Понедельник , 29 ноября 2021
Главная / Разное / Би би глоу эффект: Процедура BB Glow в Санкт Петербурге в медицинском центре AesteticaMed

Би би глоу эффект: Процедура BB Glow в Санкт Петербурге в медицинском центре AesteticaMed

Содержание

BB Glow Treatment — «BB GLOW — это нечто…»

Я давно слышала об этой процедуре, и мне очень хотелось её попробовать, но подруги меня отговаривали.

 

И вот, спустя полгода, я, наконец, решила её попробовать, тем более, что мой косметолог на неё обучилась и первую процедуру выставила со скидкой (2500₽ вместо 4000₽). Либо при покупке курса (а это 3 процедуры) каждая получается 3000₽.

 

Я все-таки решилась сначала сделать одну и посмотреть.

 

1ый день. Процедура.

Я пришла к косметологу, она меня умыла и начала что-то подготавливать. Потом я услышала как она включила аппарат, которым делают BB Glow,и, собственно, началась сама процедура.

 

У меня кожа с веснушками и следами от прыщей. Эта процедура, как мне сказали, должна решать эти проблемы как раз.

 

Сама процедура не болезненная, скорее сначала чувствуешь массаж и даже приятно, под конец начинает пощипывать, но мне наложили маску и кожа сразу успокоилась.

 

Честно говоря, сразу после процедуры я не заметила разницы, но косметолог меня заверила, что в течении 2 недель сыворотка будет работать и я увижу первый результат.

 

День 2 и 3.

Я 2 дня ходила розовая, как будто после загара. Мазалась кремом, которым мне сказали. И ждала чуда.

 

День 4.

Когда краснота спала, и я начала нормально умываться, я заметила, что что-то поменялось. Но это был не тот эффект, который я ожидала.

 

День 6.

Веснушки стали заметно светлее, кожа на щеках как будто выровнялась, пропали яркие следы от прыщей.

 

День 8.

Я проснулась и посмотрела в Зеркало. Кожа визуально смотрелась как с тональным кремом. И хотя вблизи все было не так ровно, мне это уже начало нравиться.

 

День 12.

Веснушки на самом деле стали менее заметными после 1 процедуры! И рубцы на щеках тоже перестали выделяться и стали цвета моей кожи. Когда я увидела результат, я позвонила косметологу и купила курс)

 

Отвечу на некоторые возможные вопросы:

Это больно?

Нет, сама процедура вполне терпима, особенно комфортно на щеках.

Это как тональный крем?

Не совсем. Тональный крем ложится очень плотно и забивает поры. Это скорее как очень легкий тональный крем, который матирует, тонирует и даже лечит некоторые проблемы с кожей.

 

В общем, подведу итог!

Мне эта процедура понравилась, я её рекомендую своим подругам. Может, она не всем подходит, но для этого как раз и нужно консультироваться с косметологом, и он скажет какой результат ожидать именно вам

Материалы для процедуры BB Glow Treatment

BB Glow – ухаживающая процедура для лица, которая дает эффект bb тонального крема на год. Если у девушки пигментация кожи, следы от акне, покраснения, темный тон, то уже после первого сеанса лицо светлеет, приобретает ровную текстуру с легким сиянием, разглаживаются морщинки. Процедура избавляет от необходимости постоянного использования тональных средств, которые на время маскируют проблему, но не решают ее. Сеанс проходит в комфортной обстановке. При правильном выполнении процедуры клиент не испытывает боль. Время проведения – 40-60 минут.

Последовательность выполнения

  1. Очищение лица средствами для демакияжа. Причем для чувствительных зон губ и глаз используются молочко с особым ph.
  2. Дополнительно очистить кожу от косметики, усилить действие лечебных средств поможет тоник.
  3. Использование энзимного пилинга, который подготавливает кожу к BB Glow Treatment: глубоко очищает поры, стимулирует образование новых клеток.
  4. В зависимости от проблемы (возрастные морщины, птоз, гиперпигментация, неровный тон и т.д.) подбирается сыворотка. Её наносят на лицо тонким слоем, а после вбивают в кожу на 1-2 мм аппаратом Дермапеном при помощи стерильных картриджей.
  5. При желании улучшить эффект от сеанса применяют альгинатную маску, которую наносят на лицо на 15-20 минут.
  6. Завершающий этап – увлажнение и питание кожи кремом.

Результат процедуры BB Glow на 90% зависит от добротности составов. Чтобы не ошибиться с выбором, перед приобретением читайте состав, в котором должны отсутствовать гипоаллергенные компоненты, преобладать растительные экстракты и витамины.

Интернет магазин Darbor Store рекомендует лучшие товары для профессионального проведения сеанса:

  • Демакияж для губ и глаз, для лица, восстанавливающий Ph тоник Matrigen.
  • Сыворотки и ампулы для процедуры bb glow treatment: Whitening, Meso cell, Meso bb brightening control system, Anti-aging Matrigen.
  • Пилинги Matrigen.
  • Крема: завершающий крем с тонирующим эффектом, для проблемной кожи, для травмированной кожи Matrigen.
  • Альгинатные маски: с ментолом Soothing & Cooling, Brightening & Moisturizing, Purifying & Soothing, Anti-aging & Detoxifying.
  • Дермапены Dr.Pen Ultima A1-C, My M.
  • Картриджи.

Купить материалы для процедуры BB Glow Treatment по ценам производителя можно в нашем магазине. Рады предложить добротные товары, которые делают девушек красивее и увереннее в себе.

цены, отзывы. Выбирайте лучшего специалиста на «Крэйс-Мастерс»

Услуги: косметология, коррекция бровей, эпиляция

Образование, курсы:

• Курс химии в учебном комплексе РХТУ им. Д.И. Менделеева, присвоена квалификация «химик-лаборант», 2005 г.

• Межшкольный учебный комбинат №15 «Мещанский», обучение на отделении «Технология оказания первой медицинской помощи», 2005 г.

• Международная студия красоты Jilda, курс – косметология, 2009 г.

• Компания группы Глобал Пэйментс ИНК, курс – правила обслуживания платёжных карт международных платежей систем VISA International, MasterCard WorldWide, JCB International, UnionPay, 2015 г.

• Школа «МегаСпа», курс – уход за кожей лица, 2018 г.

• УЦ Saona Cosmetics, семинар – мужской шугаринг от Saona Cosmetics, 2018 г.

• УЦ Egia Biocare System, владение методиками уходов по лицу и телу на профессиональной космецевтической линии Egia Biocare System, 2018 г.

• MEGASPA International school massage and SPA-Technologies, курс по антицеллюлитному массажу «Липодиструктивный массаж», 2018 г.

• УЦ Aravia, мастер-класс (семинар) – неинвазивная карбокситерапия ARAVIA Professional, 2018 г.

• УЦ G-DERM ACADEMY, курс – применение препаратов линии ACTIVE COMPLEX HYDROSENSE, 2018 г.

• УЦ G-derm ACADEMY, курс – применение препаратов линии ACTIVE COMPLEX ANTIACNE, 2018 г.

• УЦ Saona Cosmetics, семинар – сахарная депиляция или правильный шугаринг от Saona Cosmetics, 2018 г.

• УМЦ MARTINES IMAGE, курс – Phy-mongShe special course for professional technique and products knowledge, 2018 г.

• УЦ «Биосфера», семинар «Микронидлинговая терапия лица и тела», 2018 г.

• Школа «МегаСпа», курс программа WELNESS YON-KA, Paris 3 уровень, 2018 г.

• Школа «МегаСпа», курс – программа Anti-age YON-KA, Paris 2 уровень, 2018 г.

• Школа Романа Воронцова, тема – женский шугаринг, 2018 г.

• УЦ Sweet Epil, семинар по шугарингу, 2018 г.

• УМЦ «Мартинес имидж», семинар «Экспресс-уходы с инновационными косметическими масками», 2018 г.

• УЦ Image Aesthetic Institute, акне, патогенез, коррекция I-IV степени акне (ретинол, бензоил пероксид, кислоты), 2018 г.

• Школа «МегаСпа», полный курс – программа MEDY YON-KA, Paris, 2018 г.

• Дом Русской Косметики, подготовка по дополнительной профессиональной программе «Косметическая химия и космецевтика». (Повышение квалификации в АНО ДПО «Институт косметологии, эстетической медицины и визажного искусства — » Удостоверение о повышении квалификации №772409381193 Регистрационный номер удостоверения 1177241778471), 2019 г.

• Школа депиляции Wax Time, специальный курс практического обучения по специальности «мастер восковой депиляции», 2019 г.

• УЦ G-DERM ACADEMY, курс – применение трансдермальных препаратов линии CELLULAR PERFECTION.

• Обучение по программе «Косметическая химия и космецевтика».

Опыт:

• Опыт работы (частный) — 10 лет.

Достижения, награды:

• Участник открытого форума «Современный взгляд на проблемы инсоляции», 2018 г.

Что такое Meso BB Glow Ideal Face Skin Treatment в косметологии или Как быть красивой? — Профессиональный ремонт

В мире косметологии широкую популярность набирает bbglow Treatment (процедура Би Би Глоу). Это направление, возникшее в Корее, обещает оставить после себя сияющую кожу уже после пары сеансов на целый год. Действительно ли это помогает в устранении следов постакне и решении многих других проблем? Meso BB Glow Ideal Face Skin Treatment представляет собой процедуру, при которой специальным оборудованием в слои эпидермиса вносится сыворотка, обладающая осветляющими и тонирующими свойствами, это интенсивное и безопасное лечение кожи, которое может помочь в осветлении пигментных пятен, уменьшении обесцвечивания и способствует предотвращению преждевременного появления морщин. Как и где делают процедуру и что это такое, мы рассмотрим далее более подробно.

Отличия мезонидлинга от микронидлинга

Процедуру часто сравнивают с уже распространенной услугой «микронидлинг» и вполне справедливо, так как существенных технических отличий мезонидлинга от микронидлинга не наблюдается. В обоих случаях используют аппараты с иглами маленького диаметра, которые за счет контролируемых повреждений кожи вызывают стимуляцию клеток, стимулируют выработку коллагена и доносят в кожный покров активные вещества. Микронидлинг в основном применяют для омоложения кожи, коррекции её рельефа, а также для активации роста волос и устранения целлюлита. Мезонидлинг больше ориентирован на внешние показатели кожи (пигментация, осветление и т.д.). В связи с этим для мезонидлинга чаще используют иглы более тонкого диаметра, чтобы уменьшить болевые ощущения при работе с кожей лица. Таким образом, главное отличие этих двух процедур состоит в сыворотке/коктейле, которые наносятся на кожу перед воздействием иглы и собственно диаметр игл. Фото до и после Би Би Глоу Посмотрите на фото и сравните эффект до и после нанесения на лицо тонального крема процедурой Би Би Глоу (Meso BB Glow Ideal Face Skin Treatment) и не забывайте, что это сделано на 1 год.

Необходимые материалы и оборудование Сыворотка Наиболее распространенные сыворотки, используемые для данной процедуры ухода: «White». Состав: вода, глицерин, двуокись титана, эмульгаторы ППГ-5-ЦЕТЕТ-20, экстракт луковицы Нарцисса, гидролизованная гиалуроновая кислота, экстракт семян клякса, Аммиак-акрилоилдиметилтаурат, карбоксиэтилакрилатный кроссполимер, феноксиэтанол, этилгексилглицерин, Полисорбат 20, цетилгидроксиэтилцеллюлоза, полиметил метакрилат, триларин, диацетилболин «Matrigen». Состав: вода, пропилен, гликоль, минеральное масло, диоксид титана, триглицерид каприла, циклогексасилоксан, тальк, магниевый силикат алюминия, полисорбат 80, микрокристаллический воск, аллостеариловый спирт, стеариновая кислота, глицерилстеарат, сорбитан-сесквиолеат, оксид железа, пчелиный воск, метилпарабен, аллантоин, ксантан, экстракт листьев алоэ Барбаденсис, экстракт авокадо, гидрированное касторовое масло, токоферилацетат. «Physiothera». Состав: очищенная вода, гиалуронат натрия, экстракт авокадо, экстракт алоэ вера, экстракт коры, экстракт розы, экстракт периллы, экстракт саранчи, бутиленгликоль, ниацинамид бис-фан 1,8-метилэтилдиметилсилан, ацетилгексапептид-3, пальмитоипентапептид-3, 1,23-О-этил аскорбиновая кислота, этанол глицерин, оксид железа черный. Все сыворотки не содержат формальдегидов и отдушек, безопасны по составу и подходят для азиатской, кавказской и этнической кожи.

Advooc — поиск объявлений

Advooc
  • О проекте
  • Политика конфиденциальности
Электроника и современные гаджеты
Домашние животные и товары для них
Одежда, обувь и аксессуары
Автозапчасти
Стройматериалы и инструменты
Оборудование для бизнеса и промышленности
Мебель и интеръер
Техника для дома
Работа
Сервис и услуги
Антиквариат и коллекционирование
Косметика и товары для ухода
Еда и напитки
Музыка и музыкальные инструменты
Товары для детей
Товары для спорта и активного отдыха
Бытовая химия
Книги и журналы
Аренда недвижимости
Продажа недвижимости

Казахстан: adkza adkze advoos advooc adkzu adkzy Украина: aduaa aduae aduau aduao aduaho Беларусь: adbyf adbyt adbye adbyy Узбекистан: aduza aduze aduzy aduzu Азербайджан: adaza adazu Таджикистан: adtja adtju Киргизия: adkga adkgu Болгария: adbgf adbgt adbgd adbgl adbgy Румыния: adroa adroe adroi

© Advooc

Как аутофагия может сохранить здоровье и продлить жизнь

  • Лорел Айвс
  • Корреспондент Би-би-си по вопросам здоровья

Автор фото, Getty Images

Подпись к фото,

Иненсивные тренировки могут форсировать аутофагию

Этот малоизученный процесс, происходящий в нашем организме, в последнее время оказался в центре внимания. На аутофагию возлагают большие надежды: считается, что она активно способствует потере веса, оздоровлению и увеличению продолжительности жизни.

Аутофагия — это естественный процесс регенерации, происходящий на клеточном уровне, уменьшающий вероятность возникновения некоторых заболеваний и продлевающий жизнь.

В 2016 году японский ученый Йосинори Осуми был удостоен Нобелевской премии за открытие и исследование механизмов аутофагии. Благодаря этим исследованиям удалось лучше понять такие заболевания как болезнь Паркинсона и деменция.

С тех пор фармацевтические компании и ученые пытаются разработать лекарства, которые могли бы стимулировать этот процесс, а эксперты в сфере здорового питания и образа жизни также загорелись этой идеей и заявляют, что этот процесс может быть стимулирован естественным путем — голоданием, интенсивными физическими упражнениями и ограничением углеводов.

Что говорят ученые?

«Несомненно, результаты экспериментов на мышах демонстрируют, что это именно так», — говорит Давид Рубинштейн, профессор молекулярной нейрогенетики Кембриджского университета и Британского научного института по исследованию деменции.

«Проводились исследования, в ходе которых этот процесс запускался с помощью генетических инструментов, медикаментов или голодания, и в этих случаях животные жили дольше, были более здоровыми в целом», — говорит он.

Автор фото, Getty Images

Подпись к фото,

Есть или не есть? Мнения по поводу периодического голодания расходятся

Однако пока неясно, насколько эффективны эти приемы на людях.

«Например, у мышей можно наблюдать эффект в мозге после 24 часов голодания, а в некоторых других органах, таких как печень, намного быстрее. И, хотя мы знаем, что поститься полезно, мы не знаем точно, как долго люди должны голодать, чтобы добиться положительных результатов», — отмечает доктор Рубинштейн.

Тем не менее, по словам исследователя, голодание действительно стимулирует аутофагию, а польза для организма доказана и другими исследованиями.

Что такое аутофагия?

  • Слово «аутофагия» происходит от греческих «ауто» («сам») и «фагин» («есть»)
  • Это процесс, посредством которого клетки разрушают и перерабатывают свои компоненты
  • Он обеспечивает источник энергии и строительные блоки для обновления клеток
  • После попадания в организм инфекции посредством аутофагии могут быть уничтоженные бактерии и вирусы
  • Клетки используют аутофагию, чтобы избавляться от поврежденных белков и органелл и таким образом бороться с негативными последствиями старения организма

Процесс аутофагии был открыт в 60-х годах ХХ века, однако его важность была оценена только в 90-х, после публикации исследований Йосинори Осуми.

«Мы обнаружили, что он защищает от таких болезней, как болезнь Паркинсона, болезнь Гентингтона и некоторых форм деменции», — говорит Давид Рубинштейн

Автор фото, Reuters

Подпись к фото,

За открытие и исследование механизмов аутофагии японский биолог Йосинори Осуми получил Нобелевскую премию

«Также, судя по всем, этот процесс помогает бороться с инфекцией и воспалительными процессами», — добавляет профессор Рубинштейн.

В новых пособиях по здоровому образу жизни утверждается, что процесс может быть запущен в результате изменений в диете и поведении — например, периодичным голоданием или голоданием согласно диете 5:2.

Мышечная масса

В одной из новых книг «Сияние 15» («Glow 15») самопровозглашенного консультанта-диетолога Наоми Уиттел, предлагается 15-дневная программа, включающая 16-часовое голодание три раза в неделю.

Программа также подразумевает сокращение потребления белка в определенные дни, потребление углеводов во второй половине дня и сессии крайне интенсивных упражнений.

Наоми Уиттел протестировала свою базовую программу на добровольцах в Университете Джексонвиля во Флориде, и утверждает, что зафиксировала определенные положительные результаты.

«Некоторые люди похудели, сбросив до 3 килограммов за 15 дней. У других нормализовалось артериальное давление, прибавилась мышечная масса, а также частично разгладились морщины», — говорит она.

По словам профессора Рубинштейна, эти рекомендации повредить не могут.

«Если вы ведете нездоровый образ жизни, все время что-то едите или едите всякую дрянь, у вас и не будет возможности запустить этот процесс», — отмечает он.

Нервные клетки

Кончено же, длительное или частое голодание может нанести вред здоровью, и если вы собрались изменить свою диету или образ жизни, вам необходимо посоветоваться с врачом.

Но профессор Рубинштейн убежден, что в будущем с помощью аутофагии можно будет эффективно бороться с болезнями.

В ходе экспериментов в его лаборатории было обнаружено, что белки образуют сгустки в нервных клетках людей, страдающих такими болезнями, как Альцгеймер или Паркинсон.

«Мы обнаружили, что если запустить аутофагию, можно быстро удалить эти белки и защитить организм от нейродегенеративных заболеваний, таких как болезнь Гентингтона и некоторых видов деменции», — утверждает ученый.

effects.factor | код поиска

effects.factor | код поиска

PageRenderTime 50 мс CodeModel.GetById 14 мс app.highlight 32 мсек RepoModel.GetById 1 мс app.codeStats 1 мс

/core/effects/effects.factor
http://github.com/georgerogers42/factor
Неизвестно | 124 строки | 98 код | 26 пустой | 0 комментариев | 0 сложность | 2d1f35756aabe7f80a31fd938d8be3c2 MD5 | необработанный файл
 1! Copyright (C) 2006, 2010 Слава Пестов.2! См. Http://factorcode.org/license.txt для получения лицензии BSD.
  3 ИСПОЛЬЗОВАНИЕ: пространства имен ядра math math.parser math.order make
  4 последовательности, строки, слова, ассоциации, комбинаторы, методы доступа, массивы
  5 цитат;
  6IN: эффекты
  7
  8TUPLE: эффект
  9 {в массиве только для чтения}
 10 {выходной массив только для чтения}
 11 {прекращено? только для чтения}
 12 {in-var только для чтения}
 13 {out-var только для чтения};
 14
 15:? Прекращено (выход прекращено?)
 16 dup {"*"} = [drop {} t] [f] если;
 17
 18: <эффект> (выход - эффект)
 19 - прекращенный f f эффект боа;
 20
 21:  (in out terminated? - эффект)
 22 ф ф эффект удава; в линию
 23
 24:  (in-var in out-var out - эффект)
 25 swap [rot] dip [? Terminated] удав с эффектом 2dip;
 26 год
 27: эффект-высота (эффект - n)
 28 [выход >> длина] [вход >> длина] bi -; в линию
 29
 30: переменный эффект? ( эффект -- ? )
 31 [in-var >>] [out-var >>] bi или;
 32: двумерный эффект? ( эффект -- ? )
 33 [in-var >>] [out-var >>] bi = not;
 34
 35: эффект <= (эффект1 эффект2 -?)
 36 {
 37 {[прервано? >>] [t]}
 38 {[дублирование прекращено? >>] [f]}
 39 {[2dup [двумерный эффект? ] или? ] [f]}
 40 {[2dup [переменный эффект? ] [переменный эффект? не] bi * и] [f]}
 41 {[2dup [in >> length] bi @>] [f]}
 42 {[2dup [effect-height] bi @ = not] [f]}
 43 [т]
 44} cond 2nip; в линию
 45
 46: эффект = (эффект1 эффект2 -?)
 47 [[in >> длина] bi @ =]
 48 [[out >> length] bi @ =]
 49 [[прекращено? >>] bi @ =]
 50 2три и а;
 51
 52GENERIC: эффект> строка (obj - str)
 53M: эффект струны> струна;
 54M: эффект объекта> строковое перетаскивание «объект»;
 55M: эффект слова> название строки >>;
 56M: целочисленный эффект> номер строки> строка;
 57M: пара эффект> строка first2 [эффект> строка] bi @ ":" glue;
 58
 59: изображение стопки (seq - строка)
 60 [[эффект> строка% CHAR: \ s,] каждый] "" make;
 61
 62: var-picture (var - строка)
 63 [".. "" "окружают]
 64 [""] если *;
 65
 66M: эффект эффект> струна (эффект - струна)
 67 [
 68 "("%
 69 dup in-var >> var-picture%
 70 копий в >> стек-изображение% "-"%
 71 dup out-var >> var-picture%
 72 дублирования >> стопка изображения%
 73 дублирование прекращено? >> ["*"%] когда
 74 капля
 75 ")"%
 76] "" сделать;
 77
 78GENERIC: эффект> тип (obj - тип)
 79M: эффект объекта> тип перетаскиваемого объекта;
 80M: эффект слова> тип;
 81M: парный эффект> тип второго эффекта> тип;
 82
 83: эффекты в типах (эффект - типы входов)
 84 в карте >> [эффект> тип];
 85
 86: типы выходных эффектов (эффекты - типы входов)
 87 out >> [эффект> тип] карта;
 88
 89GENERIC: стек-эффект (слово - эффект / f)
 90
 91M: эффект стека слов
 92 [слово-опора "объявленный эффект"]
 93 [дублирование родительского слова [стек-эффект] когда] би или;
 94
 95M: отложенный вызов следующего метода стекового эффекта ((- *)) или;
 96
 97M: клон эффекта
 98 [вход >> клон] [выход >> клон] би <эффект>;
 99
100: высота стека (слово - n)
101 стек-эффект-высота эффекта;
102
103: перемешивание в случайном порядке (перемешивание стека - stack1 stack2)
104 дюйма >> отрезок длины *;
105
106: отображение в случайном порядке (эффект - отображение)
107 [выход >>] [вход >>] би [индекс] карта карри;
108
109: перемешать (перемешать стек - новый стек)
110 перестановок в случайном порядке;
111
112: добавление-эффект-ввод (эффект - эффект ')
113 [in >> суффикс "obj"] [out >>] [завершено? >>] tri ;
114
115: композиция-эффекты (эффект1 эффект2 - эффект ')
116 прервано? >> [
117 капля
118] [
119 [[[in >> длина] [out >> length] bi] [in >> length] bi * swap [-] +]
120 [[выход >> длина] [[вход >> длина] [выход >> длина] би] би * [[-]] провал +]
121 [блокировка прекращена? >>] 2тр.
122 [["x" <массив>] би @] провал
123 <окончательный эффект>
124] если; в линию
 

Поисковый код с гордостью сделан в Сиднее беном бойтером

Забудьте «супер» клей, ученые разработали новый «гипер» клей

Технология сшивки плотно связывает там, где коммерческие клеи не могут

Благодаря тому, что многие из продуктов, которые мы используем каждый день, скреплены клеями, исследователи из кампуса UBC в Оканагане и Университета Виктории надеются сделать все, от защитной одежды до медицинских имплантатов и жилищной сантехники, более прочными и устойчивыми к коррозии благодаря недавно разработанной технологии. формула гиперклея.

«Представьте себе краски, которые никогда не отслаиваются, или водостойкие покрытия, которые никогда не нужно закрывать повторно». — Профессор Аббас Милани

Группа химиков и исследователей композитных материалов открыла широко применяемый метод соединения пластмасс и синтетических волокон на молекулярном уровне с помощью процедуры, называемой сшивкой. Сшивание происходит, когда клей подвергается воздействию тепла или длинноволнового ультрафиолетового света, образуя прочные соединения, устойчивые к ударам и коррозии.Даже при минимальном количестве поперечных сшивок материалы прочно связаны.

«Оказалось, что клей особенно эффективен в полиэтилене высокой плотности, который является важным пластиком, используемым для изготовления бутылок, трубопроводов, геомембран, пластиковых пиломатериалов и многих других областей применения», — говорит профессор Аббас Милани, директор Исследовательского института материалов и производства UBC. , и ведущий исследователь в узле Оканаган Сети композитных исследований. «На самом деле, имеющиеся в продаже клеи вообще не работают с этими материалами, что делает наше открытие впечатляющей основой для широкого спектра важных применений.”

Слева направо: Кевин Головин, Аббас Милани, Фен Цзян и Джереми Вульф и участники сети COMFORTS, группа исследователей из UBC, UVic и Университета Альберты. Кредит: UBC Okanagan

.

UVic Профессор органической химии Джереми Вульф, команда которого руководила разработкой нового класса сшивающих материалов, сотрудничал с UBC Survive and Thrive Applied Research, чтобы изучить, как это работает в реальных приложениях.

«Команда UBC STAR смогла испытать материал и проверить его жизнеспособность в некоторых невероятных приложениях, включая баллистическую защиту для служб быстрого реагирования», — говорит Вульф.

Это открытие, по его словам, уже играет важную роль в сети «Комфортно оптимизированные материалы для обеспечения эксплуатационной устойчивости, термопереноса и живучести» (COMFORTS), где группа исследователей из UBC, UVic и Университета Альберты сотрудничает с создать бронежилет с высокими характеристиками.

«Используя эту технологию сшивания, мы можем лучше сплавлять вместе различные слои тканей для создания одежды следующего поколения для экстремальных условий», — говорит Вульф.«В то же время сшивающий агент обеспечивает дополнительную прочность материала самой ткани».

Милани сразу же отмечает, что невероятно сильное связующее — это только начало того, на что он способен.

«Представьте себе краски, которые никогда не отслаиваются, или водостойкие покрытия, которые никогда не нужно закрывать повторно», — говорит Милани. «Мы даже начинаем задумываться о том, чтобы использовать его как способ склеить вместе множество различных типов пластика, что является серьезной проблемой при переработке пластмасс и их композитов.”

«Существует реальный потенциал сделать некоторые из наших предметов повседневного обихода более прочными и менее склонными к сбоям, к чему стремятся многие химики и инженеры по композитным материалам».

Исследование было недавно опубликовано в журнале Science при поддержке компаний Epic Ventures и Mitacs Canada из штата Виктория.

Ссылка: «Широко применимый сшивающий агент для алифатических полимеров, содержащих связи C – H», авторы Матье Л. Лепаж, Чакраварти Симхадри, Чанг Лю, Махди Такаффоли, Литинг Би, Брин Кроуфорд, Аббас С.Милани и Джереми Э. Вульф, 15 ноября 2019 г., Science .
DOI: 10.1126 / science.aay6230

Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности. Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.


Настройка вашего браузера для приема файлов cookie

Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее частые причины:

  • В вашем браузере отключены файлы cookie.Вам необходимо сбросить настройки своего браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
  • Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались. Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файлы cookie.
  • Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
  • Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie.Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере.
  • Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie. Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Чтобы предоставить доступ без файлов cookie потребует, чтобы сайт создавал новый сеанс для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.


Что сохраняется в файле cookie?

Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.

Как правило, в cookie-файлах может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта. Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, пока вы не введете его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступа к остальной части вашего компьютера, и только сайт, который создал файл cookie, может его прочитать.

PROTAC: большие возможности для академических кругов и промышленности

AHR

Арилуглеводородный рецептор (AHR) — это активируемый лигандом фактор транскрипции, который принадлежит к семейству bHLH / PAS (основная спираль-петля-спираль / Per-Arnt-Sim) хемосенсоров. 106,107 Он опосредует многие из токсических и канцерогенных эффектов канцерогенов окружающей среды, включая хлоракне, истощение, тератогенность, иммунотоксичность, развитие опухолей и канцерогенность. AHR связывает свой лиганд, как полициклический ароматический углеводород, и инициирует ферменты, метаболизирующие ксенобиотики, такие как цитохром P450, с последующим образованием аддуктов ДНК.Хотя физиологическим расстройствам, связанным с AHR, уделяется много внимания, роль AHR в этих патологических процессах еще предстоит четко изучить из-за отсутствия мощных химических зондов. 108

Группа Кима недавно обнаружила, что апигенин, натуральный продукт, содержащийся во фруктах, растениях и меде, напрямую взаимодействует с AHR (рис. 5). Затем они предположили, что PROTAC на основе апигенина могут быть полезными молекулярными зондами для изучения биологии AHR. 108 Для создания PROTAC, нацеленных на AHR, они сначала выбрали положение на апигенине для присоединения лиганда VHL.После модификации свободных гидроксильных групп ацетильными группами было обнаружено, что все апигенины сохраняют способность ингибировать AHR после ацетилирования. Они связали пентапептидный фрагмент, полученный из фактора, вызывающего гипоксию (HIF) -1α, лиганда VHL, с апигенином или бензилированным апигенином. Api-Protac-II эффективно индуцировал деградацию AHR, в то время как деградация не наблюдалась с Api-Protac-I. Они также исследовали деградацию AHR, объединенного с усиленным зеленым флуоресцентным белком (eGFP). Их результаты показали, что Api-Protac-II можно использовать в качестве зонда для изучения биологии AHR.

Рис. 5

Представитель PROTAC AHR.

ALK

Киназа анапластической лимфомы (ALK) представляет собой тирозинкиназу подсемейства киназ рецепторов инсулина (IR). 109 Онкогенная активация ALK тесно связана с возникновением и развитием многих видов рака человека, включая диффузную крупноклеточную В-клеточную лимфому (DLBCL), анапластическую крупноклеточную неходжкинскую лимфому (ALCL), плоскоклеточный рак пищевода (ESCC), воспалительная миофибробластическая опухоль (IMT), немелкоклеточный рак легкого (NSCLC), почечно-клеточный рак (RCC), нейробластома, рак щитовидной железы, рак яичников, рак толстой кишки и рак груди. 110,111,112,113,114,115 ALK активируется в основном посредством трех различных механизмов, и хромосомные транслокации являются наиболее распространенными генетическими изменениями. Идентифицировано около 30 различных типов слитого белка ALK, и среди них слитые формы NPM-ALK, EML4-ALK, KIF5B-ALK и TGF-ALK обычно обнаруживаются при различных типах рака, включая ALCL, NSCLC и DLBCL. 116 Замещающие мутации являются вторым механизмом активации ALK, а точечные мутации в киназном домене (F1174L и R1275Q) наиболее часто наблюдаются при нейробластоме. 117 Амплификация и сверхэкспрессия гена — третий механизм активации ALK, о котором также сообщалось при многих типах рака человека. 118,119 На сегодняшний день пять ингибиторов ALK, включая алектиниб, бригатиниб, церитиниб, кризотиниб и лорлатиниб, были одобрены FDA для терапии ALK-положительного НМРЛ. 120 Несмотря на первоначальный ответ на эти ингибиторы, у большинства пациентов лекарственная устойчивость наблюдается в течение 1-2 лет. 120,121 Таким образом, срочно необходимы новые терапевтические подходы для преодоления лекарственной устойчивости.

В 2018 году группа Натанаэля С. Грея разработала два ALK PROTAC (TL13–12 и TL13–112). Эти два PROTAC были конъюгированы с ингибиторами ALK (церитиниб и TAE684) и помалидомидом с помощью лайкеров полиэтиленгликоля (PEG) разной длины (фиг. 6). 122 Эти PROTAC индуцировали мощный нокдаун ALK в клетках NSCLC h4122 (EML4-ALK), клетках ALCL Karpas 299 (NPM-ALK), клетках ALCL SU-DHL-1 (NPM-ALK) и клетках NB (F1174L / R1275Q). ALK), который в то же время поддерживал подавление передачи сигналов нижестоящего уровня ALK.Кроме того, эти PROTAC способствовали деградации других киназ (FAK, Aurora A, FER и RSK1) с помощью анализа протеомного профилирования.

Рис. 6

Типичные PROTAC-файлы ALK.

В том же году Jian Jin и его коллеги сообщили о двух нацеленных на ALK PROTAC, MS4077 и MS4078, посредством соединения церитиниба и помалидомида с двумя отдельными линкерами (рис. 6). 123 Помимо разложения NPM-ALK и EML4-ALK, MS4077 и MS4078 могут ингибировать фосфорилирование ALK и STAT3 в зависимости от концентрации и времени как в SU-DHL-1 (клетки ALCL, содержащие NPM-ALK), так и в NCI- клетки h3228 (клетки NSCLC, несущие EML4-ALK).Кроме того, MS4077 и MS4078 показали сильную антипролиферативную активность в клетках SU-DHL-1. Кроме того, MS4078 продемонстрировал хорошую экспозицию в плазме в фармакокинетическом исследовании на мышах, и тестируемые мыши хорошо переносили дозу 50 mpk (мг / кг).

Впоследствии Jong Yeon Hwang и его коллеги сообщили о TD-004, который состоял из церитиниба и лиганда VHL E3 (рис. 6). 40 TD-004 продемонстрировал отличную деградацию ALK и ингибирование роста клеток SU-DHL-1 и h4122.Кроме того, TD-004 резко уменьшил размер опухоли в модели мыши с ксенотрансплантатом h4122 in vivo.

AR

Нарушение рецептора андрогенов является основной движущей силой рака простаты. 124 Препаратами первой линии для лечения рака простаты были конкурентные антагонисты, такие как энзалутамид, который мог ингибировать транскрипционную активность AR. Однако после длительного воздействия этих антагонистов у большинства пациентов в конечном итоге разовьется лекарственная устойчивость. 125

Полученный из энзалутамида, PROTAC, нацеленный на AR, названный ARCC-4, был описан Крюсом и его коллегами в 2018 г. 126 (рис.7). ARCC-4 является высокоэффективным деструктором с низкой наномолярной активностью разложения, и его DC 50 (полумаксимальные концентрации разложения) составляли 5 нМ. Более того, ARCC-4 продемонстрировал ингибирующее действие на пролиферацию опухолевых клеток простаты и способность разрушать клинически значимый мутантный рецептор андрогенов. Кроме того, для параллельного сравнения энзалутамида и ARCC-4 использовались различные клеточные модели лекарственной устойчивости рака простаты.Например, ARCC может снижать уровень AR (~ 3,5 раза при 10 мкМ) в клетках LNCaP, сконструированных для сверхэкспрессии мутантного AR-F876L (LNCaP / F876L), в то время как AR в клетках, обработанных энзалутамидом, значительно увеличивается (~ 17,5- сложить при 10 мкМ). Другие точечные мутации AR у пациентов, получавших терапию, направленную на AR, также эффективно деградировали, включая H874Y, M896V, T877A, L702H. Следовательно, ARCC-4 продемонстрировал лучшие антипролиферативные эффекты в среде мутанта AR, в то время как энзалутамид оказался неэффективным.

Фиг.7

Типичные PROTACs, разрушающие лекарственно-устойчивый AR.

Arvinas разработал другой PROTAC, нацеленный на AR (ARV-110), который продемонстрировал высокую эффективность разрушения как мутантов AR, так и AR после перорального введения (рис. 7). ARV-110 может разрушать 95–98% AR в различных клеточных линиях, обычно используемых в исследованиях рака простаты. АРВ-110 продемонстрировал сопоставимую эффективность при более низких дозах по сравнению с энзалутамидом в моделях АР дикого типа. При оценке на моделях приобретенной и внутренней резистентности n рост опухоли блокировался на 70% и 100%, соответственно, после лечения АРВ-110.АРВ-110 вошел в фазу 1 клинических испытаний, и предварительные данные показали удовлетворительную безопасность и переносимость у пациентов. Таким образом, АРВ-110 будет многообещающей стратегией лечения пациентов с метастатическим устойчивым к кастрации раком простаты (CRPC), которые получали стандартную терапию.

BCL2

BCL2 является ключевым членом семейства BCL2 и регулирует гибель клеток (апоптоз), индуцируя (проапоптоз) или ингибируя (антиапоптоз). BCL2 классифицируется как онкоген из-за его важной роли как антиапоптотических белков. 127 При нарушении регуляции BCL2 будут возникать различные виды рака, включая рак легких и лимфомы. Пирс Бломбери и его коллеги обнаружили появление новой мутации, устойчивой к венетоклаксу (BCL2 F104I), в фолликулярной лимфоме. Более того, было трудно нацеливаться на BCL2 из-за межбелкового взаимодействия (PPI) с Bcl-xl. Таким образом, PROTAC открывают перспективы для разработки новых ингибиторов BCL2, преодолевающих ИПП и лекарственную устойчивость.

О первом ухудшении состояния BCL2 сообщили Чжан и его коллеги в 2019 году.сконструированные PROTAC для опосредованных α-спиралью мишеней PPI для деградации BCL2 128 (рис. 8). Самый мощный и селективный PROTAC, C5, разрушал BCL2 с DC 50 3,0 мкМ и демонстрировал ингибирование клеточной пролиферации, обусловленное эффективностью деградации.

Рис. 8

Типичный PROTAC, нацеленный на BCL2.

Несмотря на разработку деструкторов BCL2, не было никаких документов об эффективных PROTAC, разрушающих лекарственно-устойчивый BCL2. 129,130 ​​

BCL6

Транскрипционный фактор B-клеточной лимфомы 6 (BCL6) является членом семейства bric-a-brac, tramtrack, wide complex / poxvirus zinc finger (BTB / POZ).Он взаимодействует с тремя корепрессорами (т.е. BCoR, SMRT и NCoR) и имеет домены BTB, RD2 и цинковые пальцы. 131 BCL6 необходим для образования В-клеток зародышевого центра и дифференцировки Т-лимфоцитов. 132,133 Кроме того, было обнаружено, что он участвует в дифференцировке и пролиферации диффузных больших B-клеточных лимфом (DLBCL) и рака фолликулярной лимфомы посредством ряда генетических изменений. 134,135 Таким образом, BCL6 рассматривается как эффективная терапевтическая мишень для терапии аутоиммунных заболеваний и рака. 136 Хотя в настоящее время сообщается, что беспорядочные связи 137 и пептидомиметические ингибиторы BCL6 на основе 138 показали привлекательный эффект in vitro, они не оправдали ожиданий своих доклинических данных. Необходим мощный и селективный инструмент для понимания BCL6 при заболеваниях человека.

В 2018 году AstraZeneca впервые сообщила о мощном и избирательном нацеливании на BCL6 PROTAC, PROTAC 9 , путем конъюгирования сконструированного лиганда BCL6 и лиганда CRBN талидомида (рис.9). 139 PROTAC 9 показал дозозависимую деградацию BCL6 во всех субклеточных фракциях, но эта деградация не была полной. Кроме того, PROTAC9 не вызывал фенотипический ответ в клетках OCI-Ly1 и SUDHL4 в течение 16-дневного исследования.

Рис. 9

Типичный PROTAC BCL6.

BCR-ABL

Слитый ген BCR-ABL является основной причиной хронической миелогенной лимфомы (ХМЛ). 140 При хромосомной транслокации гена ABL с хромосомы 9 на ген BCR на хромосоме 22 образуется BCR-ABL.BCR-ABL приводил к нарушению пролиферации клеток CML у пациентов за счет активации нижестоящей передачи сигналов. 141 В настоящее время основное внимание уделяется открытию новых лекарств против тирозинкиназы ABL или BCR-ABL для лечения ХМЛ, которые по-прежнему являются АТФ-конкурентными ингибиторами. Поэтому ученые разработали несколько ингибиторов тирозинкиназы BCR-ABL, и FDA одобрило их для лечения ХМЛ. В то же время точечные мутации в тирозинкиназном домене BCR-ABL наблюдались у ряда пациентов во время введения ингибиторов киназ и в конечном итоге развивали лекарственную устойчивость.таким образом, было идентифицировано три поколения ингибиторов для борьбы с растущей лекарственной устойчивостью, включая TKI первого поколения, иматиниб; 142 TKI второго поколения, дазатиниб 143 и нилотиниб; 144 и TKI третьего поколения, понатиниб. 145

Первый разлагатель BCR-ABL был разработан Crews и соавторами в 2015 году. На основе босутиниба и дазатиниба был сконструирован BCR-ABL PROTAC, который индуцировал деградацию c-ABL и BCR-ABL в присутствии любого из них. CRBN или VHL E3 убиквитинлигаза 146 (рис.10). После оценки полученный из дазатиниба PROTAC (DAS-VHL) опосредовал четкое (> 65%) снижение c-ABL при 1 мкМ. Дазатиниб-CRBN (DAS-CRBN) PROTAC вызывал как деградацию c-ABL (> 85% при 1 мкМ), так и BCR-ABL (> 60% при 1 мкМ). Деградиатор BCR-ABL, производный дазатиниба, вызывал ингибирование роста клеток против K562, управляемого BCR-ABL, с полумаксимальной ответной концентрацией (EC 50 ) 4,4 нМ. Эти деструкторы пролили свет на разработку PROTAC для лечения лекарственно-устойчивого заболевания, связанного с BCR-ABL.

Рис. 10

Типичные PROTAC, нацеленные на лекарственно-устойчивый BCR-ABL.

В 2017 году Найто и его коллеги сообщили о втором BCR-ABL PROTAC, полученном из дазатиниба 147 (рис. 10). Впоследствии этой группой был разработан новый мощный разрушитель BCR-ABL, названный DAS-IAP. DAS-IAP обнаружил сравнимую активность в ингибировании роста клеток CML и устойчивый антипролиферативный эффект, даже когда лекарство было удалено после краткосрочного лечения. Эти результаты показали, что деструкторы BCR-ABL демонстрируют более длительное ингибирование роста клеток CML, чем ингибиторы киназы ABL.

BET

Рак простаты, будучи вторым по величине онкологическим заболеванием среди мужчин во всем мире, поразил ряд людей. Обычно депривация андрогенов для достижения окончательной ремиссии является наиболее часто используемой стратегией лечения рака простаты. Тем не менее сопротивление кастрации появилось. Для этих CRPC блокаторы передачи сигналов AR были основным лечением с плохим прогнозом. 148 Однако вторичная резистентность неизменно появлялась, хотя CRPC лечили лекарствами, нацеленными на передачу сигналов AR. 149 Недавно было доказано, что ингибирование бромодомена и экстратерминального (BET) семейства белков может нарушать нормальный рост в доклинических моделях CRPC. 150 Имеется много сообщений о разрушителях BET 151 152 153 154 155 156 , и мы сосредоточимся на достижениях BET PROTAC, которые помогли преодолеть лекарственную устойчивость.

В 2016 году ARV-771 был проиллюстрирован Crews и соавторами с DC 50 <5 нМ в клетках 22Rv1 (рис. 11) в качестве разрушителя pan-BET.ARV-771 вызывал деградацию c-MYC с IC 50 <1 нМ и апоптоз клеток через расщепление PARP. 152 Для оценки эффективности ARV-771 in vivo на модели опухоли VCaP была выбрана модель опухоли VCaP, которая представляет клиническую картину сверхэкспрессии AR после терапии с депривацией андрогенов. После лечения АРВ-771 ингибирование роста опухоли индуцировалось на 60% без значительной потери массы тела. напротив, в группе, получавшей энзалутамид, не наблюдалось ингибирования роста опухоли.В то время как ARV-771 показал более высокую эффективность и преимущества в аспекте лечения CRPC по сравнению с энзалутамидом.

Рис. 11

Типичные PROTAC, нацеленные на лекарственно-устойчивый BET.

В 2015 году группа Брэднера сообщила о другом широко известном деградаторе BET 151 (рис. 11). Конъюгация JQ1 и помалидомида дала dBET1. Обработка клеток MV4-11 с помощью dBET1 привела к значительной потере BRD4 (> 85%), которая была достигнута при таких низких концентрациях, как 100 нМ после 18 часов обработки, а dBET1 продемонстрировал сильное и превосходное ингибирование пролиферации клеток MV4-11. через 24 часа по сравнению с JQ1.Более того, dBET1 был способен разрушать BRD4 и ингибировать рост опухоли in vivo на мышиной модели ксенотрансплантата задних конечностей с человеческими клетками лейкемии MV4-11, не влияя на вес животного и нормальный общий анализ крови после обработки деградатором. Наблюдалось более значительное подавление MYC по сравнению с группой носителя в иссеченных опухолях.

Для пациентов с тройным отрицательным раком молочной железы (TNBC) химиотерапия обычно дает высокий ответ. 153 Однако остаточные опухоли вызывают высокие показатели метастатического поражения из-за амплификации локусов MCL1, что было одним из наиболее распространенных генетических изменений в химиорезистентных опухолях.Таким образом, ученые доказали, что MCL1 представляет собой слияние факторов внутренней и приобретенной устойчивости у пациентов с TNBC. Резистентность ограничивает эффективность множества противоопухолевых средств. В 2018 году группа Ванга сообщила, что BETd-246, полученный из их ингибитора BET (BETi-211), разрушает белки BET для лечения TNBC (рис. 11). BETd-246 индуцировал деградацию BRD2, BRD3 и BRD4 дозозависимым образом. После обработки в течение 1 или 3 часов 30–100 нмоль / л BETd-246 или 10–30 нмоль / л BETd-246 соответственно, белки BRD2-4 были почти полностью истощены.BETd-246 ингибировал рост клеток TNBC с IC 50 <10 нмоль / т и приводил к быстрому и зависящему от времени подавлению белка MCL1 в тестируемых клеточных линиях TNBC. При обработке модели TNBC, полученной из ксенотрансплантата (PDX) пациента, с помощью BETd-246, дозы 5 mpk, внутривенно, три раза в неделю в течение 3 недель, наблюдалась эффективная противоопухолевая активность, аналогичная ингибирующим эффектам BETi-211. при 50 мг / кг, ежедневно, после перорального приема, 5 дней в неделю в течение 3 недель. Это открытие предлагает многообещающий подход к нацеливанию MCL1 на TNBC для преодоления клинической резистентности.

BRD9 и BRD7

BRD9 представляет собой бромодомен-содержащую субъединицу BAF (BRG- / BRM-ассоциированный фактор) 157 , а его близкий гомолог BRD7 является субъединицей PBAF (полибромассоциированный BAF). 158 BAF и PBAF — два варианта комплекса SWI / SNF, которые регулируют экспрессию генов, репликацию ДНК и репарацию ДНК. 159 Избыточная экспрессия BRD9 обнаруживается при нескольких формах рака, включая рак шейки матки. 160

В 2017 году группа Брэднера разработала и охарактеризовала первый деградатор BRD9, который показал очевидную деградацию BRD9 при 50 нМ 161 (рис.12). Антипролиферативный эффект dBRD9 был немного лучше, чем у ингибитора в клеточной линии AML MOLM-13 человека.

Рис. 12

Типичные PROTAC-ы, нацеленные на BRD9 / 7.

В 2019 году Чиулли с соавторами описали деструктор путем конъюгирования лигандов VHL и BRD9. заявленный деградатор может ухудшить BRD9 и BRD 7 со значениями DC 50 , равными 1,8 и 4,5 нМ соответственно 162 (рис. 12). Две клеточные линии, EOL-1 (острый миелоидный эозинофильный лейкоз) и A-204 (злокачественная рабдоидная опухоль), которые чувствительны к ингибированию / деградации BRD9 и зависят от активного комплекса BAF, были отобраны для изучения влияния BRD7, индуцированного деградерами. / 9 деградация на жизнеспособность раковых клеток Метаболически активные клетки называются теми клетками, в которых присутствует клеточный АТФ.Деструктор dBRD9 на основе CRBN продемонстрировал цитотоксические эффекты в обеих клеточных линиях со значениями EC 50 , равными 5 нМ (EOL-1) и 90 нМ (A-402), и оказался эквивалентным VZ185 со значениями EC 50 , равными 3 и 40 нМ соответственно.

BTK

Рецептор B-клеток (BCR) является важным регулятором передачи сигналов B-клеток при адгезии, выживании и росте. Для пути BCR незаменим BTK, поскольку он работает как проксимальная сигнальная молекула мембраны для активации и пролиферации В-клеток. 163 В настоящее время ибрутиниб одобрен для лечения MCL и активированного B-клеточного (ABC) -DLBCL путем ковалентного связывания. 164 Однако у пациентов с MCL развилась лекарственная устойчивость после лечения ибрутинибом из-за миссенс-мутации BTK в C481S. 165 Ибрутиниб также утратил ингибирующую эффективность роста опухолевых клеток DLBCL в результате мутанта BTK C481S.

В 2018 и 2019 годах Рао и его коллеги впервые сообщили о двух группах новых деструкторов BTK для подавления лекарственно-устойчивого BTK 166 167 (рис.13). Сначала мощный разрушитель P13I показал высокую эффективность деградации как дикого типа, так и устойчивого к ибрутинибу C481S BTK, с DC 50 при 9,2 и 30 нМ соответственно. Кроме того, P13I давал немного лучшее ингибирование роста со значениями GI 50 (концентрация 50% ингибирования роста) 1,5 нМ по сравнению с ибрутинибом в клетках BTK дикого типа. Более того, P13I эффективно подавлял самофосфорилирование мутанта C481S BTK при низкой концентрации, тогда как ибрутиниб не работал.Следовательно, P13I может значительно ингибировать рост клеток HBL-1, экспрессирующих мутант BTK C481S со значениями GI 50 приблизительно 28 нМ. При этом ибрутиниб терял ингибирующую эффективность в отношении мутантных клеток ВТК. После этого были созданы еще более оптимизированные BTK PROTAC с большим улучшением растворимости в воде. Среди второго поколения L18I был типичным деструктором, который обладал способностью деградировать различные мутанты C481 BTK со значениями DC 50 ниже 50 нМ. Более того, L18I может обеспечить быструю регрессию опухоли в моделях ксенотрансплантатов мышей, инокулированных клетками C481S BTK HBL-1 с дозой 30 или 100 mpk, и опухоль уменьшилась на 36% и 63% соответственно.Напротив, мыши, которым вводили ибрутиниб, имели серьезную опухолевую нагрузку. Приведенные выше результаты предполагают, что нацеленные на BTK деструкторы PROTAC обладают большим потенциалом ингибирования функций BTK, особенно для лимфом, устойчивых к ибрутинибу.

Рис. 13

Типичные PROTAC, нацеленные на лекарственно-устойчивый BTK.

Почти в то же время группа Crews сообщила о другом BTK PROTAC, MT-802, производном от ибрутиниба 168 (рис. 13). Для BTK дикого типа MT-802 эффективно вызывал деградацию BTK с DC 50 из 14.6 нМ, с максимальной деградацией при 250 нМ. MT-802 сохранил ту же эффективность против C481S BTK с DC 50 , равным 14,9 нМ. Кроме того, MT-802 был способен снижать фосфорилирование BTK в клетках, выделенных от пациентов с CLL с мутацией C481S, в то время как ибрутиниб не мог.

В 2018 году Натанаэль С. Грей разработал мультикиназный деструктор, который сочетал в себе очень неразборчивый ингибитор киназы с цереблон-связывающим лигандом, и этот мультикиназный деструктор мог разлагать несколько киназ, включая BTK 169 (рис.13). В 2019 году был выпущен более конкретный деградатор BTK под названием DD-04-015, который эффективно и выборочно разрушал BTK. Обработка DD-04-015 в течение 4 ч привела к эффективному разложению при 100 нМ. Кроме того, DD-04-015 проявлял аналогичный эффект пролиферации клеток по сравнению с RN486 в клетках TMD8 после 3 дней лечения. При дальнейшей оптимизации был разработан свинец DD-03-171 со способностью разлагать C481S-BTK. DD-03-171 продемонстрировал более сильное ингибирование антипролиферации клеток лимфомы мантийных клеток (MCL) in vitro с IC 50 , равным 5.1 нМ и эффективные противораковые эффекты на PDX in viv o .

Pfizer также раскрыл PROTAC, нацеленные на BTK в 2018 году, полученные из ранее сообщенного ковалентного фенилпиразола для связывания BTK и помалидомида для связывания CRBN 170 (рис. 13). Самый мощный разрушитель BTK приводил к эффективной дегадации BTK с DC 50 5,9 ± 0,5 нМ после 24 часов обработки в клетках Ramos. При оценке in vivo эффективная деградация BTK также наблюдалась в легких и селезенке у крыс, обработанных деградатором BTK.Применение BTK PROTAC к мутантам BTK в отчете не раскрывается.

CDK4 / 6

В 2019 году Берджесс и его коллеги сообщили о своей работе по разработке двойных деградеров CDK4 / 6 171 (рис. 14). Разработанные PROTAC могут разрушать CDK4 / 6 со значениями DC 50 в диапазоне от 20 до 50 нМ и подавлять рост клеток на допустимом уровне. Однако их соединения не показали эффективности в клетках, сверхэкспрессирующих CDK4 / 6.

Рис. 14

Типичные PROTAC-файлы, нацеленные на CDK4 / 6.

В 2019 году Грей и его коллеги варьировали линкеры бифункциональных молекул, чтобы найти двойные деструкторы CDK4 / 6 (BSJ-03-204) и селективные деструкторы CDK4 и CDK6 (BSJ-04-132 или BSJ-03-123, соответственно). 172,173 (рис.14). Эти деструкторы могут разлагать целевые белки при 100 нМ и проявлять лучшие антипролиферативные эффекты по сравнению с ингибиторами CDK4 / 6. Более того, в клетках Granta-519 наблюдалась сверхэкспрессия циклина D1. деструктор BSJ-02-162 или BSJ-03-204 может приводить к заметной деградации CDK4 / 6 и вызывать остановку клеточного цикла G1 одновременно.

О наиболее мощном деструкторе сообщили Рао и его коллеги, который был получен из помалидомида и палбоциклиба, и продемонстрировал специфическую и замечательную эффективность в отношении деградации CDK6 с DC 50 , равным 2,1 нМ 174 (рис. 14). Более того, PROTACs все еще удерживали сильную деградацию и пролиферацию за счет ингибирования гематопоэтических раковых клеток с амплифицированными копиями / мутированными формами CDK6.

Хотя сообщалось о нескольких PROTAC, нацеленных на CDK4 / 6, но как разработать PROTAC, применяемые для клеток, устойчивых к ингибиторам CDK, до сих пор остается сложной задачей. 175,176

CDK8

Циклин-зависимая киназа 8 (CDK8) является членом семейства циклин-зависимых киназ, которое играет важную роль в обеспечении фазового перехода клеточного цикла, инициации синтеза ДНК и регуляции транскрипции клеток во время пролиферации клеток и дифференцировка, особенно в онкогенных сигнальных путях, включая сигнальный путь TGF-β, путь Wnt-β-катенин, путь p53, а также сывороточную и гипоксическую ответную сеть. 177 178 179 Исследование показало, что сверхэкспрессия гена CDK8 нарушает пролиферацию, дифференциацию и апоптоз клеток, что может ускорить рост и деление раковых клеток, таких как рак шейки матки, колоректальный рак, рак желудка, злокачественная меланома и так далее. 180 Хотя ингибиторы CDK8 используются и постепенно привлекают все большее внимание, их эффективность в лечении различных видов рака еще не подтверждена. 181 Следовательно, разработка PROTAC для деградации белка CDK8 стала новой стратегией преодоления этих недостатков.

Натанаэль С. Грей и его коллеги впервые синтезировали серию соединений на основе кортистатина А. Результаты показали, что разработанные производные имели немного сниженную биологическую активность по отношению к CDK8 in vitro и клеточным анализам.Затем, на основе этого каркаса, они разработали JH-XI-10-02 ( 24 ), 182 , мощный разрушитель CDK8 (рис. 15). Они наблюдали значительную деградацию CDK8 после обработки 24 в концентрации 1 мкМ в течение 24 часов в клетках Jurkat. Затем они подтвердили механизм, с помощью которого деградация опосредована через CRBN, используя отрицательный контроль в клетках Molt14, нокаутированных по CRBN. Разработка деструкторов CDK8 не только предоставила инструмент для регулирования уровней белка CDK8 in vivo, но также предложила эффективную стратегию лечения рака с помощью деструкторов CDK8.

Рис. 15

Химическая структура заявленного CDK8 PROTAC.

CDK 9

Циклинзависимая киназа 9 (CDK9) является членом семейства циклин-зависимых протеинкиназ (CDK), которые могут образовывать субъединицу комплекса положительного фактора элонгации транскрипции b (P-TEFb) с циклином T и играет решающую роль в удлинении транскрипции ряда онкогенов. 183,184,185 Он повсеместно экспрессируется во всех тканях и при различных злокачественных новообразованиях. 186 Доклинические исследования показали, что избирательное воздействие на CDK9 может иметь терапевтический потенциал при лечении рака и других заболеваний человека. 187,188 Однако CDK9 демонстрирует высокий уровень консервативной последовательности по сравнению с другими членами семейства CDK, что затрудняет разработку селективных ингибиторов CDK9. 189 Из-за разной формы поверхности и разного распределения остатков лизина на поверхности CDK это дало бы уникальную возможность разработать PROTAC, избирательно нацеленный на CDK9, который требует должным образом экспонированной поверхности остатков лизина для убиквитинирования и деградации протеасом. 190

В 2017 году Сандип Рана и его коллеги разработали первый селективный деструктор CDK9 путем конъюгирования аналога аминопиразола и лиганда CRBN талидомид 191 (рис. 16). В клетках HCT116 вестерн-блоттинг показал, что разрушитель CDK9 может снижать приблизительно 56 и 65% белка CDK9 при 10 и 20 мкМ, соответственно, при сохранении других членов семейства CDK.

Рис. 16

Типичные PROTAC-файлы CDK9.

В 2018 году группа Натанаэля С. Грея разработала селективный деструктор CDK9, THAL-SNS-032, который состоял из ингибитора мультицелевой киназы CDK SNS-032 и производного талидомида 192 (рис.16). THAL-SNS-032 индуцировал быструю деградацию CDK9 с 99% D max при 250 нМ в клетках MOLT 4 после 6 часов обработки, но не влиял на уровни других мишеней SNS-032. Кроме того, THAL-SNS-032 показал более длительный фармакодинамический эффект, чем ингибиторы.

В отличие от PROTAC, нацеленных на CDK9 на основе аминопиразола и аминотиазола, из двух вышеупомянутых групп, 191,192 Zhiyu Li и его коллеги произвели деградер CDK9 27 путем конъюгации природного продукта вогонина с помалидомидом (Фиг. .16). PROTAC 27 селективно разрушал CDK9 и проявлял более сильную активность ингибирования пролиферации клеток (IC 50 = 17 ± 1,9 мкМ), чем вогонин (IC 50 = 30 ± 3,5 мкМ) в клетках MCF7. Кроме того, 27 был намного менее активен в отношении клеточных линий с низкими уровнями экспрессии CDK9, таких как L02 (IC 50 > 100 мкМ).

CK2

Казеинкиназа 2 (CK2) — это вездесущая и конститутивно активная серин / треониновая протеинкиназа с различными видами функций. 194 Избыточная экспрессия CK2 имеет отношение к возникновению рака. 195

В 2018 году Gou и соавторы сообщили, что PROTAC нацелены на CK2 путем конъюгирования ингибитора CK2 (CX-4945) и помалидомида 196 (рис.17). Среди описанных деструкторов соединение 28 показало деградацию СК2 в зависимости от дозы и времени. Когда CK2 расщеплялся, наблюдалось пониженное фосфорилирование Akt и повышенная регуляция p53. Удивительно, но деструктор 28 продемонстрировал цитотоксичность, аналогичную CX-4945 с ингибитором CK2, хотя механизм был совершенно другим.PROTAC, нацеленные на белки CK2, по-видимому, являются потенциальной стратегией лечения рака.

Рис. 17

Представитель PROTAC, нацеленный на CK2.

c-Met

c-Met представляет собой трансмембранный RTK и рецептор фактора роста гепатоцитов (HGF), который также известен как фактор рассеяния (SF). c-Met и HGF играют причинную роль в выживании, росте, ангиогенезе и метастазировании раковых клеток. После связывания с HGF / SF c-Met димеризуется, и трансфосфорилирование происходит в киназном домене (Y1234 и Y1235) и C-концевом стыковочном домене (Y1313, Y1349, Y1356 и Y1365). 197 Стыковочный домен распознает многие последующие клеточные эффекторы, включая Src, Gab1, Crk, Grb2, SHC и PI3K, которые играют важную роль в биологии рака. Ингибиторы киназы c-Met были разработаны в течение последних 20 лет, но их клинические испытания не принесли результатов. Это предполагает, что независимая от киназы функция может управлять онкогенезом и деградацией и может быть потенциальным преимуществом перед ингибированием.

Таким образом, группа Crews разработала PROTAC, нацеленный на c-Met, на основе беспорядочного ингибитора форетиниба 47,103,198 (рис.18). И VHL, и CRBN PROTAC могут вызывать разложение c-Met в зависимости от дозы и времени. Быстрый клиренс c-Met с помощью VHL PROTAC на основе форетиниба наблюдался в течение 6 часов, что обеспечивало преимущество перед RNAi. Для РНКи обычно требуются реагенты для трансфекции или давление экзогенного отбора, которое может влиять на другие биологические процессы. Поскольку RTK также разрушаются HSP90, они обнаружили, что VHL PROTAC на основе форетиниба и ингибитор HSP90 17-AAG оказывают аддитивное действие на деградацию c-Met.Они также подтвердили, что VHL PROTAC на основе форетиниба индуцировал интернализацию c-Met с поверхности клетки с помощью конфокальной иммунофлуоресцентной микроскопии. У c-Met с делецией экзона 14 отсутствует сайт рекрутирования соседнего мембранного домена (Y1003) для его эндогенной E3-лигазы, и, таким образом, естественного «выключателя» для HGF-индуцированной передачи сигналов больше нет. VHL PROTAC на основе форетиниба может вызывать деградацию c-Met с делецией экзона 14, несмотря на то, что не разлагается естественным механизмом, что является еще одним примером того, что деградация может иметь преимущество перед ингибированием.

Рис. 18

Типичные PROTAC-файлы c-Met.

DHODH

Дигидрооротатдегидрогеназа (DHODH) представляет собой флавинмононуклеотидный (FMN) -фермент в митохондриях, который катализирует окисление дигидрооротата до оротата с коферментом Q в качестве кофактора в биосинтезе пиримидина de novo. Он обеспечивает строительные блоки для дальнейшего синтеза РНК, ДНК, гликопротеинов и фосфолипидов. 199 Ингибирование активности ДГОДГ было предложено в качестве многообещающей терапевтической стратегии при вирусных инфекциях, раке, артрите и подавлении иммунитета.Например, бреквинар, сильный ингибитор ДГОДГ, привлекал большое внимание в предыдущих исследованиях, но потерпел неудачу в клинических исследованиях из-за его побочных эффектов и плохой растворимости.

Группа Neamati разработала зонды PROTAC на основе бреквинара, чтобы лучше понять терапевтическую значимость DHODH при раке 200 (рис. 19). Зонд 32 содержал решающую карбоновую кислоту и сохранял отличную эффективность в ферментативном анализе (IC 50 = 0,093 мкМ). Напротив, метиловый эфир 31 не ингибировал активность ДГОДГ (IC 50 > 200 мкМ).Однако 32 не ингибировал рост клеток DHODH-чувствительных клеток HCT-116. Напротив, 31, был более активен в клетках HCT-116, что может быть результатом превосходной клеточной проницаемости. Более того, 31 препятствовал образованию новой колонии лучше, чем бреквинар, что предполагает более глубокое биологическое свойство 31 . К сожалению, никакой деградации белка не наблюдалось ни для 31 , ни для 32 из-за возможной существенно различающейся системы убиквитинирования белка в митохондриях.

Рис. 19

Типичные PROTACs DHODH.

EGFR и HER2

Рецептор эпидермального фактора роста (EGFR) представляет собой гликопротеин с тирозинкиназной активностью, который является основным членом семейства онкогенов эритробластоза B (ErbB). 201 Семейство EGFR включает четыре подтипа: EGFR (ErbB1, HER1), ErbB2 (HER2), ErbB3 (HER3) и ErbB4 (HER4). 202 EGFR участвует в пролиферации опухолевых клеток, ангиогенезе, опухолевой инвазии, метастазировании и ингибировании апоптоза.Сверхэкспрессия EGFR играет важную роль в прогрессировании злокачественных опухолей, таких как глиобластома, NSCLC, рак головы и шеи, рак груди, колоректальный рак, рак яичников, рак простаты, рак поджелудочной железы и так далее. 201,203,204 Таргетная терапия EGFR привела к разработке многих превосходных ингибиторов EGFR с высокой селективностью и небольшим количеством побочных эффектов. 49,146,205 Тем не менее, лекарственная устойчивость и низкий уровень клинического ответа все еще вызваны новыми мутациями при длительном клиническом приеме лекарств. 62,63,206

.2 9055 9055 9055 9055 9055 9055 9055 9055 9055
Клеточная линия Мутация PROTAC Боевая часть DC 50 (нМ) D макс. Дикий тип 33 лапатиниб 39,2 97,6
HeLa (сверхэкспрессированный мутант) Exon 20 ins 33 68,8
HCC827 Exon 19 del 34 гефитиниб 11,7 98,9
98,9
h4255
h2975 L858R / T790M 35 афатиниб 215,8 79,1

Крейг М. Крюз и его коллеги, селективный мутантный ингибитор деибраза EKGF, мутантный ингибитор E. гефитиниб, ингибитор второго поколения афатиниб и лиганд VHL (рис.20 и 21). Они обнаружили, что все деструкторы способны вызывать деградацию EGFR. 198 Например, соединение 33 индуцировало деградацию EGFR с DC 50 = 39,2 нМ и D max = 97,6% в клеточной линии OVCAR8. Соединение 33 имело более высокую антипролиферативную эффективность с IC 50 = 102 нМ в клетках SKBr3. Более того, результаты показали, что соединение 33 также может разрушать мутантную форму EGFR с инсерцией экзона 20 в линии клеток HeLa.Селективный гефитиниб мутант-EGFR был использован для замены боеголовки для разработки соединения 34 , которое позволило деградацию EGFR с делецией экзона 19 (DC 50 = 11,7 нМ и D max = 98,9%) в Клеточная линия HCC827 и мутация активирующей точки L858R (DC 50 = 22,3 нМ и D max = 96,6%) в клеточной линии h4255. Когда ингибитор второго поколения афатиниб был использован для разработки соединения 35 , он мог разрушать устойчивый к гефитинибу двойной мутантный (L858R / T790M) EGFR с DC 50 = 215.8 нМ и D max = 79,1% в клеточной линии h2975.

Рис. 20

Эффективность EGFR PROTAC в различных клеточных линиях. 198

Рис.21

Типичные PROTAC для EGFR и HER2.

Учитывая, что лапатиниб также является эффективным связующим для других RTK, они оценили потенциальную способность соединения 33 к разложению по отношению к HER2. Они обнаружили, что соединение 33 способно индуцировать деградацию HER2 при 25 нМ, но оно не показало селективности между EGFR и HER2.Основываясь на результатах, они разработали новые соединения с различными линкерами и протестировали активность разложения и селективность по отношению к HER2. Наконец, эти соединения только избирательно разрушали EGFR и не влияли на HER2.

Кроме того, был выдан патент на конструкцию деструкторов EGFR. В патенте они обнаружили, что соединение 36 обладает хорошей активностью по разложению EGFR. Очевидно, что деградацию EGFR можно было наблюдать с соединением 36 при 100 нМ. Соединение 36 также обладало хорошей антипролиферативной активностью против мутанта L858R и мутанта L858R / T790M с IC 50 300 нМ в клетках Ba / F3.

eIF4E

Эукариотический фактор инициации трансляции 4E (eIF4E) представляет собой кэп-связывающий белок, который специфически распознает кэп m7GpppX на 5′-конце кодирующей мРНК, что влияет на инициацию эукариотической трансляции. 207,208,209

Связывание eIF4E с кэпом мРНК приводит к задействованию трансляционного аппарата, а затем инициирует синтез белка в стартовом кодоне транскрипта. eIF4E оказывает большое влияние на пролиферацию, дифференцировку и метастазирование клеток. 210 Исследования показали, что eIF4E сверхэкспрессируется во многих злокачественных клеточных линиях и первичных опухолях у животных и людей, включая, среди прочего, рак груди, рак легких и неходжкинские лимфомы. 211 Сообщалось, что ингибирование функции eIF4E может замедлять рост опухоли и вызывать апоптоз. 212 Таким образом, разработка новых деструкторов eIF4E является новой стратегией лечения многих видов рака. 213 214

Аманда Л. Гарнер и сотрудники впервые разработали новые PROTAC для деградации eIF4E (рис.22). Они создали небольшую библиотеку производных GxP (GMP или GDP), конъюгированных с леналидомидом и лигандом VHL. 215 Предыдущий отчет показал, что GxP (GMP или GDP) был хорошим ингибитором eIF4E, поэтому он был выбран в качестве каркаса Bn7GxP. Чтобы проверить способность соединений к разложению, они разработали in vitro конкурентный тест с кэпом. В этом анализе лизаты клеток HEK293 инкубировали с агарозной смолой m7GxP (GMP или GDP), чтобы обеспечить аффинную очистку eIF4E.

Фиг.22

Представитель PROTAC для eIF4E.

В тестах биохимической характеристики они обнаружили, что все конъюгаты GDP были активными, в то время как производные GMP не обладали способностью к разложению. В частности, соединение 37 способно значительно разлагать eIF4E при 50 мкМ, а eIF4E полностью разлагается, когда концентрация соединения увеличивается до 500 мкМ. Однако, когда клетки MDA-MB231 и K562 обрабатывали этими соединениями, не наблюдалось внутриклеточной деградации eIF4E, несмотря на концентрации соединения до 500 мкМ.Они предполагают, что основной причиной была низкая клеточная проницаемость, как это наблюдалось с другими аналогами кэпа.

ER

ER является регулятором экспрессии генов и многих биологических процессов в качестве ядерного рецептора, включая ERα и ERβ. Восемьдесят процентов всех вновь диагностированных случаев рака груди являются ERα-положительными, 194 , поскольку ERα считается основным регулятором, который преобразует передачу сигналов эстрогена в женских половых путях и молочных железах. 216 Текущий стандарт лечения — фулвестрант, который действует путем избирательного разложения рецептора эстрогена для метастатического рака молочной железы ER +.Хотя фулвестрант реализовал терапевтическое вмешательство за счет деградации ER, до 50% ER остается по сравнению с исходными уровнями после шести месяцев лечения фулвестрантом. Следовательно, лекарственная устойчивость возникла для различных видов рака молочной железы ER +, хотя одобренные методы лечения оказались успешными в этой популяции пациентов.

В 2018 году АРВ-471 был задокументирован Арвинасом как средство разложения ER для лечения метастатического рака молочной железы ER + в качестве пероральной терапии (рис. 22). ARV-471 вызывал очевидную деградацию ER на уровне 11 нМ в различных линиях клеток рака молочной железы.ARV-471 продемонстрировал 99% ингибирующий эффект на рост опухоли при 10 mpk и 106% эффект при 30 mpk (ниже) в PDX из модели пациента с мутантным ESR1 после перорального введения. Между тем, фулвестрант продемонстрировал менее сильное ингибирование роста опухоли. Эти данные показывают, что ARV-471 значительно ингибирует рост опухоли по сравнению с фулвестрантом. Как выпущено Arvinas, ARV-471 обладал многообещающей активностью и эффективностью как в качестве отдельного агента, так и в качестве комбинированной терапии с ингибиторами CDK4 / 6 за счет разрушения ER.Исследование фазы 1 в третьем квартале было начато в 2019 году компанией Arvinas для женщин с местнораспространенным или метастатическим ER + положительным / HER2-отрицательным раком молочной железы.

В 2018 году Ван и его коллеги раскрыли мощный разрушитель ER под названием ERD-308 217 (рис. 23). ERD-308 индуцировал эффективную деградацию ER в линиях клеток рака молочной железы MCF7 и T47D ER + с DC 50 0,17 и 0,43 нМ соответственно. По сравнению с фулвестрантом деструктор вызывал более полную деградацию мишени и демонстрировал более сильное ингибирование роста клеток в клетках MCF-7.Эти данные демонстрируют новый вид деструкторов ER для лечения распространенного и метастатического рака груди ER +.

Рис. 23

Типичные PROTACs, нацеленные на лекарственно-устойчивый ER.

ERK1 и ERK2

ERK1 и ERK2 являются близкородственными серин / треониновыми киназами и участвуют в каскаде передачи сигнала Ras-Raf-MEK-ERK, который участвует во многих биологических процессах, включая клеточную адгезию, развитие клеточного цикла, миграцию клеток, выживаемость клеток, дифференциация, метаболизм, пролиферация и транскрипция путем катализирования фосфорилирования сотен цитоплазматических и ядерных субстратов. 218 219 Этот сигнальный путь участвует во многих формах рака. Деградация уровней ERK1 и ERK2 может быть выгодным подходом по сравнению с ингибированием, поскольку значительная часть передачи сигналов с помощью ERK1 и ERK2 возникает из-за межбелковых взаимодействий в дополнение к каталитической активности.

Группа Хайтмана предположила, что PROTAC обладают высокой молекулярной массой, которая ограничивает их клеточную проницаемость, и другими лекарственными свойствами. 62 (Рис. 24).Они разработали два меньших предшественника, которые могли внутриклеточно формировать молекулу PROTAC, нацеленную на ERK1 и ERK2, с помощью биоортогональной комбинации щелчков на основе ковалентного ингибитора и талидомида, меченного тетразином. Деградация ERK1 и ERK2 была завершена через 16 часов в присутствии зонда 40 (10 мкМ) и Tz-талидомида 39 (10 мкМ). Когда ERK-CLIPTAC был приготовлен перед добавлением к клеткам, не было деградации ERK1 или ERK2. Эти результаты указали на отсутствие клеточной проницаемости молекулы PROTAC и подтвердили, что разложение произошло в результате щелчка образования PROTAC из двух меньших молекул-предшественников после их проникновения в клетки.

Рис. 24

Типичные протоколы PROTAC для ERK1 и ERK2.

ERRα

Как член суперсемейства орфанных ядерных рецепторов, рецепторы, связанные с эстрогенами (ERR), играют важную роль в поддержании гомеостаза в организме, включая раннее развитие, регулируемое ERRβ, и метаболический баланс, связанный с ERRα и ERRγ. 220,221,222 ERRα имеет относительно высокую гомологию с рецептором эстрогена α (ERα) и отвечает за регулирование метаболизма и энергетического гомеостаза за счет взаимодействия с множеством транскрипционных кофакторов, таких как коактиватор 1 белков рецептора γ, активируемого пролифератором пероксисом (т.е., PGC-1α и PGC-1β), корепрессор белка 140, взаимодействующего с рецептором (RIP-140) и т. д. 223 224 225

В 2015 году Крюс и его коллеги сообщили о первом PROTAC (PROTAC_ERRα), вызывающем деградацию ERRα. 205 (рис.25). Разработанный деструктор показал дозозависимое снижение уровней ERRα в клетках MCF-7. DC 50 составлял около ~ 100 нМ, а D max составлял 86%. Кроме того, они оценили эффективность ERRα PROTAC in vivo.После обработки разрушителями наблюдали значительное снижение уровней ERRα в сердцах и почках и опухолях MDA-MB-231 примерно на 44%, 44% и 39% соответственно по сравнению с введением равного объема ингибиторов ERRα. PROTAC_ERRα PROTAC сохранял свою активность деградации in vivo, распределяясь в тканях и снижая уровни ERRα при взаимодействии с мишенью.

Рис. 25

Репрезентативные PROTAC, нацеленные на ERRα.

В 2019 году группа Ding разработала серию производных (E) -3- (4 — ((2,4-бис (трифторметил) бензил) окси) -3-метоксифенил) -2-цианоакриламида для выявления новых деструкторы эстроген-связанных рецепторов α (ERRα) 226 (рис.25). Репрезентативный деструктор, 43 , был способен специфически расщеплять белок ERRα на> 80% от 30 нМ, который до сих пор считался одним из наиболее селективных и мощных деградеров ERRα.

FAK

Киназа фокальной адгезии (FAK или PTK2) широко экспрессируется у разных видов и имеет более 90% гомологии в аминокислотной последовательности. 227 Он проявляет киназозависимую функцию фермента и независимую от киназы функцию каркаса, оба из которых имеют решающее значение в развитии рака (например,д., инвазия, метастазирование и ангиогенез), ранний эмбрион, репродукция и т. д. 228,229,230,231 За исключением киназного домена, 232 FAK содержит три других функциональных домена: полоса 4.1, эзрин, радиксин, N-концевой домен моэзина (FERM), богатые пролином области (PRI-III) и нацеливание фокальной адгезии ( FAT) С-концевой домен. 233,234 Домен FERM играет важную роль в клеточной регуляции. 235 236 237 Домены PR и FAT в основном участвуют в различных межбелковых взаимодействиях, 238 все из которых обеспечивают передачу сигналов, не зависящих от киназы FAK, и участвуют в образовании больших сигнальных комплексов. 239 240 Однако текущий набор инструментов в области медицинской химии ограничивает разработку химических соединений для ингибирования FAK и игнорирует функции каркаса FAK. Хотя в доклинических исследованиях была доказана эффективность некоторых ингибиторов FAK, клинических успехов пока не наблюдается. 239,241,242 Кроме того, устойчивость к лекарствам может вызывать традиционные ингибиторы киназ, поскольку они могут действовать только на домен киназы. Следовательно, новые стратегии устранения как ферментативных функций FAK, так и функций каркаса очень важны для заболеваний, связанных с FAK.

В 2018 году группа Craig M. Crews сообщила о первом наномолярном FAK-нацеливании PROTAC, 44 , на основе дефактиниба и убиквитинлигазы VHL E3 100 (рис. 26). Соединение 44 показало лучшую селективность белка и сильную деградацию белка. Его DC 50 составлял 3 нМ, а D max составлял 99% в бессывороточных обработанных клетках PC3 через 24 часа. Кроме того, 44 значительно нарушает миграцию клеток и приводит к снижению заживления ран после обработки 50 нМ и 250 нМ после 24 часов лечения тройными отрицательными клетками рака молочной железы человека (MDA-MB-231).В тесте на инвазию клеток Transwell 44 снижал инвазии клеток MDA-MB-231 на целых 65% при концентрации 100 нМ в течение 24 часов. Кроме того, 44 также превосходит дефактиниб в отношении активации FAK и последующей передачи сигналов. Однако это не повлияло на пролиферацию клеток.

Рис. 26

Представитель PROTAC ФАК.

В 2019 году группа Питера Эттмайера разработала два высокоселективных и функциональных PROTAC, нацеленных на FAK (BI-3663 и BI-0319), используя лиганды CRBN и VHL 243 (рис.26). BI-3663 (на основе CRBN) расщепил FAK с помощью 30 нМ DC 50 в панели из 11 клеточных линий гепатоцеллюлярной карциномы человека. Несмотря на эффективную деградацию FAK, эти соединения по-прежнему не влияли на пролиферацию клеток ни в одной из протестированных клеточных линий.

Недавно группа Yu Rao разработала FAK-нацеленные PROTAC с ингибиторами FAK (PF562271 или VS6063) и лигандом CRBN 244 (рис. 26). FC-11 (FAK PROTAC на основе PF562271) показал пикомолярную деградацию FAK в тестируемых клеточных линиях (DC 50 в тестируемых клеточных линиях составлял 40 пМ в Ramos, 80 пМ в PA1, 310 пМ в TM3, 330 пМ в MDA. -MB-436 и 370 пМ в клеточных линиях LNCaP).Однако, как и другие сообщенные FAK PROTAC, 100 243 FC-11 не влияли на пролиферацию клеток в тестируемых клеточных линиях в большей степени, чем PF562271. Следовательно, требуется больше работы для изучения биологии, связанной с FAK.

FLT-3

FMS-подобная тирозинкиназа 3 (FLT3) принадлежит к семейству RTK типа III, играет важную роль в пролиферации, дифференцировке и апоптозе клеток. 245 246 Около 30% впервые диагностированных пациентов с острым миелоидным лейкозом (ОМЛ) обнаруживают мутации FLT3; в основном к ним относятся мутации внутренней тандемной дупликации (ITD) в 20-25% случаев AML и точечные мутации (e.g., D835) в тирозинкиназном домене (TKD) в ~ 5–10% случаев. 247 248 249 Мутации как FLT3-ITD, так и TKD приводят к постоянной активации FTL3 и потере аутоингибиторной функции на FLT3, что в конечном итоге способствует активации нисходящих сигнальных путей STAT, PI3K / Akt и MAPK / ERK. 250,251,252 В последние годы было вложено много усилий в разработку низкомолекулярных ингибиторов FLT3. Хизартиниб (AC220), гильтеритиниб, MLN-518, сунитиниб и понатиниб изучаются в ходе клинических испытаний. 253,254,255,256,257 Хотя эти ингибиторы FLT3 демонстрируют сильную активность против AML в клинических испытаниях, приобретенная лекарственная устойчивость и рецидивы все еще остаются проблемами для терапии, нацеленной на FLT3.

В 2018 году Натанаэль С. Грей и его коллеги синтезировали два FLT3-специфичных PROTAC, TL13-117 и TL13-149, на основе исследования мультикиназного разрушителя TL12-186. Эти специфические нацеленные на FLT3 PROTAC были синтезированы путем конъюгирования клинического кандидата хизартиниба и лиганда CRBN помалидомида с линкером ПЭГ (рис.27). 169 В ячейках MOLM-14 TL13-117 и TL13-149 вызвали наиболее эффективное разрушение FLT3 в диапазоне от 10 до 100 нМ соответственно. Однако у квизартиниба IC 50 примерно в пять раз ниже, чем у TL13-117 и TL13-149 в обеих клетках MOLM-14 и MV4-11, что указывает на то, что индуцированная TL13-117 и TL13-149 деградация FLT3 немного улучшает их антипролиферативные эффекты.

Рис. 27

Типичные PROTAC-файлы FLT3.

В том же году Craig M.Группа Crews разработала FLT3 PROTAC, комбинируя хизартиниб и лиганд VHL E3 с оптимизированным линкером (фиг. 27). 258 Этот PROTAC показал низкие наномолярные концентрации FLT3-ITD в клетках MV4-11 и MOLM-14, а активность ингибирования роста клеток была в> 3,5 раза более сильной, чем у хизартиниба с субнаномолярным IC 50 (0,6 ± 0,08 nM) в отличие от ранее описанных FLT3 PROTAC, которые не дали преимущества. 169 Кроме того, FLT3 PROTAC был способен индуцировать деградацию FLT3 ITD в опухолях ксенотрансплантата MV4-11 при дозировке 30 mpk (уровни лекарственного средства в плазме поддерживались на уровне> 5 нМ во время лечения).

HDAC6

Гистоновые деацетилазы (HDAC) представляют собой класс протеаз, основной функцией которых является изменение структуры хромосом и регулирование экспрессии генов. 259 HDAC6 принадлежит к семейству HDAC типа II, которое обладает уникальными структурными и биологическими свойствами. 260 261 262 HDAC6 имеет два функциональных домена деацетилирования и один мотив цинкового пальца, которые необходимы HDAC6 для проявления своей биологической активности. Все большее количество исследований показало, что HDAC6 тесно связан с возникновением и развитием опухолей. 259,263,264 Ингибиторы HDAC6 могут ингибировать пролиферацию раковых клеток, способствовать апоптозу и иметь хорошие эффекты при различных злокачественных опухолях, таких как множественная миелома (MM), неходжкинская лимфома (NHL) и другие злокачественные опухоли. 262 265 Однако большинство ингибиторов HDAC6 плохо селективны и действуют на различные изоформы HDAC, особенно на HDAC1 и HDAC3. Хотя они обладают очевидным антидифференциальным и антипролиферативным действием, также очевидны побочные эффекты, включая миелосупрессию, потерю массы тела, утомляемость и аритмию и т. Д., что ограничивает их серьезное использование. 264 266 267

В 2018 году Тан и его коллеги спроектировали и разработали первый деструктор для цинк-зависимых HDAC путем конъюгирования неселективных ингибиторов HDAC с убиквитин-лигазой E3 268 (рис. 28). В этой работе они обнаружили, что разложение типичного соединения 51 происходило при 41 нМ и достигало максимального эффекта в диапазоне от 123 до 370 нМ в клетках MCF-7. DC 50 и D max были 34 нМ и 70.5% соответственно. Эффект крючка не наблюдался при более высоких концентрациях. Они также обнаружили, что максимальный эффект деградации HDAC6 наблюдался на уровне 80 нМ, когда они использовали соединение 51 для обработки линии клеток MM.1S в течение 6 часов.

Рис. 28

Типичные PROTAC-файлы HDAC6.

В 2019 году они сообщили о новом поколении многофункциональных деструкторов HDAC6 путем связывания селективного ингибитора HDAC6 nexturastat A с лигандом CRBN, который может иметь синергетический эффект для антипролиферации MM 269 (рис.28). В этой работе они обнаружили, что соединение 52 снижало уровень HDAC6 при концентрации всего 3 нМ и достигало максимального эффекта примерно при 30 нМ. Он показал DC 50 при приблизительно 1,6 нМ в клеточной линии MM.1S, что было в ~ 5-6 раз выше, чем у соединения 51 . В то же время они обнаружили, что соединение 52 имеет хорошую селективность в отношении HDAC6 и демонстрирует меньшую деградацию HDAC1, HDAC3 и HDAC4.

В 2019 году Рао и его коллеги сообщили о разработке мощных инструментов PROTAC для избирательной деградации белка HDAC6 (рис.28). Они также выбрали nexturastat A (Nex A) в качестве связующего HDAC6, но они модифицировали молекулу PROTAC на алкильную цепь вместо бензольного кольца в соединении 52. 270 В этом исследовании типичное соединение 53 было наиболее предпочтительным. мощный деструктор, который может значительно снизить уровень белка HDAC6 при концентрации 100 нМ в клетках HeLa. Они также оценили потенциал деградации в различных клеточных линиях и обнаружили, что соединение 53 последовательно индуцировало значительную деградацию HDAC6 во всех клеточных линиях, но показало лучшую чувствительность в клеточной линии MM MM.1С. Более того, они обнаружили, что соединение 53 имело хорошую селективность в отношении HDAC6 и не имело эффектов разложения на HDAC1, HDAC2 или HDAC4 даже при 10 мкМ. Соединение 53 имело DC 50 3,8 нМ против HDAC6, а GI 50 составляло 1,21 мкМ в клетках MM.1S. Процесс разложения также был хорошо проиллюстрирован визуализацией на основе флуоресценции.

MCL1

Миелоидноклеточный лейкоз 1 (MCL1) — это белок, способствующий выживанию, сверхэкспрессируемый при различных формах рака, таких как лимфома, лейкемия, рак груди и ММ. 271 MCL1 может сочетаться с проапоптотическими факторами Bim, Bak и Bax посредством PPI и подавлять их проапоптотические функции. 272 Таким образом, MCL1 считается критическим фактором выживания при раке человека. Учитывая, что ингибирование традиционными небольшими молекулами зависит от занятия кармана при определенной концентрации и в течение достаточного времени, PPI сложно нацелить из-за их неглубоких участков связывания. Поскольку PROTAC могут вызывать деградацию белка без необходимости в высокой аффинности связывания, PROTAC обладают большим потенциалом для преодоления этой проблемы.

В 2019 году Дерксен и его сотрудники разработали dMCL1-2 и подтвердили образование тройного комплекса 273 (рис. 29). Они доказали, что по сравнению с контролями ДМСО, dMCL1-2 может вызывать заметное снижение уровней MCL1 при 100 нМ в клетках OPM2, инициируя убиквитинирование MCL1.

Рис. 29

Типичные PROTAC, нацеленные на MCL1.

Как упоминалось выше, MCL1 взаимодействовал с BCL2. Таким образом, Чжан и его коллеги также поняли, что MCL1 ухудшается с помощью PROTAC C1 со значением DC 50 , равным 0.7 мкМ и одновременно достигла деградации BCL2 128 (фиг. 29).

MDM2

p53, супрессор опухолей, играет ключевую роль в регуляции многих клеточных процессов и предотвращении развития рака. 274 Однако мутации или делеции р53 встречаются примерно в 50% случаев рака человека, что приводит к инактивации функции супрессора опухоли р53. 275 Мышиная двойная минута 2 (MDM2) является отрицательным эндогенным клеточным регулятором р53. Как лигаза E3, она может связываться с p53 и убиквитинировать его, что в конечном итоге приводит к эффективной деградации p53. 276 Действительно, MDM2 сверхэкспрессируется при некоторых злокачественных опухолях человеческого p53 дикого типа. Чтобы восстановить опухолевую супрессорную функцию p53, нарушение взаимодействий MDM2-p53 стало многообещающей терапевтической стратегией для рака человека дикого типа p53. Однако ингибирование p53 приводит к сверхэкспрессии и накоплению MDM2, что может привести к проблемам с токсичностью. Кроме того, несмотря на значительный прогресс в разработке ингибиторов MDM2, лекарственная устойчивость стала серьезным ограничением. Таким образом, стратегия PROTAC стала очень желательным методом модуляции уровней MDM2.

В 2018 году группа Shaomeng Wang опубликовала первый мощный деструктор MDM2, MD-224, привязав спирооксиндольный ингибитор MDM2 MI-1061 к лиганду CRBN леналидомид 61 (рис.30). MD-224 эффективно индуцировал деградацию MDM2 в субнаномолярных концентрациях в клетках лейкемии человека. Он достиг значения IC 50 1,5 нМ для ингибирования роста клеток RS4; 11 и других линий лейкозных клеток. Кроме того, MD-224 также продемонстрировал полную и стойкую регрессию опухоли in vivo, превзойдя ингибитор MI-1061.

Рис. 30

Химическая структура указанного ингибитора MDM2 и PROTAC.

В 2019 году группа Weiping Tang сообщила о втором деструкторе MDM2, деструкторе 32, через соединение лиганда MDM2 (нутлин) и лиганда CRBN E3 (леналидомид) (рис. 30). 277 Degrader 57 индуцировал эффективную деградацию MDM2 со значением DC 50 , равным 23 нМ в RS4; 11 лейкозных клетках. Он также подавлял пролиферацию лейкозных клеток с помощью IC 50 3,2 нМ, что было почти в 1000 раз сильнее, чем ингибитор MDM2.

p38α и p38δ

Киназы p38 MAPK активируются различными клеточными стрессами и воспалительными цитокинами. 278 279 Они состоят из четырех членов (p38α, p38β, p38γ и p38δ), но сообщалось о редких изоформ-селективных химических пробах. 47 p38 MAPKs активируются посредством двойного фосфорилирования их мотива Thr-Gly-Tyr в их петле активации и последующих характерных глобальных конформационных изменений. Среди изоформ p38α является наиболее изученной изоформой, поэтому для нее было разработано множество ингибиторов, но они показали ограниченную эффективность и безопасность.Напротив, p38δ недостаточно изучен для лечения рака и диабета, и его функциональное ингибирование, по-видимому, трудноизлечимо.

Группа Crews разработала p38α- и p38δ-селективные PROTAC на основе форетиниба и различных лигандов E3-лигазы (VHL) 47 (рис. 31). SJFα разлагал p38α с DC 50 7,16 нМ и D max 97,4%, в то время как он был менее эффективным против p38β, p38γ и p38δ. SJFδ ухудшил p38δ с DC 50 46,17 нМ и D max из 99.4%, при этом он не разрушал p38α, p38β или p38γ. Затем они использовали анализ тройного комплекса in vitro, чтобы продемонстрировать селективность. Было обнаружено, что SJFα только способствует тройному комплексу VHL: PROTAC: p38α, тогда как в присутствии SJFδ такие тройные виды не обнаруживаются. Однако и SJFα, и SJFδ могут участвовать в тройных комплексах VHL: PROTAC: p38δ с одинаковой эффективностью. Таким образом, они использовали поверхностный плазмонный резонанс (SPR) для изучения кинетики сборки бинарных и тройных комплексов.Комплекс SJFδ показал увеличенный период полураспада ( t 1/2 = 38 с) по сравнению с комплексом SJFα ( t 1/2 = 8 с), что указывает на то, что p38δ: SJFδ: VHL является более благоприятный тройной комплекс по сравнению с p38α: SJFδ: VHL, который соответствует результатам деградации. Моделирование молекулярной динамики (МД) комплексов p38δ: SJFδ: VHL и p38δ: SJFα: VHL показало, как длина и ориентация линкера для рекрутирования VHL на разных PROTACs могут приводить к различным тройным интерфейсам для достижения селективной деградации.

Рис. 31

Типичные PROTAC для p38α и p38δ.

PARP1

Поли (АДФ-рибоза) полимеразы (PARP) относятся к ДНК-зависимым ядерным ферментам, которые играют роль переноса отрицательно заряженных фрагментов АДФ-рибозы от клеточного NAD + на различные белковые субстраты. 280 PARP1 — самый распространенный ядерный фермент семейства PARP. Он обладает функциями восстановления повреждений ДНК из-за репликации, воздействия экзогенных токсинов, ионизирующего излучения, ультрафиолетового излучения, факторов окружающей среды, химиотерапии, клеточных метаболитов, лучевой терапии и т. Д.и играет роль в остановке гибели клеток. 281 Из-за ключевой роли PARP1 в ответе на повреждение ДНК он рассматривается как мощная терапевтическая мишень для лечения рака. В настоящее время ряд ингибиторов PARP1, таких как олапариб, нирапариб и инипариб, находятся на разных стадиях клинических испытаний. 282 Однако цитотоксичность и лекарственная устойчивость — самые большие препятствия для их использования у пациентов. Таким образом, по-прежнему существует острая необходимость в других терапевтических методах с новыми механизмами действия.

В 2018 году группа Yu Rao опубликовала первый PROTAC, нацеленный на PARP1 (соединение 60 ), соединив ингибитор PARP1 нирапариб и лиганд MDM2 нутлин-3 283 (рис.32). После широкого скрининга деградации в нескольких линиях клеток тройного отрицательного рака молочной железы (TNBC) было обнаружено, что соединение 60 может избирательно индуцировать значительную деградацию PARP1 и апоптоз клеток в клетках MDA-MB-231. Кроме того, соединение 3 в пять раз сильнее ингибиторов PARP1 (нирапариб, олапариб и велипариб) с точки зрения антипролиферативной активности и не проявляет цитотоксичности в нормальных клетках.

Рис. 32

Типичный PROTAC PARP1.

PI3K

Фосфоинозитид-3-киназы (P13Ks) представляют собой внутриклеточные фосфатидилинозитолкиназы, входящие в сигнальный путь PI3K / Akt / mTOR, которые участвуют в регуляции пролиферации, апоптоза и дифференцировки клеток. 284 285 286 Недавние исследования показали, что избыточная экспрессия P13K-зависимого сигнального пути является основным признаком туморогенеза. По разным структурам и функциям PI3K обычно подразделяются на три класса, среди которых PI3K класса I считаются наиболее тесно связанными с развитием опухоли и наиболее часто изучаемым ферментом. 287 288 289 290 PI3K класса I можно разделить на IA (PI3Kα, PI3Kβ и PI3Kδ) и IB (PI3Kγ). Хотя многие ингибиторы PI3K уже разработаны, их лекарственные свойства серьезно ограничены из-за плохой селективности и побочных эффектов. 291 292 293 Более того, высокая частота мутаций гена PIK3CA, который кодирует PI3Kα в солидных опухолях, затрудняет разработку ингибиторов PI3Kα. 294 295 Таким образом, разработка новых агентов расщепления белка, нацеленных на белок PI3K, стала отличной стратегией.

Цзян и его коллеги разработали и синтезировали серию потенциальных PROTAC на основе CRBN и ZSTK474 для деградации PI3K 296 (рис. 33).Типичное соединение 61 индуцировало заметную деградацию PI3K при 10 мкМ, и фосфорилирование Akt, S6K и GSK-3β в сигнальном пути PI3K / Akt / mTOR также могло быть подавлено в клетках HepG2. Однако ферментативная активность репрезентативного соединения 61 против PI3Kα оказалась хуже, чем у контрольного ZSTK474.

Рис. 33

Представитель PROTAC PI3K.

Пирин

Пирин является железосвязывающим членом суперсемейства белков купина и, как сообщается, является регулятором фактора транскрипции. 297 Он взаимодействует с BCL3, протоонкопротеином, связываясь с путем NFκB через комплекс пирин / p65 / ДНК. Было высказано предположение, что человеческий пирин играет роль регулятора фактора транскрипции, чувствительного к окислительно-восстановительным процессам, под контролем фактора транскрипции NRF2 через изменения клеточного окислительного стресса. Нокдаун пирина через миРНК может подавлять миграцию и пролиферацию раковых клеток. 298,299

Джонс и его коллеги сообщили о высокоаффинном химическом зонде пирина CCT251236 с помощью фенотипического скрининга для разработки нацеленных на пирин PROTAC 300 (рис.34). Их PROTAC первого поколения обладали хорошим сродством к пирину и комплексу CRBN-DDB1, но не наблюдалось заметной деградации пирина или воздействия на раковые клетки. Они выдвинули гипотезу, что физико-химические свойства были основной причиной отказа PROTAC первого поколения. Они снизили количество tPSA и HBD при сохранении приемлемого Log D 7,4, чтобы сбалансировать проницаемость и растворимость в PROTAC второго поколения, что дало обнадеживающие результаты. Однако талидомидный лиганд, нацеленный на CRBN, в PROTAC быстро разлагается при 37 ° C и pH 7.4 фосфатный буфер. Таким образом, они были нацелены на дальнейшую оптимизацию проницаемости в третьем поколении, чтобы быстрее приводить к более высоким свободным внутриклеточным концентрациям. При лечении PROTAC CCT367766 третьего поколения, нацеленного на пирин, можно было наблюдать почти полную деградацию пирина при обработке всего лишь 50 нМ и всего 2 часа воздействия. Масс-спектрометрия всего протеома показала хорошую селективность PROTAC CCT367766.

Рис. 34

Представитель PROTAC пирина.

PRC2 (EED-target)

Репрессивный комплекс 2 Polycomb (PRC2) включает три основных субъединицы: развитие эмбриональной эктодермы (EED), энхансер гомолога zeste 1 (EZh2) или EZh3 и супрессор гомолога zeste 12 (SUZ12). 301 PRC2 обладает активностью гистон-метилтрансферазы (HMT), которая устанавливает и поддерживает моно- или три-метилирование лизина 27 гистона 3 (h4K27). Сложная сеть белок-белковых взаимодействий между EED, EZh3 и SUZ12 необходима для каталитической активности PRC2. 302,303,304 Сообщалось, что PRC2 ведет себя как онкоген, так и как супрессор онкогенеза при различных типах рака. EZh3, EED и SUZ12 обычно имеют повышенную регуляцию, а также подвержены мутациям при некоторых формах рака, таких как рак молочной железы, колоректального рака и рака простаты. 302,305 Таким образом, нацеливание на PRC2 для лечения рака стало эффективной стратегией. В настоящее время эффективное ингибирование каталитической активности PRC2 достигается за счет воздействия как на EED, так и на EZh3. Несмотря на клинические разработки нескольких ингибиторов EZh3 (например, UNC1999, GSK126, EPZ-6438, CPI-1205 и DS-3201b) и EED (например, EED226, A-395 и MAK683), лекарственная устойчивость наблюдается и сохраняется ограничение для этого класса молекул. Следовательно, необходимы новые подходы для преодоления наблюдаемого сопротивления.

Группа Lindsey I. James впервые сообщила о химическом деструкторе PRC2, UNC6852, который содержал лиганд, производный от EED226, и лиганд VHL (фиг. 35). 306 UNC6852 сильно разложил EED и EZh3 со значениями DC 50 0,79 ± 0,14 мкМ и 0,3 ± 0,19 мкМ, соответственно, в то время как SUZ12 показал меньшую деградацию. Кроме того, UNC6852 блокирует гистон-метилтрансферазную активность EZh3 и ингибирует пролиферацию клеток DB (линия клеток DLBCL, несущая мутант EZh3 Y641N) с EC 50 из 3.4 ± 0,77 мкМ после 9 дней лечения, что было аналогично ингибиторам EED226 и UNC1999

Фиг. 35

Представитель PROTAC PRC2.

RIPK2

Серин-треонинкиназа RIPK2 является важным медиатором врожденного иммунитета для передачи сигналов NOD1 и NOD2. 307 NOD1 и NOD2 представляют собой цитозольные рецепторы для производных бактериального пептидогликана, таких как мурамилдипептид (MDP), которые связаны с активированным RIPK2 и привлекают киназы, такие как TAK1, IKKα, IKKβ и IKKγ, для активации NF-κB и MAPK.Это приводит к экспрессии различных воспалительных белков и антибактериальных белков, активации аутофагии и презентации антигена. Путь передачи сигналов NOD-RIP2 особенно важен для воспаления кишечника и иммунитета слизистой оболочки дыхательной системы, который регулируется убиквитинизацией.

Группа Crews разработала молекулу PROTAC, нацеленную на RIPK2, PROTAC_RIPK2 ( 63 ), которая дала D max > 95% при концентрациях более 10 нМ и DC 50 из 1.4 нМ 205 (рис.36). Затем они рассмотрели один из аспектов действия PROTAC: субстехиометрический катализ, при котором одна молекула PROTAC способна индуцировать убиквитинирование и деградацию множества молекул целевого белка. Чтобы определить каталитическую природу PROTAC_RIPK2, они определили абсолютное количество RIPK2 с помощью жидкостного сцинтилляционного анализа в реакциях, содержащих 0,50, 1,0 и 2,0 моль PROTAC, что привело к 1,7, 3,4 и 4,0 пмоль модифицированного RIPK2, соответственно, что соответствует стехиометрии 3.3, 3.4 и 2.0. Эти данные свидетельствуют о каталитическом способе разложения PROTAC. Однако они думали, что каталитическая способность была недооценена для клеточной среды и полиубиквитинирования. Протеомное исследование клеточной количественной экспрессии также выявило высокую специфичность в отношении деградации мишеней.

Рис. 36

Представитель PROTAC RIPK2.

Rpn13

Rpn13 связан с регуляторным компонентом 19S протеасомы и захватывает убиквитинированные белки в качестве субстрата для деградации через протеасому 20S. 308 Затем фрагменты убиквитина удаляются из захваченного субстрата с помощью деубиквитинирующего фермента UCh47 на протеасоме 19S, который затем разворачивается AAA-ATPases для дальнейшей опосредованной 20S протеасомой деградации. Ингибирование протеасом является эффективной стратегией лечения множественной миеломы (ММ), но нацеливание на различные компоненты убиквитин-протеасомной системы остается неуловимым. Экспрессия Rpn13 выше в клетках ММ и играет важную роль в росте и выживании клеток ММ.И РНК-интерференция, и ингибиторы подтвердили, что Rpn13 был лекарственной мишенью для ММ. 309

Чаухан и его коллеги разработали деструктор, WL-40, связав ковалентный ингибитор Rpn13 RA190 с лигандом CRBN 309 (фиг. 37). Ковалентное связывание RA190 с Rpn13 может блокировать распознавание полиубиквитинилированных белков для последующей деградации протеасомой. В клетках, обработанных WL40, уровни Rpn13 были максимально (95%) снижены через 16 часов. Важно отметить, что в отличие от бортезомиба, который может избирательно ингибировать протеасомную активность 20S и, следовательно, приводить к агрегации полиубиквитинированных белков с более низкой молекулярной массой, WL40 блокирует только протеасому 19S и предотвращает деубиквитилирование субстратов, что приводит к образованию полиубиквитинированных белков с более высокой молекулярной массой.Кроме того, WL-40 запускал мощную анти-MM активность в присутствии цитопротекторного микроокружения опухоли BM, преодолевал устойчивость к бортезомибу и был активен в контексте мутантного p53. WL40 индуцировал стрессовую реакцию ER / UPR и передачу апоптотических сигналов p53 / p21 быстрее, чем RA190. Кроме того, исследование in vivo показало, что WL40 значительно ингибировал рост опухоли с половиной эквимолярной дозы RA190.

Рис. 37

Типичный PROTAC Rpn13.

SGK3

Сыворотка / глюкокортикоид-индуцируемая протеинкиназа (SGK) является ключевой сигнальной молекулой PI3K, которая играет важную роль в регуляции пролиферации, выживания, инвазии и метастазирования клеток. 310 SGK-3, изоформа семейства SGK, играет важную роль в пролиферации и выживании клеток, особенно при раке груди, раке печени, колоректальном раке и раке простаты. 311,312 Недавние исследования показали, что SGK-3 сверхэкспрессируется в клетках рака груди и что его ингибитор может значительно ингибировать пролиферацию клеток рака груди. Однако известные в настоящее время ингибиторы SGK-3 имеют низкие значения IC 50 и селективность. 313 ​​ Таким образом, кажется, что оптимизация и определение характеристик PROTAC, специфичного для SGK3, особенно привлекательны.

Дарио Р. Алесси и его коллеги впервые разработали конъюгат PROTAC ингибитора SGK 308-R со связывающим лигандом VH032 VHL, нацеленный на деградацию SGK3 314 (фиг. 38). Соединение 65 индуцировало 50% -ную деградацию эндогенного SGK3 при 0,3 мкМ в течение 2 часов, а максимальная деградация 80% наблюдалась в течение 8 часов в клетках HEK293. В отличие от ингибитора, деструктор имел хорошую селективность, которая не разрушала близкородственные изоформы SGK1 и SGK2. Деградатор также может подавлять пролиферацию линий злокачественных клеток ZR-75-1 и CAMA-1 по сравнению с ингибитором PI3K (GDC0941).

Рис. 38

Представитель PROTAC SGK-3.

Smad3

Smad3 является важным переносчиком в сигнальном пути трансформирующего фактора роста β (TGF-β), который отвечает за прямой перенос сигнала TGF-β из внеклеточного пространства в ядро ​​и регуляцию экспрессии гены-мишени. 315,316 Известно, что уровень экспрессии и функциональное состояние Smad3 влияет на процесс передачи сигнала, включая рост, пролиферацию, развитие, дифференцировку, миграцию и апоптоз клеток. 316,317,318 Было подтверждено, что сверхэкспрессия Smad3 связана с фиброзом печени и фиброзом почек, особенно при различных заболеваниях почек, таких как обструктивная нефропатия, диабетическая нефропатия и гипертоническая нефропатия. Следовательно, стратегия конструирования новой химерной молекулы, нацеленной на протеолиз (PROTAC), которая может предотвращать фиброз почек за счет нацеливания на убиквитинирование и деградацию основного интрацитоплазматического Smad3, имеет большое значение.

Ван и его коллеги провели скрининг низкомолекулярных лигандов, которые связываются с Smad3, а затем использовали молекулу для синтеза целевого соединения 319 (рис.39). Они наблюдали небольшую деградацию после обработки 1 мкг 66 в лизатах клеток ACHN.

Рис. 39

Представитель PROTAC Smad3.

STAT3

STAT3 принадлежит к семейству STAT, которое состоит из семи членов, включая STAT1, STAT2, STAT3, STAT4, STAT5A, STAT5B и STAT6. Они разделяют консервативный домен Src-homology 2 (Sh3), который отвечает за гомодимеризацию посредством фосфорилированного Tyr 705 и последующей трансактивации. Следовательно, ингибиторы, нацеленные на домен Sh3 для нарушения гомодимеризации PPI, были ограничены гомологичной селективностью.С другой стороны, только частичная транскрипционная активность STAT3 может быть подавлена, потому что мономерный STAT3 все еще остается активным. Хотя эмбриональная летальность наблюдается у мышей с нулевым STAT3, первичные мышиные фибробласты растут почти со скоростью у мышей с нулевым STAT3 как фибробласты дикого типа, что указывает на то, что STAT3 является незаменимым в нормальных клетках. 320 Однако, как фактор транскрипции, STAT3 играет решающую роль в онкогенезе, регулируя гены, связанные с выживанием, пролиферацией, инвазией и метастазированием клеток.STAT3 был предложен в качестве особенно привлекательной мишени для потенциальной терапии рака.

Учитывая, что разработка эффективных и селективных ингибиторов STAT3 остается сложной задачей, совсем недавно группа Ванга разработала мощные и специфические деструкторы PROTAC, нацеленные на STAT3, которые продемонстрировали большой терапевтический потенциал in vivo для AML и анапластической крупноклеточной лимфомы (ALCL) 321 ( Рис.40). Сначала они провели оптимизацию на основе своего предыдущего ингибитора домена Sh3 STAT3 CJ-887 и получили лиганд, названный SI-109, с высоким сродством к STAT3 и хорошей проницаемостью для клеток.Сокристаллическая структура STAT3 с SI-109 была решена и руководствовалась разработкой PROTAC путем привязки SI-109 и аналога леналидомида. Деструктор SD-36 продемонстрировал высокую активность в клетках AML и ALCL. Он ухудшил> 90% STAT3 в клетках AML в течение 4 часов и> 50% STAT3 в ячейках ALCL. Серия экспериментов по спасению подтвердила, что SD-36 является настоящим PROTAC, а не молекулярным клеем. Что еще более важно, SD-36 показал превосходную селективность, поскольку другие члены семейства STAT не могли быть разрушены или связаны.Некоторые мутации STAT3, такие как D661Y, K658R и Y705F, также эффективно разрушались SD-36. SD-36 истощал как мономерный, так и димерный STAT3 в клетках AML в концентрации 1 мкМ после обработки в течение 5 часов; таким образом, транскрипционная активность STAT3 была сильно и специфически ингибирована. Например, все его нижестоящие гены, такие как BCL3, HCK, HGF, JAK3, PIM1, SOCS3 и VEGFA, были подавлены. SD-36 индуцировал апоптоз за счет активации каспазы-3/7 и расщепления PARP; при этом уровень STAT3 в митохондриях также был снижен.SD-36 эффективно индуцировал деградацию опухолей ксенотрансплантата STAT3 и достиг полной и длительной регрессии опухоли у мышей. После анализа других тканей мыши, таких как печень, селезенка, сердце и почки, было обнаружено, что SD-36 вызывает глубокое истощение STAT3 в этих тканях, но его безопасность оказалась хорошей.

Рис. 40

Типичный PROTAC STAT3.

TBK1

TANK-связывающая киназа 1 (TBK1) является серин / треониновой киназой и неканоническим членом семейства IKK с множеством клеточных функций в области врожденного иммунитета, онкогенеза и развития. 322 Что еще более интересно, некоторые эксперименты с RNAi показали синтетическую летальность K-Ras с TBK1. 323 Однако последующие отчеты поставили под сомнение эту гипотезу. 324

Вместо RNAi группа Crews разработала PROTAC, нацеленные на TBK, которые можно использовать в качестве инструментов для исследования взаимосвязи между TBK1 и мутантами K-Ras 322 (рис. 41). В качестве отправной точки они выбрали кристаллическую структуру TBK1, связанного с ингибитором. После модификации на основе структуры с доступным соотношением структура-активность (SAR) ингибитор использовали в качестве нацеливающего на белок фрагмента VHL PROTAC.Систематический обзор длины линкера показал, что PROTAC с линкерами менее 12 атомов не продемонстрировали заметной активности деградации из-за стерических конфликтов в тройном комплексе. Представитель PROTAC 67 с линкером из 15 атомов показал высокую эффективность клеточной деградации (DC 50 = 12 нМ) и максимальную деградацию ( D max = 96%). Они дополнительно модифицировали фрагмент, нацеленный на белок, и лиганд VHL, чтобы изучить больше SAR. Была протестирована способность PROTAC 67 разрушать неканоническую киназу IkB IKKε, близкий гомолог TBK1.Хотя ингибитор проявлял плохую селективность в отношении TBK1 по сравнению с IKKε (значения IC 50 1,3 нМ против 8,7 нМ), PROTAC 67 не влиял на уровень IKKε. Они предположили, что селективность является результатом дифференциального представления их поверхностных лизинов VHL и его реакционноспособного компонента тиоэфира убиквитина E2, что приводит к различной эффективности переноса убиквитина. Кроме того, различие в образовании и стабильности тройного комплекса может способствовать селективности.Наконец, оценивали эффект пролиферации клеток PROTAC 67 как в линиях мутантных клеток K-Ras (h33, A549 и h2792), так и в линиях клеток K-Ras дикого типа (h3110 и HCC827). Результаты показали, что в этих клетках не было значительной разницы, что указывало на то, что TBK1 не был синтетически летальным для мутанта K-Ras.

Рис. 41

Представитель PROTAC TBK1.

TRIM 24

Адресный карман белка часто не имеет функционального значения при заболевании.Это верно для мультидоменного, содержащего бромодомен регулятора транскрипции TRIM24. Было высказано предположение, что TRIM24 является зависимым от многих видов рака, однако сильные и селективные лиганды для бромодомена TRIM24 не вызывают эффективных антипролиферативных ответов. 325

В 2018 году группа Брэднера разработала PROTAC, dTRIM24, для деградации TRIM24 путем привлечения убиквитинлигазы VHL E3 326 (рис.42). Деструктор вызвал сильную и селективную деградацию TRIM24 с максимальной деградацией при 5 мкМ.Используя dTRIM24 для исследования функции TRIM24, они охарактеризовали динамические последствия потери TRIM24 для всего генома на локализацию хроматина и контроль генов. Кроме того, они определили TRIM24 как новую зависимость при остром лейкозе. Попарное исследование деградации TRIM24 по сравнению с ингибированием бромодомена выявило усиленный антипролиферативный ответ от деградации. dTRIM24 предложил химический зонд зарождающейся зависимости от рака и проложил путь вперед для множества селективных, но неэффективных лигандов для белков, представляющих терапевтический интерес.

Рис. 42

Представитель PROTAC, нацеленный на TRIM 24.

Штамм Gorilla Glue Weed | Научно-обоснованный обзор 2021 года

Обзор

Где-то в прошлом десятилетии мир каннабиса начал обезумевать из-за нового сильнодействующего штамма, и тогда мы все решили прилепиться к дивану в массовом порядке. Gorilla Glue # 4, он же GG4 или просто Gorilla Glue, — это гибрид с преобладанием сативы, известный своими чрезвычайно смолистыми и липкими шишками (отсюда и название), очень высоким уровнем ТГК и мощным высоким содержанием.Часто копируются и редко дублируются, вот почему мы так зациклились на Gorilla Glue.

Индика / Сатива / Гибрид

Гибрид

День / ночь

Происхождение и общая информация

Gorilla Glue, в частности Gorilla Glue 4 (GG4), является созданием GG Strains, дуэта заводчиков, который описывает себя как «два преступника», которые разработали несколько сортов каннабиса, и «оригинальные заводчики Original Glue (GG4), ранее известные как Gorilla Клей 4.”

(Штамм часто называют «оригинальным клеем» или GG4, чтобы избежать каких-либо сложных юридических ситуаций с клеевой компанией)

Они описывают ряд наград сорта, включая первое место на High Times San Bernardino Medical Cannabis Cup в 2014 году и High Times Cup в Мичигане в том же году, которые этот сорт также выиграл. Среди других титулов в наступающем году — награды за самый высокий уровень ТГК и лучший цветок на Spannabis 2018, а также выбор в качестве одного из самых сильных сортов High Times на Земле за 2017 год.

Хорошо, вы думаете, мы понимаем, что он сильный, но что еще может предложить трава Gorilla Glue? Его аромат описывается как острый, землистый и кислый, а также свежий, сосновый и землистый вкус. Это густой, захватывающий дым, и это еще до того, как мы дойдем до кайфа.

Gorilla Glue # 4 больше всего ассоциируется с высоким замком дивана, но это может быть гораздо больше. Каннабист описал кайф как чувство, которое сначала было похоже на поездку по голове сативы, которая затем превращается в «глубокий камень тела», соответствующий более спокойной концентрации.Ощущение описывается как сбалансированное, но все же очень тяжелое и удовлетворяющее, даже довольное. Картина является одной из высоких, сочетающих в себе лучшее из обоих миров — расслабляющей и достаточно каменистой, чтобы погрузить вас в безмятежное состояние, сохраняя при этом церебральный кайф.

В обзоре говорится, что когда вы отбираете тонны сортов каннабиса, «требуется что-то резкое, что-то настолько необычное, чтобы подняться на вершину. После того, как я занимался самолечением всю свою взрослую жизнь, это, несомненно, соответствует требованиям ».

Не заблуждайтесь, Gorilla Glue — это во многих отношениях классический сорт дивана, который определенно лучше подходит для ночного времени, когда работа сделана и пора прилипнуть.

Происхождение Gorilla Glue довольно сложное. Его чаще всего описывают как смесь Chem’s Sister, Chocolate Diesel и Sour Dub.

Каннабиноиды и терпены в клее

Gorilla Glue

Существуют тысячи хемоваров каннабиса, и нет реальных стандартов, как их идентифицировать — в основном каждый может выращивать что угодно и называть это как угодно. Другими словами — есть лучшие способы выбрать сорт, чем только по названию.

Химический профиль, который вы видите ниже, является средним лабораторным тестом продуктов под названием «Gorilla Glue» — так что это всего лишь приблизительная оценка того, что вы можете найти, купив травку Gorilla Glue.Gorilla Glue часто тестируется с высокой концентрацией THC (в среднем 21,3%) и BCP в качестве основного доминирующего терпена (0,61%), за которым следуют лимонен, мирцен и гумулен.

Полный химический профиль

* Цифры в таблицах являются средними данными из нескольких источников
** Терпены представляют фармакологический интерес при концентрациях выше 0,05%

Как

Gorilla Glue влияет на вас

Судя по сообщениям пользователей, штамм Gorilla Glue часто вызывает расслабление, счастье и эйфорию.Это также может вызвать сухость во рту, сухость глаз и, реже, головокружение. Но на самом деле марихуана влияет на людей по-разному. Два основных фактора — это ваша собственная биология (ваша эндоканнабиноидная система, метаболизм, возраст, вес и т. Д.). и выбранный вами продукт (включая его каннабиноидный профиль и состав терпенов, а также используемый способ доставки).

Возможное лечение:

При этом указанный выше химический профиль потенциально может помочь при таких состояниях и симптомах, как

Сообщенные эффекты

Эйфорический

Наконечники для выращивания Gorilla Glue

Gorilla Glue # 4 — популярный сорт на рынке семян не только потому, что это очень известный хемовар, но и потому, что он может зацвести всего за восемь недель и является высокопродуктивным сортом.И, как очевидно из названия, вы будете вознаграждены (очень) покрытой смолой сорняками премиум-класса, что также отлично, если вы хотите делать концентраты.

Может легко расти как в помещении, так и на улице, хотя предпочитает солнечный и теплый климат. Gorilla Glue # 4 также известен своей устойчивостью к вредителям и болезням.

При выращивании каннабиса правильные семена могут заставить даже любителя почувствовать (и выглядеть) профессионалом. Невооруженным глазом вам будет трудно отличить обычные семена от семян выигравшего призовые сорта.Именно здесь на помощь приходит покупка в надежном семеноводческом хозяйстве.

Урожайность (на открытом воздухе) унций / растение

21

Прежде всего, давайте посмотрим, откуда произошла эта горилла. Chem Sis — это разновидность Chemdawg, очень известного и уважаемого сорта, который сыграл важную роль в выведении Sour Diesel и OG Kush.Chocolate Diesel — как можно понять из названия — это мощный сативный сорт, сочетающий в себе генетику Sour Diesel и любимого местных сортов Chocolate Thai. А кислый дабб? Гибрид с преобладанием сативы, описанный как гибрид Sour Diesel и Sour Bubble Восточного побережья.

В итоге, это сложное генеалогическое древо.
Из-за высокого содержания ТГК и смол, Gorilla Glue # 4 получил высокую оценку селекционеров за свою генетику. Он использовался для скрещивания с некоторыми из самых популярных сортов в мире, такими как Gorilla Cookies (скрещивание с популярным штаммом Thin Mint Girl Scout Cookies), Gorilla Zkittlez (скрещивание с любимым фруктовым фанатом Zkittlez) и Gorilla Blue (помесь черники).Но список длинный, и за то время, которое вы потратили на прочтение этой статьи, кто-то мог вывести новый кросс Gorilla Glue # 4.

Материалы Cannigma предназначены только для информационных целей. Это не заменяет профессиональные медицинские консультации, диагностику или лечение. Перед началом лечения всегда консультируйтесь с опытным врачом, имеющим опыт работы с каннабисом.

Спасибо за отзыв!

Подпишитесь на каждые две недели обновлений, в которых есть множество образовательных программ, рецептов и советов по каннабису. Вашему почтовому ящику это понравится.

Характеристики склеивания фанеры с клеями из крови свиней, полученными новым методом :: BioResources

Ду К., Юн К., Гуань М. и Чжан Ф. (2020). « Характеристики склеивания фанеры с клеями из крови свиней, полученными новым методом », BioRes. 15 (4), 7586-7597.
Abstract

Возобновляемые и экологически чистые адгезивы из свиной крови (PBA) были получены путем модификации PBA мягким щелочным раствором и глутаральдегидом и обработки их ультразвуком. ПБА подвергали термогравиметрическому (ТГ) анализу и инфракрасной спектроскопии с преобразованием Фурье (ИК-Фурье), а также анализировали прочность сцепления и поверхность сцепления фанеры для оценки характеристик сцепления. Результаты показали, что щелочной раствор разворачивает структуру белков крови, а глутаральдегид сшивает белок крови.Кроме того, ультразвук значительно увеличил экспансию белка в слабощелочных условиях. Термическая стабильность PBA, подвергнутых ультразвуковой обработке в слабощелочных условиях, была улучшена, но сшивающий агент не использовался, а проницаемость, которую анализировали с помощью флуоресцентного микроскопа, улучшилась. Кроме того, средняя и эффективная глубина проникновения на границе склеивания увеличилась на 53% и 55% соответственно. Прочность сцепления фанеры, изготовленной из модифицированных ПБА, была значительно улучшена и соответствовала соответствующим требованиям.


Скачать PDF
Полная статья

Характеристики склеивания фанеры с клеями из крови свиней, полученными новым методом

Кеке Ду, a, b, c, § Cheng Yong, b, c, § Mingjie Guan, a, * и Fan Zhang a

Возобновляемые и экологически чистые клеи для крови свиней (PBA) были получены путем модификации PBA мягким щелочным раствором и глутаральдегидом и обработки их ультразвуком. ПБА подвергали термогравиметрическому (ТГ) анализу и инфракрасной спектроскопии с преобразованием Фурье (ИК-Фурье), а также анализировали прочность сцепления и поверхность сцепления фанеры для оценки характеристик сцепления.Результаты показали, что щелочной раствор разворачивает структуру белков крови, а глутаральдегид сшивает белок крови. Кроме того, ультразвук значительно увеличил экспансию белка в слабощелочных условиях. Термическая стабильность PBA, подвергнутых обработке ультразвуком в слабощелочных условиях, была улучшена, но сшивающий агент не использовался, а проницаемость, которую анализировали с помощью флуоресцентного микроскопа, улучшилась. Кроме того, средняя и эффективная глубина проникновения на границе склеивания увеличилась на 53% и 55% соответственно.Прочность сцепления фанеры, изготовленной из модифицированных ПБА, была значительно улучшена и соответствовала соответствующим требованиям.

Ключевые слова: Клей для крови свиней; Ультразвук; Сшитая структура; Интерфейс склеивания; Флуоресценция

Контактная информация: a: Колледж материаловедения и инженерии, Нанкинский лесотехнический университет, Нанкин, провинция Цзянсу, 210037, Китай; b: Исследовательский центр по переработке сельского хозяйства Академии сельскохозяйственных наук Цзянсу, Нанкин, провинция Цзянсу, 210014, Китай; c: Центр совместных инноваций Цзянсу по утилизации твердых органических отходов, Нанкин, провинция Цзянсу, 210014, Китай; §: Кеке Ду и Ченг Ён внесли равный вклад в эту работу; * Автор, ответственный за переписку: mingjieguan @ 126.com

ВВЕДЕНИЕ

В настоящее время большинство клеев, используемых для склеивания древесины, имеют формальдегидную основу, например фенольную смолу и меламиновую смолу. Эти клеи не подлежат возобновлению, а формальдегид представляет значительную угрозу для здоровья человека (Irle and Bolton 1991; Gryta et al. 1996; Schmidt et al. 2006; Mo et al. 2015; Li et al. ). 2018). В связи с недавним повышением экологической сознательности и производства отходов биологические клеи на основе возобновляемых ресурсов стали популярной темой исследований (Ferdosian et al. 2017).

Клеи на основе растительных белков являются одними из самых типичных клеев на биологической основе. Было проведено множество исследований различных адгезивов на основе растительных белков, таких как кукурузный белок (Santoni and Pizzo 2013), пшеничный белок (D’Amico et al. 2010; Nordqvist et al 2012) и соевый белок. (Ван и др. 2008 г .; Лин и др. 2012 г.). Соевый белок является наиболее широко используемым белковым клеем (Pizzi 2006). Однако соевый белок имеет высокую вязкость, что ограничивает применение клеев на основе соевого белка.Кроме того, использование пищевых культур для производства клея может вызвать озабоченность нехваткой продовольствия, особенно в странах с большой численностью населения, таких как Китай.

Кровь — это природный биоразлагаемый ресурс с низкой вязкостью, который в основном получают из остатков животноводства и побочных продуктов мясоперерабатывающей промышленности. Кровь с высоким содержанием белка используется в основном в качестве корма для животных с низкой добавленной стоимостью после обработки. Кроме того, кровь используется в экологически чистых композитных материалах, таких как биопластики (Bier et al. 2012а, б; Low et al. 2012 г.). До настоящего времени было проведено несколько исследований по приготовлению клеев из свиной крови. Ян и др. (2006) сравнил свойства адгезивов на основе фенольных смол, модифицированных соевым белком, арахисовым белком и белком крови, и обнаружил, что свойства адгезивов на основе фенольных смол на основе белков крови аналогичны свойствам адгезивов на основе чистой фенольной смолы. Ли и др. (2018) приготовили клей на основе кровяной муки, модифицированный поливиниловым спиртом, додецилсульфатом натрия и трехглицидилдиамином.Было обнаружено, что соответствующие свойства адгезивов на основе модифицированной кровяной муки превосходят свойства немодифицированных адгезивов. Однако адгезивы, приготовленные в этих исследованиях, были сделаны из сухой кровяной муки. Сушка — это энергоемкий процесс, и процесс сушки крови не требуется для приготовления клея для крови свиней (PBA), который должен быть приготовлен экономичным и простым методом. Лин и Гунасекаран (2010) использовали свежую коровью кровь в качестве сырья для приготовления клеев с помощью щелочной модификации , и было обнаружено, что прочность адгезионного склеивания на сдвиг не зависит от pH и была сопоставима с таковой фенолформальдегида в сухом растворе. состояние.К сожалению, Лин и Гунасекаран (2010) не обсуждали это явление с точки зрения микроскопических механизмов.

В последнее время большое внимание уделяется химической модификации белков крови из-за зрелости адгезивной технологии соевого белка. Однако чрезмерное использование химических реагентов может нанести большой ущерб окружающей среде. Напротив, ультразвуковое лечение — это мягкий и экологически чистый метод модификации. Многие исследования показали, что ультразвук может разрушать четвертичную и / или третичную структуру белков, производить небольшие молекулярные субъединицы и улучшать растворимость и эмульгирующую способность белков за счет кавитации (Suslick and Price 1999; He et al. 2005; Чен и др. 2011). Jambrak et al. (2014) сообщил, что обработка ультразвуком может уменьшить размер частиц и увеличить удельную свободную поверхность белков. Cheng et al. (2019) сообщил, что молекулярные взаимодействия белков усиливаются предварительной обработкой ультразвуком. Эти данные показывают, что небольшое количество щелочи может раскрыть вторичную структуру белков с помощью ультразвуковых волн. Что еще более важно, использование меньшего количества химикатов может уменьшить ущерб окружающей среде.

В этом исследовании свежая свиная кровь была модифицирована с использованием простого метода добавления небольшого количества химических реагентов и использования ультразвука для приготовления белковых клеев. Такой подход не только позволяет избежать энергозатрат на процесс сушки крови, но также снижает повреждение окружающей среды избытком химического реагента. Ультразвуковая обработка разрушает четвертичную и третичную структуру белков, щелочной раствор может способствовать гидролизу белков, а глутаральдегид может улучшить водонепроницаемость клеев в качестве сшивающего агента.Это исследование было направлено на разработку экологически чистого клея для биоматериалов с использованием свиной крови. Основные физические свойства, термическая стабильность, функциональные группы, сопротивление сдвигу во влажном состоянии (WSS) и поверхность склеивания фанеры, приготовленной с использованием ПБА, были измерены для исследования характеристик и механизма действия модифицированных ПБА.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

Материалы

Свежая свиная кровь с pH 7,36 была получена на бойне Xiaolingwei в Нанкине, Китай.В кровь добавляли соответствующее количество антикоагулянта и хранили при 4 ℃ не более недели. Используемые NaOH и глутаральдегид были приобретены у Beijing SLB Technology Co., Ltd. (Пекин, Китай). Шпон тополя ( Populus tomentosa Carr.) (50 см × 50 см × 0,2 см) с содержанием влаги 9% был приобретен в Гуаннане, провинция Цзянсу, Китай.

Приготовление клея

Свежая свиная кровь (100 г) перемешивалась в течение 1 ч при 40 ° C и кодировалась как FPB.NaOH (1 г) добавляли к свежей свиной крови (100 г), перемешивали в течение 1 ч при 40 ° C и кодировали как NPB. Затем в NPB добавляли глутаральдегид (1 г), перемешивали в течение 1 ч при 40 ° C и кодировали как GPB.

NaOH (1 г) добавляли к свежей свиной крови (100 г), перемешивали в течение 1 ч при 40 ° C, подвергали обработке ультразвуком (40 кГц, 500 Вт) и кодировали как NUPB. Затем в NPB добавляли глутаральдегид (1 г), перемешивали в течение 1 часа при 40 ° C, подвергали обработке ультразвуком (40 кГц, 500 Вт) и кодировали как GUPB.

Процесс производства клея показан на схеме 1.

Схема 1. Технологическая схема приготовления клеев

Определение основных свойств

Клеи FPB, NPB, NUPB, GPB и GUPB (по 20 мл каждого образца) по отдельности помещали в пробирку на 30 минут для наблюдения за образованием расслоений или пузырьков.

Содержание твердого вещества в каждом клее было измерено в соответствии с GB / T 14074 (2006). Приблизительно 3 г (М) клея помещали в печь до достижения постоянного веса (m) при температуре 100 ± 2 ° C.Содержание твердого вещества рассчитывали по формуле. 1,

Содержание твердого вещества = м / M × 100% (1)

, где м — постоянный вес (г), а M — масса (г) клея. Все измерения были выполнены в трех экземплярах.

Клеи FPB, NPB, NUPB, GPB и GUPB (по 20 мл каждого образца) помещали в пробирку на 1 час, а затем измеряли pH. Все измерения были выполнены в трех экземплярах.

Методы

Термогравиметрический анализ (ТГА)

Температурное разложение предварительно высушенных замораживанием клеев измеряли на приборе S II 7200 TGA (Hitachi Ltd., Токио, Япония) при следующих условиях: 5 мг клеящего порошка, температура сканирования от 25 ° C до 600 ° C и скорость нагрева 10 ° C / мин в атмосфере N 2 .

Инфракрасная спектроскопия с преобразованием Фурье (FTIR)

Образцы клея были предварительно полностью высушены замораживанием и измельчены в порошок. Инфракрасную спектроскопию с преобразованием Фурье использовали для получения спектров адгезивов с помощью инфракрасного спектрометрического анализатора Tensor 27 (Bruker, Карлсруэ, Германия) с использованием таблеток KBr в спектральном диапазоне от 400 см -1 до 4000 см -1 с 4 см -1 разрешение при 32 сканированиях.

Измерение сопротивления сдвигу во влажном состоянии (WSS)

Клеи были нанесены на трехслойный шпон тополя (40 см × 40 см × 0,2 см). Распространение клея для одинарной клейкой линии составляло 360 г / м 2 и подвергалось горячему прессованию при 120 ° C в течение 5 минут при 1,20 МПа на гидравлическом прессе QLB-D (Shanghai First Rubber Machinery Factory, Шанхай, Китай). Образцы фанеры хранили при температуре от 21 до 23 ℃ и влажности от 60 до 63% в течение не менее 24 часов после горячего прессования. Прочность склеивания фанеры на сдвиг измеряли во влажных условиях в соответствии с GB / T 17657 (2013).Образцы (2,5 см × 10 см) были погружены в воду при 63 ± 2 ° C на 3 часа, а затем высушены при комнатной температуре в течение 10 минут, и их сопротивление сдвигу во влажном состоянии было испытано с использованием машины для растяжения (CMT5504, Shenzhen XinSanSi Co. Ltd., Шэньчжэнь, Китай) с рабочей скоростью 10,0 мм / мин.

Морфология склеивающего интерфейса

Поперечное сечение размером 5 мм × 5 мм × 20 мкм было создано из каждого образца с помощью ультрамикротома TU-213 (Yamato Kohki Industrial Co., Ltd., Ямато, Япония) при комнатной температуре после размягчения образцов. замачиванием в воде на 2 Вт.Затем поперечные сечения дегидратировали с помощью этанола (30%, 50%, 75%, 95% и 100%). Затем 0,5% флуоресцентного красителя толуидиновый синий-O добавляли по каплям в течение 30 минут, и каждый образец дважды очищали деионизированной водой перед наблюдением. Наконец, образец исследовали под флуоресцентным микроскопом BX51 (Olympus Corporation, Токио, Япония). Микроскопические изображения были обработаны с помощью программного обеспечения для обработки графики (ImageJ, National Institutes of Health, v1.8.0, Bethesda, America) для расчета средней глубины проникновения (AP), эффективной глубины проникновения (EP) и площади проникновения ( A ). клеевого слоя.AP был получен путем взятия среднего из пяти значений максимальной глубины проникновения адгезивного слоя, A — это площадь адгезива на всем флуоресцентном изображении, а A , разделенная на длину клейкой линии, — это EP (Гаврилович-Грмуса и др. 2016; Цинь и др. 2016).

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

Основные характеристики клеев

Содержание твердого вещества — важный показатель для оценки качества клея.Таблица 1 показывает, что у FPB было самое низкое содержание твердого вещества 18,2%, а содержание твердого вещества NPB и GPB увеличилось до 19,0% и 22,1%, соответственно. Причинами увеличения содержания твердых веществ могут быть добавление твердого NaOH и испарение воды во время приготовления клеев. Сферическая структура белковой молекулы была разрушена, что открыло более активные группы, которые были полезны для дальнейшей модификации сшивания глутаральдегида. Влияние ультразвуковой обработки на твердое содержание ПБА различалось, поскольку твердое содержание НУПБ было выше, чем у НПБ, а твердое содержание ГУПБ было ниже, чем содержание ГПБ.Это могло быть связано с увеличением растворимого белка при кавитации и термическим и механическим воздействием ультразвуковой обработки, которое могло вызвать повышенную растворимость белка (Liu et al. 2011; Zhu 2015; Wu 2016). Однако механическое воздействие ультразвука может разрушить сшитую структуру, образованную белком и глутаральдегидом (Li et al. 2012). Несмотря на это, твердые содержания NUPB и GUBP все еще были выше, чем у FPB, поэтому было показано, что ультразвуковая обработка является возможным методом модификации.Кроме того, pH PBA снизился после модификации глутаральдегидом, вероятно, потому, что аминогруппы ковалентно реагируют с глутаральдегидом (Silva et al. 2004; Betancor et al. 2006).

Таблица 1. Основные характеристики клеев

Анализ TG и DTG

Как показано на кривой ТГ на рис. 1 (a), термическое разложение PBA было разделено на четыре стадии: от 0 ° C до 120 ° C, от 120 до 230 ° C, от 230 ° C до 400 ° C и выше. 400 ° С.Изменение веса на первом этапе было связано с потерей свободной воды и связанной воды, а на втором этапе было связано с разделением четвертичной структуры белка и разложением небольших молекул. Третья стадия в основном связана с деградацией структуры белкового скелета крови свиньи и разрывами нековалентных связей на этой стадии. Четвертая стадия была связана с термическим разложением крови (Barreto et al. 2003; Soares et al. 2005; Schmidt et al. 2005; Шмидт и Сольди 2006). Кривая ТГ показывает, что массы остатков GUPB и NUPB были относительно большими, что позволяет предположить, что NUPB и GUPB обладают лучшей термостойкостью. Этот результат мог быть связан с тем, что NUPB и GUPB генерируют более мелкие молекулы с хорошей термической стабильностью под действием ультразвуковой обработки.

Кривая DTG показывает, что самые высокие температуры разложения FPB, NPB и GPB постепенно увеличиваются. Этот контраст указывает на то, что в композитах произошли некоторые структурные изменения.Это могло быть связано с разложением пептидных и амидных связей под действием NaOH, который обнажает многие реакционноспособные группы, которые могут сшиваться при катализе NaOH. Затем были получены молекулы с большей формульной массой, и стабильность NPB была улучшена. Реакция продолжала давать сшитые структуры после добавления глутаральдегида, и термическая стабильность GPB была дополнительно улучшена (Tian et al. 2016). Самые высокие изменения температуры разложения NPB и GPB не были очевидны после ультразвуковой модификации.Однако для NPB и GPB пик был более выраженным, чем для NUPB и GUPB, соответственно. Возможно, что ультразвук может быть использован для усиления взаимодействия между белками через изменений в структуре белка; таким образом, внутри NUPB и GUPB находится больше макромолекул, и их термическая стабильность улучшается (Li et al .2012; Esteghlal et al .2019; Pathak et al .2020).

Рис. 1. Кривые ТГ (а) и ДТГ (б) клеев ФПБ, НПБ, НУПБ, ГПБ, ГУПБ

Спектрофотометрический анализ FTIR

На рис. 2 показаны кривые FTIR плат.Инфракрасный анализ с преобразованием Фурье может выявить возможные химические и физические взаимодействия в клеях. Широкий пик от 3000 до 3500 см -1 на рис. 2а был обусловлен большим количеством свободных групп N-H и O-H (Yuan et al. 2017). Ширина полупика GPB была намного уже, чем у FPB, что указывает на то, что количество свободных аминокислотных остатков в белке уменьшилось и глутаральдегид сшился с белком. NaOH разрушил структуру белковых молекул и увеличил количество свободных аминокислотных остатков, в результате чего ширина полупика NPB была шире, чем у FPB.Ширина полупика NUPB была уже, чем у NPB, а ширина полупика GUPB была шире, чем у GPB. Это могло произойти, потому что ультразвук может вызвать агрегацию белков и уменьшить количество свободных аминокислотных остатков, но разрушает сшитые структуры, образованные глутаральдегидом и белком.

Рис. 2. Кривые FTIR клеев FPB, NPB, NUPB, GPB и GUPB

Характерные пики поглощения белков составляют 1660, 1542 и 1312 см. -1 , которые представляют собой растяжение C = O амида I, изгиб NH амида II и растяжение CN и изгиб NH амида III, соответственно. .Пики абсорбции GPB и GUPB были намного слабее, чем у FPB, при 1312 см -1 (фиг. 2b), что указывает на то, что глутаральдегид был сшит с белком. По сравнению со спектром адгезива FPB, пик поглощения NUPB исчез при 1104 см -1 (приписываемый растяжению C-O), что могло произойти из-за того, что субъединицы белка были разрушены ультразвуковой обработкой. Механизм реакции при обработке NaOH, глутаровым альдегидом и ультразвуком молекулами белка крови свиньи показан на рис.3.

Рис. 3. Схематическое изображение механизма реакции NaOH, глутарового альдегида и ультразвуковой обработки белками крови свиньи

Анализ стыковки

Рис. 4. Интерфейс склеивания фанеры, склеенной клеем ФПБ, НПБ, НУПБ, ГПБ и ГУПБ

Распределение клея на границе склеивания фанеры показано на рис. 4.

На рис. 4 показано, что глубина проникновения клея в двух соседних винирах не была симметричной или постоянной.

Клеи в основном распределялись в клеточной полости и клеточной стенке паренхимных клеток, лучевых клеток и протоков тополя, а некоторые клеи проникали внутрь винира через трещину в облицовке. Величина инфильтрации FPB в фанеру и ячейки тополя была низкой и в основном присутствовала на границе склеивания. Больше NPB, NUPB, GPB и GUPB проникло внутрь ячеек шпона и тополя и образовало «клеевое кольцо» для лучшей проницаемости.

Результаты количественного анализа представлены в таблице 2.Результаты показывают, что значения A, AP и EP для FPB были самыми низкими, а проницаемость FPB была наихудшей, а значения A, AP и EP для NPB, NUPB, GPB и GUPB были улучшены после модификации. . Значения A и AP NPB были самыми большими, а значение EP NUPB было наибольшим. Значения EP для NUPB и GUPB увеличились на 10% и 12%, соответственно, по сравнению со значениями EP для NPB и GPB, что указывает на то, что текучесть PBA улучшилась при ультразвуковой обработке.

Таблица 2. Результаты анализа интерфейса склеивания фанеры

WSS фанеры

WSS фанеры, изготовленной с использованием PBA, показан на рис. 5. WSS FPB составлял всего 0,16 МПа, что намного меньше требований к прочности клеев для фанеры (≥ 0,7 МПа) (GB / T 17657 2013).

Рис. 5. ВСС фанеры, склеенной ФПБ, НПБ, НУПБ, ГПБ, ГУПБ

Слегка увеличена ВСС фанеры из НПБ. Это могло быть связано со способностью NaOH открывать структуру белковых молекул и открывать активные группы для сшивания, но структура белковых молекул не могла быть полностью раскрыта в мягких щелочных условиях.Поскольку белковые молекулы диспергируются и разворачиваются в растворе под действием кавитации ультразвуковой обработки, взаимодействие между деревом и белком увеличивается в процессе отверждения (Nordqvist et al. 2010; Sui et al. 2017; Zhu et al. .2017), и достигается лучшая прочность сцепления. Таким образом, ВСС фанеры из НУПБ увеличилась на 318% по сравнению с НПБ и достигла 0,71 МПа. WSS фанеры, изготовленной из GPB, был самым высоким, что объяснялось тем фактом, что добавление глутаральдегида приводило к образованию сложных сшитых структур, которые улучшали характеристики полученного клея (Wang et al. 2007). WSS фанеры, изготовленной из ГУПБ, снизился на 31% по сравнению с ГПБ. Это может быть связано с тем, что сшивающая структура GUPB была меньше, чем у GPB после ультразвуковой обработки (Li et al. 2016). Однако фанера из ГУПБ по-прежнему соответствовала требованиям прочности.

ВЫВОДЫ

  1. После модификации небольшим количеством NaOH и глутарового альдегида и обработки ультразвуком термическая стабильность и характеристики склеивания модифицированных адгезивов из свиной крови (PBA) были улучшены.
  2. Обработанная глутаральдегидом свиная кровь (GPB) имела более стабильную сшитую структуру, лучшую термическую стабильность и отличные характеристики связывания. Кроме того, прочность соединения версии, обработанной ультразвуком (GUPB), была ниже, чем у версии GPB, потому что обработка ультразвуком немного разрушила сформированную сшитую структуру.
  3. В условиях слабой щелочности использование ультразвука помогает молекулам белка крови свиньи достаточно развернуться и улучшить проницаемость PBA на границе связывания.Таким образом, прочность на сдвиг во влажном состоянии (WSS) GPB увеличилась на 318% и достигла требований к прочности сцепления фанеры согласно GB / T 17657 (2013).
  4. Поскольку это позволяет сократить количество химических реагентов и стоимость, приготовление ПБА с помощью ультразвуковой обработки в мягких щелочных условиях является экологически чистым методом подготовки.

БЛАГОДАРНОСТИ

Работа выполнена при финансовой поддержке Национального государственного научного фонда Китая (грант № 21808093) и приоритетной академической программы развития высших учебных заведений Цзянсу (PAPD).

ССЫЛКИ

Баррето, П. Л. М., Пирес, А. Т. Н., и Сольди, В. (2003). «Термическое разложение съедобных пленок на основе молочных белков и желатина в инертной атмосфере», Разложение и стабильность полимеров 79 (1), 147-152. DOI: 10.1016 / s0141-3910 (02) 00267-7

Бетанкор, Л., Лопес-Гальего, Ф., Идальго, А., Алонсо-Моралес, Н., Матео, Г. Д.-О. К., Фернандес-Лафуэнте Р. и Гисан Дж. М. (2006). «Различные механизмы иммобилизации белка на активированных глутаровым альдегидом опорах: эффект активации опоры и условий иммобилизации», Enzyme and Microbial Technology 39 (4), 877-882.DOI: 10.1016 / j.enzmictec.2006.01.014

Бир, Дж. М., Вербик, К. Дж. Р. и Лэй, М. С. (2012a). «Экологический профиль термопластичного белка, полученного из кровяной муки. Часть 1. Проблемы распределения », Международный журнал оценки жизненного цикла 17 (2), 208-219. DOI: 10.1007 / s11367-011-0349-8

Бир, Дж. М., Вербик, К. Дж. Р. и Лэй, М. С. (2012b). «Экологический профиль термопластичного белка, полученного из кровяной муки. Часть 2: Обработка термопластов », Международный журнал оценки жизненного цикла 17 (3), 314-324.DOI: 10.1007 / s11367-011-0355-x

Чен, Л., Чен, Дж., Рен, Дж., И Чжао, М. (2011). «Влияние предварительной обработки ультразвуком на ферментативный гидролиз изолятов соевого белка и на эмульгирующие свойства гидролизатов», Журнал сельскохозяйственной и пищевой химии 59 (6), 2600-2609. DOI: 10.1021 / jf103771x

Cheng, Y., Donkor, P.O., Ren, X., Wu, J., Agyemang, K., Ayim, I., and Ma, H. (2019). «Влияние предварительной обработки ультразвуком с моночастотой и одновременной двойной частотой на механические свойства и микроструктуру гелей эмульсии сывороточного белка», Food Hydrocolloids, 89, 434-442.DOI: 10.1016 / j.foodhyd.2018.11.007

Д’Амико, С., Грабалова, М., Мюллер, У., и Бергхофер, Э. (2010). «Склеивание древесины ели клеем из пшеничной муки. Влияние температуры прессования на прочность адгезионного соединения», Промышленные культуры и продукты 31 (2), 255-260. DOI: 10.1016 / j.indcrop.2009.11.001

Эстеглал, С., Гахруи, Х. Х., Ниакусари, М., Барба, Ф. Дж., Бехит, А. Э., Малликарджунан, К., и Рухинеджад, С. (2019). «Устранение пробелов в знаниях о влиянии нетермической обработки на белки и аминокислоты», Foods 8 (7), 262.DOI: 10.3390 / foods8070262

Фердосян Ф., Пан З., Гао Г. и Чжао Б. (2017). «Клеи на биологической основе и оценка для применения в древесных композитах», Полимеры 9 (2), Артикул 70. DOI: 10.3390 / polym70

Гаврилович-Грмуса И., Данки М., Джипорович-Момцилович М., Попович М. и Попович Дж. (2016). «Влияние давления на радиальное и тангенциальное проникновение адгезивной смолы в древесину тополя и на прочность клеевых соединений на сдвиг», BioResources 11 (1), 2238-2255.DOI: 10.15376 / biores.11.1.2238-2255

ГБ / Т 14074 (2006). «Методы испытаний клеев для древесины и их смол», Управление по стандартизации Китая, Пекин, Китай.

ГБ / т 17657 (2013 г.). «Методы испытаний для оценки свойств древесных панелей и древесных панелей с декорированной поверхностью», Управление по стандартизации Китая, Пекин, Китай.

Gryta, M., Majchrzak, J., Kaledkowski, B., and Szemien, M. (1996). «Фенолоформальдегидная смола, модифицированная меламином и мочевиной», Przemysl Chemiczny 75 (1), 12-14.

Хе Ю., Цао Ю. и Лю Ю. (2005). «Механизм инициирования эмульсионной полимеризации при ультразвуковом облучении», Journal of Polymer Science Part B: Polymer Physics 43 (18), 2617-2624. DOI: 10.1002 / polb.20544

Ирле, М. А., и Болтон, А. Дж. (1991). «Физические аспекты образования клеевого соединения древесины с помощью клеев на основе формальдегида. Часть III. Ползучесть смол на основе формальдегида при различной относительной влажности », Holzforschung 45 (1), 69-74.DOI: 10.1515 / hfsg.1991.45.1.69

Джамбрак, А. Р., Мейсон, Т. Дж., Лелас, В., Панивник, Л., и Герцег, З. (2014). «Влияние ультразвуковой обработки на размер частиц и молекулярную массу сывороточных белков», Journal of Food Engineering 121, 15-23. DOI: 10.1016 / j.jfoodeng.2013.08.012

Ли, К., Лин, Т., и Ван, X. (2012). «Влияние ультразвуковой обработки на шерстяное волокно и свойства ткани», Журнал Текстильного института 103 (6), 662-668. DOI: 10.1080/00405000.2011.597569

Ли С., Ян X., Чжан Ю., Ма, Х., Лян, К., Цюй, В., Хе, Р., Чжоу, К., и Махуну, Г. К. (2016). «Влияние предварительной обработки с помощью ультразвука и ультразвука на ферментолиз и структурные характеристики рисового белка», Ultrasonics Sonochemistry 31, 20-28. DOI: 10.1016 / j.ultsonch.2015.11.019

Ли, Х., Ли, Дж., Ло, Дж., Ли, К., Гао, К., и Ли, Дж. (2018). «Новый экологически чистый биоадгезив на основе кровяной муки: подготовка и характеристики», журнал Journal of Polymers and the Environment, 26 (2), 607-615.DOI: 10.1007 / s10924-017-0976-7

Лин, Х., Гунасекаран С. (2010). «Клей из коровьей крови: характеристика физико-химических и адгезионных свойств», Международный журнал адгезии и адгезивов, 30 (3), 139-144. DOI: 10.1016 / j.ijadhadh.2009.10.003

Линь, К., Чен, Н., Биан, Л., и Фань, М. (2012). «Разработка и характеристика механизмов высокоэффективных биоадгезивов на основе сои», Международный журнал адгезии и адгезивов 34, 11-16.DOI: 10.1016 / j.ijadhadh.2012.01.005

Лю Б., Ма, Х.-Л., Ли, С.-Дж., Тиан, В.-М., и Ву, Б.-Г. (2011). «Исследование структуры изолята обезжиренного белка зародышей пшеницы при ультразвуковой обработке», Спектроскопия и спектральный анализ 31 (8), 2220-2225. (На китайском языке) DOI: 10.3964 / j.issn.1000-0593 (2011) 08-2220-06

Low, A., Lay, M., Verbeek, J., and Swan, J. (2012). «Обесцвечивание гемоглобина как сырья для биопластиков второго поколения», Preparative Biochemistry & Biotechnology 42 (1), 29-43.DOI: 10.1080 / 10826068.2011.563401

Мо, X. Ф., Фан, Д. Б., Цинь, Т. Ф., и Чу, Ф. X. (2015). «Характеристики отверждения и характеристики адгезии фенолформальдегидных смол с композиционными добавками», журнал Journal of Tropical Forest Science 27 (2), 248-254.

Нордквист П., Хаббаз Ф. и Мальмстрём Э. (2010). «Сравнение прочности сцепления и водостойкости изолята соевого протеина, модифицированного щелочью, и клеев из пшеничной глютена», International Journal of Adhesion & Adhesives 30 (2), 71-79.DOI: 10.1016 / j.ijadhadh.2009.09.002

Нордквист П., Теджил Д., Хосрави С., Лоутер М., Мальмстрём Э. и Хаббаз Ф. (2012). «Фракции пшеничного глютена как клеи для древесины — глютенины против глиадинов», журнал Journal of Applied Polymer Science 123 (3), 1530-1538. DOI: 10.1002 / app.34312

Патак, Р., Леонг, Т. С. Х., Мартин, Г. Дж. О., и Ашоккумар, М. (2020). «Аминокислоты и целостность вторичной структуры белков молока, обработанных ультразвуком», Австралийский химический журнал 73 (2-3), 170-179.DOI: 10.1071 / ch29372

Пицци, А. (2006). «Последние разработки в области экологически эффективных клеев на биологической основе для склеивания древесины: возможности и проблемы», Journal of Adhesion Science and Technology 20 (8), 829-846. DOI: 10.1163 / 156856106777638635

Цинь Л., Линь Л. и Фу Ф. (2016). «Микроструктурные и микромеханические характеристики проникновения модифицированной карбамидоформальдегидной смолы в древесину», BioResources 11 (1), 182-194. DOI: 10.15376 / biores.11.1.182-194

Сантони, И., и Пиццо, Б. (2013). «Оценка альтернативных растительных белков в качестве клеев для древесины», Industrial Crops and Products 45, 148-154. DOI: 10.1016 / j.indcrop.2012.12.016

Шмидт В., Джакомелли К. и Сольди В. (2005). «Термическая стабильность пленок, образованных изолятом соевого белка — додецилсульфатом натрия», Деградация и стабильность полимера 87 (1), 25-31. DOI: 10.1016 / j.polymdegradstab.2004.07.003

Шмидт К., Грюнвальд Д. и Паш Х. (2006). «Приготовление клеев на основе сополимера фенола, мочевины и формальдегида при гетерогенном катализе», журнал Journal of Applied Polymer Science 102 (3), 2946-2952.DOI: 10.1002 / app.24441

Шмидт В., Сольди В. (2006). «Влияние добавления поликапролактон-триола на термостабильность пленок на основе изолята соевого белка», Деградация и стабильность полимера 91 (12), 3124-3130. DOI: 10.1016 / j.polymdegradstab.2006.07.016

Силва, К., Соуза, Ф., Губиц, Г., и Кавако-Пауло, А. (2004). «Химические модификации белков с использованием глутаральдегида», Food Technology and Biotechnology 42 (1), 51-56.

Соарес, Р.М. Д., Скремин, Ф. Ф., и Сольди, В. (2005). «Термическая стабильность биоразлагаемых пленок на основе соевого белка и кукурузного крахмала», Macromolecular Symposia 229 (1), 258-265. DOI: 10.1002 / masy.200551132

Суй, X., Би, С., Ци, Б., Ван, З., Чжан, М., Ли, Ю. и Цзян, Л. (2017). «Влияние ультразвуковой обработки на эмульсионную систему, стабилизированную изолятом соевого белка и лецитином: его эмульгирующие свойства и стабильность эмульсии», Food Hydrocolloids, 63, 727-734.DOI: 10.1016 / j.foodhyd.2016.10.024

Suslick, K. S., and Price, G. J. (1999). «Применение ультразвука в химии материалов», Annual Review of Materials Science 29, 295-326. DOI: 10.1146 / annurev.matsci.29.1.295

Тянь З., Лю В. и Ли Г. (2016). «Микроструктура и стабильность гидрогеля коллагена, поперечно сшитого глутаральдегидом», Деградация и стабильность полимера 130, 264-270. DOI: 10.1016 / j.polymdegradstab.2016.06.015

Ван, Ю., Мо, X., Сан, X.С., и Ван, Д. (2007). «Адгезия соевого белка, усиленная сшивкой глутаральдегидом», Journal of Applied Polymer Science 104 (1), 130-136. DOI: 10.1002 / app.24675

Ван, В. Х., Ли, X. П., и Чжан, X. Q. (2008). «Клей на соевой основе из базовой модификации», Pigment & Resin Technology 37 (2), 93-97. DOI: 10.1108 / 03699420810860446

Ву, З. (2016). Сшивающая модификация адгезивов на основе белков и механизмов , Ph.Докторская диссертация, Пекинский университет лесного хозяйства, Пекин, Китай.

Янг И., Куо М., Майерс Д. Дж. И Пу А. (2006). «Сравнение адгезивных смол на белковой основе для древесных композитов», Journal of Wood Science 52 (6), 503-508. DOI: 10.1007 / s10086-006-0804-5

Юань, К., Чен, М., Ло, Дж., Ли, X., Гао, К., и Ли, Дж. (2017). «Новый процесс на водной основе позволяет получить экологически чистый биоадгезив из зеленого сшитого растворимого полисахарида сои и соевого белка», — Carbohydrate Polymers 169, 417-425.DOI: 10.1016 / j.carbpol.2017.04.058

Чжу, В. (2015). Химическое сшивание соевого белка и его влияние на свойства древесных клеев на основе соевого белка , магистерская работа, Северо-восточный лесной университет, Харбин, Китай.

Чжу, X., Ван, Д., Ли, Н., и Сунь, X. S. (2017). «Клей для древесины на биологической основе из белка камелины (остаток биодизельного топлива) и деполимеризованного лигнина с улучшенной водостойкостью», ACS OMGEA 11 (2), 7996-8004. DOI: 10.1021 / acsomega.7b01093

Статья подана: 20 марта 2020 г .; Рецензирование завершено: 4 июня 2020 г .; Доработанная версия получена и принята: 23 июня 2020 г .; Опубликовано: 19 августа 2020 г.

DOI: 10.15376 / biores.15.4.7586-7597

11 способов предотвратить прилипание фекалий к унитазу

Когда зовет природа, вы, вероятно, не думаете о том, что внутри унитаза. Но иногда последствия могут быть весьма тревожными.

Не так уж много сцен выглядят так уродливо, как какашки прилипают к унитазу.Кроме того, использование кисти — никому не любимое занятие. Итак, что вы можете с этим поделать?

Во-первых, нужно знать причины, по которым это происходит. Во-вторых, вы можете использовать несколько уловок, чтобы это предотвратить.

Из этой статьи вы узнаете, как предотвратить прилипание фекалий к унитазу.

Что заставляет какашку прилипать к унитазу?

Есть пять основных причин, по которым фекалии застревают в унитазе.

Слабая система промывки

Когда вы смываете унитаз, он должен создавать достаточно воды для удаления мусора из унитаза.Но если система слива слабая, вы, скорее всего, увидите, как фекалии прилипают к унитазу.

Вы не моете туалет регулярно

Чистить унитаз доставлять удовольствие, поэтому вы можете пропускать его чаще, чем положено. Если у вас большая семья, мусор из туалета и минеральные отложения будут быстро накапливаться.

На унитазе могут быть пятна и мусор, препятствующие потоку воды. Если в щелях на поверхности скопилась грязь, ржавчина или кальций, фекалии будут прилипать к этим участкам.

Пятна, которые вы видите в чаше, часто возникают из-за жесткой воды. Это вода с высоким содержанием кальция и магния — эти два элемента быстро связываются с другими частицами в воде, образуя пятна и гребни.

Складки и выступы на унитазе

Иногда сам унитаз выходит из строя из-за неровной поверхности. Если миска заполнена складками и выступами, вы не сможете предотвратить прилипание фекалий к поверхности миски.

Проблема может быстро обостриться, и вам, возможно, даже придется прочистить унитаз, если в нем еще остались фекалии.Это не ваша вина, а производственный брак. Если у вас есть действующая гарантия, вам следует попросить вернуть деньги или заменить унитаз.

Употребление жирной пищи

Если вы едите много жирных закусок и мяса, ваши фекалии производят эффект клея. Жирная диета создает жирную консистенцию фекалий, которая легко прилипает к поверхности унитаза. Фекалии становятся липкими, и средний смыв не может удалить их всю за одну попытку.

Как предотвратить прилипание фекалий к унитазу?

Чтобы фекалии не прилипали к унитазу, воспользуйтесь одним из этих приемов.

Уловка 1. Используйте чистящее средство для унитаза

Средства для чистки туалетов, такие как Clorox, могут удалять пятна и минеральные отложения.

Помимо того, что они безопасны и поддаются биологическому разложению, очистители для унитазов устраняют поверхностные препятствия, которые позволяют фекалиям прилипать к унитазу.

Они образуют специальное покрытие, которое позволяет фекалии скользить по выходному отверстию. Проблема с покрытием в том, что оно исчезает после нескольких десятков промывок, поэтому вам придется каждую неделю заливать еще одну дозу вашего любимого чистящего средства.

Уловка 2: Чистка туалета между посещениями

Каждый раз, когда вы смываете унитаз, в унитазе остается мусор. Если не очистить унитаз щеткой перед следующим использованием, мусор будет накапливаться и образовывать пятна.

Чистка ершиком для унитаза между сливами может предотвратить прилипание фекалий к унитазу. Имейте в виду, что это не ваша большая еженедельная или двухнедельная уборка, а скорее небольшая повседневная вещь, которую вы можете делать, чтобы избавиться от прилипающих фекалий.

Взлом 3: Измените свою диету

Переход на диету с низким содержанием жиров — еще один способ предотвратить прилипание фекалий к унитазу.

Отказ от жирной пищи делает какашки менее липкими. Это означает, что следует избегать жирных продуктов, таких как мясо, масло, твердый сыр, шоколад, пирожные и т. Д.

Решение имеет приятный побочный эффект, потому что диета с низким содержанием жиров также полезна для вашего здоровья. Ешьте много овощей, цельнозерновых продуктов, рыбы и фруктов — это будет лучше для вас, вашего желудка и вашего туалета.

Взлом 4: налейте уксус и пищевую соду в миску

Засыпание смеси пищевой соды и уксуса в миску перед сном — еще один способ предотвратить прилипание фекалий к унитазу. Этот метод работает, потому что он предотвращает накопление кальция на поверхности чаши.

Правильная смесь включает две чашки пищевой соды и одну чашку уксуса. Раствор отлично удаляет старые пятна, особенно если у вас жесткая вода.

Взлом 5: Попробуйте с Coca-Cola

Coca-Cola — это не только газированный газированный напиток, но и достойное средство для чистки туалетов с пятнами.Налейте в миску бутылку Coca-Cola и дайте ей поработать 30 минут. После этого почистите унитаз щеткой, чтобы удалить пятна от минеральных отложений.

Самое лучшее в этом то, что кока-кола дешевая, поэтому вы часто пользуетесь этим методом. Несмотря на нестандартность, эта стратегия работает, если вам нужно быстрое решение проблемы и нет дома других чистящих средств.

Совет 6: промойте унитаз перед его использованием

Если промыть унитаз перед его использованием, поверхность останется гладкой, потому что на унитазе еще останется вода.Он может переносить фекалии в сливное отверстие унитаза и поддерживать унитаз в чистоте.

Однако этот прием не экологичен, потому что вы тратите много воды. Это также не решает проблему навсегда.

Взлом 7: Используйте пемзу

Для удаления желтых пятен на унитазе можно использовать пемзу. Потрите поверхность унитаза пемзой, но не давите слишком сильно.

Процесс очистки пемзы можно повторять каждую неделю.Чистящая палочка из пемзы постепенно избавит от желтых пятен от унитаза.

Совет 8: используйте антипригарный спрей

Существует множество видов спреев с антипригарным покрытием, с помощью которых можно удалить фекалии из унитаза. Спреи представляют собой скользкое покрытие, которое помогает фекалии скользить по миске. Все, что нужно, — это опрыскать внутреннюю часть миски, чтобы образовался защитный слой.

Обратной стороной является то, что антипригарные спреи могут работать только до определенного времени. Другими словами, вам нужно будет часто опрыскивать унитаз.

Уловка 9: Чаще чистите туалет

Это простой прием, который вам, вероятно, не понравится. Лучший способ защитить испачканный унитаз от испражнений — это чаще чистить его. Чистить его раз в неделю — минимум, если вы хотите избавиться от пятен и мусора.

Иногда вы даже можете заметить большие пятна и полосы минеральных отложений в унитазе, особенно если вы проведете несколько недель вдали от дома. В этом случае не забудьте мыть унитаз немного дольше, чтобы удалить самые стойкие пятна.

Так вы предотвратите прилипание фекалий к унитазу.

Взлом 10: усиление системы промывки

Слабая система смыва в вашем туалете может быть причиной прилипания фекалий к поверхности. У этой проблемы может быть много причин, но наиболее распространенной является крышка унитаза, которая закрывается слишком быстро.

Взлом 11: Заменить унитаз

Иногда нет лучшего решения, чем замена унитаза. Однако мы не рекомендуем это делать, прежде чем пробовать другие решения.Постарайтесь очистить поверхность чаши и подумайте о новом унитазе, если ничего не помогает.

Существует множество водосберегающих туалетов с чистой и глянцевой поверхностью, не позволяющей фекалам прилипать к поверхности унитаза.

Один из наших любимых унитазов со смывом, устойчивых к загрязнению, — Toto Promenade. Многослойная поверхность придает чаше смазочные свойства, предотвращая образование пятен.

Итог

Если вы не хотите, чтобы фекалии прилипали к унитазу, вам необходимо регулярно ухаживать за унитазами.Очистка поверхности является обязательной, но вы также можете использовать кока-колу или изменить диету, чтобы избежать жирной пищи.

Мы показали вам 11 проверенных советов, как предотвратить прилипание фекалий к унитазу, но теперь вам нужно их проверить. Обязательно сделайте это до того, как природа снова позовет вас!

FAQ

Что делает какашку толстой?

Толщина фекалий зависит от того, какую пищу вы потребляете в течение дня. Мы рекомендуем избегать продуктов с высоким содержанием жира, потому что они делают ваши фекалии толще.Толстые фекалии легко прилипают к унитазу.

Как часто нужно чистить унитаз?

Это вопрос личных предпочтений.

Check Also

Профессия ит специалист: Профессия IT-специалист. Описание профессии IT-специалиста. Кто такой IT-специалист. . Описание профессии

Содержание Что такое IT специалист — Кто кем работаетСамые востребованные IT-профессии 2021 года / Блог …

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *