисления. англ. 10, 155–170. doi: 10.1615/IntJMultCompEng.2011002356

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Yucesoy, C.A., Koopman, B.H.F.J.M., Baan, G.C., Grootenboer, HJ, и Huijing, P.A. (2003a). Эффекты межмышечной и внемышечной передачи миофасциальной силы на соседние мышцы-синергисты: оценка экспериментами и моделированием методом конечных элементов. Дж. Биомех. 36, 1797–1811 гг. doi: 10.1016/S0021-9290(03)00230-6

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Ючесой, К.A., Koopman, BHFJM, Baan, G.C., Grootenboer, HJ, and Huijing, P.A. (2003b). Внемышечная миофасциальная передача силы: эксперименты и моделирование методом конечных элементов. Арх. Физиол. Биохим. 111, 377–388. дои: 10.1080/13813450312331337630

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Ючесой, К.А., Туркоглу, А.Н., Умур, С., и Атес, Ф. (2015). Интактный мышечный компартмент, подвергшийся воздействию ботулинического токсина типа А, демонстрирует нарушение межмышечного механического взаимодействия. Мышечный нерв 51, 106–116. doi: 10.1002/mus.24275

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Области действия 2 коммерческих препаратов ботулинического токсина типа А в одинаковых указанных дозах: двойное слепое рандомизированное исследование | Дерматология | JAMA Дерматология

Важность В статье представлены новые данные по спорному вопросу о влиянии доз на диффузионные характеристики 2-х ботулинических токсинов типа А.

Объектив Оценить поля действия абоботулотоксина А и онаботулотоксина А в одной и той же указанной стандартной дозе (1:1 ЕД), сравнивая активность потовых желез и мышц.

Дизайн, настройка и участники Проспективное одноцентровое рандомизированное двойное слепое исследование было проведено в Бразильском центре исследований в области дерматологии в Порту-Алегри, Бразилия. Среди участников было 19 женщин.

Вмешательства Каждый пациент получил 2 ЕД абоботулотоксина А на одну сторону лба и 2 ЕД онаботулотоксина А на другую сторону.

Основные результаты и показатели Через 28 дней оценивали горизонтальный и вертикальный диаметр и площадь полей ангидротического эффекта, амплитуду вызванных потенциалов действия сложных мышц и 4-балльную валидированную шкалу выраженности морщин.

Результаты Горизонтальный и вертикальный диаметры полей действия и площади были значительно больше для онаботулотоксина А, чем полученные для абоботулотоксина А. Не было выявлено существенных различий между продуктами в баллах по шкале выраженности морщин и потенциалах действия вызванных соединений мышц.Онаботулотоксин А имел значительно большую диффузию, чем абоботулотоксин А, когда вводились изоволюметрические инъекции той же помеченной стандартной дозы продуктов.

Выводы и актуальность Хотя во многих исследованиях утверждается, что диффузия зависит от продукта, а абоботулотоксин А рассеивается больше, чем онаботулотоксин А, результаты настоящего исследования подтверждают, что диффузия зависит от дозы, и более мощная испытанная доза рассеивает больше.

Пробная регистрация клинические испытания.Идентификатор правительства: NCT01732809

Ботулинический токсин типа А широко используется для коррекции морщин с безопасными и эффективными результатами. Коммерчески доступные препараты ботулинического токсина типа А приводят к сходным клиническим эффектам и используются по тем же эстетическим показаниям, даже если они представляют собой разные составы и обладают разной эффективностью. 1 Некоторые врачи используют только один бренд; другие используют 2 или более различных продуктов в своей клинической практике в соответствии со своим опытом и предпочтениями.Установление наилучшего эквивалента дозы между продуктами имеет большое значение в клинической практике, и это было предметом многочисленных обсуждений в публикациях и на совещаниях. 1 ,2 Поля мышечного и ангидротического действия ботулинического токсина типа А, также называемые некоторыми авторами «диффузионными ореолами», являются наилучшим выражением соответствующих клинических эффектов токсинов. Их можно объективно измерить для определения характеристик продукта.

Недавнее исследование 3 показало, что абоботулотоксин А (Диспорт; Ипсен) и онаботулотоксин А (Ботокс; Аллерган) имели сходные поля действия (FE [диффузия]) в мышцах и потовых железах при эквивалентной дозе 2.0:1,0 меченых единиц (абоботулотоксин А к онаботулотоксину А) и показали значительно большие диаметры и площади полей ангидротического действия (ФАЭ) для абоботулотоксина А по сравнению с онаботулотоксином А при дозовой эквивалентности 2,5:1,0 меченых единиц (абоботулотоксин А к онаботулотоксину А). Несмотря на то, что эти отношения показали существенные различия в размерах FAE, FAE из самого высокого соотношения считали клинически незначимым, поскольку он был меньше 2 мм, а межиндивидуальные вариации были более чем в 4 раза больше.

Хотя некоторые авторы 4 считают, что абоботулотоксин А обладает большей диффузией, чем онаботулотоксин А, имеются сообщения 3 ,5 , что оба препарата имеют одинаковую диффузию при использовании эквипотенциальных доз. Это означает, что на самом деле нет значимых различий в распространении продуктов; на самом деле единственными различиями были дозы, использованные в предыдущих исследованиях различий в диффузии.

Другие исследования 3 ,6 продемонстрировали убедительные доказательства того, что доза является наиболее важным фактором для препаратов ботулинического токсина типа А, поскольку FE (или диффузия) зависит от дозы, а обычные объемы, используемые при восстановлении продуктов (например, , 1-4 мл) не имеют значения в ореолах диффузии.С точки зрения пациента другие факторы (например, мышечная масса, область инъекций, интенсивность потоотделения и индивидуальные особенности, возможно, связанные с количеством нервно-мышечных синапсов и уровнем блокируемого выброса ацетилхолина) могут влиять на размер аорты. КЭ или диффузионные ореолы. Цель настоящего исследования состояла в том, чтобы оценить характеристики FE/диффузии абоботулинумтоксина А и онаботулотоксина А в одинаковой дозе (1:1 эквивалентность помеченной единицы) в отношении активности мышц и потовых желез.

Дизайн исследования и участники

Это было проспективное одноцентровое рандомизированное двойное слепое исследование. Все участники были набраны из исследовательского центра в Порту-Алегри, Бразилия, и дали письменное информированное согласие. Это исследование было одобрено местным комитетом по этике Associação Hospitalar Moinhos de Vento, и все стандарты надлежащей клинической практики, протоколы Хельсинкской декларации и национальные правила были соблюдены.Основными критериями включения были женщины в возрасте от 18 до 60 лет, наличие умеренных и выраженных морщин лба с обеих сторон при максимальном сокращении лобной мышцы по шкале выраженности морщин 3 (WSS), положительное потоотделение по тесту Минора. , 7 и баллы от III до V по визуальной шкале интенсивности пота. 8

Было проведено три оценки: исходный уровень, посещение 1 (инъекция) и посещение 2 (через 28 дней после процедуры).Клинические оценки включали 4-балльную валидированную шкалу для лба (WSS) в покое и при максимальной активности лобной мышцы. Фотографические оценки также были выполнены на исходном уровне и через 28 дней и оценены одним независимым исследователем для определения WSS. Нежелательные явления регистрировались после лечения на визитах 1 и 2.

Амплитуда вызванных потенциалов действия сложных мышц 9 (ECMAP) в лобной мышце при стимуляции лицевого нерва определялась исходно и во 2 визите с использованием поверхностных электродов на лбу и электрической стимуляции лицевого нерва в соответствии со стандартными нейрофизиологическими процедуры.Амплитуда ECMAP была выполнена опытным неврологом (F.T.R.) с использованием электромиографического устройства (Teca Sapphire; Teca Corp). Фотооценка включала стандартный набор из 3 фотографий мышц лба: в покое, при максимальной активности лобной мышцы и при выполнении теста Минора. Горизонтальный и вертикальный диаметры FAE были количественно определены с использованием коммерческого программного обеспечения (Mirror-DPS 7.02; Canfield Scientific Inc) и выражены в сантиметрах. Площадь ФУЭ рассчитывалась с использованием того же программного обеспечения и выполнялась с учетом периметра ФЭУ, предполагая, что они не являются идеальными кругами.

Продукты были восстановлены с использованием 0,9% стерильного физиологического раствора без консерванта за 5-20 минут до введения. Для получения изоволюметрических инъекций в эквивалентной дозе 1:1 меченые единицы продукты восстанавливали следующим образом. AbobotulinumtoxinA, 500 ЕД на флакон, разбавляли в 2,5 мл и отсасывали в каждый шприц по 1 ЕД. Это разведение привело к концентрации восстановленного продукта 200 ЕД/мл (2 ЕД/0,01 мл). Затем в каждый шприц добавляли одинаковый объем (0,01 мл) физиологического раствора, получая концентрацию 2 ЕД/0.02 мл. OnabotulinumtoxinA, 100 ЕД на флакон, восстанавливали 1 мл 0,9% физиологического раствора, в результате чего концентрация восстановленного продукта составляла 100 ЕД/мл (2 ЕД/0,02 мл).

Инъекции проводились дерматологом (C.H.), имеющим опыт применения ботулинического токсина типа А, в одну точку с каждой стороны лба. Точки были отмечены с использованием шаблона, созданного из листа рентгеновской пленки, чтобы гарантировать, что расположение точек инъекции было отмечено последовательно от пациента к пациенту.Стандартные изоволюметрические инъекции (0,02 мл каждого продукта) вводили с помощью шприцев объемом 0,3 мл с короткой иглой 29G и длиной 0,5 см (Ultra-Fine II; Becton Dickinson and Company), при этом шаблон располагался на лбу пациента. Колпачки игл срезали, чтобы продукты вводились на стандартную глубину 3 мм.

Пациенты были рандомизированы в ту сторону лба (левую или правую), в которую вводили продукты. Список рандомизации был составлен статистиком с использованием коммерческого программного обеспечения (SPSS, версия 16.0; ООО «СПСС»). Ослепление сохранялось для пациентов и исследователей, использующих одинаковые шприцы для инъекций. Они были идентифицированы кодом, известным только фармацевту (J.S.S.), ответственному за разведение продуктов. Во время исследования список рандомизации хранился в запечатанном конверте.

Пациенты были последовательно разделены на 1 из 2 групп для введения изоволюметрических (0,02 мл) доз 2 ЕД абоботулинумтоксина А, вводимого с одной стороны лба, и 2 ЕД онаботулотоксина А, вводившегося с противоположной стороны.Пациенты группы А получали 2 ЕД/0,02 мл восстановленного абоботулотоксина А на правую сторону лба и 2 ЕД/0,02 мл восстановленного онаботулотоксина А на левую сторону. Пациенты группы В получали 2 ЕД/0,02 мл восстановленного абоботулотоксина А на левую сторону лба и 2 ЕД/0,02 мл восстановленного онаботулотоксина А на правую сторону.

Принимая во внимание результаты предыдущего исследования 3 , которое обнаружило разницу в 0.30 см для горизонтального диаметра и 0,58 см 2 для площади FAE, и определяя мощность 80% и ошибку α 5%, был получен размер выборки 16. Тем не менее, 19 человек были зачислены, поскольку учитывался показатель отсева 15%.

Парные и непарные тесты t использовались для анализа непрерывных переменных, а тест χ 2 использовался для категориальных переменных. Другие данные выражаются в виде среднего значения (SD), медианы (диапазона) или процента.Ошибка α считалась значимой при P  < .05. Для анализа данных использовали коммерческое программное обеспечение (SSPS, версия 16.0).

Девятнадцать женщин были включены в это исследование в период с 29 июля 2011 г. по 14 октября 2011 г., а последняя участница завершила исследование 11 ноября 2011 г. Была 1 выбывшая из исследования, в результате чего 18 пациентов завершили исследование. Средний возраст составлял 38,4 (10,2) года (диапазон от 28 до 55 лет), все пациенты были белыми и не сообщали об употреблении запрещенных наркотиков.Классификация Фитцпатрика 4 участников (22%) была II, 13 участников (72%) была Fitzpatrick III, и 1 участник (6%) был Fitzpatrick IV. В настоящее время курят пять женщин (28%).

Горизонтальный и вертикальный диаметры и площадь FAE были значительно больше для онаботулотоксина А, чем те, которые были получены для абоботулотоксина А через 28 дней после процедуры ( P  < ,001) при использовании указанных доз (таблица 1).

В таблице 2 представлены результаты для WSS и ECMAP на исходном уровне и через 28 дней для 2 процедур.Статистически значимых различий между пропорциями участников в отношении оценки WSS как в покое, так и при максимальном сокращении, в исходном состоянии и через 28 дней после инъекций онаботулотоксина А или абоботулотоксина А, оцененных при посещении и по фотографиям, не было. В целом участники добились уменьшения морщин с помощью инъецированных доз для обоих методов лечения (Рисунок 1 в начале и Рисунок 2 через 28 дней). Через 28 дней у пациентов были более низкие показатели WSS.

Как онаботулотоксин А, так и абоботулотоксин А значительно снижали значения ECMAP при посещении 2 по сравнению с исходным уровнем: 1079.11 (266,02) против 165,39 (232,10) мкВ ( P  < .001) и 1108,17 (364,76) против 202,89 (258,44) мкВ ( P  < .001). Однако значения ECMAP существенно не отличались между продуктами.

Нежелательные явления, связанные с техникой инъекции, были легкими и преходящими. У одного участника (6%) была эритема в местах инъекций (с обеих сторон), а у 3 участников (17%) было минимальное кровотечение в местах инъекций сразу после введения, все на левой стороне, без существенных различий между продуктами (2). на стороне введения аботулотоксина А и 1 на стороне введения онаботулотоксина А).Одна пациентка сообщила о разрыве мениска, что помешало ей выполнить тест Минора, и данные этой пациентки были исключены из оценки. Это событие не было связано с процедурами исследования. Серьезных нежелательных явлений не было.

В этом некоммерчески спонсируемом исследовании оценивались FAE двух коммерческих препаратов ботулинического токсина типа А при эквивалентной дозе 1:1 меченых единиц, вводимых в лоб. FAE тестируемых продуктов оценивали путем измерения диаметров горизонтальной и вертикальной ангидротической зоны, а также площади, окружающей точки введения, с использованием теста Минора.Полученные зоны позже были проанализированы с использованием коммерческого программного обеспечения. Мышечная активность в областях инъекций оценивалась с использованием утвержденных 4-точечных шкал WSS 3 и ECMAP 9 с помощью электромиографии.

Применение обоих продуктов привело к уменьшению морщин по шкале WSS и снижению мышечной активности по шкале ECMAP. При рассмотрении этих двух различных конечных точек и методов измерения не наблюдалось существенной разницы между двумя продуктами.Тем не менее, FAE, оцененные с помощью теста Минора через 28 дней наблюдения, были значительно выше для онаботулотоксина А, чем для абоботулотоксина А.

Описаны эквиваленты доз от 6:1 до 1:1 ЕД (абоботулинумтоксин А к онаботулотоксину А). 10 ,11 В последние несколько лет многие авторы 3 ,12 ,13 предполагали, что эквивалентность доз между препаратами, которые будут использоваться в клинической практике, составляет примерно 2.5:1,0 ЕД (абоботулотоксин А в онаботулотоксин А) или даже 2,0:1,0 ЕД (абоботулотоксин А в онаботулинумтоксин А), как указано во многих статьях и поддержано доктором Д. Хексселем. Эквивалентность дозы 1:1 помеченных единиц не рекомендуется для клинической практики; тем не менее, предложение для настоящего исследования состояло в том, чтобы изучить лечение с одинаковыми маркированными единицами, чтобы попытаться лучше объяснить характеристики каждого продукта в отношении эффективности и характеристик FAE.

В различных исследованиях 2 ,4 ,14 было продемонстрировано, что более высокая диффузия или больший FAE абоботулотоксина А возникает при использовании высоких эквивалентных доз, таких как меченые единицы 3:1 (абоботулотоксин А к онаботулотоксину А) или более.Одно исследование 3 показало более крупные FE с эквивалентностью меченой единицы 2,5:1 и поддерживает эквивалентную и эквивалентную дозу этих продуктов примерно 2:1 (абоботулотоксин А к онаботулотоксину А). Другое исследование 9 показало кажущуюся реальную эквивалентность между абоботулотоксином А и онаботулотоксином А в виде 1,57:1 помеченных единиц (абоботулотоксин А по отношению к онаботулотоксину А), но этот результат был экстраполирован из исследования диапазона доз на короткий разгибатель пальцев в каждой стопе добровольцев.Мышцы лица заметно отличаются от других мышц тела, потому что они содержат более 1 нервно-мышечного соединения на мышечное волокно, 15 , и это необходимо учитывать при сравнении данных различных исследований, особенно результатов мышц лица с результатами других мышц. В целом, эти исследования подтверждают тот факт, что более высокие дозы ботулинического токсина типа А более эффективны для получения большего FAE и полей мышечного эффекта при использовании коммерческих препаратов. 3 ,9

Изоволюметрические инъекции одинакового количества меченых единиц абоботулотоксина А и онаботулотоксина А показали меньшую ФАЭ (меньшую диффузию) в местах инъекции абоботулотоксина А по сравнению с онаботулотоксином А, что свидетельствует о том, что размер ФАЭ или диффузионных ореолов может изменяться в зависимости от используемой дозы и эквивалентность испытанной дозы.Тем не менее, абоботулотоксин А продемонстрировал такое же прямо измеренное воздействие на мышечную активность, как и онаботулотоксин А, без каких-либо статистически значимых различий между результатами WSS и ECMAP. Аналогичное воздействие на морщины и ECMAP, производимое обоими продуктами в одной и той же дозе, указанной на этикетке, является интересным открытием, даже если его интерпретировать в контексте этого краткосрочного (28 дней) исследования. Поскольку считается, что сами эффекты и их продолжительность зависят от дозы, необходимы дальнейшие исследования с использованием более низких доз в косметических целях, чтобы получить больше данных о продолжительности эффекта более низких доз препаратов ботулинического токсина типа А.Однако исследования , 16, , , 17, ясно продемонстрировали, что продолжительность эффекта также зависит от дозы.

В предыдущих исследованиях различия более 0,30 см для горизонтального диаметра и 0,58 см 2 для площади FAE считались клинически значимыми. 3 ,10 В настоящем испытании различия, обнаруженные между двумя исследуемыми продуктами через 28 дней, составили 0,40 см по горизонтальному диаметру и приблизительно 0.63 см 2 для области ФЭУ (рис. 3 и рис. 4). Тем не менее, это следует более тщательно изучить, чтобы лучше понять соответствующие аспекты эстетического применения (в основном, мышечные эффекты) и среди различных продуктов, а также индивидуальные реакции на одинаковые маркированные дозы, которые могут повлиять на результаты в клинической практике.

Принимая во внимание, что не было обнаружено существенной разницы между абоботулотоксином А и онаботулотоксином А в отношении морщин с эквивалентностью доз 2:1, которая использовалась ранее для ECMAP и FAE, и дозой 2.Эквивалентность дозы 5:1 Для абоботулотоксина А, 3 были обнаружены более высокий диаметр, ECMAP и FAE, это исследование подтверждает наблюдения Karsai и коллег 18 ,19 о том, что размер FAE является просто эффектом дозы, а не к утверждениям, что один продукт распространяется больше, чем другой.

В заключение, онаботулотоксин А имеет значительно большую FAE, чем абоботулотоксин A, при изоволюметрических инъекциях одинаковых помеченных стандартных доз продуктов, подтверждая теорию о том, что FAE в основном связан с дозой, используемой в клинической практике, и эквивалентными соотношениями в клинических испытаниях.Оба продукта имели схожие результаты в отношении косметического применения и мышечного эффекта через 28 дней. Результаты этого исследования открывают новые горизонты использования меньших доз токсинов в косметических целях. Для изучения этого подхода необходимы более длительные исследования.

Принято к публикации: 27 июня 2013 г.

Автор, ответственный за переписку: Дорис Хекссел, доктор медицинских наук, Бразильский центр исследований в области дерматологии, 782 Dr. Timoteo St, цокольный этаж, -040, Порту-Алегри, RS, Бразилия (дорис@hexsel.ком.бр).

Опубликовано в Интернете: 9 октября 2013 г. doi:10.1001/jamadermatol.2013.6440.

Вклад авторов: Доктора Д. Хекссел и К. Хекссел имели полный доступ ко всем данным исследования и несут ответственность за целостность данных и точность анализа данных.

Концепция и дизайн исследования: D. Hexsel.

Получение данных: Все авторы.

Анализ и интерпретация данных: D.Хекссель, Сига, Ротта, Родригес.

Составление рукописи: D. Hexsel, Siega, Schilling-Souza, Rodrigues.

Критическая проверка рукописи на наличие важного интеллектуального содержания: Все авторы.

Статистический анализ: Сьега, Родригес.

Административная, техническая и материальная поддержка: D. Hexsel, C. Hexsel, Rotta, Rodrigues.

Научный надзор: D. Hexsel, Siega, Schilling-Souza, Rodrigues.

Раскрытие информации о конфликте интересов: Доктор Д. Хекссель получил финансирование исследований от L’Óreal, Cynosure, Syneron, Ipsen, Allergan, Galderma и Medicis; работал консультантом Ipsen и Galderma; и был членом бюро докладчиков Ipsen и Galderma. Других раскрытий не поступало.

Финансирование/поддержка: Это исследование было проведено при поддержке Бразильского центра исследований в области дерматологии, некоммерческой организации.

Роли спонсоров: Это исследование не спонсировалось.Бразильский центр исследований в области дерматологии разработал и провел исследование; собирали, анализировали и интерпретировали данные; и подготовил, рассмотрел и утвердил рукопись

Дополнительные материалы: Энди Пикетт, доктор философии, предоставил критические комментарии к этой статье, за которые он не получил финансовой компенсации. Дайана Монти Атик, BPharm, сотрудница исследовательского центра во время испытания, помогала в сборе данных и получала свою обычную заработную плату.

1. Пикет А, Перроу K. Лекарственный состав ботулинических токсинов для клинического применения. J Препараты Дерматол . 2010;9(9):1085-1091.PubMedGoogle Scholar2.Karsai С, Раулин C. Имеют ли разные составы ботулинического токсина типа А разные характеристики миграции? J Космет Дерматол . 2008;7(3):230. doi:10.1111/j.1473-2165.2008.00395.x. PubMedGoogle ScholarCrossref 3.Hexsel Д, Брум С, сделать Прадо ДЗ, и другие.Полевой эффект двух коммерческих препаратов ботулинического токсина типа А. J Am Acad Dermatol . 2012;67(2):226-232.PubMedGoogle ScholarCrossref 4.Trindade de Almeida АР, Маркес Э, де Алмейда Дж, Кунья Т, Борасо R. Экспериментальное исследование, сравнивающее диффузию двух препаратов ботулинического токсина типа А у пациентов с гипергидрозом лба.  Дерматол Сург . 2007;33(1, тематический выпуск):S37-S43.PubMedGoogle ScholarCrossref 5.Wohlfarth К, Сыча Т, Рану Д, Навер Х, Кэрд Д.Эквивалентность доз двух коммерческих препаратов ботулинического нейротоксина типа А.  Curr Med Res Opin . 2009;25(7):1573-1584.PubMedGoogle ScholarCrossref 6.Hexsel ДМ, Зойрефманн М, Родригес ТС, сделай Прадо ДЗ. Увеличение полевых эффектов аналогичных доз Clostridium botulinum комплекса токсин-гемагглютинин типа А при лечении компенсаторного гипергидроза. Арч Дерматол . 2009;145(7):837-840.PubMedGoogle ScholarCrossref 7.Незначительный V. Ein Neues Verfahren zu der klinischen Untersuchung der Schweissabsonderung. Z Нейрол . 1927;101:302-308.Google Scholar8.Hexsel Д, Родригес ТС, Зойрефманн М, Цехмайстер-Прадо D. Рекомендации по выполнению и оценке результатов Малого теста по визуальной шкале интенсивности потоотделения.  Дерматол Сург . 2010;36(1):120-122.PubMedGoogle ScholarCrossref 9.Wohlfarth К, Швандт я, Вегнер Ф, и другие.Биологическая активность двух комплексов ботулинического токсина типа А (диспорт и ботокс) у добровольцев. J Нейрол . 2008;255(12):1932-1939.PubMedGoogle ScholarCrossref 10.Hexsel Д, Даль’Форно Т, Гекссель С, До Прадо ДЗ, Лима мм. Рандомизированное пилотное исследование, в котором сравнивали ореолы действия двух коммерческих препаратов ботулинического токсина типа А.  Dermatol Surg . 2008;34(1):52-59.PubMedGoogle ScholarCrossref 11.Карсай С, Раулин С.Текущие данные об эквивалентности различных препаратов ботулинического нейротоксина А и рекомендации для клинической практики в дерматологии.  Дерматол Сург . 2009;35(1):1-8.PubMedGoogle ScholarCrossref 12.Heckmann М, Плевиг ГРАММ; Группа по изучению гипергидроза. Эффективность низких доз ботулинического токсина А при подмышечном гипергидрозе: рандомизированное параллельное открытое исследование. Арч Дерматол . 2005;141(10):1255-1259.PubMedGoogle ScholarCrossref 13. Schnider П, Морару Э, Киттлер Х, Фоллер Б, Кранц Г, Ауфф Э.Ботулинический токсин в лечении очагового гипергидроза [на немецком языке].  Вена Клин Вохеншр . 2001;113(дополнение 4):36-41.PubMedGoogle Scholar14.Cliff СХ, Джудихарджо Х, Элтрингем E. Различные составы ботулинического токсина типа А имеют разные характеристики миграции. J Космет Дерматол . 2008;7(1):50-54.PubMedGoogle ScholarCrossref 15.Happak В, Лю Дж., Бурггассер Г, Цветы А, Грубер Х, Фрайлингер ГРАММ.Лицевые мышцы человека: размеры, расположение моторных концевых пластинок и наличие мышечных волокон с несколькими моторными концевыми пластинками.  Анат Рек. . 1997;249(2):276-284.PubMedGoogle ScholarCrossref 16.Ascher Б, Закин Б, Кестемонт П, Баспейрас М, Бугара А, Сантини J. Многоцентровое рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование эффективности и безопасности 3 доз ботулинического токсина А при лечении межбровных морщин. J Am Acad Dermatol .2004;51(2):223-233.PubMedGoogle ScholarCrossref 17.Monheit Г., Каррутерс А, Брандт Ф, Рэнд Р. Рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование ботулинического токсина типа А для лечения межбровных морщин: определение оптимальной дозы.  Дерматол Сург . 2007;33(1, тематический выпуск):S51-S59.PubMedGoogle ScholarCrossref 18.Karsai С, Адриан Р, Хаммес С, Тимм Дж, Раулин C. Рандомизированное двойное слепое исследование влияния ботокса и диспорта/релоксина на морщины на лбу и электромиографическую активность. Арч Дерматол . 2007;143(11):1447-1449.PubMedGoogle ScholarCrossref 19.Карсай С, Раулин C. Ботокс и Диспорт: существует ли коэффициент преобразования дозы в дерматологии и эстетической медицине? J Am Acad Dermatol . 2010;62(2):346-347.PubMedGoogle ScholarCrossref

Исследование: новый ботулинический токсин менее опасен, чем считалось

Когда в 2013 году группа калифорнийских исследователей сообщила о новом типе ботулинического токсина, они скрыли генетические данные о смертельном токсине из-за опасений, что злоумышленники могут использовать эти данные для создания токсина до может быть разработан эффективный антитоксин.

Доклад вызвал большой интерес. Это был не только первый отчет о новом ботулиническом токсине за более чем 40 лет, но и редкий пример того, как исследователи взяли на себя инициативу ограничить публикацию данных из-за опасений по поводу возможного «двойного использования» своих открытий.

Но на прошлой неделе выяснилось, что новый токсин не совсем та угроза, которую описывали. Исследователи из Центров по контролю и профилактике заболеваний (CDC) и Университета Висконсина (UW) в статье Journal of Infectious Diseases (JID) заявили, что, как оказалось, новый токсин может быть заблокирован доступными антитоксинами. .По словам авторов, это говорит о том, что на самом деле это не новый токсин.

В комментарии, сопровождающем новый отчет JID , Пол Кейм, доктор философии, эксперт по генетическому анализу в Университете Северной Аризоны, сказал, что обработка результатов о новом токсине показала, что некоторые аспекты политики США в отношении «исследований двойного назначения, вызывающих озабоченность » (DURC) работал хорошо, но другие не так хорошо.

Новые результаты получены, поскольку правительство США готовится подтолкнуть учреждения, получающие федеральное финансирование, к выявлению и регулированию исследований, подпадающих под категорию DURC, с политикой по этому вопросу, которая должна вступить в силу в сентябре.В то же время правительство работает над созданием политики в отношении одного типа DURC: экспериментов, которые могут сделать вирус или бактерию более опасными.

В октябре прошлого года администрация Обамы приостановила финансирование некоторых так называемых исследований по «приобретению функциональности».

Предыдущие результаты

До отчета 2013 года было известно, что Clostridium botulinum производит семь типов токсинов, обозначенных от A до G, каждый из которых вызывает паралич, блокируя нейротрансмиттеры у людей и животных.Последний был обнаружен в 1970 году. Антитоксины доступны для всех семи и упакованы в продукт под названием BAT.

Новый токсин был идентифицирован исследователями из Департамента общественного здравоохранения Калифорнии (CDPH), которые обнаружили токсин в результате случая младенческого ботулизма. У пациента был новый штамм C botulinum , названный IBCA10-7060, который продуцировал два токсина — тип B и новый токсин. Исследователи назвали последний ботулинический нейротоксин типа H, или BoNT/H.

Обнаружив, что токсин не чувствителен к доступным антитоксинам, авторы пришли к выводу, что он представляет серьезную опасность. Они проконсультировались с несколькими правительственными учреждениями США, в том числе с CDC, перед принятием решения об отказе в предоставлении данных о генетической последовательности. JID , публикуя свой отчет, сделал исключение из своей общей политики, требуя от авторов представлять последовательности нуклеотидов генов в общедоступную базу данных и включать номера доступа в свою рукопись.

Токсин, проверенный на мышах

В новом исследовании JID говорится, что группа CDC-UW поставила перед собой задачу оценить новый токсин, протестировав его против доступных антитоксинов на мышах и в лабораторных культурах нейронных клеток.Они обнаружили, что его можно полностью заблокировать с помощью комбинации антитоксинов типа А и В. BAT, который содержит оба типа, был эффективен против токсинов как у мышей, так и в культуре клеток.

Комбинации антитоксинов, которые не включали оба типа A и B, не нейтрализовали токсичность нового штамма C botulinum , что показывает, что антитоксины типа A и B были специфичны для нового токсина и токсина типа B соответственно. писали исследователи.

Сьюзен Э.Масланка, доктор философии, первый автор отчета, сказал, что причина противоречивых результатов калифорнийской группы и группы CDC-UW может заключаться в разнице в эффективности используемых антитоксинов. Она возглавляет группу Национальной лаборатории ботулизма в Лабораторном отделении кишечных заболеваний CDC.

Она сообщила CIDRAP News, что калифорнийская команда использовала более старый терапевтический антитоксин, разработанный Министерством обороны США (DoD), тогда как ее группа использовала BAT, семивалентный продукт, недавно лицензированный Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA).Она прокомментировала, что Минобороны оставило антитоксин для потенциального использования в войсках, но так и не выдало ему лицензию.

Несмотря на то, что эти два продукта были разработаны с одинаковой эффективностью, антитоксин Министерства обороны США, возможно, был менее мощным, когда он использовался в калифорнийском исследовании, предположил Масланка. «Это только мое предположение. Это, безусловно, может быть объяснением различий», — сказала она.

Последовательность была выпущена несколько месяцев назад

Исследователи CDC-UW также смогли изучить генетическую последовательность нового антитоксина.Как оказалось, последовательность была выпущена в декабре прошлого года с публикацией отчета ученых FDA в журнале Genome Announcements . В то время, по-видимому, не было опубликовано сообщений о том, что доступные антитоксины эффективны против нового токсина.

Но Масланка объяснил, что авторы FDA были осведомлены о выводах группы CDC. «Конечно, FDA уже было известно о некоторых исследованиях, которые мы уже проводили, и о том, что нам удалось предварительно нейтрализовать этот токсин с помощью антител серотипа А», — сказала она.«На наш взгляд, тот факт, что его можно нейтрализовать антитоксином А, делает этот токсин менее опасным для высвобождения последовательности ДНК».

Это подтвердила Марианна Наум, политический аналитик Управления пищевых продуктов и ветеринарной медицины FDA. «При публикации отчета мы консультировались с нашими партнерами по CDC», — сказала она CIDRAP News.

Группа CDC-UW сравнила генетическую последовательность нового токсина с последовательностями других ботулинических токсинов. Их анализ показал, что токсин имеет «гибридоподобную структуру», которая содержит области, подобные токсинам A1 и F5 (подтипы токсинов A и F).

Подводя итоги, в отчете говорится: «Новый BoNT представляет собой вариант серотипа A, состоящий из гибридной структуры между bont A1 и F5, который может быть нейтрализован существующим антитоксином серотипа A. Необходимы дальнейшие исследования с использованием очищенного токсина. присвоить этому новому BoNT соответствующую номенклатуру и дополнительно охарактеризовать его риски».

Комментируя проблему с названием, Масланка сказал: «В целом серотипы идентифицировали по отсутствию нейтрализации доступными антитоксинами, поэтому тот факт, что антитоксин серотипа А нейтрализует это, предполагает, что серотип Н не является подходящей номенклатурой.»

«Сообщество по ботулизму не полностью согласно с тем, как продвигаться вперед в наименовании токсинов в пределах серотипа, который может иметь изменчивость ДНК», добавила она. Политика DURC от обработки результатов о новом штамме C botulinum и его токсине. среди исследователей наук о жизни.

Кроме того, Кейм сказал: «Процессы проверки для выявления DURC в научном журнале сработали, и JID предложил эффективное решение дилеммы DURC — отредактировать информацию, которая позволила бы злонамеренным субъектам распространять предупреждение об опасности.

Он добавил, что новый штамм C botulinum был распространен среди других «квалифицированных и проверенных на федеральном уровне исследователей в ограниченном порядке» в соответствии с правилами Select Agent and Toxin по обращению с опасными агентами.Такой подход позволил другим ученым проверить первоначальные результаты, не дав злоумышленникам возможности извлечь из них выгоду.

Кейм также является бывшим председателем Национального научного консультативного совета по биобезопасности, который курирует вопросы DURC для правительства США.

С другой стороны, Кейм сказал, что он и некоторые другие считают, что новый штамм мог быть распространен в других лабораториях раньше — возможно, даже до публикации оригинальных статей.

«Учитывая важность национальной безопасности и общественного здравоохранения, неэтично препятствовать исследованиям конкурентов по личным, профессиональным или коммерческим мотивам», — написал он.«Точно так же чрезмерное государственное регулирование бесполезно, если оно замедляет разработку контрмер».

Кейм также возражал против решения полностью отказаться от генетической последовательности. Он утверждал, что последовательность могла быть распространена конфиденциально, используя соглашения о передаче материалов, и что это очень помогло бы исследовательским группам, которые пытались понять новый токсин и разработать меры противодействия.

«В конце концов, последовательность генома пришлось переопределить, чтобы предоставить доступ более широкому сообществу исследователей», — написал он.

Учитывая, что конфиденциальная информация регулярно защищается в системах здравоохранения и финансов, Кейм добавил: «Мы должны иметь возможность распространять конфиденциальную информацию среди исследовательского сообщества. должна обрабатываться неконфликтующей третьей стороной или иметь пункт о прекращении действия, требующий ее окончательного выпуска.

«Этот подход достижим и должен быть целью политики для правительства и для неправительственных исследовательских институтов.

В ответ на запрос CIDRAP News CDPH, чьи сотрудники впервые сообщили о новом токсине, сегодня представила краткое заявление в ответ на комментарии Кейма:

«Обнаружение токсина типа H представило необычную ситуацию. для CDPH. Департамент обычно не идентифицирует агентов, которые потенциально являются новыми и / или имеют значение для национальной безопасности. Поскольку непосредственной угрозы не было, CDPH решил действовать осторожно, чтобы предотвратить любую возможную угрозу общественному здоровью и безопасности.CDPH передал управление новым штаммом федеральному правительству».

Maslanka SE, Luquez C, Dykes JK, et al. F, который нейтрализуется антитоксином серотипа А. J Infect Dis 2015 (ранняя онлайн-публикация от 10 июня) [Полный текст]

Keim P. Новый ботулинический токсин и его испытания в наших научных учреждениях (комментарий). J Infect Dis 2015 (Ранняя онлайн-публикация, 10 июня) [Полный текст]

См. также:

10 октября 2013 г., Новостная статья CIDRAP об исходных сообщениях о новом токсине

11 декабря 2014 г., Объявления о геноме Штамм C botulinum , продуцирующий новый токсин

25 сентября 2014 г., CIDRAP Новостная статья о политике США в отношении DURC для учреждений

12 марта 2015 г., CIDRAP Новостная статья о политике США в области исследований «приобретения функции»

.